Hormon sinh tr 0n gi Qu hoà s2 biMu hiKn c/a t(t c cỏc Cyt-P450 Jc hiKu gi i tớnh

Một phần của tài liệu Ebook cytochrome p450 phần 2 PGS TS nguyễn thị ngọc dao (Trang 64 - 69)

- Cỏc sqc t# Cỏc phõn t S b e o v !

5.3.3.Hormon sinh tr 0n gi Qu hoà s2 biMu hiKn c/a t(t c cỏc Cyt-P450 Jc hiKu gi i tớnh

NH NG GEN Cyt-P450 VÀ S BIU HIN C A CHÚNG

5.3.3.Hormon sinh tr 0n gi Qu hoà s2 biMu hiKn c/a t(t c cỏc Cyt-P450 Jc hiKu gi i tớnh

Nh�ng nghiờn c�u t� cu�i nh�ng n�m 1950 �ó ch� ra r�ng chuy�n hoỏ l��ng d�ng gi�i tớnh c�a steroid và thu�c�ó b�bi�n��i b�i hormon sinh d�c. Tuy nhiờn, ��n nh�ng n�m 1970 nú �ó���c ch�ng minh r�ng s� �i�u hoà ph�thu�c hormon sinh d�c�ũi h�i s�

cú m�t c�a tuy�n yờn. Sau �ú Gustafson và Stenberg g�i ý v�s�t�n t�i c�a m�t y�u t�tuy�n yờn ���c g�i là “m�t y�u t�feminization” (làm phỏt tri�n n�tớnh). Y�u t�tuy�n yờn này �ó ���c phỏt hi�n là hormon sinh tr��ng. Hormon sinh tr��ng này �i�u hoà s�phõn bi�t gi�i tớnh trong s�chuy�n hoỏ steroid �gan, vỡ hormon cú m�t trong c� hai gi�ị ��u m�i�� gi�i quy�t ngh�ch lý này ��n t�sinh lý h�c hormon sinh tr��ng. Tuy�n yờn gi�ng ��c ti�t ra hormon sinh tr��ng t�ng ��t trong khi �ú tuy�n yờn gi�ng cỏi ti�t ra hormon m�t cỏch liờn t�c. S�bài ti�t nh�p nhàng cú tớnh khỏc nhau v� gi�i tớnh này �ó ���c d� �oỏn là cơ ch� cho s� xỏc ��nh cỏc ki�u hỡnh c�a nh�ng P450 gi�i tớnh. Sau �ú Gustafson và Stenberg �ó nghiờn c�u s�chuy�n hoỏ steroid trong chu�t�ó ���c c�t b� tuy�n yờn và xỏc

��nh r�ng tuy�n �c (hypothalamus) nh�là cơquan liờn k�t hormon sinh d�c. Hormon tuy�n �c ��c bi�t là y�u t� gi�i phúng hormon sinh tr��ng và y�u t� �c ch� s� gi�i phúng hormon sinh tr��ng ho�c Somatostatin tr� l�i �i�u hoà s� nh�p nhàng trong bài ti�t hormon sinh tr��ng c�a tuy�n yờn. H� gi�thi�t r�ng tr�c sinh d�c - tuy�n�c - tuy�n yờn - gan (gonado - hypothalamo - pituiraty - liver)

Nguy�n Th�Ng�c Dao

144

này là cơch� �i�u hoà�ỏp �ng cho s�chuy�n hoỏ l��ng d�ng sinh d�c. N�m 1990, gi� thi�t này v�n cũn chi�m v� trớ trung tõm trong nghiờn c�u tớnh ��c hi�u gi�i tớnh c�a Cyt-P450. Trong nh�ng n�m

��u 1980, nh� tinh s�ch ���c nh�ng P450 ��c hi�u gi�i tớnh và s�

xu�t hi�n c�a k� thu�t DNA tỏi t� h�p �ó làm cho nghiờn c�u s�

bi�u hi�n ��c hi�u gi�i tớnh � m�c �� phõn t� cú �i�u ki�n ti�n hành. Rừ ràng r�ng nh�ng Cyt-P450 xỳc tỏc ch�n l�c s� thu�phõn steroid ��c hi�u gi�i tớnh ���c bi�u hi�n trong c� hai gi�ng. Hơn n�a s�bi�u hi�n��c hi�u gi�ng c�a nh�ng Cyt-P450 này ���c�i�u hoà b�i hormon sinh tr��ng. Tuy nhiờn, cơch� �i�u hoà là ph�c t�p và khỏc t�Cyt-P450 này ��n Cyt-P450 khỏc. Vớ d�, trong khi c� 2 lo�i P45016 và P450g chu�t c�ng ��u ��c hi�u gi�ng ��c � gan, hormon sinh tr��ng ti�t theo th�i k� l�i �i�u hoà m�t cỏch khỏc nhau s�bi�u hi�n��c hi�u gi�ng ��c c�a 2 Cyt-P450 nàỵ

H�th�ng th��ng ���c dựng nh�t cho nh�ng nghiờn c�u này là chu�t �ó b� c�t b� tuy�n yờn. �� th�y �nh h��ng c�a hormon sinh tr��ng lờn s� bi�u hi�n Cyt-P450, th�nh tho�ng hormon ���c tiờm vào �� gi�m s� bài ti�t nh�p nhàng � ��ng v�t ��c ho�c ���c cho u�ng b�ng s� khu�ch tỏn liờn t�c t�m�t cỏi bơm th�m th�u tớ hon

�� làm gi�m � ��ng v�t gi�ng cỏị P45016 ���c làm gi�m trong chu�t �ó b� c�t b� tuy�n yờn, b� ng�n ch�n b�i s� khu�ch tỏn c�a hormon sinh tr��ng, nh�ng khụng b� �nh h��ng b�i vi�c th�nh tho�ng thờm hormon nàỵ K�t qu� này kh�ng ��nh r�ng P45016 bi�u hi�n trong chu�t ��c �ũi h�i s� ti�t ng�t quóng c�a hormon sinh tr��ng, trong khi P450g ���c bi�u hi�n liờn t�c khi v�ng m�t hormon sinh tr��ng. S� ng�n ch�n P450g b�i hormon sinh tr��ng trong chu�t cỏi d�n t�i s�bi�u hi�n ��c hi�u gi�ng��c c�a nú. Cơ

ch�này làm nh�l�i cơch� �i�u hoà s�bi�u hi�n��c hi�u gi�ng cỏi c�a Cyt-P450 và Cyt-P450RLM2 c�a chu�t c�ng. Cyt-P45015

���c bi�u hi�n trong gan c�a nh�ng chu�t cỏi và b� ch�n trong chu�t cỏi b� c�t b� tuy�n yờn, m�c th�p ���c tỡm th�y trong chu�t

��c. Tuy nhiờn, m�c th�p c�a Cyt-P45015 trong chu�t �ó ���c ph�c h�i l�i b�i khu�ch tỏn hormon sinh tr��ng nh�ng khụng ph�i thờm vào th�nh tho�ng, �� cú ���c m�c cao nh� �ó th�y�chu�t cỏi bỡnh th��ng.

K�t qu� kh�ng ��nh r�ng s� �i�u hoà d�ơng tớnh b�i hormon sinh tr��ng là c�n thi�t ��i v�i Cyt-P45015 ���c bi�u hi�n trong chu�t cỏị Tuy nhiờn, th� thu�t c�t b� tuy�n

Ch ng V. Nh�ng gen Cyt-P450 và s�bi�u hi�n c�a chỳng 145 yờn làm bi�n ��i nhi�u nh�ng hormon khỏc hơn là hormon sinh tr��ng. S�d�ng t� bào gan chu�t��u tiờn, Gurelian và cs. m�i �õy �ó ch�ng t� r�ng m�t mỡnh hormon sinh tr��ng �ó cú kh� n�ng bi�n ��i tr�c ti�p ki�u hỡnh ��c hi�u gi�i c�a nh�ng t� bào v�i m�c �ớch bi�u hi�n Cyt-P45015 . S� d�ng chu�t nh�t nh� ��t bi�n thi�u h�t hormone sinh tr��ng, Poshi và Negishi �ó nghiờn c�u s� �i�u hoà ��c hi�u gi�i c�a Cyt-P450 b�i hormon sinh tr��ng � m�c mRNẠ Chu�t này cú s� thi�u h�t trong vi�c t�o thành hormon sinh tr��ng, v�i m�c bỡnh th��ng c�a hormon tuy�n tu�, �ó cung c�p m�t trong nh�ng mụ hỡnh ��ng v�t in vivo thớch h�p nh�t �� nghiờn c�u s� �i�u hoà hormon sinh tr��ng c�a P450s. C-P-450 ��c hi�u gi�ng

��c �ó b� gi�m trong chu�t ��c nh� này trong khi �ú m�c c�a P45015 ��c hi�u gi�ng cỏi khụng b� bi�n ��i � chu�t cỏi nh�

nh�ng ��u t�ng trong chu�t ��c nh�. K�t qu� là, cỏc Cyt-P450

�ó r�t ớt ��c hi�u v� gi�i trong chu�t nh� so v�i chu�t lai c�n gi�ng bỡnh th��ng khỏc. Vi�c thờm ng�t quóng hormon sinh tr��ng t�o ra C-P45016 mRNA trong chu�t ��c nh� � m�c nh� � chu�t ��c bỡnh th��ng, Cyt-P45015 b� �c ch� và I- P45016 -mRNA ��c hi�u gi�ng cỏi ���c th�y � m�c nh�

trong chu�t cỏi bỡnh th��ng.

S� khu�ch tỏn hormon, tuy nhiờn, cú �nh h��ng m�t chỳt lờn Cyt-P450 khỏc trong chu�t nh�. K�t qu� này xỏc ��nh r�ng s� bi�u hi�n ��c hi�u gi�ng ��c c�a Cyt-P45016 ���c �i�u hoà m�t cỏch d�ơng tớnh b�i hormon sinh tr��ng. Ng��c l�i, Cyt-P45015 ��c hi�u gi�ng cỏi liờn t�c ���c bi�u hi�n trong gan c�a chu�t cỏi và b� �c ch� b�i s� ti�t ng�t quóng cu�

hormon sinh tr��ng trong chu�t��c.

Cơ ch� �i�u hoà trong chu�t nh�t cú gỡ �ú khỏc v�i trong chu�t c�ng. Khụng gi�ng nh� tr��ng h�p chu�t ��c b� thi�n, s�

thi�n c�a chu�t nh�t ��c tr��ng thành d�n t�i s� cỏi hoỏ c�a c�

C-P45016 và P45015 ; C-P45016 -mRNA trong chu�t nh�t b�

thi�n b� �c ch� ��n m�c ch� cũn nh� ���c th�y trong chu�t nh�t cỏi bỡnh th��ng, trong khi �ú P45015 -mRNA l�i t�ng. X� lý b�ng androgen (hormon gi�ng ��c) s� ph�c h�i Cyt-P450 này

��n m�c bỡnh th��ng � chu�t tr��ng thành. Yoshioka và cs. �ó th�y r�ng androgen tỏc ��ng khụng tr�c ti�p, cú l� qua s� �i�u

Nguy�n Th�Ng�c Dao

146

hoà bài ti�t và s� t�ng h�p hormon sinh tr��ng. B�i v�y xu�t hi�n v�n �� là s� �i�u hoà ph� thu�c androgen c�a hormon sinh tr��ng khụng hoàn toàn gi�ng nhau trong chu�t c�ng và chu�t nh�t tr��ng thành.

M�c dự cú s�khỏc nhau trong �i�u hoà ph�thu�c hormon sinh tr��ng trong ��ng v�t tr��ng thành, s�bi�u hi�n Cyt-P450 ��c hi�u gi�i ph�n nào �ú ���c xỏc ��nh b�i androgen bào thaị S� thi�n chu�t m�i sinh làm m�t�i s� phõn bi�t gi�i tớnh c�a cỏc Cyt-P450 trong ��ng v�t tr��ng thành và x� lý chu�t m�i sinh v�i androgen ph�c h�i ki�u hỡnh ��c hi�u gi�i�tu�i tr��ng thành. �i�u này ���c g�i là d�u�n bào thai “neonatal imprinty”. S�thi�n núi chung ớt �nh h��ng ��n s� bi�u hi�n ph� thu�c gi�ớ: “D�u �n bào thai” c�a s� (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});

bi�u hi�n Cyt-P450 ��c hi�u gi�i cú l� là do s�nh�p nhàng bài ti�t hormon sinh tr��ng�ó b� c� ��nh tr��c khi m�i sinh b�i androgen. Gi�thi�t này là quỏ �ơn gi�n�� gi�i thớch cơch�mà b�i nú s�bi�u hi�n Cyt-P45016 trong chu�t c�ng ��c tr��ng thành ph� thu�c vào s� cú m�t c�a hormon sinh tr��ng, nh�ng s� bi�u hi�n c�a RML2, P4502a và P450g d��ng nh�là khụng ph�thu�c vào s�cú m�t c�a hormon.

M�c dự m�c �� ��c hi�u gi�i tớnh là khụng l�n nh� là c�a nh�ng Cyt-P450 m�i ���c mụ t� � trờn, Cyt-P4507 chu�t c�ng, steroid 7 - hydroxylase là m�t mụ hỡnh hay cho s� bi�u hi�n ph� thu�c gi�ị V� m�t phỏt tri�n cỏ th�, hàm l��ng P4507 - mRNA c�a gan t�ng t�ớ b�n tu�n tu�i � chu�t ��c và cỏi và r�i gi�m ch� trong tu�i sau d�y thỡ � gi�ng ��c, d�n t�i m�c � gan cao 3 ��n 4 l�n hơn m�c � gan c�a chu�t cỏi tr��ng thành. K�t qu� này kh�ng ��nh r�ng Cyt-P4507 bi�u hi�n khỏc v�i bi�u hi�n c�a nhi�u Cyt-P450 khỏc, nh�ng Cyt-P450 khỏc ch� ���c phỏt tri�n trong m�i gi�ng sau khi d�y thỡ. M�c dự s� �i�u hoà x�y ra làm khỏc bi�t v�i h�u h�t cỏc Cyt-P450 ��c hi�u gi�i tớnh khỏc, s� bi�u hi�n rừ nh�n th�y c�a Cyt-P4507 chu�t cỏi c�ng ���c bi�t là ���c �i�u hoà b�i hormon sinh tr��ng

���c ti�t ra m�t cỏch nh�p nhàng.

Nhi�u cụng b�m�i�õy g�i ý r�ng nh�ng hormon khỏc bao g�m glucocorticoid và thyroxine c�ng tham gia vào s� bi�u hi�n Cyt-

Ch ng V. Nh�ng gen Cyt-P450 và s�bi�u hi�n c�a chỳng 147 P450 ��c hi�u gi�ị C�n cú nh�ng nghiờn c�u ti�p t�c �� xỏc ��nh cơ ch� tham gia c�a nh�ng hormon này vào s� �i�u hoà ��c hi�u gi�i nh�th�nàọ

Tuy nhiờn, s�phiờn mó c�a gen C-P45016 �ó ���c t�ng lờn khi cho thờm ng�t quóng hormon sinh tr��ng vào chu�t nh�, trong khi s� x� lý cựng hormon này l�i �c ch� phiờn mó c�a gen Cyt- P45015 . Nh�ng k�t qu� này xỏc ��nh r�ng s� bi�u hi�n ��c hi�u gi�i c�a Cyt-P450s trong chu�t���c �i�u hoà m�t cỏch phiờn mó b�i hormon sinh tr��ng. Mode và cs �ó cụng b�r�ng cỏc gen Cyt- P45015 và 16 chu�t ��c hi�u gi�i tớnh ���c �i�u hoà b�i hormon sinh tr��ng m�t cỏch phiờn mó c�ng nh�là h�u phiờn mó. K�t qu� c�a h� tuy nhiờn �ó b� ph�c t�p hoỏ b�i m�t �i�u là cỏc gen ch�u s� �i�u hoà m�t cỏch phõn bi�t trong nh�ng chu�t bỡnh th��ng và trong chu�t b� c�t tuy�n yờn x� lý v�i hormon. Vớ d�, s� �i�u hoà c�a Cyt-P45016 ��c hi�u gi�ng ��c trong chu�t bỡnh th��ng là h�u phiờn mó, trong khi s� �i�u hoà phiờn mó là rừ r�t trong chu�t �ó c�t tuy�n yờn. M�c dự nguyờn nhõn c�a s� khỏc nhau rừ ràng trong cơ ch� �i�u hoà gi�a chu�t bỡnh th��ng và chu�t c�t tuy�n yờn v�n cũn ph�i xỏc ��nh, vi�c s� d�ng nh�ng ph�ơng phỏp khỏc nhau �� làm suy y�u hormon sinh tr��ng (S�

c�t tuy�n yờn trong tr��ng h�p nh�ng thớ nghi�m trờn chu�t khỏng l�i s� �c ch� m�t cỏch ch�n l�c c�a homron sinh tr��ng trong chu�t nh�gõy ��t bi�n thi�u h�t hormone phỏt tri�n) s� �nh h��ng

��n k�t lu�n. M�c dự cú tớnh toỏn ��n �� nh�y b� gi�i h�n và tớnh

��nh l��ng trong thớ nghi�m run – on assay, c�ng �� b�ng ch�ng

�� xỏc ��nh r�ng s� �i�u hoà gen P450 ��c hi�u gi�i ��u tiờn là �

m�c phiờn mó m�c dự �i�u hoà sau phiờn mó nh� là làm b�n mRNA c�ng ���c �ỏnh giỏ caọ Hormon sinh tr��ng �i�u hoà phiờn mó gen P450 nh� th� nào: Qua h� th�ng thụng tin th� hai ho�c qua s� t�ơng tỏc tr�c ti�p v�i trỡnh t� �i�u hoà c�a nh�ng gen P450 �ớch? Hi�n nay, quỏ trỡnh �i�u hoà này cũn ch�a ���c làm rừ. �ú là m�t trong nh�ng �i�u quan tr�ng nh�t và cõu h�i t�n t�i trong nghiờn c�u v� s� �i�u hoà gi�i c�a Cyt-P450 c�n ���c chỳ ý hơn trong nh�ng nghiờn c�u t�ơng laị

Nguy�n Th�Ng�c Dao

148

Hỡnh 5.6. S�phiờn mó ��c hi�u gi�i c�a cỏc gen Cyt-P450 15 và Cyt-P450 16 .

Nhõn t� bào gan �ó���c tỏch t�chu�t��c và cỏi 120/ j và là ��i t��ng cho run-on assays. Thờm n�a ��i v�i gen Cyt- P450, s� d�ch mó c�a MUP (mouse major uninary protein) ��c hi�u gi�ng��c, Cyt-P450b và 7-actin genes c�ng�ó ���c �o nh� là ��i ch�ng, Plasmid pUC19 �ó ���c dựng nh�là n�n��laị B�i vỡ m�u���c lai chộo, run-on assay ��i v�i gen Cyt-P450 15 c�ng bao g�m s� phiờn mó c�a gen P450 coh, trong khi �ú s�phiờn mó c�a gen C- P45016 �ó g�n v�i phiờn mó c�a P450 cb gen. �i�u này �ó khụng làm thay ��i vi�c k�t lu�n r�ng s�phiờn mó c�a C-P45016 và P45015 genes là ��c hi�u gi�ị

Một phần của tài liệu Ebook cytochrome p450 phần 2 PGS TS nguyễn thị ngọc dao (Trang 64 - 69)