VI. Xột nghiệm nước tiểu
2. Hoỏ nghiệm nước tiểu
ðộ kiềm, toan
Gia sỳc ăn cỏ – ngựa, dờ, cừu, trõu, bũ – nước tiểu thường kiềm. Thức ăn thực vật qua tiờu húa của cơ thể cho những sản vật thải ra ngoài kiềm tớnh, như cỏc loại bicacbonat. Thức ăn ủộng vật, trong protit cú nhiều S, P, N, qua trao ủổi chất của cơ thể thành H2SO4, H3PO4 và cỏc muối toan tớnh khỏc. Vỡ vậy, nước tiểu gia sỳc ăn thịt như chú mốo thường toan tớnh. Nước tiểu loài ăn tạp lỳc toan lỳc kiềm tựy theo tớnh chất thức ăn.
Nước tiểu loại ăn cỏ toan tớnh là triệu chứng bệnh: ủúi lõu ngày, ra nhiều mồ hụi, viờm ruột cata, viờm phổi nặng, cũi xương, mềm xương, sốt cao.
Nước tiểu ngựa toan thỡ trong suốt, ớt lắng cặn. Nước tiểu loài ăn thịt kiềm do nước tiểu tớch lại trong bàng quang, ure chuyển hoỏ thành amoniac: viờm tắc bàng quang.
Nước tiểu cú nhiều mủ, mảnh tổ chức, tế bào thượng bỡ bị trương to, phõn giải nước tiểu cũng kiềm tớnh.
Chẩn ủộ toan, kiềm Chẩn ủộ toan
10 ml nước tiểu, thờm 40 ml nước cất ủể pha loóng và 1-2 giọt Phenolfthalein 1%. Chẩn ủộ NaOH N/10 ủến lỳc xuất hiện màu hồng nhạt khụng mất màu.
Lõý lượng HCl ủể biểu thị ủộ axit trong 100 ml nước tiểu X (ủộ toan, g) = H x 10 x 0,00365
H: số ml NaOH ủó dựng
0,00365 là khối lượng HCl trong 1ml HCL N/10.
Chẩn ủộ kiềm
Làm như trờn, nhưng chỉ thị màu Natri alizarinsunfat và chẩn ủộ bằng HCl N/10 ủến lỳc xuất hiện màu vàng.
Lấy lượng NaOH biểu thị lượng kiềm trong 100 ml nước tiểu: X (lượng kiềm, g%) = G x 10 x 0.004
G: số ml HCl ủó dựng; 0,004 g là khối lượng NaOH trong 1ml NaOH N/10
Abumin niệu (Albuminnuria)
Gọi albumin niệu là do thúi quen, thật ra phải gọi là protein niệu (proteinuria), vỡ nếu cú albumin trong nước tiểu thỡ cú cả globulin.
Cỏc xột nghiệm albumin trong nước tiểu ủều dựa trờn nguyờn tắc protein sẽ kết tủa khi gặp nhiệt ủộ cao, axit hoặc kim loại nặng.
Nước tiểu kiểm nghiệm phải trong suốt. Nếu ủục phải lọc, nếu kiểm phải toan hoỏ, nhất là nước tiểu ngựa.
Cỏc xột nghiệm ủịnh tớnh
ðun sụi. Trong 1 ống nghiệm: 5 ml nước tiểu, 2 - 3 giọt axit axetic 10%, lắc ủều và ủun từ từ trờn ngọn lửa ủốn cồn.
Nếu nước tiểu ủục, cho thờm 1 - 2 giọt axit nitric 25% khụng mất ủục – phản ứng dương tớnh.
ðộ mẫn cảm của phương phỏp 1/30.000 – 1/40.000.
Chỳ ý: khi toan hoỏ nước tiểu theo liều lượng trờn. Nếu toan húa quỏ nhiều axit, protein sẽ bị hoà tan, kết quả xột nghiệm sẽ sai.
Căn cứ ủộ ủục theo phương phỏp ủun sụi ủể tớnh lượng protein trong nước tiểu: Ký
hiệu
Hàm lượng protein trong nước
tiểu Phản ứng trong ống nghiệm
- Khụng cú Trong suốt
± 0.01 – ớt hơn ðục mờ
0.01 – 0.05 Vẩn ủục yếu
+ 0.1 ðục và tủa khoảng 1/10 cột nước tiểu +++ 0.2 – 0.3 Kết tủa như bụng, cao khoảng 1/4 cột nước
tiểu
++++ Rất nhiều 0.5-1.0 Kết tủa thành cục, cao khoảng1/2 cột
2 – 3 ðụng hoàn toàn
Phương phỏp dựng axit nitric (phương phỏp Heller)
Trong ống nghiệm: 3 - 5 ml axit nitric 50% và theo thành ống cho tiếp 2 - 3 ml nước tiểu kiểm nghiệm (ủó toan hoỏ). Nếu vũng tiếp xỳc vẫn ủục trắng:
Phản ứng dương tớnh: trường hợp lượng protein ớt, vũng ủục xuất hiện sau 2 - 3 phỳt. ðộ nhạy của phương phỏp: 0.033%.
Phương phỏp dựng axit sunphoxalixilic 20% (axit sunfosalicilic) – phương phỏp Rock – Williame)
Trong ống nghiệm: 5 ml nước tiểu rồi nhỏ thờm 10 giọt axit sunphoxalixilic 20%. Nước tiểu vẩn ủục như mõy, cú thể kết tủa.
Nếu là anbumo (albumone) với axit sunphoxalixilic 20% cũng cho kết tủa nhưng ủun sụi thỡ hết, ủể nguội lại xuất hiện.
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Giỏo trỡnh Giỏo trỡnh Chẩn ủoỏn bệnh thỳ ……….90
ðộ nhạy của phương phỏp: 1/60.000. Phương phỏp này dựng phổ biến trong lõm sàng, ủặc biệt khi kiểm nghiệm nước tiểu kiềm tớnh.
Phương phỏp dựng cồn
Trong ống nghiệm 5ml nước tiểu, rồi nhẹ nhàng theo thành ống nghiệm cho 1 lớp cồn. Nếu vũng tiếp xỳc cho kết tủa trắng thỡ phản ứng dương tớnh.
ý nghĩa chẩn ủoỏn:
Trong nước tiểu gia sỳc khụng cú protein, cỏc phương phỏp tỡm anbumin ủều cho kết quả õm tớnh. Nếu cú albumin niệu là triệu chứng cần chỳ ý.
Anbumin niệu từ thận do cơ năng siờu lọc của thận bị rối loạn, protein trong mỏu theo nước tiểu ra ngoài – gọi là anbumin niệu thật.
Anbumin niệu thật sinh lý: do lao ủộng quỏ sức, thời gian chửa, do quỏ lạnh, cú lỳc do ăn quỏ nhiều protein… loại anbumin này xuất hiện thời gian ngắn, trong nước tiểu khụng cú cặn bệnh lý.
Anbumin niệu thật do bệnh: viờm thận cấp tớnh trong hàng loạt cỏc bệnh truyền nhiễm, cỏc trường hợp trỳng ủộc, bỏng nặng, một số bệnh nội khoa nặng… Do thận cú tổn thương, protein niệu theo nước tiểu ra ngoài. ðặc ủiểm loại anbumin niệu này là trong nước tiểu cú cặn bệnh lý và cú bệnh cảnh tương ứng.
Anbumin niệu ngoài thận - Anbumin niệu giả: do viờm bể thận, viờm bàng quang, viờm niệu ủạo.
ðể phõn biệt anbumin niệu thật với anbumin niệu giả cần xột nghiệm cặn nước tiểu và kết hợp với bệnh cảnh.
Bệnh lan tràn từ thận ủến bể thận, bàng quang gõy anbumin niệu thỡ gọi là anbumin niệu hỗn hợp.
Trong lõm sàng anbumin niệu thường là triệu chứng thận tổn thương – Nhưng chỳ ý là số lượng anbumin trong nước tiểu khụng tỷ lệ thuận với mức ủộ bệnh ở thận.
Xột nghiệm hồng cầu và huyết sắc tố (Hemoglobin) trong nước tiểu
Cỏc xột nghiệm dưới ủõy ủều cho kết quả phản ứng dương tớnh khi trong nước tiểu cú hồng cầu, huyết sắc tố hoặc sắc tố của cơ thể (mioglobin).
Phương phỏp dựng thuốc thử Benzilin (phương phỏp Adler)
Trong một ống nghiệm: một ớt bột benzilin bằng hạt kờ và 2 ml axit axetic ủặc, lắc cho ủều. Thờm vào 2 ml H2O2 3%, lắc ủều. Rồi cho nước tiểu kiểm nghiệm vào từ từ theo thành ống. Vũng tiếp xỳc xuất hiện màu xanh – phản ứng dương tớnh.
Nếu mỏu trong nước tiểu ớt, cú thể làm theo cỏch sau ủể rễ nhận kết quả:
Trong 1 ống nghiệm: 10 ml nước tiểu ủun sụi ủể phỏ vỡ men oxy hoỏ, thờm 10 giọt axit axetic ủể toan hoỏ nước tiểu. Cho 3 ml ete etylic lắc ủều rồi ủể yờn ủể ete nổi lờn trờn. Hỳt lấy phần ete trong cú phần huyết sắc tố ủể làm phản ứng benzilin theo cỏc bước như trờn.
Phương phỏp dựng thuốc thử Pyramidon
Trong ống nghiệm: 0,5 mlaxit axetic ủặc, 2 ml nước tiểu, lắc ủều; thờm vào 2 ml pyramidon 5% (trong cồn) và 0,5 ml H2O2 3%. Hỗn hợp biến thành màu tớm – phản ứng dương tớnh.
Phương phỏp dựng Phenolphtalein (phương phỏp Collo)
Trong ống nghiệm 3 ml nước tiểu và 3 ml thuốc thử Phenoltalein; trộn ủều rồi thờm 1ml H2O2 5%. Vũng tiếp xỳc ủỏ tớm – phản ứng dương tớnh
Thuốc thử: Phenolfthalein 2 g KOH 20 g Bột kẽm 10 g Nước cất 100 ml. ý nghĩa chẩn ủoỏn:
Trong nước tiểu cú hồng cầu gọi là huyết niệu (Hematuria), cú huyết sắ tố – huyết sắc tố niệu (Hemoglobinuria) và cú Mioglobin – Mioglobinuria. Trong chẩn ủoỏn thường chỳ ý 2 dạng ủầu.
Huyết niệu xuất hiện khi ở thận hoặc bể thận, ống thận, bàng quang, niệu ủạo tổn thương, xuất huyết.
Huyết niệu do thận: vỡ thận, viờm thận cấp tớnh. Nhiều bệnh truyền nhiễm gõy xuất huyết: nhiệt thỏn, dịch tả trõu bũ, dịch tả lợn, phú thương hàn. Huyết niệu do thận nước tiểu sẫm, cặn cú nhiều cục mỏu, cú tế bào thượng bỡ thận.
Huyết niệu do bể thận: sỏi bể thận, giun thận, viờm bể thận xuất huyết.
Huyết niệu do bàng quang: viờm bàng quang, sỏi bàng quang, loột niệu ủạo, viờm niệu ủạo chảy mỏu… ðể chẩn ủoỏn phõn biệt cần xột nghiệm cặn nước tiểu.
ðể phõn biệt cỏc trường hợp xuất huyết ở ủường tiết niệu bằng cỏch: hứng 3 cốc nước tiểu ở 3 thời ủiểm. Nước tiểu giai ủoạn ủầu, giai ủoạn giữa và giai ủoạn cuối của quỏ trỡnh ủi tiểu, quan sỏt màu sắc của 3 cốc.
Nếu màu của cốc ủầu ủậm – do xuất huyết ở niệu ủạo. Cốc sau ủậm – xuất huyết ở bàng quan.
Nếu cả 3 cốc cú màu ủỏ như nhau thỡ xuất huyết ở thận hoặc bể thận.
Huyết sắc tố niệu là do hồng cầu vỡ quỏ nhiều trong cơ thể và ra ngoài theo nước tiểu.
Phõn biệt huyết niệu và huyết sắc tố niệu
Huyết niệu Huyết sắc tố niệu
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Giỏo trỡnh Giỏo trỡnh Chẩn ủoỏn bệnh thỳ ……….92
ðể lắng Hồng cầu lắng Khụng cú
Kiểm kớnh Hồng cầu nguyờn vẹn Hồng cầu vỡ từng mảng
Lọc nhiều lần Mất màu Khụng mất màu
Xột nghiệm ủường trong nước tiểu Phương phỏp Heines
Nguyờn tắc: nếu cú ủường sẽ khử Cu++ thành Cu+ trong Cu2O kết tủa màu gạch hay màu vàng ủậm.
Phương phỏp này mẫn cảm thớch hợp ủể kiểm nghiệm nước tiểu gia sỳc nhất là nước tiểu ngựa.
Thuốc thử Heines:
1. Hoà 13,3 g CuSO4 tinh khiết trong 400 ml nước cất. 2. Hoà 50 g KOH trong 400 ml nước cất.
3. 15 ml glyxelin tinh khiết trong 200 ml nước cất.
Trộn 1 và 2 lại, quấy ủều rồi ủổ 3 vào, lắc ủều ủựng chai nỳt mài sử dụng lõu dài. Xột nghiệm
Trong ống nghiệm: 3ml thuốc thử Heines, ủun sụi, rồi nhỏ 10 giọt nước tiểu kiểm nghiệm. Nếu cú tủa màu ủỏ gạch: phản ứng dương tớnh.
Phương phỏp Nylander
Nguyờn tắc: trong mụi trường kiềm sous nitras bismuth bị ủường khử oxy ủể thành oxy bismuth hoặc bismuth kết tủa màu nõu hoặc màu ủen.
Thuốc thử:
Sous nitras bismuth 2.0 g.
Kali – natri tartrat 4.0g.
Kali hydroxit (KOH) 100ml.
Hoà tan lọc qua giấy lọc, bảo quản trong chai thuỷ tinh màu.
Xột nghiệm:
Trong ống nghiệm 3 - 5ml nước tiểu kiểm nghiệm, thờm vào 1 - 2 ml nước tiểu Nylander, ủun sụi. Hỗn dịch biến thành màu nõu ủen: phản ứng dương tớnh.
Chỳ ý: nếu nước tiểu cú nhiều indican và cỏc sắc tố khỏc, lỳc ủun cũng cú kết tủa màu ủen. Vỡ vậy, trước khi kiểm nghiệm cho ớt HCl 25% và bột xương lắc ủều lọc và loại ủi. Nước tiểu cú nhiều nhầy (muxin) cũng cú thể cho phản ứng dương tớnh giả.
Phương phỏp Benedict
Giống như phương phỏp Heines, nhưng cú ưu ủiểm là axit uric. Muối urat và cỏc cặn hữu cơ khụng cú khả năng khử oxy trong thuốc thử Benedict. Phương phỏp Benedict ủược sử dụng rộng rói.
Trong thuốc thử Benedict:
1) 173 g Natri xitrat (Na2C6H5O7.11H2O) và 90 g Natri carbonat khan (hoặc 180 g Natri carbonat kết tinh) trong 600 ml nước cất, ủun nhẹ, lắc cho tan, lọc hết cạn rồi cho thờm nước cất ủến 850 ml.
2) 17,3 g CuSO4.5H2O trong 100ml nước cất, lắc cho tan rồi cho thờm nước cất ủến 150 ml.
Trộn dung dịch 1 với dung dịch 2, lắc ủều. Xột nghiệm
Trong 1 ống nghiệm: 1,5 ml thuốc thử Benedict và 3 giọt nước tiểu kiểm nghiệm. Lắc ủều và ủun núng trong 2 phỳt. Kết tủa màu gạch cua: phản ứng dương tớnh.
Cú thể dựa vào kết quả phản ứng với thuốc thử Benedict ủể tớnh lượng ủường trong nước tiểu.
Màu dung dịch Kết quả Nồng ủộ ủường trong nước tiểu %
Khụng thay ủổi - 0
Màu xanh khụng tủa ± Từ 0,1 - 0,3
Kết tủa xanh + 0,5
Màu vàng ++ 1,0
Màu ủỏ da cam +++ 1,5
Màu ủỏ nhạt ++++ 2,0 và nhiều hơn
ý nghĩa chẩn ủoỏn:
Cỏc phương phỏp xột nghiệm trờn phỏt hiện glucoza. Trong nước tiểu ủộng vật, ngoài glucoza cũn cú frutoza, lactoza, levuloza, pentoza. Chỳ ý cỏc chất vitamin C, creatinin, axit uric cũng khử oxy như glucoza, nờn phản ứng dương tớnh với cỏc xột nghiệm glucoza.
Cỏc xột nghiệm ủường niệu dương tớnh là triệu chứng bệnh lý và ủường niệu sinh lý. ðường niệu sinh lý: Ăn quỏ nhiều ủường, ủường huyết cao vượt ngưỡng thận. Cỏc trường hợp: gia sỳc sợ hói, hưng phấn, lạnh ủột ngột. Nước tiểu gia sỳc cú chửa cú ủường lactoza và hiện tượng này mất ủi sau khi gia sỳc ủẻ sau 2 - 3 tuần.
ðường niệu bệnh lý: thường là cỏc bệnh thần kinh. Chú dại, sung huyết nóo, viờm nóo tuỷ, cỏc trường hợp trỳng ủộc (trỳng ủộc oxyt cacbon, trỳng ủộc thuỷ ngõn, trỳng ủộc chloral hydrat). Một số bệnh truyền nhiễm gõy tổn thương ở thận và kớch thớch thần kinh trung ương. Viờm thận mạn tớnh xuất hiện ủường niệu. ðường niệu ở ngựa, chú là triệu chứng bệnh ủỏi ủường (Diabet).
Xột nghiệm bilirubin trong nước tiểu
Nước tiểu cú bilirubin màu vàng, nếu nhiều thỡ màu xanh, lắc cú bọt màu vàng xanh. Khi lượng bilirubin ớt thỡ cần phải hoỏ nghiệm.
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Giỏo trỡnh Giỏo trỡnh Chẩn ủoỏn bệnh thỳ ……….94
Phương phỏp dựng axit nitric (HNO3):
Lọc nước tiểu nhiều lần qua một giấy lọc, rồi ủể tờ giấy lọc trờn hộp lồng cho bốc hơi ủến lỳc khụ, tờ giấy màu trắng. Nhỏ 1 giọt axit nitric xuống giữa mảnh giấy, nếu xuất hiện những vũng trũn ủồng tõm từ ngoài vào: màu xanh lỏ cõy, xanh nước biển, tớm, ủỏ, vàng. Vũng màu xanh lỏ cõy chớnh là do bilirubin.
Phương phỏp dựng cồn iod 1%:
Trong 1 ống nghiệm: cho 1 ml cồn iod, rồi từ từ cho thờm 2 ml nước tiểu kiểm nghiệm trờn tầng iod. Nếu quan sỏt thấy vũng tiếp xỳc màu xanh: phản ứng dương tớnh.
Phương phỏp dựng BaCl2:
Cắt những băng giấy lọc bề ngang khoảng 1,5 cm, nhỳng vào dung dịch BaCl2 bóo hoà rồi phơi khụ dựng lõu dài.
Thuốc thử Foucher: 25g axit trichlorua axetic, 1g FeCl3 trong 100 ml nước cất.
Xột nghiệm: nhỳng mảnh giấy BaCl 2 vào trong nước tiểu kiểm nghiệm; lấy ra hong trờn ngọn lửa ủốn cồn cho khụ hoặc ủể khụ trong khụng khớ. Nhỏ 1 giọt thuốc thử Foucher lờn mảnh giấy. Xuất hiện màu xanh: phản ứng dương tớnh.
Phương phỏp Xinhop:
Lấy 5 ml nước tiểu pha loóng với 5ml nước cất, rồi thờm vào 5ml BaCl2 10% lắc ủều vào lọc qua giấy lọc. Cho 1 giọt axit nitric bốc khúi vào phần cặn trờn giấy lọc.
Nếu xuất hiện màu xanh: phản ứng dương tớnh.
ý nghĩa chẩn ủoỏn:
Bilirubin xuất hiện trong nước tiểu khi bệnh ở gan hay bệnh làm tắc ống mật (xem phần “Khỏm gan”). ở bũ, theo Roussow (1962), bilirubinuria xuất hiện khi hàm lượng bilirubin trong huyết thanh trờn 10 mg% và theo tỏc giả, những ca bệnh rất hiếm cú. ở trõu, bilirubinuria xuất hiện khi hàm lượng cholebilirubin trong huyết thanh vượt quỏ 0,5 mg% ( Hồ Văn Nam, Nguyễn Kim Thành, 1985).
Xột nghiệm urobilinogen trong nước tiểu
Urobilinogen trong nước bao gồm 4 chất: urobilinogen, urobilin, stecobilinogen và stecobilin (Todorov, 1968).
Phương phỏp Florens:
Cho vào ống nghiệm: 5 ml nước tiểu kiểm nghiệm, 4 giọt H2SO4 ủặc ủể toan hoỏ và 3 ml ete etilic. Lắc ủều, ủể yờn cho hỗn dịch phõn tầng. Hỳt phần ete trờn cựng cho qua ống nghiệm khỏc trong ủú cú sẵn 3 ml HCl ủặc. Vũng tiếp xuất hiện màu ủỏ: phản ứng dương tớnh. Lượng urobilinogen càng nhiều vũng ủỏ càng dày.
Phương phỏp Nhicop:
Phương phỏp Neubauer ủược Nhicop cải tiến dựa trờn nguyờn tắc: urobilinogen kết hợp với thuốc thử Ehrlich tạo thành một hợp chất màu ủỏ và nhận xột lượng urobilinogen nhiều hay ớt bắng cỏch cho tỏc dụng một lượng thuốc thử Ehrlich với những ống nước tiểu cú ủộ pha loóng khỏc nhau.
HCl: 100 ml
Sỏu ống nghiệm ủều nhau, mỗi ống 2 ml nước cất và cho vào ống thứ nhất 2 ml nước tiểu kiểm nghiệm. Trộn ủều ống thứ nhất, rồi hỳt 2 ml ống thứ nhất cho qua ống thứ 2. Cũng làm tương tự ống thứ hai và lại hỳt 2 ml ống thứ hai cho qua ống thứ 3..., ủến ống thứ 6, hỳt 2 ml bỏ ủi. Như vậy nước tiểu trong 6 ống ủược pha loóng theo tỷ lệ: 1: 2; 1 : 4; 1 : 8; 1 : 16; 1 : 32;...
Cho vào mỗi ống 1ml thuốc thử Ehrlich, lắc ủều cho cỏc ống và ủọc kết quả sau 5 phỳt. ở bũ, theo Nhicop: từ ống cú ủộ pha loóng nước tiểu 1: 16 trở ủi xuất hiện màu ủỏ, phản ứng dương tớnh.
ðịnh lượng urobilinogen rtong nước tiểu
Cho vào ống nghiệm: 5 ml nước tiểu, 5 giọt H2SO4 ủặc ủể toan hoỏ và 2 ml ete etilic. ðậy kớn ống nghiệm bằng ống cao su và lắc thật ủều. ðể yờn 5 phỳt. Hỳt lấy 1ml phần ete ở trờn cho qua 1 ống nghiệm khỏc và thờm vào 1 ml HCl ủặc. Lắc ủều và ủể yờn 10 phỳt.