Phần 4 Kết quả và thảo luận
4.4. Đánh giá khả năng ức chế vi khuẩn in vitro của cao khô dịch chiết trong
4.4.2. Khả năng ức chế in vitro của cao khô dịch chiết sử dụng các dung mô
khác nhau trên vi khuẩn Streptococcus spp phân lập từ dịch viêm tử cung bò
Bằng phương pháp khuếch tán trên thạch, 5 loại dịch chiết (1:10) có nồng độ 100mg/ml được thử hoạt tính kháng khuẩn trên vi khuẩn Streptococcus spp. Kết quả kháng sinh đồ của 3 lần lặp lại được trình bày ở bảng 4.7.
Bảng 4.7. Khả năng ức chế in vitro của cao khô dịch chiết Bồ Công Anh sử dụng các dung môi khác nhau với vi khuẩn Streptococcus spp.
STT Dung môi Đường kính vòng vô khuẩn (mm)
D1 D2 D3 Dtb ± s 1 DMSO 0 0 0 0 2 Ethanol 14 14 13 13,67±0,47 3 Methanol 12 12 11 11,67±0,47 4 Ethyl acetate 16 15 16 15,67±0,47 5 n- butanol 0 0 0 0 6 n- hexan 0 0 0 0
Ghi chú: D1, D2, D3: Đường kính vòng vô khuẩn của các lần thử 1,2,3
Dtb: Đường kính vòng vô khuẩn trung bình. s: Độ lệch thực nghiệm chuẩn có hiệu chỉnh.
Hình 4.7. Khả năng ức chế in vitro của cao khô dịch chiết Bồ Công Anh sử dụng các dung môi khác nhau với vi khuẩn Streptococcus spp
Kết quả thử nghiệm trên vi khuẩn Streptococcus spp.được trình bày ở bảng 4.7 và hình 4.7 cho thấy, có 3/5 loại cao khô dịch chiết Bồ Công Anh có khả năng ức chế vi khuẩn in vitro với đường kính vòng vô khuẩn biến đổi từ 11,67mm (dung môi methanol) đến 15,67 mm (dung môi ethyl acetate). Cao khô dịch chiết sử dụng dung môi n-butanol và n-hexan không có khả năng ức chế vi khuẩn in vitro với đường kính vòng vô khuẩn 0 mm. Cao khô dịch chiết sử dụng dung n-butanol và n-hexan không có khả năng ức chế vi khuẩn in vitro trong khi
đó cao khô dịch chiết sử dụng dung môi khác (ethanol, methanol và ethyl acetate) phù hợp với kết quả nghiên cứu định tính xác định một số nhóm hoạt chất hòa tan trong cao khô dịch chiết lá Bồ Công Anh bằng phương pháp hóa học. Cao khô dịch chiết sử dụng dung môi ethanol, methanol và ethyl acetate cho phản ứng dương tính với 9/10 phản ứng định tính trong khi đó cao khô sử dụng dung môi n-butanol và n- hexan chỉ cho phản ứng dương tính với 5/10 và 7/10 phản ứng định tính. Cũng phù hợp với nhận định khi tiến hành định tính các nhóm hoạt chất có trong các loại cao khô dịch chiết khi sử dụng dung môi khác nhau, trong cao khô dịch chiết sử dụng dung môi ethyl acetate cho phản ứng dương tính với saponin trong khi đó các loại cao khô sử dụng dung môi khác đều cho kết quả âm tính. Chính điều này có thể giải thích một phần nguyên nhân tại sao cao khô dịch chiết Bồ công anh sử dụng dung môi ethyl acetate cho khả năng ức chế vi khuẩn in vitro tốt nhất, cao hơn hẳn các loại cao khô dịch chiết khác.
Kết quả nghiên cứu của chúng tôi khá phù hợp với nghiên cứu của Khúc Huy Hoàng (2015) khi đánh giá khả năng ức chế vi khuẩn in vitro của cao khô dịch chiết lá cây Huyền diệp trong các dung môi khác nhau đối với vi khuẩn
Streptococcus spp phân lập từ dịch viêm vú bò. Kết quả nghiên cứu này cho thấy
ở nồng độ100 mg/ml cao khô dịch chiết cho kết quả đường kính vòng vô khuẩn khác nhau phụ thuộc vào dung môi sử dụng (DC Cloroform (24,67 ± 0,58 mm); DC Ethanol (22,00 ± 1,00 mm); DC Ether dầu (19,33 ± 1,53 mm); DC Ethyl axetate (19,67 ± 1,53 mm); DC nước (17,67 ± 0,58 mm)). Tuy nhiên cao khô dịch chiết sử dụng dung môi nước trong nghiên cứu này cho khả năng ức chế vi khuẩn in vitro.Theo nghiên cứu của Nguyễn Văn Thanh và Nguyễn Thanh Hải (2016), khi nghiên cứu khả năng ức chế vi khuẩn in vitro của cao khô dịch chiết cây Đơn đỏ cho thấy đố vớ v khuẩn Streptococcus spp. đường kính vòng vô khuẩn bình quân g ao động từ 17,67 mm (dung mô nước) đến 24,67 mm (vớ dung mô là chloroform). Ngoài cao khô dịch chiết sử dụng dung môi là ethanol và chloroform, 04 loại cao khô dịch chiết sử dụng các dung môi khác đều có tác dụng kém hơn so với kháng sinh ampicillin (50mg/ml), với đường kính vòng vô khuẩn là 23,67 mm. Cao khô dịch chiết sử dụng dung môi ethanol có tác dụng ức chế vi khuẩn tương đương với kháng sinh ampicillin với đường kính vòng vô khuẩn nằm không có sự sai khác về mặt thống kê. Riêng cao khô dịch chiết sử dụng dung môi chloroform với đường kính vòng vô khuẩn lớn hơn so với các cao khô khi sử dụng các dung môi còn lại và có khả năng ức chế vi khuẩn cao hơn nhưng không có sự sai khác về mặt thống kê so với kháng sinh ampicillin.
Liên cầu khuẩn Streptococcus là vi khuẩn gram (+) nên cũng như
Staphylococcus chịu ảnh hưởng của các dịch chiết. Vậy với vi khuẩn Gram (+)
thì cao dịch chiết sử dụng dung môi ethyl acetate cho kết quả khả quan. Trong tương lai có thể thay thế kháng sinh tổng hợp bằng kháng sinh thực vật mà kết quả phòng trị không thay đổi lại còn hạn chế nguy cơ tạo dòng vi khuẩn kháng thuốc. Do đó chúng tôi lựa chọn cao khô dịch chiết Bồ công anh sử dụng dung môi ethyl acetate để tiến hành các nghiên cứu tiếp theo.
Hình 4.8. Khả năng ức chế VK Streptococcus spp in vitro của cao khô dịch chiết Bồ Công Anh