- Cỏc sqc t# Cỏc phõn t S b e o v !
5.3.5.Nh?ng yVu t5 phiờn mó cis-acting
NH NG GEN Cyt-P450 VÀ S BIU HIN C A CHÚNG
5.3.5.Nh?ng yVu t5 phiờn mó cis-acting
T�ơng tỏc c�a nh�ng y�u t� cis-acting và nh�ng y�u t� trans- acting �i�u hoà s�phiờn mó gen. Nh�ng y�u t� cis-acting bao g�m cỏc promotor nh� TATA, CAAT và cỏc h�p G-C, y�u t� t�ng c��ng nh�là y�u t� �ỏp �ng estrogen (estrogen responsive element: ERE) và y�u t� �ỏp �ng glucocorticoid (GER). S�l��ng cỏc y�u t�
trans-acting �ó ���c ��c tr�ng: m�t protein g�n TATA (GFIID), nh�ng protein g�n CAAT, estrogen receptor và glucocorticoid receptor. M�t s� gen Cyt-P450 �i�u hoà gi�i tớnh g�m cỏc C- P45016 , P45015 chu�t; P45016 chu�t c�ng, P45015 , P4507 và RLM-2 �ó ���c ��c trỡnh t� và ��c tr�ng. B�i v�y, cú th�núi, nghiờn c�u m�i b�t��u��tỡm hi�u ���c cơch�mà b�i nú s�phiờn mó c�a cỏc gen Cyt-P450 ��c hi�u gi�i���c �i�u hoà b�i hormon và cỏc y�u t� khỏc. Ti�c là, nh�ng gen Cyt-P450 ��c hi�u gi�i t�nú khụng th� hi�n b�t k� ��c tr�ng c�u trỳc rừ ràng nào và d��ng nh�khụng cú s�khỏc bi�t ��i v�i b�t c�gen Cyt-P450 khỏc nàọ
M�i �õy, s�d�ng thành cụng s�bi�u hi�n tỏch bi�t v�gi�i c�a Cyt-P450-16 và gen Cyt-P450cb liờn quan v� c�u trỳc, Yoshioka ti�n hành footprinting m�t DNase và phiờn mó in vitro ��xỏc ��nh m�t y�u t�phiờn mó cis-acting ��c hi�u cho gen C-P45016 ��c hi�u gi�ng ��c. Y�u t� này TA-TT CCGGGCCAAAACAAA, g�i là SDI (sex difescence information) t�o�i�u ki�n cho s�phiờn mó cao
in vitro và ���c��nh v�trong vựng -84/-102 trong trỡnh t�rỡa 5’c�a gen C-P45016 (hỡnh 5.8). M�c dự cú s� t�ơng t� trong trỡnh t� rỡa 5’ c�a C-P45016 gen và P450cb, P450cb gen khụng ��c hi�u gi�i trong s� bi�u hi�n c�a nú và �ó khụng cú trỡnh t� SDI trong vựng
�ỏp �ng (hỡnh 5.9). Y�u t� khỏc, CTE (Common Transcription Element) �ó cú m�t trong vựng -44/-77 c�a c�2 gen Cyt-P450, tuy nhiờn, y�u t�phiờn mó này là m�t phiờn mó y�u và th�hi�n ch�1/10 ho�t tớnh v�i SDỊ �i�u thỳ v� ��tỡm hi�u v�CTE là nú chia s�m�t s�t�ơng t�trỡnh t�cao v�i y�u t� COUP �i�u hũa gen albumin. Vỡ
Nguy�n Th�Ng�c Dao
150
s�v�ng m�t c�a SDI trong promotor, s�phiờn mó invitro c�a gen P450cb �ó ���c h� tr� b�i CTẸ K�t qu� là, ho�t tớnh promotors c�a Cyt-P450cb �ó x�p x� 1/10 ho�t tớnh c�a promotor gen C- P45016 . Hơn n�a, ho�t tớnh phiờn mó t�ơng ��i c�a cỏc gen C- P45016 và P450cb t�ơng quan thu�n v�i m�c mRNA t�ơng��i c�a chỳng trong gen c�a chu�t��c. �i�u này g�i ý r�ng SDI là m�t y�u t� c�n thi�t tham gia vào s� phiờn mó ��c hi�u gi�ng ��c c�a cỏc gen C-P45016 .
Tuy nhiờn,Promotor gen C-P45016 ,�ó khụng tỡm ki�m���c s�
phiờn mó ��c hi�u gi�iin vitro, kh�ng��nh r�ng khi thờm SDI vào, y�u t� cis-acting khỏc là c�n thi�t ��i v�i gen �� kh�ng ��nh s�
phiờn mó ��c hi�u gi�i trong cỏc t� bào gan. �ng h� gi� thi�t này, Wong và cs. s�d�ng nh�ng t� bào HepG2 chuy�n nhi�m g�i ý s�
cú m�t c�a nh�ng y�u t� làm t�ng d�ơng tớnh và õm tớnh s� ��c hi�u t� ch�c g�i là PRE và NRE trong ex-tream xa c�a gen C- P45016 . Tuy nhiờn, c�n nh�ng nghiờn c�u ti�p theo �� xỏc ��nh trỡnh t� c�a y�u t� t�ng c��ng và �� làm rừ s� �ỏp �ng ��i v�i hormon sinh tr��ng. K�t qu�d��ng nh�xỏc ��nh r�ng s�phiờn mó
��c hi�u gi�i c�a cỏc gene Cyt-P450 ���c �i�u hoà b�i nh�ng y�u t� cis-acting ��c hi�u: Nh�ng y�u t� kh�i ��ng cơ b�n g�n (bao g�m SDI) và xa, nh�ng y�u t�t�ng c��ng ph�thu�c hormon nh�là PRE và NRE, m�c dự nh�ng quan sỏt v�ch�c n�ng c�a nh�ng y�u t�này v�n cũn h�n ch�.