- Cầu Nguyễn Văn Trỗi Cầu Sông Hàn.
10.Các biện pháp an toàn:
- Phơng pháp này sử dụng nhiều các loại dung môi hữu cơ trong suốt quá trình tiến hành, do đó để hạn chế việc thử nghiệm viên có thể hít phải hơi dung môi, phòng làm việc phải đợc thông thoáng hoặc tiến hành trong tủ hút.
- Tránh để các dung dịch chuẩn tiếp xúc qua da.
- Sử dụng các dụng cụ thuỷ tinh một cách cẩn thận, tránh bể vỡ.
11.Cách tiến hành:
11.1 Xử lý mẫu:
* Ph ơng pháp chiết lỏng - lỏng :
- Lấy 500ml mẫu nớc bằng ống đong vào phễu chiết 1lít thứ nhất, cho vào phễu chiết 50-100ml n-Hexane, lắc trong 5-10 phút, để yên cho tách lớp, chuyển pha nớc sang phễu chiết thứ hai
- Thêm 50ml n-Hexane vào phễu chiết thứ hai, lắc 5-10 phút, để yên cho tách lớp, xả bỏ pha nớc
- Lấy tiếp 500ml mẫu nớc bằng ống đong vào phễu chiết 1lít thứ nhất, lắc 5-10 phút, để yên cho tách lớp, chuyển pha nớc sang phễu chiết thứ hai
- Lắc phễu chiết thứ hai trong 5-10 phút, để yên cho tách lớp, xả bỏ pha nớc
- Gộp phần dung môi chiết ở hai phễu chiết và dung môi tráng rửa phễu chiết vào phễu chiết 250ml sau đó làm khan dung môi chiết bằng cách cho qua phễu lọc có chứa Na2SO4 khan, rửa phễu lọc bằng 20ml n-Hexane, dịch chiết đợc hứng vào bình cầu nút nhám 250ml
- Cô quay chân không dịch chiết đến gần khô trên máy cô quay chân không, tháo bình cầu ra khỏi máy cô quay chân không và tiếp tục làm bay hơi dung môi bằng dòng khí Nitơ
- Thêm chính xác 1ml n-Hexane để hoà tan cặn trong bình cầu
- Tiêm 1àl - 150àl dung dịch chuẩn và dung dịch mẫu trên máy sắc ký khí để xác định định tính và định lợng.
L u ý: u ý:
Trong thực tế đối với trờng hợp mẫu bẩn (mẫu nớc thải) cần phải tiến hành bớc làm sạch mẫu bằng sắc ký cột với chất nhồi Silicagen hoặc Florisil đợc chuẩn bị nh sau: Lót một lớp bông thủy tinh vào đáy cột sắc ký, khoá van cột sắc ký, chuyển 30ml dung môi Aceton vào cột, cho từ từ (vừa cho vừa gõ nhẹ lên thành cột) lần lợt 2g Na2SO4 khan, 5g Silicagen, 3g Na2SO4 khan (Chú ý phần dung môi phải luôn ngập các chất nhồi cột)
- Bay hơi dung môi chiết nói trên bằng cô quay chân không đến còn khoảng 5ml, chuyển dung dịch còn lại lên cột sắc ký có chứa 5g Silicagen và 5g Na2SO4 khan, mở van cột sắc ký chỉnh tốc độ chảy khoảng 15- 20ml/phút, rửa cột bằng 50ml Aceton
- Rửa giải bằng 50ml n-Hexane và thu dung dịch rửa giải vào bình cầu cô quay chân không
- Bay hơi dung dịch rửa giải đến còn khoảng 5ml, tiếp tục làm bay hơi bằng dòng khí Nitơ đến khô
- Thêm chính xác 1ml n-Hexane để hoà tan cặn trong bình cầu
- Tiêm 1àl – 150àl dung dịch chuẩn và dung dịch mẫu trên máy sắc ký khí để xác định định tính và định lợng.
- Ph ơng pháp chiết pha rắn :
- Chuẩn bị mẫu: Lấy 1 lít mẫu nớc vào cốc thuỷ tinh 1.000ml, thêm 10ml Methanol, lắc đều.
- Hoạt hoá cột: Lắp cột vào thiết bị chiết pha rắn, khoá van xả, dùng pipet cho 5ml n-Hexane lên cột, mở van xả, tiếp tục cho 5ml Ethylacetat qua cột (không để khô dung môi trên cột). Cho 5ml Methanol lên cột, mở bơm chân không, mở van xả, (không để khô dung môi trên cột), tiếp tục cho 5ml nớc cất qua cột đến còn khoảng 1-2ml trên cột.
- Cho mẫu qua cột: Nối ống dẫn từ cốc chứa mẫu đến cột C18, mở bơm chân không, mở van xả, chỉnh tốc độ mẫu qua cột khoảng 10ml- 15ml/phút
- Rửa cột: Sau khi mẫu qua cột, rửa cột bằng 10ml nớc cất và 10ml dung dịch Methanol/nớc (20: 80), để không khí qua cột đến khô.
- Rửa giải: Rửa giải cột với 5ml dung dịch Hexane/Ethylacetat (70: 30) vào ống thuỷ tinh 10ml, làm bay hơi dung dịch rửa giải bằng dòng khí Nitơ, dùng pipet cho chính xác 1ml Aceton vào ống thuỷ tinh, đậy nắp, lắc đều.
- Tiêm 1àl – 150àl dung dịch chuẩn và dung dịch mẫu trên máy sắc ký khí để xác định định tính và định lợng.
11.2 Điều kiện sắc ký, khối phổ:11.2.1 Điều kiện sắc ký: 11.2.1 Điều kiện sắc ký:
- Chơng trình nhiệt độ cột:
+ Nhiệt độ đầu 85oC, giữ ở 2 phút
+ Sau đó tăng lên 195oC với tốc độ gia nhiệt 30oC/phút, giữ ở nhiệt độ này trong 5phút
+ Tiếp tục tăng nhiệt độ lên đến 250oC; với tốc độ gia nhiệt 5oC/phút, giữ ở nhiệt độ này trong 5phút
- Tiêm mẫu: Tuỳ thuộc vào nồng độ mẫu có thể tiến hành các kỹ
thuật tiêm mẫu sau đây:
- Tiêm mẫu với kỹ thuật chia/không chia (chơng trình bay hơi dung môi)
+ Chơng trình chia/không chia:
từ 0 đến 2 phút tỷ lệ chia 50:1 từ 2 đến 5 phút không chia Sau 5 phút tỷ lệ chia 50:1
+ Nhiệt độ bộ phận tiêm mẫu: Nhiệt độ đầu 50oC giữ trong 2 phút, sau đó tăng lên 270oC với tốc độ gia nhiệt 200oC/phút, giữ ở nhiệt độ 270oC trong 10 phút
+ Thể tích mẫu tiêm: 5àl – 150àl - Tiêm mẫu chia dòng
+ Nhiệt độ bộ phận tiêm mẫu: 270oC + Thể tích mẫu tiêm: 1àl – 5àl