- Giá trị trung bình cộng:
2.3.2.1 Chiết tách mẫu nớc.
a) Mẫu nớc đợc tiến hành theo qui trình chiết pha rắn và pha lỏng tuỳ theo ngời phân tích, vì hiệu suất thu hồi gần nh nhau nhng mỗi phơng pháp đều có những u điểm riêng.
- Lấy 500ml mẫu nớc bằng ống đong vào phễu chiết 1 lít thứ nhất, cho vào phễu chiết 50-100ml n-hexane, lắc trong 5-10 phút, để yên cho tách lớp, chuyển pha nớc sang phễu chiết thứ hai.
- Thêm 50ml n-hexane vào phễu chiết thứ hai, lắc 5-10 phút, để yên cho tách lớp, xả bỏ pha nớc.
- Lấy tiếp 500ml mẫu nớc bằng ống đong vào phễu chiết 1lít thứ nhất, lắc 5-10 phút, để yên cho tách lớp, chuyển pha nớc sang phễu chiết thứ hai.
- Lắc phễu chiết thứ hai trong 5-10 phút, để yên cho tách lớp, xả bỏ pha nớc.
- Gộp phần dung môi chiết ở hai phễu chiết và dung môi tráng rửa phễu chiết vào phễu chiết 250ml, sau đó làm khan dung môi chiết bằng cách cho qua phễu lọc có chứa Na2SO4 khan, rửa phễu lọc bằng 20ml n-hexane, dịch chiết đợc hứng vào bình cầu nút nhám 250ml.
- Cô quay chân không dịch chiết đến gần khô trên máy cô quay chân không, tháo bình cầu ra khỏi máy cô quay chân không và tiếp tục làm bay hơi dung môi bằng dòng khí Nitơ.
- Thêm chính xác 1ml n-hexane để hoà tan cặn trong bình cầu.
- Tiêm 1àl - 150àl dung dịch chuẩn và dung dịch mẫu trên máy sắc ký khí để xác định định tính và định lợng.
Lu ý: Trong đối với trờng hợp mẫu bẩn (mẫu nớc thải) cần phải tiến hành bớc làm sạch mẫu bằng sắc ký cột với chất nhồi silicagen hoặc Florisil.
- Bay hơi dung môi chiết nói trên bằng cô quay chân không đến còn khoảng 5ml, chuyển dung dịch còn lại lên cột sắc ký có chứa 10g silicagen
và 5g Na2SO4 khan, rửa giải bằng 50ml n-hexane, hứng dung dịch rửa giải vào bình cầu 100ml.
- Bay hơi dung dịch rửa giải đến còn khoảng 5ml, tiếp tục làm bay hơi bằng dòng khí Nitơ đến khô.
- Thêm chính xác 1ml n-hexane để hoà tan cặn trong bình cầu.
- Tiêm 1àl - 150àl dung dịch chuẩn và dung dịch mẫu trên máy sắc ký khí để xác định định tính và định lợng.
* Phơng pháp chiết pha rắn:
- Chuẩn bị mẫu: Lấy 1 lít mẫu nớc vào cốc thuỷ tinh 1000ml, thêm 10ml Methanol, lắc đều.
- Hoạt hoá cột: Lắp cột vào thiết bị chiết pha rắn, khoá van xả, dùng pipet cho 5ml n-hexane lên cột, mở van xả, tiếp tục cho 5ml ethylacetat qua cột (không để khô dung môi trên cột). Cho 5ml Methanol lên cột, mở bơm chân không, mở van xả (không để khô dung môi trên cột), tiếp tục cho 5ml nớc cất qua cột đến còn khoảng 1-2ml trên cột.
- Cho mẫu qua cột: Nối ống dẫn từ cốc chứa mẫu đến cột C18, mở bơm chân không, mở van xả, chỉnh tốc độ mẫu qua cột khoảng 10ml- 15ml/phút.
- Rửa cột: Sau khi mẫu qua cột, rửa cột bằng 10ml nớc cất và 10ml dung dịch Methanol/nớc (20 : 80), để không khí qua cột đến khô.
- Rửa giải: Rửa giải cột với 5ml dung dịch hexane/ethylacetat (70: 30) vào ống thuỷ tinh 10ml, làm bay hơi dung dịch rửa giải bằng dòng khí Nitơ, dùng pipet cho chính xác 1ml Aceton vào ống thuỷ tinh, đậy nắp, lắc đều.
Tiêm 1àl - 150àl dung dịch chuẩn và dung dịch mẫu trên máy sắc ký khí để xác định định tính và định lợng.
2.3.2.2.Chiết tách mẫu đất.
Đối với mẫu đất do điều kiện thời gian nên chúng tôi chỉ sử dụng tài liệu tham khảo các qui trình phân tích thuốc BVTV trong đất để chọn lựa dung môi và phơng pháp chiết, sau khi chiết các điều kiện khác đợc khảo sát nh trong qui trình phân tích nớc, tuy nhiên khâu làm sạch mẫu đợc chú trọng.
- Cân 50g mẫu đất vào bình tam giác 250ml, cho vào 100ml aceton (V1), đậy nắp bình tam giác lắc trên máy lắc trong 10 phút, chuyển bình tam giác vào bể siêu âm trong 10 phút để yên, lọc dung dịch vào ống đong, ghi thể tích dịch lọc thu đợc (V2).
- Lấy 10ml dịch lọc chuyển lên cột sắc ký có chứa 10g silicagen và 5g Na2SO4 khan, mở van cột sắc ký, rửa cột bằng 50ml aceton, rửa giải bằng 50ml n-hexane và thu dung dịch rửa giải vào bình cầu cô quay chân không.
- Cô quay chân không dịch chiết đến gần khô trên máy cô quay chân không, tháo bình cầu ra khỏi máy cô quay và tiếp tục làm bay hơi bằng dòng khí Nitơ.
- Thêm chính xác 1ml Aceton để hoà tan cặn trong bình cầu.
- Tiêm 1àl - 150àl dung dịch chuẩn và dung dịch mẫu trên máy sắc ký khí để xác định định tính và định lợng.
* Ph ơng pháp chiết pha rắn:
- Chuẩn bị mẫu:
- Cân 50g mẫu đất vào bình tam giác 250ml, cho vào 100ml Aceton (V1), đậy nắp bình tam giác lắc trên máy lắc trong 10 phút, chuyển bình tam giác vào bể siêu âm trong 10 phút, để yên, lọc dung dịch vào ống đong, ghi thể tích dịch lọc thu đợc (V2). Lấy 10ml dịch lọc, pha loãng đến 500ml bằng nớc cất, thêm 10ml Methanol, lắc đều.
- Hoạt hoá cột: Lắp cột vào thiết bị chiết pha rắn, khoá van xả, dùng
pipet cho 5ml n-hexane lên cột, mở van xả, tiếp tục cho 5ml Ethylacetat qua cột (không để khô dung môi trên cột). Cho 5ml Methanol lên cột, mở bơm
chân không, mở van xả (không để khô dung môi trên cột), tiếp tục cho 5ml nớc cất qua cột đến còn khoảng 1-2ml trên cột.
- Cho mẫu qua cột: Nối ống dẫn từ bình chứa mẫu đến cột C18, mở
bơm chân không, mở van xả, chỉnh tốc độ mẫu qua cột khoảng 10ml- 15ml/phút.
- Rửa cột: Sau khi mẫu qua cột, rửa cột bằng 10ml nớc cất và 10ml dung dịch Methanol/nớc (20 : 80), làm khô cột bằng dòng khí Nitơ.
-Rửa giải: Rửa giải cột với 5ml dung dịch hexane/ethylacetat (70:30)
vào ống thuỷ tinh 10ml, làm khô dung dịch rửa giải bằng dòng khí Nitơ, dùng pipet cho chính xác 1ml Aceton vào ống thuỷ tinh, đậy nắp, lắc đều.
- Tiêm 1àl - 150àl dung dịch chuẩn và dung dịch mẫu trên máy sắc ký khí để xác định định tính và định lợng.
2.3.3.Tính kết quả:
2.3.3.1.Tính kết quả trong mẫu nớc: +Phơng pháp ngoại chuẩn:
Hàm lợng d lợng của mỗi cấu tử trong mẫu (àg/lít): Sm(Hm) x C chuẩn x Vcuối
X =
Sc(Hc) x Vmẫu
- Trong đó: Sm(Hm): Diện tích hoặc chiều cao của píc mẫu Sc(Hc): Diện tích hoặc chiều cao của píc chuẩn Cchuẩn: Nồng độ chuẩn àg/lít (ppb)
Vmẫu: Thể tích mẫu (ml) Vcuối: Thể tích định mức cuối. Hoặc: X= C mẫu / Vmẫu
C mẫu: Hàm lợng các chất trong dung dịch mẫu tiêm vào máy sắc ký đợc tính theo đờng chuẩn bằng phần mềm xử lý dữ liệu
Vmẫu: Thể tích mẫu nớc lấy phân tích