Phần 4 Kết quả và thảo luận
4.3.1. Kết quả tách chiết RNA tổng số của chủng virus KTY-PRRS-06
Chủng virus KTY-PRRS-06 sau khi phân lập được bảo quản trong điều kiện thích hợp (âm 800C). Ở nghiên cứu này, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đặc điểm sinh học phân tử của chủng virus KTY-PRRS-06 qua các đời cấy chuyển P0, P10, P20, P30, P40.
Chủng virus PRRS lựa chọn nghiên cứu được nhân lên trên môi trường tế bào Marc-145 và sẽ được tiến hành tách chiết RNA tổng số theo quy trình tách chiết của bộ Kit QIAgen (đã trình bày trong phần phương pháp nghiên cứu). Kết quả tách chiết RNA tổng số của virus sẽ được kiểm tra bằng điện di trên thạch Agarose 1,2% và là nguyên liệu cho phản ứng RT- PCR để tạo ra phân tử DNA hoàn chỉnh từ sợi đơn dương RNA. Kết quả kiểm tra tách chiết RNA tổng số được minh họa ở hình 4.8.
.
Hình 4.8. Hình ảnh điện di kiểm tra sản phẩm tách chiết RNA tổng số
(Theo thứ tự từ trái sang phải là kết quả tách chiết RNA tổng số của chủng KTY-PRRS-06 ở các đời P0, P10, P20, P30, P40).
Qua hình ảnh điện di cho thấy có một lượng lớn RNA thu được sau khi tiến hành tách chiết, biểu hiện bằng các vệt sáng thu được khi chụp ảnh bằng máy chụp ảnh gel do RNA đã giữ Ethidiumbromide lại trên bản thạch và dưới tác dụng của tia UV các thuốc nhuộm này phát màu sáng. Đồng thời các RNA
tách chiết có độ nguyên vẹn cao biểu thị bằng một vạch sáng, do RNA tích điện âm nên trong điện trường chúng sẽ chạy về cực dương.
Nếu phổ điện di của RNA tách chiết khi hiện hình cho nhiều dải băng (nhiều vạch sáng) thì chứng tỏ khi chiết tách chúng đã bị gãy đoạn nhiều. Phổ điện di gọn chứng tỏ RNA chiết tách ít bị đứt gãy.
Như vậy, quá trình tách chiết RNA tổng số của chủng virus KTY-PRRS- 06 qua các đời cấy chuyển là thành công, cung cấp nguyên liệu cho phản ứng RT- PCR.