[14]
1.5.1. Giới hạn phát hiện
Ngưỡng tới hạn (Critical level – LC): mật độ vi sinh vật thấp nhất (khác 0) mà phương pháp có thể phát hiện được nhưng không thể cho 1 giá trị định lượng chính xác. Dưới ngưỡng này, không thể chắc chắn được mật độ vi sinh thật sự khác 0 hay không. Ở ngưỡng này, xác suất phương pháp phân tích cho kết quả âm tính giả là 50%.
Giới hạn phát hiện (Limit of detection– LOD): mật độ vi sinh vật thấp nhất mà phương pháp có thể phát hiện được ở độ tin cậy 95%, nhưng không thể cho 1 giá trị định lượng chính xác.
1.5.2. Độ nhạy, độ đặc hiệu và tỷ lệ dương tính giả, tỷ lệ âm tính giả
Độ nhạy: Tỷ lệ xác định đúng trên tổng số các chủng hoặc khuẩn lạc dương tính giả định. Đại lượng này biểu thị khả năng phát hiện số lượng thật của vi sinh vật đích bằng phương pháp thử thông qua việc xác định tỵ lệ nghiệm đúng (kết quả dương tính) trên tổng số vi sinh vật dương tính giảđịnh.
Độđặc hiệu: Tỷ lệ xác định đúng trên tổng số các chủng hoặc khuẩn lạc âm tính giả định. Đại lượng này biểu thị khả năng phát hiện số lượng thật của vi sinh vật đích bằng phương pháp thử thông qua việc xác định tỷ lệ nghiệm đúng (kết quả âm tính) trên tổng số vi sinh vật âm tính giảđịnh.
Tỷ lệ dương tính giả: Tỷ lệ dương tính quan sát được sai với kết quả thực. Tỷ lệ âm tính giả: Tỷ lệ âm tính quan sát được sai với kết quả thực. Đại lượng này biểu thị tỷ lệ số vi sinh vật âm tính bị xác định sai.
CHƯƠNG 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1. Vật liệu:
2.1.1. Chủng chuẩn Aspergillus và mẫu thực phẩm
Chủng chuẩn Aspergillus flavus: 5 chủng được cung cấp từ các viện nghiên cứu và 24 chủng được phân lập từ các mẫu thức ăn chăn nuôi, ngũ cốc, trà… (phân lập theo hướng dẫn của FAO – 1992) được trình bày ở Bảng 2.1:
Bảng 2.1: Danh mục các chủng A. flavus sử dụng trong nghiên cứu khảo sát chủng có và không có khả năng sinh độc tố Aflatoxin B1
STT Tên chủng Nguồn gốc nhMã sận diốện
1 A. flavus ATCC Bộ sưu tập chủng chuẩn Mỹ 02 2 A. flavus 278 VTCC Bộ sưu tập chủng chuẩn Việt Nam 10
3 A. flavus 203 VTCC Bộ sưu tập chủng chuẩn Việt Nam 11 4 A. flavus 135 VTCC Bộ sưu tập chủng chuẩn Việt Nam 12
5 A. flavus Viện Pasteur 13
6 A. flavus Nguyên liệu 1 01
7 A. flavus Đường maltose 1 03
8 A. flavus Trà lipton 1 04 9 A. flavus Thức ăn 1 05 10 A. flavus Thức ăn 2 06 11 A. flavus Trà lipton 2 07 12 A. flavus Bột bắp 08 13 A. flavus Bột cá 09 14 A. flavus Trà (sấy khô) 1 14 15 A. flavus Trà (sấy khô) 2 15
16 A. flavus Bột mì 1 16 17 A. flavus Bột mì 2 17 18 A. flavus Gia vị 1 18 19 A. flavus Gia vị 2 19 20 A. flavus Bột mì 3 20 21 A. flavus Trà Lipton 3 21 22 A. flavus Bột bắp 1 22 23 A. flavus Bột bắp 2 23 24 A. flavus Trà (sấy khô) 3 24 25 A. flavus Đường maltose 2 25
26 A. flavus Bột mì 3 26
27 A. flavus Bột mì 4 27
28 A. flavus Trà (sấy khô) 4 28 29 A. flavus Trà (sấy khô) 5 29
30 A. flavus Nguyên liệu 3 30
Chủng chuẩn khác: 1 chủng Aspergillus oryzae do Viện Chủng chuẩn quốc gia Việt Nam (VTCC) cung cấp, A.ochraceus do Trung tâm Kỹ Thuật 3 cung cấp.
Mẫu dùng để phân lập chủng: trà, ngũ cốc, thức ăn chăn nuôi... được liệt kê ở Bảng 2.1.
Mẫu dùng để xác nhận hiệu lực phương pháp: mẫu thức ăn dạng bột mịn và mẫu thức ăn dạng hạt.
2.1.2. Thiết bị và dụng cụ chính
Nghiên cứu sử dụng một số thiết bị và dụng cụ của phòng thí nghiệm vi sinh như:
Thiết bị: tủ ấm, bể điều nhiệt, tủ ủ, cân phân tích, máy dập mẫu, tủ cấy, tủ mát, bàn đọc UV
Dụng cụ: đĩa petri, ống nghiệm, transfer pipette,...