Nhận xét: Qua số liệu ở bảng 3.13 và đồ thị 3.1; 3.2 chúng tôi nhận thấy, sự tăng trưởng của cả 2 chủng bắt đầu gia tăng ở thời điểm 12 giờ. Tuy nhiên, ở mỗi chủng sự tăng trưởng đạt cực đại ở thời điểm khác nhau, đối với chủng Lactobacillus
PA2 đạt cực đại ở thời điểm 36 giờ và tương đối ổn định đến 48 giờ, sau đó giảm dần nhưng giảm không đáng kể. Còn chủng Lactobacillus PP tăng trưởng và hoạt tính kháng khuẩn đạt cực đại ở thời điểm 48 giờ và giảm dần theo thời gian. Như vậy, có thể xác định qúa trình ST của các chủng như sau:
+ Chủng Lactobacillus PA2: pha tiềm phát từ 0 – 12 giờ, pha logarit từ 12–36 giờ, pha cân bằng từ 36 – 48 giờ, pha suy vong ở thời điểm sau 48 giờ.
+ Chủng Lactobacillus PP: pha tiềm phát từ 0 – 12 giờ, pha logarit từ 12 – 48 giờ, pha cân bằng từ 48 – 60 giờ, pha suy vong sau 60 giờ.
Kết quả này phù hợp với kết quả nghiên cứu của tác giả Nguyễn Văn Thanh (2002) và nghiên cứu của tác giả Lê Thị Hồng Tuyết (2004).
Mặt khác, chúng tôi nhận thấy rằng giá trị pH của MT sau nuôi cấy tỷ lệ nghịch với sự tăng trưởng và hoạt tính kháng khuẩn của các chủng này. Cụ thể, ở chủng Lactobacillus PA2 tăng trưởng và hoạt tính kháng khuẩn tăng lên từ 12 đến 36 giờ, không đổi đến 48 giờ, bắt đầu giảm từ thời điểm 48 giờ. Ngược lại, pH bắt đầu giảm từ thời điểm 12 giờ và giảm cực đại đến 48 giờ, sau đó lại bắt đầu tăng lên, chủng PP cũng tương tự. Điều này có thể giải thích là do sản phẩm chính của quá trình lên men lactic đồng hình là acid lactic. Do vậy, sự tăng trưởng của VK sản sinh
ra acid lactic làm pH của MT sau nuôi cấy giảm, đồng thời acid tạo ra đã ức chế VSV gây bệnh do vậy hoạt tính kháng khuẩn tăng lên tỷ lệ thuận cùng với sự tăng trưởng.
Như vậy, để thu sinh khối đạt cao nhất và hiệu quả nhất thì nên thu sinh khối đối với chủng Lactobacillus PA2 ở thời điểm 36 giờ, chủng Lactobacillus PPở thời điểm 48 giờ.
3.5.2. Ảnh hưởng pH ban đầu
Giá trị pH ban đầu trong MT có ảnh hưởng rất lớn đến sự ST và sinh tổng hợp các chất của VSV. Đối với LAB thì đây là một đặc điểm rất quan trọng vì sự ST của chúng phụ thuộc rất nhiều vào pH ban đầu của MT. Để xác định độ pH tối ưu cho sự ST và tạo hoạt tính kháng khuẩn cao nhất của hai chủng Lactobacillus PA2 và
Lactobacillus PP, chúng tôi tiếp tục khảo sát pH ban đầu của MT ở các giá trị pH 5,5; 6,0; 6,5; 7,0 và 7,5. Điều chỉnh pH môi trường bằng NaOH 1N và HCl 1N.
Thu nhận mẫu sau 36 giờ đối với chủng Lactobacillus PA2 sau 48 giờ với chủng Lactobacillus PP. Xác định sự tăng trưởng, sự thay đổi pH và hoạt tính kháng khuẩn của 2 chủng trên. Kết quả được thể hiện qua bảng 3.14 và biểu diễn qua đồ thị 3.3; 3.4.
Bảng 3.13. Kết quả khảo sát ảnh hưởng pH môi trường nuôi cấy đến sự
ST, hoạt tính kháng khuẩn của chủng Lactobacillus PA2 và Lactobacillus PP
Độ pH ban đầu Mật độ tế bào, (….x106 CFU/ml) Hoạt tính đối kháng, (D - d, cm) pH sau Lactobacillus PA2 Lactobacillus PP Lactobacillus PA2 Lactobacillus PP Lactobacillus PA2 Lactobacillus PP 5,5 94,32 94,32 3,63 3,59 3,69 3,70 6,0 95,12 94,88 3,70 3,68 3,78 3,79 6,5 95,80 95,28 3,93 3,85 3,83 3,84 7,0 95,28 94,92 3,55 3,55 3,90 3,94 7,5 94,80 93,84 3,49 3,47 4,25 4,25
Đồ thi 3.3. Ảnh hưởng pH ban đầu của MT đến sự ST và hoạt tính kháng khuẩn của chủng Lactobacillus PA2
Đồ thị 3.4. Ảnh hưởng pH ban đầu của MT đến sự ST và hoạt tính kháng khuẩn của chủng Lactobacillus PP
Nhận xét: Qua kết quả bảng 3.13 chúng tôi nhận thấy, cả hai chủng đều có khả năng phát triển tốt ở khoảng pH từ 5,5 đến 7,5. Khả năng ST và tạo hoạt tính kháng khuẩn cao nhất trên cả hai chủng đều ở pH 6,5. Cụ thể, ở pH 6,5 mật độ tế bào đạt cao nhất (95,80 x106 CFU/mlđối với chủng Lactobacillus PA2, 95,28 x106 CFU/ml đối với chủng Lactobacillus PP) và hoạt tính kháng khuẩn cũng đạt cao nhất (chủng
pH = 5,5 pH = 6,0 pH = 6,5
pH = 7,0 pH = 7,5
Hình 3.8. Hoạt tính kháng khuẩn của chủng Lactobacillus PA2 đối với