năng nhân nhanh chồi cây Sâm cau
Để tăng số chồi chúng tôi không chỉ sử dụng TDZ một cách đơn lẻ mà phối hợp với IBA để tìm ra hệ số nhân chồi tối ưu. Trong thí nghiệm này, chúng tôi sử dụng nồng độ TDZ cho hệ số nhân chồi cao nhất ở nồng độ (1,5mg/l) sau đó kết hợp với IBA ở các nồng độ 0,25 mg/l; 0,50 mg/l; 0,75 mg/l; 1,0 mg/l, kết quả thí nghiệm được ghi ở bảng 4.4 dưới đây.
Trong nhân giống in vitro, nhiều loại cây trồng chỉ phù hợp với các chất thuộc nhóm Cytokinin, nhưng có nhiều loại cây trồng khi kết hợp các chất điều hòa sinh trưởng giữa nhóm Cytokinin và Auxin thì nâng cao hiệu quả trong nhân
giống.Để tìm hiểu ảnh hưởng của Auxin đến quá trình nhân nhanh chồi có sự tương
tác với TDZ, tiến hành bổ sung IBA với các nồng độ khác nhau vào môi trường MS + 30 g/1 sucrose + 5,5 g/1 agar + 200 ml/l nước dừa + 1 g/l than hoạt tính.
Kết quả được trình bày ở bảng 4.4 và hình 4.5 cho thấy sự kết hợp giữa TDZ và IBA có ảnh hưởng tích cực lên quá trình hình thành chồi và sinh trưởng của chồi cây. Khi nồng độ TDZ giữ nguyên ở mức 1,5 mg/l, bổ sung IBA với các nồng độ khác nhau thì số lượng chồi và số lá/chồi ở các công thức là khác nhau. IBA ở nồng độ 0,5 mg/l kết hợp với 1,5 mg/l TDZ là tốt nhất, với số chồi là 8 chồi/mẫu và 3,9 lá/cây. Chồi cây xanh và sinh trưởng tốt.
Chỉ tiêu số chồi: Khi nồng độ TDZ giữ nguyên ở mức 1,5 mg/l, số chồi dao động từ 4,9 - 8,0 chồi. Bổ sung IBA với nồng độ 0,25; 0,50; 0,75; 1,0 mg/l đều có số chồi cao hơn công thức đối chứng (không bổ sung IBA). Sự sai khác này có ý
nghĩa thống kê với mức độ tin cậy 95%.
Bảng 4.4. Ảnh hưởng của tổ hợp (TDZ + IBA) đến khả năng nhân nhanh chồi Sâm cau (sau 6 tuần nuôi cấy).
Chất điều tiết sinh trưởng (mg/l) Số chồi (chồi) Số lá/chồi (lá) Chất lượng chồi TDZ IBA 1,5 0,00 4,9d 2,6b Chồi nhỏ, lá bé 1,5 0,25 6,1b 2,9b Chồi nhỏ, lá xanh
1,5 0,50 8,0a 3,9a Chồi bình thường, lá xanh
1,5 0,75 6,3b 3,5a Chồi nhỏ, lá xanh
1,5 1,00 5,6c 2,7b Chồi nhỏ, lá màu vàng nhạt
CV% 3,6 4,6
LSD0.05 0,41 0,43
Ghi chú: Nền môi trường MS + 30 g/1 sucrose + 5,5 g/1 agar + 200 ml/l nước dừa + 1 g/l than hoạt tính PH 5,5.
Số chồi cao nhất là ở công thức 3 với nồng độ IBA là 0,5 mg/l (8,0 chồi). Số chồi ở công thức 1 (không bổ sung IBA) thấp nhất (4,9 chồi), chất lượng chồi kém, chồi nhỏ lá bé. Khi tăng nồng độ IBA lên 1,0 mg/l số chồi cây giảm mạnh, chỉ còn 5,6 chồi, chồi bé, lá chuyển sang màu vàng nhạt.
Hình 4.5. Ảnh hưởng của tổ hợp nồng độ (TDZ+IBA) đến số chồi Sâm cau
mức 1,5 mg/l, bổ sung nồng độ IBA với mức 0,50; 0,75 mg/l đều có số lá/chồi cao hơn công thức đối chứng. Công thức còn lại có số lá/chồi tương đương công thức đối chứng. Các kết quả thu được có ý nghĩa thống kê với mức độ tin cậy α = 0,05. Số lá/chồi tăng dần theo chiều thuận khi tăng nồng độ của IBA và đạt cao nhất ở mức 0,5 mg/l (3,9 lá/chồi), rồi sau đó giảm dần. Số lá/chồi ở mức nồng độ 1 mg/l IBA giảm mạnh, chỉ còn 2,7 lá.
Khi tăng nồng độ IBA lên 1 mg/l số chồi và số lá giảm dần, thậm chí những chồi tạo ra nhỏ, thấp và không đồng đều, có thể do IBA ở nồng độ cao sẽ gây ức chế sự tái sinh của mẫu.
Hình 4.6. Ảnh hưởng của tổ hợp (TDZ + IBA) đến khả năng nhân nhanh