3.1. Kĩ thuật lấý mẫu nước xét nghiệm
3.1.1. Kỹ thuật lấy mẫu nước xét nghiệm vi sinh vật a. Dụng cụ lấy mẫu
- Chai thủy tinh nút mài thể tích 250 - 500ml (chai đã được rửa sạch và hấp sấy khô, phía ngoài có dán nhãn).
+ Trước khi lấy mẫu chai phải rửa sạch, súc chai bằng dung dịch natricarbonat 1% và rửa lại bằng dung dịch acid loãng 1% súc tráng rửa bằng nước sạch sau đó tráng lại bằng nước cất.
+ Hấp sấy khô ở nhiệt độ 1800C trong vòng 30 phút.
+ Dán nhãn lên chai (nhiệt độ nước, nhiệt độ không khí, loại nước, thời tiết lúc lấy mẫu họ tên người lấy mẫu, yêu cầu xét nghiệm những chỉ số gì, ngày giờ, tháng, năm gửi mẫu nước đi xét nghiệm).
+ Đóng gói chai.
- Cồn 900để khử khuẩn, tăm bông. - Diêm, bút chì, sổ sách ghi chép.
- Quang chai: bằng sắt, nhôm, đồng và có đế nặng. - Phích đá, hòm lạnh để bảo quản mẫu.
b. Kỹ thuật lấy mẫu
+ Nước máy: lấy ởđầu nguồn, giữa nguồn, cuối nguồn (ở nơi sử dụng).
+ Mở vòi cho nước chảy 2-3 phút, trước khi lấy phải tráng chai lấy mẫu 3 lần rồi mới lấy chính thức.
+ Mở nút chai lấy mẫu bằng hai ngón nhẫn và út bàn tay phải, ngón cái và ngón trỏ cầm tăm bông tẩm cồn đốt kỹ miệng chai để tiệt khuẩn, tay trái cầm chai, lấy 9/10 chai nước sau đó khử khuẩn lại miệng chai, đóng chặt nút chai, đóng gói và bảo quản trong hòm lạnh.
- Nước bề mặt: dùng quang chai vô khuẩn, cho chai vào quang thả xuống độ sâu 30 - 40cm, đợi nước vào đẩy chai, kéo lên đậy nút chai, đóng gói và bảo quản.
+ Nếu là nước sông suối mỗi điểm cần lấy 3 vị trí 2 bờ và ở giữa, lấy cách bờ 1 cm, khi nước cạn 1ấv cách đáy 30 - 50cm, miệng chai hướng về phía dòng chảy.
+ Nếu là nước hồ lấy ở 4 vị trí 4 điểm 4 góc và 1 điểm ở giữa. - Nước ngầm:
+ Nếu là nước giếng dùng quang chai vô khuẩn, lấy cách mặt nước 40 cm, nếu dùng gầu thì phải tráng đi tráng lại vài lần.
+ Như là nước giếng khoan sâu: cách lấy mẫu như nước máy.
càng sớm càng tốt, nếu chưa chuyển ngay thì phải bảo quản ở nhiệt độ 0 – 40C
3.1.2. Kỹ thuật lấy mẫu nước xét nghiệm lí hóa học a. Dụng cụ
- Chai thủy tinh nút mài loại 1 lít (quy trình rửa chai như lấy mẫu vi sinh vật) - Quang chai.
- Thể tích lấy mẫu 5 - 7 lít.
b. Kỹ thuật lấy mẫu
- Trước khi lấy mẫu cần tráng chai nhiều lần bằng chính nước đó.
- Kỹ thuật như lấy mẫu nước xét nghiệm vi sinh vật (không có tăm bông). - Ghi nhãn và bảo quản.
3.1.3. Kỹ thuật lấy mẫu nước xét nghiệm chất khí hòa tan (COD)
- Chỉ dùng chai nút nháp, dung tích 300ml.
- Cho nước chảy từ từ vào miệng chai cầm chai hơi nghiêng không để không khí vào trong chai.
- Cốđịnh oxy hòa tan bằng hai dung dịch: kiềm NaOH và KI 2ml, MnCl 2ml.
- Đưa thuốc xuống tận dưới đáy chai, đậy nút, lắc đều cho tủa lắng xuống đáy khoảng 30 phút, sau đó gắn nút paraphin hoặc gắn xi.
3.2. Xét nghiệm nước về tình chất hóa học
3.2.1. Định lượng chất hữu cơ trong nước a. Nguyên tắc
Dùng pemanganatkali (KMnO4) để oxy hóa các chất hữu cơ có trong nước và từ đó đo lượng O2 giải phóng ra để oxy hóa chất hữu cơđó. Tức là ta cho các chất hữu cơ tác dụng với một lượng thừa KmnO4 N/50 ở nhiệt độ sôi trong 10 phút, sau đó chuẩn độ thuốc tím còn thừa bằng acid oxalic (H2C2O4) N/50. Từ lượng thuốc tím đã sử dụng ta tính được nồng độ các chất hữu cơ có trong nước. Phản ứng thực hiện trong môi trường kiềm hoặc môi trường acid.
b. Dụng cụ - hóa chất
- Dụng cụ: chai lọ lấy mẫu nước loại chai nút mài hít, đã rửa sạch, hấp số khô. Bình nón 250ml, buret, pipet, giá treo buret, đèn cồn, kiềng...
- Hóa chất: KMnO4 N/50 H2C2O4 N/50 H2SO4đặc
c. Tiến hành
Ta cho vào bình nón thứ tự sau: - Nước xét nghiệm 100ml
- H2SO4 đặc 2ml - KMnO4, N/50 10ml
Đun sôi trong 10 phút, sau đó cho thêm 10 mL acid oxalic N/50 lúc này sẽ mất màu hoàn toàn. Từ buret chuẩn độ bằng thuốc tím cho tới khi xuất hiện màu hồng thì dừng lại và ghi lại số ml thuốc tím đã chuẩn độ hết (n ml)
Song song với mẫu xét nghiệm ta phải làm 1 mẫu đối chứng bằng nước cất các bước tiến hành tương tự ta sẽ có (n' ml thuốc tím) thường n’ = 0,5.
d. Kết quả
X mg O2 /l = (n-n').0,16.1000/ 100 = (n-n').1,6.
Trong đó: n là số ml thuốc tím đã chuẩn độ hết với mẫu nước xét nghiệm. n’ là số ml thuốc tím đã chuẩn độ hết với mẫu nước đối chứng.
0,16 là 1 ml thuốc tím giải phóng ra 0,16 mgO2 1000 tính ra thể tích 1 lít nước.
100 số lượng nước đem xét nghiệm.
e. Nhận định kết quả
Nếu chúng ta thực hiện trong môi trường kiềm thì đó là chất hữu động vật so với tiêu chuẩn cho phép từ 0 đến < 2 mgO2/lít.
- Nếu chúng ta thực hiện trong môi trường acid thì đó là chất hữu thực vật so với tiêu chuẩn cho phép từ 2 đến < 4 mgO2/lít.
- Dựa vào tiêu chuẩn để chúng ta đánh giá nước đó có bị ô nhiễm hay không.
3.2.2. Định lượng Amoniac (NH3) trong nước (bằng phương pháp lên máu với thuốc thử
Nessler) a. Nguyên tắc
Trong môi trường kiềm mạnh các muối có gốc NH3 sẽ tạo thành NH4(OH). Muối này sẽ kết hợp với thuốc thử Nessler cho ta một phức chất màu vàng nâu.
Nessler Kalitetraiodua Mecurat Oxy Dimecurat Amoni Iodua (vàng nâu)
Nhưng trong nước có rất nhiều ion Ca, Mg làm trở ngại cho phản ứng vì vậy trước khi xét nghiệm ta phải khửđộ cứng của nước bằng dung dịch khử kiềm Seigncte (Kali natritactrat).
b. Hóa chất
- Dung dịch chuẩn Nessler
- Dung dịch khử kiềm Seignete 5%
- Ống hút 2ml, 5ml, 10ml - Ống nghiệm
- Bộ thang mẫu đã biết trước nồng độ NH3 - Chai lọ dựng hóa chất
- Máy điện quang kế (Specol 11)
d. Tiến hành
- Ta cho vào ống nghiệm thứ tự sau: Nước xét nghiệm 10ml.
Dung dịch khử kiềm Seignete 5% 5 giọt. - Lắc đều để 3 - 5 phút sau cho thêm: Dung dịch chuẩn Nessler 5 giọt.
Lắc đều để 5 - 7 phút. Đem so màu với thang mẫu, tương ứng với ống nào thì lấy kết quả của ống đó.
+ Nếu đem so màu trên máy điện quang kế thì so màu ở bước sóng 420 nm kết quả sẽ hiện trên màn hình.
+ Dựa vào tiêu chuẩn để chúng ta đánh giá nước đó có bị ô nhiễm hay không.
3.2.3. Định lượng NO2 trong nước (Bằng phương pháp so màu với thuốc thử Griess) a. Nguyên tắc
Trong môi trường acid ion NO- sẽ kết hợp với ion H+ để tạo thành HNO2. Acid này sẽ kết hợp với thuốc thử Griess cho ta một phức chất màu hồng.
HNO2 + A.sulfanilic... A. Diazosulfanihc.
A. Diazosulfanilic+alpha naphtylamin... A. alpha naphtylamin azobensulfonic.
b. Hóa chất
- Griess A (gồm acid acetic và acid sulfanilic) - Griess B (gồm acid acetic và alpha naphtylamin).
c. Dụng cụ
- Ống hút 2ml, 5ml, 10ml - Ống nghiệm
- Bộ thang mẫu đã biết trước nồng độ NO2 - Chai lọđựng hóa chất
- Máy điện quang kế (Specol 11)
d. Tiến hành
- Ta cho vào ống nghiệm thứ tự sau: Nước xét nghiệm 10ml.
Griess A 1ml Griess B 1ml
- Lắc đều để 5 - 7 phút. Đem so màu với thang mẫu, tương ứng với ống nào thì lấy kết quả của ống đó.
+ Nếu đem so màu trên máy điện quang kế thì so màu ở bước sóng 520nm kết quả sẽ hiện trên màn hình.
+ Dựa vào tiêu chuẩn để chúng ta đánh giá nước đó có bị ô nhiễm hay không.
3.2.4. Xác định độ cứng của nước a. Nguyên tắc
Trylon B có khả năng tạo thành những hỗn hợp vững chắc với những ion hóa trị 2 đặc biệt là ion Ca và Mg. Nhưng trong môi trường kiềm chỉ thị màu đen Eryocrom T sẽ kết hợp ion Ca, Mg tạo thành một phức hợp màu hồng. Khi chúng ta cho Trylon B vào nó sẽ phá vỡ phức hợp đó để lấy đi ion Ca, Mg tạo thành một phức hợp bền vững hơn có màu xanh lơ.
b. Hóa chất. - Trylon B N/10. - Chỉ thị màu đen Eryocrom T. - Dung dịch đệm NH3 c. Dụng cụ - Chai lấy mẫu nước loại 1 lít, 2lít, 5lít.
- Bình nón 250ml, buret và giá treo buret, pipet và giá để pipet. - Chai lọ dựng hóa chất.
d. Tiến hành
- Ta cho vào bình nón thứ tự sau:
Nước xét nghiệm 50ml Dung dịch đệm NH3 5ml Chỉ thị màu đen Eryocrom T 0,2ml Sau đó lắc đều.
- Từ Buret chuẩn độ bằng Trylon B N/10 cho tới khi thấy chuyển từ màu hồng sang màu
xanh lơ thì dừng lại và ghi lại số ml Trylon B đã dùng.
e. Kết quả
Trong đó:
1ml Trylon B = 0,28
n là số ml Trylon B đã dùng
f. Nhận định kết quả
Dựa vào kết quả thu được để nhận định loại nước đó là nước mềm, nước cứng, khá cứng, rất cứng theo tiêu chuẩn.
3.3. Các test xử lí nước
3.3.1. Test làm trong nước
a. Nguyên tắc: Trong những khối lượng nước bằng nhau, ta cho những lượng phèn tăng dần sao cho đủ lượng phèn tối thiểu để làm trong một mẫu nước, rồi từ đó tính lượng phèn cần thiết đủđể làm trong một thể tích nước nhất định sau 4 giờ (l mm3, 10 mm3, 100 mm3).
b. Dụng cụ
- Chai lấy mẫu nước loại 1lít, 21ít, 5lít. - Bình nón 250ml, pipet và giá để pipet.
- Chai lọđựng hóa chất, phễu, ống nghiệm, giấy lọc, thang mẫu.
c. Hóa chất
- Phèn nhôm Al2(SO4)3.18H2O 10%. 1ml = 0,01 mg phèn. - Phèn kép K2SO4.Al2(SO4)3.6H2O
- Phèn sắt Fe(Cl3)2
d. Tiến hành
- Ta cho vào 3 bình nón thứ tự sau:
