Hiện nay, phương pháp truyền thống để xét nghiệm B. cereus trong thực phẩm dựa trên nguyên tắc nuôi cấy, phân lập vi khuẩn. Qui trình này phải trải qua nhiều bước: đồng nhất mẫu, tăng sinh, chọn lọc, xác định các tính chất hóa sinh.
Phương pháp dựa trên đặc điểm hình thái:
• Trên môi trường MPA: có thể sơ bộ phân biệt được B. cereus và B. mycoides do khuẩn lạc của B. mycoides có dạng dễ cây còn khuẩn lạc B. cereus
lại có hình tròn, có tâm lồi, màu trắng sữa đến trắng đục.
• Trên môi trường thạch MYP và môi trường thạch Mossel (cereus selective agar) khuẩn lạc của B. cereus có đường kính 0,4 – 0,5µm, khuẩn lạc có màu hồng eosin hoặc xanh xung quanh có vùng kết tủa màu hồng hoặc xanh, có tâm lồi, bề mặt xù xì, không dính ướt, có vành ở mép [16].
Phương pháp dựa trên đặc điểm sinh lý sinh hóa
Đặc tính sinh lý sinh hoá của B. cereus có rất nhiều điểm tương đồng với các loài còn lại trong nhóm B. cereus đặc biệt là 3 loài B. thuringiensis, B. mycoides,B. anthracis như khả năng sinh catalase, gelatinase, khả năng lên men glucose kỵ khí, phản ứng khử nitrat, phản ứng VP… Tuy nhiên, thông qua một số đặc tính sinh lý, sinh hóa bước đầu có thể nhận biết được B. cereus với các loài khác như khả năng chuyển động để phân biệt với B. anthracis và B. mycoides. Do hầu hết các chủng B. cereus và B. thuringiensis đều có khả năng chuyển động nhờ lông roi còn B. anthracis và B. mycodes thì không. Ngoài ra, trên môi trường thạch huyết, có thể phân biệt được với B. anthracis do B.cereus
có khả năng phân giải huyết còn B. anthracis thì không. Trong nhóm B. cereus
có nhiều đặc điểm sinh lý sinh hoá giống nhau. Hiện nay, người ta chỉ có thể phân biệt được chúng qua khả năng sinh tinh thể độc của B. thuringiensis sau 3 - 4 ngày nuôi cấy trong khi B. cereus và các loài khác trong nhóm thì lại không có khả năng này. Tuy nhiên, phương pháp dựa trên đặc tính sinh lý, sinh hoá vẫn chưa đủ sức thuyết phục cho việc xác định chính xác vi khuẩn B. cereus [27].
-Ưu điểm của phương pháp này
Thao tác đơn giản.
Dễ làm.
Không phải đầu tư dụng cụ và thiết bị đắt tiền. -Nhược điểm
Độ nhạy không cao.
Thời gian để xác định tình trạng ô nhiễm thực phẩm do B. cereus lâu (khoảng 5 – 7 ngày).
Tốn nhiều nhân công, cần có kỹ thuật viên có kinh nghiệm về vi sinh vật.
Không thể phát hiện được các chủng B. cereus này có hay không có sinh độc tố do đó hạn chế trong công tác phòng ngừa.
Tốn nhiều hóa chất.
Yêu cầu kỹ năng thao tác.