Phần 3 Vật liệu và phương pháp nghiên cứu
3.3.Đối tượng/vật liệu nghiên cứu
3.3.1. Đối tượng nghiên cứu
Cây Sâm cau (Curculigo orchioides Gaertn.) được thu thập ở Sơn La.
3.3.2. Vật liệu nghiên cứu
- Mẫu Sâm cau:Cây Sâm cau được thu thập ở Sơn La.
Hình 3.1. Mẫu Sâm cau đưa vào nuôi cấy in vitro
- Môi trường nuôi cấy:
+ Môi trường nuôi cấy: Murashige & Skoog (MS) được coi như là một môi trường cơ bản, được sử dụng phổ biến trong nuôi cấy mô thực vật. MS được phát
minh bởi nhà khoa học thực vật Toshio Murashige và Skoog Folke K. vào năm 1962 trong quá trình tìm kiếm của Murashige cho một loại hormone mới.
+ Các chất kích thích sinh trưởng được sử dụng trong thí nghiệm là: IBA
(Indole - 3 - butyric acid), TDZ (thidiazuron). Ngoài ra trong mơi trường ni cấy cịn bổ sung phloroglucinol (PG), AgNO3 và các phụ gia khác như tảo Spirulina, đường, nước dừa, than hoạt tính...
IBA là hormone thuộc nhóm Auxin. Trong ni cấy mô thực vật IBA và các Auxin khác được sử dụng để bắt đầu sự hình thành rễ trong ống nghiệm trong một quy trình gọi là vi nhân giống. Xuất xứ: Đức.
TDZ có hoạt tính giống như Cytokinin, đẩy nhanh tiến trình trưởng thành, được cấp bằng sáng chế vào đầu những năm 1980 bởi công ty Đức Schering AG. Xuất xứ: Đức.
- Giá thể:
Các giá thể trồng cây sử dụng trong nghiên cứu: Vụn xơ dừa, vụn xơ dừa + trấu hun (50:50), mùn rừng, mùn rừng + vụn xơ dừa (70:30).
- Các loại phân bón sử dụng:
Hình 3.2. Growmore (N: P: K = 30: 10: 10)
Hình 3.3. B1 Thái Lan Hình 3.4. Atonik 1.8 SL
+ Growmore (N: P: K = 30: 10: 10) có nguồn gốc từ Mỹ, nhập khẩu từ Công ty TNHH Tư vấn - Thương mại Mai Huy. Thành phần: N: 30%; P2O5: 10%; K2O: 10%; Cu: 0,05%; Fe: 0,10%; Mn: 0,05%; Mo: 0,0005%; Zn: 0,05%, giúp cây đẻ nhánh khoẻ, ra lá tốt.
Huy; Thành phần: P2O5: 2,0%; Fe: 0,10%; Fe - EDTA: 0,10%; B1: 0,10 %; α NAA: 0,04%, giúp cây sinh trưởng và phát triển tốt.
+ Atonik 1.8 SL: được đăng kí bởi Ashi chemical MFG Co., Ltd, có tác dụng kích thích sự sinh trưởng và phát triển cho cây.
- Chất khử trùng nấm, bệnh:
Daconil 75WP: có nguồn gốc từ Nhật Bản, đóng gói và phân phối bởi cơng ty TNHH Việt Thắng; Hoạt chất Chlorothalonil: 75%; là thuốc trừ bệnh chống nấm diệt khuẩn, phổ tác dụng rộng.
- Trang thiết bị:
+ Buồng cấy vô trùng (Bioiogical safety Cabinets); Nồi hấp khử trùng (Auto Clave) của hãng Tomy Nhật Bản; Cân điện tử của Đức; Máy đo pH; Tủ sấy…
+ Bình tam giác có kích thước từ 250ml - 500ml, pipet loại 1ml, dụng cụ nuôi cấy, phễu lọc, đũa thủy tinh…