III. Hoỏ tớnh của mỏu
8. Canxi huyết thanh
Canxi là thành phần chủ yếu trong huyết tương, ủược hấp thu vào cơ thể qua niờm mạc ruột non. Sau khi vào cơ thể, lượng lớn canxi ủọng ở xương, một phần nhỏ ở sụn.
Vitamin D cú tỏc dụng rất lớn trong việc hấp thu canxi trong ủường ruột, quỏ trỡnh chu chuyển canxi trong cơ thể và giữ nồng ủộ canxi trong mỏu tương ủối ổn ủịnh; Sau vitamin D là tuyến giỏp trạng, thận và gan.
Quỏ trỡnh trờn theo cơ chế sau: vitamin D ủược hấp thu ở ruột non nhờ tỏc dụng của mật hoặc tổng hợp ở da vận chuyển ủến gan. ở gan, dưới tỏc dụng của men 25 – hydroxylaza, Vitamin D biến thành 25 – hydroxy - Vitamin D ( 25 – OH – D). Quỏ trỡnh này xảy ra tại vi tiểu thể (microsome) của tế bào gan.
25 – OH – D chuyển hoỏ ủến thận, và tại ủõy, nhờ men 1, ỏ hydroxylaza của ti lạp thể ở liờn bào ống thận, biến thành 1,25 – dihydroxy - Vitamin D (1,25 –(OH)2 – D) cú tỏc dụng xỳc tiến hấp thụ canxi ở ủường ruột và huy ủộng canxi ở xương vào mỏu.
Sự ủiều hoà tổng hợp 1,25 – (OH)2 – D phụ thuộc nồng ủộ canxi, phot pho và hooc mụn phú giỏp trạng trong mỏu. Khi canxi mỏu giảm, tuyến phú giỏp trạng bị kớch thớch tiết ra nhiều parathyroxin kớch thớch mạnh hoạt tớnh men 1, ỏ hydroxydaza ở thận tăng tổng hợp 1,25 -(0H)2- D, do ủú làm tăng hấp thụ canxi ở ruột và huy ủộng canxi ở xương vào mỏu làm tăng canxi mỏu. Khi canxi mỏu tăng, lại ức chế bài tiết parathyroxin, do ủú làm giảm tổng hợp 1,25-(0H)2-D.
Khi gia sỳc cú chửa, trong thời gian gia sỳc non ủang lớn, xương ủang cứng và phỏt triển cần rất nhiều Canxi PO4-- và cả Vitamin D. Thiếu một trong những chất trờn sẽ gõy rối loạn chuyển hoỏ Canxi.
Canxi huyết thanh tăng: cường năng phú giỏp trạng, ung thư xương,...
Canxi huyết thanh giảm: cũi xương, lịờt sau khi ủẻ, bờ nghộ co giật, thiếu mỏu, viờm thận, nhược năng phú giỏp trạng.
* ðịnh lượng Canxi huyết thanh
Phương phỏp chuẩn ủộ bằng Kali permanganat
Nguyờn tắc: Canxi trong huyết thanh tỏc dụng với amoni oxalat cho Canxi oxalat kết tủa. Dựng nước amoniac ủể rửa amoni oxalat cũn thừa, rồi hoà tan Canxi oxalat nhờ axit sulfuric. Sau cựng chuẩn ủộ bằng dung dịch kali permanganat ủó biết một ml kết tủa ủược bao nhiờu Canxi.
Từ ủú tớnh hàm lượng Canxi trong huyết thanh.
Chất cú Canxi + (NH4)2C2O4 CaC2O4 + muối amoni CaC2O4 + H2SO4 CaSO4 + H2C2O4
2KMnO4 + 3 H2SO4+ 5 H2C2O4 K2SO4 + 2MnSO4 + 10 CO2 + 8 H2O Thuốc thử: 1. Amoni oxalat 4% 2. Nước amoniac 2% Nước amoniac (d = 0,9) 2ml Nước cất ủến 100 ml 3. Axit sulfuric 1N 4. Natri oxalat 0,01N
6,7 g Natri oxalat ( Na2C2O4 C.P ., sấy 1100C trong 3 giờ), thờm vào một ớt nước cất, quấy cho tan rồi cho vào bỡnh ủịnh mức 1000ml. Thờm vào 5 ml axit sulfuric ủặc thuần khiết, rồi cho nước ủến 1000 ml thỡ ủược Natri oxalat 0,1N. ðong thật chớnh xỏc 10 ml dung dịch trờn cho vào bỡnh ủịnh mức 100ml, rồi thờm nước cất cho ủủ 100 ml ( pha khi dựng).
5. Kali permanganat 0,01 N (1ml kết tủa 0,2 mg Canxi). Lấy 10ml Kali permanganat 0,1 N cho vào bỡnh ủịnh mức 100 ml rồi thờm nước cất cho ủủ 100 ml. Dung dịch này dễ thay ủổi nồng ủộ. Vỡ vậy, khi dựng cần phải hiệu ủớnh.
Cỏch hiệu ủớnh: Cho vào ống nghiệm 2 ml Natri oxalat 0,01 N, 2 ml H2SO4 1N. ðun
sụi cỏch thuỷ một phỳt cả hai ống ủể cho nhiệt ủộ trong ống ủạt khoảng 75 oC, rồi dựng Kali permanganat 0,01N ( cần hiệu ủớnh) ủể chuẩn ủộ cho ủến khi xuất hiện màu hồng bền vững.
2 Hệ số hiệu ủớnh=
Số ml KMnO4 dựng _ Số ml KMnO4 dựng cho ống hiệu ủớnh cho ống nước cất
Thao tỏc
Cho vào ống li tõm 1 ml huyết thanh , 3 ml nước cất và 1 ml amoni oxalat 4%, ngoỏy cho ủều, ủể 30 phỳt, ly tõm nhanh 5 – 10 phỳt. Dốc ngược ủổ hết nước trong. ðể ỳp ngược ống li tõm trờn giấy thấm ủể hỳt hết nước cũn lại.
Cho thờm 4 ml nước amoniac 2%, ngoỏy ủều, ly tõm 5 – 10 phỳt, ủổ phần nước trong. Rửa như vậy thờm một lần nữa, cuối cựng dốc ngược ống trờn giấy thấm ủể 5 phỳt ủể hỳt hết nước cũn lại. Thờm vào 2ml H2SO4 1 N ủể hoà tan Canxi oxalat. Cho vào ống ủun cỏch thuỷ. Khi nhiệt ủộ trong ống khoảng 75 oC thỡ dựng ống hỳt 1 ml cú khắc ủộ, chuẩn ủộ bằng Kali permanganat 0,01 N cho ủến khi cú màu khụng mất. Ghi lại số ml KMnO4 0,01 N ủó dựng.
Cỏch tớnh: mg% = Số ml KMnO4 ủó dựng x hệ số ủiều chỉnh x
1 100