d. Một số chỉ tiêu chất lượng củ giống
4.15.3 Xét nghiệm ELISA một số lô giống
Việc phát hiện virus trên thực vật bằng các phương pháp huyết thanh dựa trên khả năng của các kháng thể (antibody) cĩ thể phản ứng đặc hiệu in vitro với các kháng nguyên (antigene) của chúng (các phần tử virus). Phương pháp xét nghiệm hấp phụ liên kết enzyme (enzyme-linked immunosorbent assay kiểu bánh antibody kép (double-antibody sandwich-DAS) là một trong những kỹ thuật huyết thanh nhạy cảm nhất. Các phần tử virus, nếu cĩ trong các mẫu cây, trước tiên sẽ bị
bẫy bắt bằng các kháng thểđặc hiệu (IgG), được hấp phụ trước lên thành các giếng của một khay microtitre và sau đĩ cho phản ứng với một kháng thể đặc hiệu khác
đã được liên kết với một enzyme (conjugate = IgG + enzyme). Khi enzyme này (một alkaline phosphatase) được sử dụng, sự thủy phân của một cơ chất đặc hiệu (di-sodium p-Nitro phenyl Phosphate) tạo ra một sản phẩm cĩ màu vàng cĩ cường
độ tương ứng thuận với lượng virus cĩ trong mẫu cây. Xét nghiệm này thơng thường diễn ra trong 1,5 ngày.
Nhiều loại virus cĩ thể được xét nghiệm cùng một lúc bằng cách phối trộn các kháng thể. Một phức hợp kháng thể (đối với các virus khác nhau) được dùng để hấp phụ lên thành giếng của khay microtitre và sau khi đưa kháng dịch mẫu vào, một conjugate đa hĩa trị (một phức hợp conjugate đặc hiệu với nhiều virus) được dùng để
xác định xem mẫu dịch cây cĩ chứa một loại virus nào đĩ trong nhĩm cần xét nghiệm. ELISA kit của CIP được thiết kế để chẩn đốn riêng biệt các loại virus khoai tây như
PVX, PVS, PVM, PVY, PVA, PLRV (hoặc APMoV và APLV thay vì PVM và PVA ở
vùng Ande). Kết quả xét nghiệm bệnh héo xanh và một số loại virus trên khoai tây ở
các lơ giống thí nghiệm được trình bày ở bảng 4.27 và bảng 4.28.