- Cầu Nguyễn Văn Trỗi Cầu Sông Hàn.
06 Mẫu đất trồng rau Bắc Mỹ An 5/2004 nắng D
3.2.3 Làm sạch mẫu:
Trong quá trình chiết tách, xử lý mẫu. Đối với một số mẫu có chứa các thành phần có thể gây nhiễu hoặc có thể làm nhiễm bẩn gây ảnh hởng đến tuổi thọ của cột sắc ký hoặc hệ thống Detector, chúng tôi đã tiến hành bớc làm sạch mẫu sau khi chuyển mẫu sang pha hữu cơ bằng dung môi thích hợp.
Tuỳ thuộc đối tợng mẫu, (nớc thải các loại, nớc trên các sông hồ) chỉ tiêu cần phân tích các chất hấp thụ sẽ đợc lựa chọn nh:
Florisil(Magiesilicat), silicagen(SiO2.xH2O), than hoạt tính.
Trong quá trình thực nghiệm, chúng tôi đã tiến hành tạo các mẫu giả bằng cách đa thêm các chất chuẩn vào các mẫu đất, nớc. Sau đó tiến hành chiết tách và thực hiện các bớc làm sạch nh sau:
- Cột sắc ký thuỷ tinh với khoá Teflon: 30cm x 20mm
Lót một lớp bông thuỷ tinh dới đáy cột, cho vào một lớp Na2SO4 khan (khoảng 2cm), tuỳ thuộc vào đối tợng mẫu các chất hấp phụ sẽ đợc nhồi vào cột (bằng phơng pháp khô hoặc phơng pháp ớt nh: Florisil, Silicagen, than hoạt tính. Trên cùng đợc cho vào lớp Na2SO4 khoảng 2cm. Cột sắc ký sau khi nhồi và hoạt hoá không đợc để khô dung môi phía trên.
- Dịch chiết mẫu đợc đa lên cột, sau đó đợc rửa giải với dung môi thích hợp đã chọn.
- Dung dịch rửa giải đợc làm bay hơi bằng cô quay chân không và dòng Nitơ đến khô, sau đó đợc hoà tan trong một thể tích dung môi nhất
định, thêm chất nội chuẩn và tiêm trên máy sắc ký khí để định tính và định l- ợng.
+ Làm sạch mẫu trên cột Florisil.
Trong thực tế là mẫu nớc trên các sông không cần phải sử dụng phơng pháp làm sạch, (chúng tôi chỉ sử dụng cho việc phân tích mẫu đất) nhng chúng tôi vẫn khảo sát một số chất để tham khảo.
Để đạt đợc độ rửa giải tốt florisit phải hoạt hoá trớc khi sử dụng. Florisit đợc hoạt hoá ở nhiệt độ 1300C trong khoảng thời gian 12 giờ, bảo quản trong bình thuỷ tinh màu nâu ở 60 đến 800C.
Florisit là chất phân cực mạnh, nó giữ các HCCC yếu hơn so với giữ các chất phân cực mạnh, vì vậy phải chọn dung môi thích hợp để rửa giải, dựa trên tài liệu,[44] [45] [46] chúng tôi sử dụng dung môi hệ dung môi n- hexan -diclometan 5:1 để rửa giải. Kết quả khảo sát định tính trên 5 chất cho thấy mức độ lu giữ của cột florisil khác nhau trên từng phân đoạn, dùng 60 ml hệ dung môi n-hexan- đi clometan thì chúng có khả năng lôi kéo hết 5 chất trên ra khỏi cột.
3.3.Xác định đờng chuẩn.
3.3.1.Giới hạn phát hiện và thời gian lu.
Giới hạn phát hiện các chất kể trên với thiết bị phân tích GC-MS
đợc xem là nồng độ thấp nhất mà thiết bị phân tích có thể phát hiện đợc khi xuất hiện pic của chất phân tích gấp 3 lần độ nhiễu đờng nền.
Giới hạn định lợng là giá trị thấp nhất mà tại đó xác định đợc trên đồ thị chuẩn. Trên thực tế là giá trị nồng độ nhỏ nhất mà tại đó tín hiệu thu đợc gấp 10 lần tín hiệu nền.
Cách tính giới hạn phát hiện:
-Tính giới hạn phát hiện của thiết bị (LOD) LOD =C *3 /S/N
C: Nồng độ dung dịch chuẩn nằm trong khoảng tuyến tính. 3: Chiều cao tín hiệu tối thiểu chấp nhận so với đờng nền.
S/N: Tỉ lệ tín hiệu trên nhiễu đờng nền (xem phần phụ lục sắc đồ chuẩn 5 loại.)
-Tính giới hạn phát hiện của phơng pháp (MDL): MDL = LOD/KLg
Trong đó: KLg hệ số làm giàu mẫu.
Giới hạn phát hiện của phơng pháp đối với nhóm clo hữu cơ trong nớc và đất đợc chỉ ra ở bảng 3.5(xem phần phụ lục sắc ký đồ chuẩn)
Bảng 3.6. Kết quả tính toán giới hạn phát hiện của phơng pháp (DVT ppb)
Chỉ tiêu Lindan Aldrin DDE Dieldrin DDT
S/N 1161 853 315 171 202 LOD 10ppb 15ppb 42ppb 70ppb 70ppb MDL 0,01ppb 10ng/l 0,015 ppb 15ng/l 0,042ppb 42ng/l 0,08ppb 80ng/l 0,07ppb 70ng/l Giới hạn phát hiện thấp nhất của phơng pháp trong 5 chất trên đều nhỏ hơn 0,08ppb, tơng đơng với 0,08à/l, điều này cho phép chúng ta yên tâm về kiểm soát chất lợng số liệu phân tích trong phơng pháp xác định lợng vết thuốc BVTV trong nớc, trong đất mà đề tài nghiên cứu.
Thời gian lu:
Thời gian lu của 5 loại chất chuẩn trên đợc chỉ ra ở bảng 3.6 và trên phụ lục sắc đồ của mẫu chuẩn và mẫu giả cho thấy các pic của từng chất hoàn toàn tách ra khỏi nhau khi dùng cả 2 chế độ pullscan và SIM.
Bảng 3.7.Thời gian lu của 5 chất cột: SPB-1701, 30m x0,32mm x 0,25um
STT Tên chất Thời gian lu của dung dịch chuẩn
Thời gian lu của mẫu giả
01 Lindan 9,16 9,18
02 Aldrin 10,32 10,34
03 DDE 14,78 14,82
05 DDT 19,7 19,72
Nh vậy từ bảng trên cho thấy thời gian lu của 5 chất trên xa nhau rất nhiều, điều này cho thấy độ phân giải của cột SPB -1701 rất cao, khả năng tách cấu tử gần nh hoàn toàn.
3.3.2.Chuẩn bị dung dịch mẫu chuẩn.
Dựa trên giới hạn phát hiện của phơng pháp dãy dung dịch chuẩn có nồng độ là: 0,1; 0,5; 1; 2 và 5 ppb chúng tôi tiêm mẫu với những thể tích khác nhau vào GC-MS. Kết quả thu đợc phụ lục đờng chuẩn trên chơng trình phần mềm của máy đợc chỉ ra ở phần phụ lục đờng chuẩn và sắc ký đồ. Vậy có thể định lợng đồng thời các HCCC cũng nh những đồng phân của chúng. Các đờng chuẩn cho thấy khoảng tuyến tính của 5 chất trên từ 0,1 đến 5 ppb. Dựa trên các sắc ký đồ thu đợc và các phơng trình đờng chuẩn chúng tôi thấy rằng điều kiện sắc ký đã chọn hoàn toàn có thể định lợng đợc HCCC trong mẫu nớc và đất trong đề tài này.