Chuẩn bị dịch mẫu cây

Một phần của tài liệu Nghiên cứu một số biện pháp kỹ thuật góp phần hoàn thiện công nghệ sản xuất củ giống khoai tây g1 ATLANTIC từ cây giống sạch bệnh,tại đà lạt,lâm đồng (Trang 107 - 108)

3.1Thu thập và ấn ñịnh mẫu trong túi plastic (việc này có thể thực hiện 2-3 ngày trước nếu có ñiều kiện bảo quản mẫu ở nhiệt ñộ 4oC).

Nếu dùng lá ñể xét nghiệm, chọn các lá có triệu chứng, hoặc thu thập 01 lá

ở mỗi phần cây – ngọn, giữa thân và gốc. Nếu dùng củ giống, lấy mầm hoặc mô phần ñuôi (tia) củ. Dùng bảng mẫu kèm theo két hoặc một kiểu bảng tương tựñể xác ñịnh vị trí mẫu cây trên khay microtitre.

3.2Thêm 4 lần dung dịch cht ñệm ly trích (so với khối lượng mẫu) vào túi plastic. Ví dụ: nếu khối lượng mẫu là 0,5g (2-3 lá chét), thêm 2ml dung dịch cht ñệm ly trích.

3.3Dùng một ống nghiệm dày hoặc dùng phần ñáy ống nghiệm, lăn hoặc ép nhẹ lên túi plastic ñể nghiền nát mẫu trong túi cho ñến khi dịch mẫu có biểu hiện ñồng nhất.

3.4Chắt kiệt dung dịch phủ áo trong các giếng của khay plastic và làm khô bằng cách úp khay lên giấy thấm (khăn giấy). Dùng một pipette nhỏ ñầy các giếng với dung dịch PBS-T (bước rửa giếng). ðể khoảng 3 phút, xong chắt kiệt. Làm như vậy 3 lần hoặc ñến khi khay sạch hoàn toàn.

Trường ðại hc Nông nghip Hà Ni – Lun văn thc sĩ nông nghip ... 94

3.6Chuẩn bị các mẫu ñối chứng dương và âm tính, ít nhất 2 giếng mỗi loại 100µl/ giếng.

3.7Dán kín khay bằng băng keo hoặc cho khay vào túi plastic như trước và cho vào tủ lạnh ñể qua ñêm ở 4oC.

Một phần của tài liệu Nghiên cứu một số biện pháp kỹ thuật góp phần hoàn thiện công nghệ sản xuất củ giống khoai tây g1 ATLANTIC từ cây giống sạch bệnh,tại đà lạt,lâm đồng (Trang 107 - 108)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(122 trang)