S t.ng hp cEm ng Cyt-P450 th-c vCt

Một phần của tài liệu Ebook cytochrome p450 phần 2 PGS TS nguyễn thị ngọc dao (Trang 29 - 32)

M�t s� nghiờn c�u �ó ch�ng minh cho s� kớch thớch t�ng h�p ch�n l�c m�t s� d�ng Cyt-P450 b�i cỏc nhõn t� hoỏ h�c, v�t lý và sinh lý (b�ng 4.3).

M�t nhúm ch�t�ư�c g�i là safener, là húa ch�t�ư�c s�d�ng �� b�o v�m�t s�lo�i ng�c�c ch�ng l�i cụn trựng. Safener c�ng �ư�c s�d�ng trờn cỏc cỏnh ��ng. Chỳng �ư�c phỏt tri�n b�i s�sàng l�c, nhưng cụng trỡnh m�i �õy do m�t s� nhúm, �ỏng chỳ ý là nhúm nghiờn c�u �phũng thớ nghi�m c�a S.Frear � Fargo, �ó g�i ý r�ng cơ s� phõn t� cho safener ho�t ��ng là s� kớch thớch t�ng h�p cỏc ��ng phõn Cyt-P450. Vớ d� dư�i �õy �ư�c rỳt ra t� cụng trỡnh c�a Zeinmerlin và Durst (1992)… S�thanh th�i c�a lỳa mỡ ��i v�i ch�t di�t c�là do kh�n�ng c�a chỳng xỳc tỏc s�th�y phõn vũng aryl c�a cỏc c�u trỳc húa h�c khỏc nhaụ Ngư�i ta c�ng thu �ư�c s� kớch thớch t�ng h�p r�t cao b�ng cỏch k�t h�p, theo m�t trỡnh t� x� lý

Nguy�n Th�Ng�c Dao 108

nh�t ��nh, k�t h�p nh�ng �nh hư�ng c�a Phenobarbital (PB) và naphtalic anhydride (NA), m�t safener �ó�ư�c bi�u hi�n t�t. Trong thớ nghi�m � hỡnh 4.5, ngư�i ta �ó b�c h�t lỳa mỡ b�ng NA và sau 48h n�y m�m, x�lý h�t v�i PB. Quỏ trỡnh k�t h�p này làm t�ng 20 ��n 35 l�n s� oxy húa diclofop- m�t diphenylether, chlorsulfuron- m�t sulfonylurea và chlortoluron- m�t phenylureạ Hơn n�a, s�oxy húa 2,4-D cú th� �o �ư�c trong khi �ó khụng th� phỏt hi�n�ư�c� h�t��i ch�ng. B ng 4.3. Lo i Ch t kớch thớch t"ng h#p Cỏc y�u t�v�t lý Thỏch th�c b�i m�m b�nh Ch�t húa h�c Ánh sỏng, tia UV

V�t thương, oxygen, n�m, virus, elicitor (ch�t chi�t màng n�m m�c…)

Manganese, cadmium, th�y ngõn ,

clofibrate, (axit, ester và cỏc ch�t tương t�), phenobarbital, aminopyrine, ethanol. Biphenyl, arochlor, -naphto flavone, isosaffrole, ch�t di�t c�(2,4-D, monurone, chlortoluron, mecoprof…) Safener (NA, cyometrinil, oxabetrinil, CGA, (133205…) azoles.

Vi�c tỡm ra nh�ng húa ch�t gi�ng nhau ho�c tương t� cú th� kớch thớch t�ng h�p Cyt-P450 �c� ��ng v�t và cõy xanh làm xu�t hi�n cõu h�i li�u�õy là s�trựng h�p ng�u nhiờn hay th�c t�cú th� là cú m�t cơch�chung?. Nh�ng nghiờn c�u v�s�sinh t�ng h�p cỏc enzym th�y phõn axit bộo th�c v�t do Salaun và c�ng s�ti�n hành (Benveniste và cs. 1982, Salaun và cs. 1981, Zimmerlin và cs.1992) g�i ý r�ng ớt nh�t PB và clofibrate cú th�ho�t��ng ch�c n�ng theo m�t cỏch tương t�nhau �cỏc t�ch�c��ng v�t và th�c v�t. K�t qu� c�a h� ch� ra r�ng PB và clofibrate kớch thớch t�ng h�p m�t cỏch ch�n l�c enzym th�y phõn và ( -1) c�a axit bộo chu�i dài và trung bỡnh m�t cỏch tương �ng.

Trong m�t s� loài th�c v�t, ch� y�u là � h� ��u, cỏc axit bộo �ư�c th�y phõn m�t cỏch riờng bi�t� ��u methyl t�n cựng (v�trớ ) b�i Cyt-P450 microsomal. (Benveniste và cs., 1982). C�ng như � ��ng v�t cú vỳ, clofibrate và nh�ng ch�t làm t�ng s� phõn chia t� bào peroxisome kớch thớch t�ng h�p m�t cỏch ch�n l�c nh�ng - hydroxylase th�c v�t này (Salaun và cs. 1987) và gõy ra s� t�ng

Ch ng IV. H�th�ng Cytochrome-P450 �vi sinh v�t và th�c v�t 109 cư�ng phõn chia peroxisome (cơ quan t� ch�a nhi�u peroxidase). �ỏng k� là nh�ng microsome tỏch t� h�u h�t nh�ng loài th�c v�t khỏc nhau ��u xỳc tỏc s� oxy húa bờn trong chu�ị � cỏc microsome tỏch t�h�t lỳa mỡ, axit lauric �ư�c th�y phõn �cacbon s�11, 10, và 9 b�i ( -1)-LAH (Zimmerlin và cs., 1992).

-hydroxylase ( -1)-hydroxylase ( -3)-hydroxylase

(Cõy ��u t�m sativa) (Cõy lỳa mỡ) (cõy artiso Jerusalem)

Hỡnh 4.5. S�ch�n l�a vựng và s�kớch thớch t�ng h�p h�th�ng 3-laurate-hydroxylase �th�c v�t b�c caọ

Như �hỡnh 4.5, enzyme th�y phõn ( -1) c�a laurate �ư�c kớch thớch t�ng h�p t�ng 11 l�n b�i PB. Trong cõy artiso jerusalem, acid 10-, 9-, và 8-hydroxylauric �ư�c t�o ra b�i IC-LAH, enzyme này c�ng�ư�c kớch thớch t�ng h�p m�nh b�i PB (Salaun và cs., 1981 và 1993). �i�u �ỏng chỳ ý là khụng cú nh�ng phõn �o�n microsome nào �ư�c phõn tớch cho t�i nay là cú kh�n�ng th�y phõn c�cacbon t�n cựng và g�n t�n cựng. �i�u này trỏi ngư�c rừ v�i cỏc h� th�ng c�a ��ng v�t nơi mà c� hai ph�n �ng ��u x�y ra trong cựng cỏc phõn �o�n microsome gi�ng nhaụ

SU Pa dVng húa cHa cỏc Cyt-P450 thUc vEt

Trong nh�ng n�m qua, nh�ng ph�n �ng ph� thu�c Cyt-P450 khỏc nhau �ư�c mụ t� � th�c v�t bao g�m m�t s�cỏc d�ng isozym. Tuy nhiờn, do r�t khú kh�n trong vi�c tinh s�ch cỏc isozyme sao cho v�n gi� �ư�c ho�t tớnh, nờn nh�ng th�c m�c v�tớnh ��c hi�u cơch�t c�a m�t isozyme Cyt-P450 th�c v�t v�n chưa�ư�c gi�i quy�t.

M�i�õy, Vrerck-Reichart và cs, trong phũng thớ nghi�m c�a h�, �ó tinh s�ch (Gabriac và cs., 1991) và tỏch dũng (Teutsch và cs., 1993) �ư�c enzyme cinnamic acid 4-hydroxylase (CA4H), m�t Cyt- P450 ch� y�u �th�c v�t (hỡnh 4.6). Con �ư�ng chuy�n hoỏ ��y�� này �ư�c kớch thớch m�nh b�i m�t lo�t cỏc y�u t�sinh h�c và khụng

Nguy�n Th�Ng�c Dao 110

sinh h�c và CA4H d� b� t�n thương m�t ph�n ��i v�i m�t s� th� nhưỏnh sỏng, v�t thương, cụn trựng và s� ti�p xỳc v�i nh�ng hoỏ ch�t khỏc nhaụ D. Pompon (CNRS. Gif) và M. Kazmaier (Orsan, Paris) �ó bi�u hi�n �ư�c enzyme này v�i hi�u su�t r�t cao (turn- over=400) trong cỏc t�bào n�m men. K�t qu�này cung c�p m�t h� th�ng lý tư�ng cho s�phỏt hi�n cơ ch� chuy�n hoỏ nh�ng cơch�t cú ỏi l�c th�p. Tia UV Ánh sỏng PN th Tbng cn hXc Kớch thớch sinh hXc Kớch thớch khụng sinh hXc

Hỡnh 4.6. S�tham gia c�a CA4H và nh�ng Cyt- P450 khỏc nhau vào con �ư�ng chuy�n húa phenylpropanoid

Francis Durst và cs �ó nghiờn c�u kh� n�ng xỳc tỏc c�a CA4H ��i v�i t�t c� cỏc cơ ch�t sinh lý c�a Cyt-P450 th�c v�t �ư�c xỏc ��nh cho ��n nay và thờm c�m�t s� lư�ng l�n cỏc ch�t ngo�i laị �i�u thỳ v�là khụng cú h�p ch�t sinh h�c nào trong s� �ú, th�m chớ c� phenylpropanoids-ch�t th� hi�n ki�u cinnamate, là �ư�c chuy�n hoỏ. Ngư�c l�i, 7-ethoxy và 7-methoxycoumarin, ch�t di�t c� chlortoluron và PCMA l�i là cơ ch�t c�a CA4H (b�ng 4.5).

Nh�ng k�t qu�này cho th�y r�ng enzyme, trong khi cú s�ph�n �ng phõn bi�t rừ v�i cỏc h�p ch�t n�i sinh cú th�cú m�t trong cựng nh�ng ng�n dư�i t� bào, l�i c�ng cú kh� n�ng t�t �� thớch �ng và xỳc tỏc chuy�n hoỏ cỏc ch�t ngo�i laị

- Cỏc sqc t#- Cỏc phõn tSbeo v!

Một phần của tài liệu Ebook cytochrome p450 phần 2 PGS TS nguyễn thị ngọc dao (Trang 29 - 32)