CHƯƠNG 3 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
4.4 Ảnh hưởng của liều lượng vi khuẩn được bổ sung vào môi trường xử lý
nước thải đến hiệu suất đông tụ
Kết quả nghiên cứu hiệu suất đông tụ của 4 cặp vi khuẩn (B. cereus KG05 +
B. megaterium VL01), (B. cereus KG05 + Bacillus sp. VL05), (B. cereus KG05 +
B. aryabhattai ST02) và (B. megaterium VL01 + Bacillus sp. VL05) ở liều lượng:
0,01; 0,02; 0,03; 0,04; 0,05; 0,06; 0,07; 0,08; 0,09 và 0,1 (%) với mật độ >= 109 cfu/ml cho thấy, hiệu suất đông tụ tăng dần khi tăng liều lượng vi khuẩn từ 0,01 đến 0,05%. Hiệu suất đông tụ đạt cao nhất (86,6%) ở liều lượng 0,05% và khác biệt có ý nghĩa thống kê ở mức 1% so với hai nghiệm thức đối chứng và các nghiệm thức ở các mức liều lượng vi khuẩn nhỏ hơn 0,05% (Hình 4.15). Đặc biệt,
hiệu suất đông tụ ở nghiệm thức đối chứng dương chỉ đạt được cao nhất là 34%, trong khi nghiệm thức có bổ sung 0,05% dịch vi khuẩn và 0,05% PAC thì đạt đến
86,6%.
Hình 4.15 : Ảnh hưởng của liều lượng vi khuẩn đến hiệu suất đông tụ
Ghi chú: (A): KG05 + VL01; (B): KG05 + VL05; (C): KG05 + ST02; (D): VL01 + VL05
A B
C
Kết quả Hình 4.15 cho thấy khi tiếp tục bổ sung tăng liều lượng vi khuẩn
trong quá trình xử lý nước thải lên từ 0,06% dần đến 0,1% thì hiệu suất đông tụ
vẫn tăng nhưng khác biệt không có ý nghĩa thống kê so với hiệu suất đông tụ khi
chỉ bổ sung liều lượng vi khuẩn ở mức 0,05%. Chỉ số 0,05% liều lượng vi khuẩn
rất thấp so với các kết quả nghiên cứu trước. Theo Deng et al. (2003) ứng dụng vi
khuẩn trong xử lý nước thải, bổ sung liều lượng vi khuẩn dao động từ 1 – 15%. Kết quả nghiên cứu này cho thấy khả năng hoạt động của vi khuẩn đông tụ rất cao
trong quá trình xử lý nước thải, đặc biệt là nước thải chăn nuôi heo sau biogas với
liều lượng 0,05% ở mật độ 109 cfu/ml đã cho hiệu suất đông tụ cao nhất.
Từ kết quả phân tích ở Bảng 4.8, 4.14 và Hình 4.15 cho thấy để tiến hành
ứng dụng vi khuẩn đông tụ vào xử lý nước thải chăn nuôi heo sau biogas ở ĐBSCL, môi trường nước thải không phải điều chỉnh pH và nồng độ cation mà chỉ
bổ sung 0,05% dịch cặp vi khuẩn đông tụ đã chọn và 0,05% PAC dùng làm chất
trợ lắng thì hiệu suất đông tụ sẽ đem lại hiệu quả cao.
4.5 Ứng dụng vi khuẩn vào xử lý nước thải chăn nuôi heo sau biogas
4.5.1 Hiệu suất đông tụ của các cặp chủng vi khuẩn trong xử lý nước thải chăn nuôi heo sau biogas quy mô 08 lít thực hiện ở phòng thí nghiệm
Kết quả ứng dụng cặp vi khuẩn đông tụ (B. cereus KG05 + B. megaterium
VL01), (B. cereus KG05 + Bacillus sp. VL05), (B. cereus KG05 + B. aryabhattai
ST02) và (B. megaterium VL01 + Bacillus sp. VL05) qua 3 chu kỳ xử lý cho thấy,
hiệu suất đông tụ trong 3 chu kỳ xử lý nước thải chăn nuôi heo sau biogas ở các
nghiệm thức 2, 3, 4, 5, 6 đạt từ 84 – 86% cao hơn nghiệm thức 1 (ĐC) và khác biệt có ý nghĩa thống kê ở mức 1%. Cuối chu kỳ 1, nghiệm thứcđối chứng chỉ đạt
hiệu suất 9%, NT2 (có bổ sung 0,05% PAC) đạt 33% còn NT3, NT4, NT5, NT6 có bổ sung PAC (0,05%) và cặp chủng vi khuẩn đông tụ (0,05%) đạt hiệu suất đạt từ
80 – 83% và khác biệt có ý nghĩa thống kê so với NT1 và NT2. Kết thúc chu kỳ 1,
thời gian hoạt động của vi khuẩn trong môi trường nước thải là 24 giờ (Sục khí 6
giờ và để yên 18 giờ) kết quả cho thấy các nghiệm thức có bổ sung vi khuẩn đông
tụ, hiệu suất đông tụ tăng lên tỷ lệ thuận với thời gian, hiệu quả nhất ở thời gian
lắng tụ là 18 giờ. Tại thời điểm bắt đầu chu kỳ 2 hiệu suất đông tụ trở về giá trị
không, bởi vì lượng nước thải mới được bổ sung vào được khuấy đều với 50% lượng nước thải cặn lắng của chu kỳ trước còn lại, sau đó hiệu suất đông tụ tăng
lên tỷ lệ thuận với thời gian trong chu kỳ 2. Đến cuối chu kỳ 2 hiệu suất đông tụ ở
tất cả nghiệm thức đều tăng và cao nhất ở thời gian lắng tụ 6 giờ. Trong đó NT2 đạt được 37%, còn NT3, NT4, NT5, NT6 hiệu suất đông tụ đạt từ 84 – 86%. Đến
cuối chu kỳ 3 thì hiệu suất đông tụ ở 4 nghiệm thức có chủng vi khuẩn đông tụ đều
giảm xuống còn từ 74 – 77% thấp hơn so với chu kỳ 1 và chu kỳ 2, trong khi NT2
Hình 4.16: Hiệu suất đông tụ của vi khuẩn qua 3 chu kỳ xử lý nước thải quy mô 08 lít
* Ghi chú: NT1: đối chứng, NT2: PAC, NT3: PAC+VKKG05+VL05, NT4: PAC+VKKG05+VL01, NT5: PAC+VKKG05+ST02,NT6: PAC+VKVL01+VL05
Chu kỳ I: Thời gian từ 0 – 18 giờ; Chu kỳ II, III: Thời gian từ 0 – 6 giờ
Từ Hình 4.16 cho thấy, hiệu quả hoạt động tối ưu của vi khuẩn đông tụ trong
xử lý nước thải chăn nuôi heo sau biogas cho hiệu suất đông tụ cao nhất ở chu kỳ 1 và chu kỳ 2 thời gian hoạt động của vi khuẩn từ 24 – 31 giờ. Trong nước thải chăn
nuôi heo, thành phần chất lơ lửng hữu cơ rất cao và khó lắng do vậy việc bổ sung
0,05% PAC vào mỗi nghiệm thức (trừ nghiệm thức đối chứng) là cần thiết, với lượng 0,05% PAC là rất nhỏ nằm trong giới hạncho phép được bổ sung PAC trong
xử lý nước thải sinh hoạt, bổ sung 0,05% PAC có vai trò “ trợ lắng” giúp cho quá trình xử lý nước thải của vi khuẩn được tốt hơn. Kết quả cho thấy, vai trò của vi
khuẩn đông tụ trong quá trình xử lý nước thải chăn nuôi heo rất rõ khi NT2 chỉ bổ
sung 0,05% PAC thì sau 3 chu kỳ cho hiệu suất đông tụ chỉ đạt từ 33 – 42% trong khi các NT3, NT4, NT5, NT6 có bổ sung từng cặp chủng vi khuẩn đông tụ vào
môi trường để tạo sự đông tụ cùng với 0,05% PAC thì hiệu suất đông tụ tăng lên rất cao, đạt từ 84 – 86% khác biệt có nghĩa thống kê ở mức 1% so với nghiệm thức đối chứng và nghiệm thức 2 (chỉ có PAC). Điều này cho thấy, vai trò của các cặp
chủng vi khuẩn đông tụ được bổ sung trong xử lý nước thải chăn nuôi heo sau
biogas cho hiệu suất tương đương 50%. Trong 3 chu kỳ xử lý, tại chu kỳ 2 ở NT4 cho hiệu suất đông tụ cao nhất (86%), nghiệm thức này được bổ sung cặp chủng vi
khuẩn B. cereus KG05 + B. megaterium VL01, thời gian hoạt động của vi khuẩn
đến cuối chu kỳ 2 là 31 giờ. Kết quả này phù hợp với kết quả kiểm tra sinh hóa khả
84,7±1,4 80,9±1,4 80,2±2,6 81,0±1,0 83,2±3,2 82,8±2,3 84,5±1,4 86,3±1,0 71,8±4,8 73,9±1,7 73,9±2,0 71,6±7,1 33,4±2,9 8,0±3,4 36,7±1,2 9,0±5,1 8,8±2,1 36,7±1,2
năng tự đông tụ ở thí nghiệm trước cho thấy, pha log của vi khuẩn đông tụ ở thời
gian 24 – 36 giờ. Khi so sánh hiệu quả hoạt động của từng cặp chủng vi khuẩn đông tụ ở từng nghiệm thức, nhận thấy kết quả khác biệt không có ý nghĩa thống
kê ở mức 1% (Hình 4.16). Quá trình kết dính của các tế bào vi khuẩn qua các chu
kỳ xử lý nước thải có thể thấy rằng, khi vi khuẩn được bổ sung vào môi trường ở
các nghiệm thức 3, 4, 5, 6, và các nghiệm thức được sục khí 6 giờ, vi khuẩn được
trộn đều trong môi trường, giai đoạn này nguồn dinh dưỡng trong môi trường rất
dồi dào giúp vi khuẩn thực hiện tăng sinh khối dễ dàng, khi để yên (lắng tụ) 18 giờ, thời gian này vi khuẩn tăng sinh khối rất nhanh đây cũng là thời gian sinh trưởng tối ưu của vi khuẩn đông tụ, lúc này mật độ vi khuẩn rất cao, khoảng cách
các tế bào vi khuẩn trong môi trường càng gần nhau từ đó cơ chế kết dính tế bào xảy ra càng lớn làm tăng hiệu suất đông tụ, kết quả nước được sáng màu và giảm
cặn lơ lửng (Hình 4.17).
Hình 4.17: Mẫu nước thải sau xử lý bằng vi khuẩn đông tụ
* Ghi chú: NT1: đối chứng, NT2: PAC, NT3: PAC+VKKG05+VL05, NT4: PAC+VKKG05+VL01, NT5: PAC+VKKG05+ST02,NT6: PAC+VKVL01+VL05
Hình chụp ngày: 21/02/2014
Mẫu nước thải trong từng nghiệm thức sau khingưng sục khí một giờ ở đầu
chu kỳ 2, mỗi nghiệm thức được lấy lượng nước đang xử lý ra bình tam giác để
quan sát màu của nước trong giai đoạn để lắng 6 giờ ở chu kỳ 2 (Hình 4.7). Kết
quả cho thấy đầu chu kỳ 2, mặc dù được thay đổi 50% nước trong và thêm 50%
lượng nước thải mới vào chu kỳ xử lý. Nhưng kết quả ở cuối chu kỳ 2 vẫn ổn định và tăng hiệu suất đông tụ, bởi vì thời gian hoạt động ở chu kỳ 2 vẫn là thời gian tăng trưởng tối ưu của vi khuẩn đông tụ, hơn nữa nguồn dinh dưỡng chính của vi
khuẩn đông tụ là nguồn cacbon từ các cặn lơ lửng hữu cơ trong môi trường nước
thải, việc bổ sung lượng nước thải mới vào, đây cũng là bổ sung thêm nguồn dinh dưỡng cho vi khuẩn đông tụ hoạt động đạt được mật độ tối ưu nhất, từ đó làm tăng
thêm sự kết dính của các tế bào vi khuẩn với nhau tạo được hiệu suất cao nhất.
Đến cuối chu kỳ 3 (thời gian hoạt động của vi khuẩn >36 giờ) lúc này vi khuẩn đông tụ đã chuyển sang giai đoạn già và sự tăng trưởng của vi khuẩn bước sang giai đoạn yếu, thêm vào đó trong môi trường lúc này các sản phẩm thải của vi
khuẩn ngày càng tăng, nguồn dinh dưỡng dần cạn kiệt, làm cho vi khuẩn giảm khả
NT1 NT2 NT3 NT4 NT5 NT6
năng tăng sinh, mất dần cơ chế kết dính tế bào. Từ đó các cầu nối giữa bề mặt các
tế bào dần dần bị vô hiệu, kết quả là hiệu suất đông tụ dần giảm xuống và khác biệt
có ý nghĩa thống kê mức 1% so với hiệu suất đông tụ ở từng thời điểm trong mỗi
chu kỳ (Hình 4.16).
4.5.2 Hiệu quả xử lý nước thải chăn nuôi heo sau biogas của cặp chủng vi khuẩn đông tụ, đến các thông số pH, BOD5, TSS, TN, TP, NH4+, PO43- trong môi trường
Kết quả Hình 4.16 cho thấy quá trình xử lý nước thải đạt hiệu suất đông tụ từ
80 − 86% của các nghiệm thức có chủng vi khuẩn đông tụ, hiệu quả nhất ở cuối
chu kỳ 1 và chu kỳ 2, từ đó tạo điều kiện cho các thông số BOD5, TN, TSS, TP, N- NH4+, PO43- trong các nghiệm thức giảm đáng kể so với NT1, NT2 và so với
QCVN40:2011/BTNMT (Bảng 4.15).
Bảng 4.15: Thông sốnước thải chăn nuôi heo sau biogas, qua xử lý quy mô 08 lít
Sau xử lý
Tên mẫu pH BOD5
mg/l TN mg/l TSS mg/l TP mg/l NH4+ mg/l PO43- mg/l QCVN40:2011/BTNMT loại A 6-9 30 20 50 4 5 6 QCVN40:2011/BTNMT loại B 5,5-9 50 40 100 6 10 10 Chu kỳ 1 NT1: ĐC 8,2 3.861 527 963 29,0 1.129 13,8 NT2: PAC (0,05%) 7,6 1.634 305 545 9,46 990 4,65 NT3: PAC+VK KG05+VL05 7,6 59,4 197 42,6 4,97 525 0,99 NT4: PAC+VK KG05+VL01 7,5 26,7 177 23,8 2,13 485 0,69 NT5: PAC+VK KG05+ST02 7,5 57,4 183 44,6 9,56 485 1,09 NT6: PAC+VK VL01+VL05 7,5 28,7 177 31,7 1,89 505 1,09 Chu kỳ 2 NT2: PAC (0,05%) 7,8 243 301 149 10,89 772 5,84 NT3: PAC+VK KG05+VL05 7,8 83,2 146 35,6 3,64 376 0,69 NT4: PAC+VK KG05+VL01 7,9 65,3 168 31,7 4,12 297 0,89 NT5: PAC+VK KG05+ST02 7,9 75,2 134 267 4,19 307 0,40 NT6: PAC+VK VL01+VL05 7,8 69,3 166 27,7 4,05 287 0,69 Chu kỳ 3 NT2: PAC (0,05%) 7,8 213 189 239 5,80 762 10,0 NT3: PAC+VK KG05+VL05 7,7 188 161 200 3,67 406 5,35 NT4: PAC+VK KG05+VL01 7,7 139 199 52,5 4,17 436 5,05 NT5: PAC+VK KG05+ST02 7,8 168 185 153 4,68 396 4,65 NT6: PAC+VK VL01+VL05 7,8 163 171 259 4,10 436 5,54
Phân tích mẫu: Trung tâm kỹ thuật và ứng dụng công nghệ Cần Thơ (Aptech ISO/IEC 17025) –
Trong nước thải chăn nuôi heo sau biogas giá trị pH ban đầu là 8,2 (NT1),
khi môi trường được bổ sung 0,05% PAC thì giá trị pH có giảm xuống chỉ còn dao
động từ 7,6 − 7,8 (NT2), giá trị pH này rất phù hợp cho quá trình hoạt động tối ưu
của vi khuẩn đông tụ (Bảng 4.7). Kết quả nghiên cứu cho thấy ở thời điểm cuối
mỗi chu kỳ xử lý của nghiệm thức NT3, NT4, NT5, NT6 chỉ số pH dao động từ
7,5 – 7,9 (Bảng 4.15) đạt loại A của Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia về môi trường. Vì vậy, có thể khẳng định rằng pH của môi trường có tác động rất lớn đến sự thích
nghi và khả năng hoạt động của các chủng vi khuẩn đông tụ. Bởi vì pH có ảnh hưởng lớn đến việc cân bằng ion trong môi trường, là một trong những yếu tố
quyết định đến hiệu quả kết dính của các tế bào vi khuẩn trong quá trình gom tụ
các vật chất lơ lửng, từ đó có được hiệu suất đông tụ cao nhất. Ngoài ra, pH trong
môi trường còn có ảnh hưởng đến điện tích trên bề mặt các protein ở màng ngoài của tế bào vi khuẩn, qua đó tác động đến sự kết dính giữa các tế bào vi khuẩn, làm
thay đổi hiệu suất đông tụ, vì một trong các cơ chế tạo sự đông tụ đã được chứng
minh là dựa vào liên kết giữa protein lectin của tế bào này với oligosaccharide của
tế bào kia (Malik et al., 2003). Theo Ryan và Russell (2013) sự chênh lệch điện
tích do pH sẽ làm ảnh hưởng đến sự tương tác định hướng của protein và oligosaccharide không còn đặc hiệu.
Từ kết quả ở Bảng 4.15 cho thấy cuối chu kỳ 1, ở các nghiệm thức có bổ
sung cặp chủng vi khuẩn đông tụ, chỉ số BOD5 đã giảm từ 65 đến 144 lần so với
nghiệm thức đối chứng và thấp hơn NT2 (chỉ bổ sung PAC) từ 27,5 – 61 lần, trong