đến nấm Fusarium solani gây bệnh vàng lá thối rễ trên vườn cam Sành
Dựa trên kết quả phân lập và tuyển chọn 19 dòng nấm thuộc nhóm nấm
Trichoderma sp. được phân lập tại vùng rễ cây cam Sành và dòng nấm tăng nhanh khả năng phân hủy chất hữu cơ nấm Gongronella butleri với khả năng phân hủy chất hữu cơ 41,73% trong 14 ngày được nuôi cấy trong điều kiện phòng thí nghiệm (Hình 4.37). Tiến hành bố trí thí nghiệm đối kháng với dòng nấm Fusarium solani được xác định là tác nhân gây bệnh vàng lá thối rễ trên vườn cam Sành (Hình 4.37). Tất cả các dòng nấm được nuôi cấy trên môi trường MEA 1% trước đó cho thực hiện nuôi cấy theo phương pháp dual- culture (Royse and Ries, 1978; Chan and Logan, 1984; Whipps, 1987; Vu Tiên Khang et al., 2013) để đánh giá khả năng đối kháng trên môi trường MEA 1% (Hình 4.37). Khả năng phát triển của các dòng nấm được ghi nhận ở 2, 6 và 12 ngày SNC cho đánh giá khả năng ức chế của các dòng nấm đối với nấm Fusarium solani (Skidmore and Dickinson, 1976; Chand and Logan, 1984; Suciatmih and Rahmansyah, 2014).
Kết quả nghiên cứu cho thấy phần trăm ức chế của các dòng nấm được phân lập đối kháng với nấm Fusarium solani gây bệnh vàng lá thối rễ cho thấy ở giai đoạn 12 ngày SNC cho thấy có 4 dòng nấm thể hiện khả năng đối kháng cao, phần trăm ức chế biến động từ 38,2% đến 56,1% (Bảng 4.2). Trong đó, nấm Gongronella butleri có khả năng ức chế cao nhất đối với nấm Fusarium solani, với phần trăm ức chế lên đến 56,1%. Nấm Gongronella butleri được nghiên cứu có khả năng sản xuất chitosan với hàm lượng cao (Teng et al.,
2001; Chatterjee et al., 2005; Babu et al., 2015; Zhang et al., 2020). Chitosan giữ vai trò trong phân hủy sinh học và là tác nhân đối kháng với vi sinh vật gây bệnh, tạo hàng rào bảo vệ cho cây trồng được chứng minh trong những
nghiên cứu trước đây (Herrera-Eetrella and Chet, 1999; Kaur et al., 2012). Đặc biệt, vai trò của chitosan trong quản lý nấm Fusarium sp. gây bệnh trên cây trồng (Palma-Guerero et al., 2008; El-Hadrami et al., 2010). Ba dòng nấm
Trichoderma sp. còn lại cho thấy hiệu quả như nhau đến khả năng ức chế nấm
Fusarium solani, được thực hiện định danh loài nấm qua giải mã trình tự DNA xác định nấm Trichoderma asperellum (Phụ lục 2).
Hình 4.37 Khả năng ức chế của các dòng nấm được phân lập lên sự phát triển của nấm Fusarium solani
Bảng 4.2 Đánh giá khả năng ức chế của các dòng nấm phân lập tại đối với nấm Fusarium solani gây bệnh vàng lá thối rễ
Ký hiệu Tên dòng nấm 2 ngày SNC
(%)
6 ngày SNC (%) 12 ngày SNC
(%)
SS 10-1E1 Gongronella butleri 14,8±0,63abcd 44,4±7,14 a 56,1±3,08 a
TO 4.1 Trichoderma asperellum 23,1±4,28 ab 37±4,36 ab 38,4±6,65 ab TB 4.2B 29,8±3,60 a 38,7±8,34 ab 41,4±4,47 ab TO 4.3B 22±3,64 ab 33,2±6,61 abc 38,2±6,45 ab TB 4.2Bb 15,4±10,8abcd 20,3±5,77 bcdefg 26,3±5,85 bcd FR 4-3 23,5±6,07 ab 17,8±12,9 bcdefg 20,4±7,31 bcdef TO 3.3 12,4±6,21 cdefg 22,1±11,2 bcdef TO 4.1 T1 7,78±4,84 bcd 20±10,5 bcdefg 23,72±3,89 bcdef TO 4.1 T2 10,2±11,3 bcd 23±8,56abcdefg 24,2±14,2 bcde TO 2.1 5,49±6,89 bcd 21,2±12 bcdefg 25±6,64 bcde TB 4.2Ba 1,92±3,85 cd 0±0,00 g 26,4±10,2 bcd TO 4.1T2a 6,92±9,44 bcd 22±6,55 bcdef 2,03±2,95 g TB 4.2T2 14,3±10,2abcd 30±6,71 abcd 11,1±3,48 cdefg TB 4.3Ba 20,5±3,98 abc 6,13±7,42 efg 16,1±11,6 cdefg TB 2.3B 19,1±13,4abcd 29,3±4,04 abcd 22,7±13,9 bcdefg TB 3.2 5,32±3,79 bcd 0±0,00 g 7±4,88 defg TO 2.3B 6,17±4,65 bcd 10,6±12,3 efg 9,27±7,02 cdefg TO 4.1B 13,1±11,1abcd 10,3±7,47 defg 30,3±9,15 bc TB 4.1 10,2±9,09 bcd 25,3±14,9abcde 21±13 bcdefg
TB 1a 15±8,70abcd 3,26±6,52 fg 2,59±3,03 fg TB 4.3B 16,6±7.07abcd 8,9±3,87 defg 3,85±5,44 efg
Như vậy, dựa trên khả năng ức chế của bốn dòng nấm triển vọng SS 10-1 E1, TO 4.1, TB 4.2B và TO 4.3B với hiệu quả ức chế cao trên đĩa petri đối với nấm Fusarium solani gây bệnh vàng lá thối rễ, được chọn cho nhóm nấm có ích trong sản xuất phân hữu cơ vi sinh.
4.5.3 Sản xuất phân hữu cơ vi sinh
Rơm trước khi ủ được điều chỉnh đến ẩm độ 70%, đảm bảo cho nấm phân hủy chất hữu cơ hoạt động tốt nhất trong giai đoạn phân hủy. Sau 75 ngày ủ, tiến hành mở đống ủ để bốc thoát hới nước tự nhiên. Phân hữu cơ sau ủ được trộn đều, lấy mẫu và phân tích các thành phần dinh dưỡng (Bảng 3.3)
Sau đó, thực hiện chủng các nấm có lợi đối kháng với nấm Fusarium solani gây bệnh VLTR trên vườn cam Sành với mật số chủng là 2,0x106 cfu/g chất hữu cơ nền đối với từng dòng nấm: nấm Trichoderma asperellum
(phân lập tại đất vùng rễ cây cam Sành); Gongronella butleri (nấm tăng nhanh khả năng phân hủy CHC, Hình 4.38) và nấm Trichoderma sp. thương mại cho sản xuất 4 loại phân HCVS khác nhau Mật số lưu tồn nấm có ích trong mỗi loại phân hữu cơ vi sinh được phân tích, đánh giá sau 15 ngày sau khi chủng (Bảng 4.4).
Hình 4.38 Hình thái khuẩn lạc nấm Gongronella butleri
Bảng 4.3 Mật số vi sinh vật có lợi của các loại phân hữu cơ vi sinh
Loại phân HCVS
Vi sinh vật có lợi Mật số lưu
tồn (cfu/g)
Phân HCVS 1 Trichoderma sp. (bản địa) 3,55 x 107
Phân HCVS 2 Gongronella sp. 2,03 x 108
Phân HCVS 3 Trichoderma sp.(bản địa) + Gongronella sp. 4,50 x 10 6 3,50 x 107
Phân HCVS 4 Trichoderma sp. thương mại 3,62 x 107