Để khẳng định lại hai chủng trên thuộc loài L. acidophilus như trên nhãn các chế phẩm, chúng tôi gửi hai chủng PA2 và PP đến phòng xét nghiệm Công ty Nam Khoa – Thành phố Hồ Chí Minh, để định danh tiếp đến loài. Kết quả định danh đến loài bằng phương pháp giải trình tự gen 16S rRNA và tra cứu trên BLAST SEARCH. Với mỗi chủng chúng tôi đã tiến hành định danh lặp lại hai lần, với hai lần phân lập độc lập nhau (kết quả đính kèm ở phần phụ lục).
Kết quả giải trình tự gen 16S của chủng Lactobacillus PA2:
CTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTCGAGCG AGCAGAACCAGCAGATTTACTTCGGTAATGACGCTGGGGACGCGAGCGGC GGATGGGTGAGTAACACGTGGGGAACCTGCCCCATAGTCTGAGATACCACT TGGAAACAGGTGCTAATACCGGATAATAAAGCAGATCGCATGATCAGCTTA TAAAAGGCGGCGTAAGCTGTCGCTATGGGATGGCCCCGCGGTGCATTAGC TAGTTGGTAAGGTAACGGCTTACCAAGGCAATGATGCATAGCCGAGTTGAG AGACTGAACGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGA GGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGAGCCAAGTCTGATGGAGCAACG CCGCGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAAAGCTCTGTTGTTGGTGAAG AAGGATAGAGGTAGTAACTGGCCTTTATTTGAGCGTAATCAACCAGAAAGT CACGGCTAACTACGTG.
Kết luận: Chủng Lactobacillus PA2 là Lactobacillus suntoryeus với độ tương đồng 100%
Kết quả giải trình tự gen 16S của chủng Lactobacillus PP:
TTGATCCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTC GAGCGAGCAGAACCAGCAGATTTACTTCGGTAATGAGCCTGGGGACGCGA GCGGCGGATGGGTGAGTAACACGTGGGGAACCTGCCCCATAGTCTAGGAT ACCACTTGGAAACAGGTGCTAATACCGGATAATAAAGCAGATCGCATGATC AGCTTATAAAAGGCGGCGTAAGCTGTCGCTATGGGATGGCCCCGCGGTGC ATTAGCTAGTTGGTAAGGTAACGGCTTACCAAGGCAATGATGCATAGCCGA GTTGAGAGACTGAACGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTA CGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCAACAATGGACGCAAGTCTGATGGAC GAACGCCGCGTGAGTGAAGAGGGTTTTCGGATCGTAAAGCTCTGTTGTTGG TGAAGAAGGATAGAGGTAGTAACTGGCCTTTATTTGACGGTAATCAACCAG AAAGTCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTA
Kết luận: Chủng Lactobacillus PP là Lactobacillus helveticus với độ tương đổng 99%, là Lactobacillus acidophilus với độ tương đồng 97%
Như vậy, chủng Lactobacillus PA2: Lactobacillus suntoryeus
Chủng Lactobacillus PP: Lactobacillus helveticus
Với mỗi chủng, chúng tôi đã tiến hành phân lập độc lập nhiều lần trong các chế phẩm chỉ chứa thành phần là L. acidophilus và định danh lặp lại hai lần. Kết quả của hai lần định danh trên mỗi chủng đều giống nhau. Thực tế, các chế phẩm này đã sử dụng một chủng VK khác thuộc chi Lactobacillus mang những đặc điểm tương tự và thay thế cho loài Lactobacillus acidophilus nên thành phần VSV trên nhãn thuốc là không đúng.
Kết quả này chính là một sự cảnh tỉnh đối với việc sử dụng các chế phẩm probiotic trên thị trường thuốc hiện nay. Tác dụng và hiệu quả lâm sàng của các chế phẩm probiotic phụ thuộc gần như hoàn toàn vào đặc tính sinh lý – sinh hóa của VSV được sử dụng. Chỉ những loài nào đã được nghiên cứu lâm sàng đầy đủ mới bảo đảm an toàn và lợi ích sử dụng được chứng minh một cách khoa học. Vì vậy, việc công bố sai danh pháp của VSV trong chế phẩm probiotic là một điều không thể chấp nhận được. Để bảo đảm quyền lợi cho người tiêu dùng, cần phải có một tiêu chuẩn kiểm tra các sản phẩm chức năng mà trong đó chỉ tiêu định danh phải được quan tâm đúng mức, xây dựng đủ cơ sở khoa học cho công tác kiểm nghiệm.
Chương 4 - KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ