L ỜI MỞ ĐẦU
2.2.11. Phương pháp khảo sát các đặc tính probiotic và điều kiện bảo quản chế
2.2.11.1. Phương pháp xác định khảnăng sinh các enzyme hỗ trợ tiêu hóa của chế phẩm
0,1g chế phẩm Bacillus hòa tan vào 1ml dung dịch NaCl 0,5% đã tiệt
trùng, thu được dịch mẫu chế phẩm. Khả năng sinh enzyme của chế phẩm thu
được được xác định bằng phương pháp chấm điểm trên bề mặt thạch của môi
trường có bổsung cơ chất enzyme tương ứng như đã trình bày ở mục 2.2.6. 2.2.11.2. Phương pháp xác định khả năng sống sót trong môi trường
đường ruột của chế phẩm
Đểxác định khảnăng sống sót của chế phẩm Bacillusthu được trong điều kiện đường ruột, mẫu dịch chế phẩm được chuẩn bịtrước như sau:
Cân 1g chế phẩm Bacillus hòa tan vào 10ml dung dịch NaCl 0,5% đã tiệt trùng. Tiến hành vortex đều hỗn hợp. Ly tâm rửa 2 lần dịch mẫu chế phẩm bằng dung dịch muối NaCl 0,5% ở chếđộ 6000 v/p, thời gian 7 phút và nhiệt độ 4oC.
Dịch chế phẩm được thử khả năng sống sót trong điều kiện đường ruột theo
phương phápđãđược trình bày ở mục 2.2.7.
2.2.11.3. Phương pháp xác định khả năng sống sót của chế phẩm trong
điều kiện bảo quản ở nhiệt độ phòng
Khả năng sống sót sau quá trình bảo quản của các chế phẩm Bacillus
41 + Chuẩn bị dịch mẫu chế phẩm: Sau các khoảng thời gian lần lượt là 3 tháng và 7 tháng bảo quản, chế phẩm probiotic dạng bào tử Bacillus được xác
định khả năng sống sót. Cân 0,1g chế phẩm probiotic hòa tan trong 1ml dung dịch NaCl 0,5%, vortex đảo trộn đều dịch mẫu
+ Xác định mật độ dịch mẫu chế phẩm bằng phương pháp pha loãng liên
tiếp và khuếch tán trên đĩa thạch môi trường NA.
Tính toán mật độ dịch chế phẩm sau thời gian bảo quản, so sánh với mật độ ban
đầu của chế phẩm để kết luận về khả năng sống sót của chế phẩm đó sau thời gian bảo quản theo công thức:
𝑇𝑇ỉ𝑙𝑙ệ𝑠𝑠ố𝑛𝑛𝑙𝑙𝑠𝑠ó𝑡𝑡 (%) = 𝑀𝑀ậ𝑡𝑡độ𝑣𝑣𝑣𝑣𝑘𝑘ℎ𝑠𝑠ẩ𝑛𝑛𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑏𝑏ả𝑙𝑙 𝑞𝑞𝑠𝑠ả𝑛𝑛 (
𝐶𝐶𝐶𝐶𝐶𝐶 𝑙𝑙 ) 𝑀𝑀ậ𝑡𝑡độ𝑣𝑣𝑣𝑣𝑘𝑘ℎ𝑠𝑠ẩ𝑛𝑛𝑏𝑏𝑠𝑠𝑛𝑛đầ𝑠𝑠 (𝐶𝐶𝐶𝐶𝐶𝐶𝑙𝑙 )