Phươngpháp phân tích resveratrol

Một phần của tài liệu Bước đầu xây dựng tiêu chuẩn cao đặc chiết xuất từ vang nho, trần bì và chè xanh (Trang 38)

Các nghiên cứu về phương pháp phân tích resveratrol trong nhiều nguồn nguyên liệu khác nhau đã công bố ở việt Nam cũng như trên thế giới cho thấy phương pháp chủ yếu được sử dụng là phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao vớidetector UV hoặc detector khối phổ. Đây là hai phương pháp chính được sử dụng để định lượng resveratrol.

Nuno Ratola, Joaquim Luís Faria và Arminda Alves đã sử dụng phương pháp HPLC với detector UV để nghiên cứu phân tích và định lượng resveratrol trong rượu vang nho ở vùng Alentejo Bồ Đào Nha. Với điều kiện sắc ký: cột Lichrokart C18 của Merck (5 µm, 4,6 × 250 mm), pha động nước : acetonitril : acid acetic tỷ lệ ( 70 : 29,9 : 0,1), tốc độ dòng 1ml/ phút, thể tích tiêm 20 µl, detector 310 nm. Kết quả nghiên cứu xác định được sự có mặt của resveratrol trong tất cả 47 mẫu rượu vang đỏ với nồng độ khác nhau, trong khoảng từ 0,13 đến 2,64 mg/ l [41].

Laszlo Mark, Martin S. Pour Nikfardjam, Peter Avar và Robert Ohmacht đã xây dựng và thẩm định phương pháp HPLC để phân tích định lượng trans- resveratrol và trans-piceid trong rượu vang nho Hungary. Điều kiện sắc ký: cột sắc ký pha đảo C18 (6µm, 250× 4,6 mm), pha động sử dụng là hỗn hợp acid axetic : methanol : nước (10: 90: 1) làm dung môi A, hỗn hợp methanol- acid acetic- nước (90: 10: 1) làm dung môi B, tốc độ dòng 1,5 ml/ phút vớichế độ chạy gradient,

29

detector ở 306 nm. Phương pháp phân tích được thẩm định tính tuyến tính, giới hạn phát hiện, độ lặp lại, độ thu hồi. Khoảng tuyến tính của nồng độ từ 0,01 đến 101 mg/l với R2> 0,999; giới hạn phát hiện là 205 pg, độ lặp lại của thời gian lưu và diện tích píc được xác định với độ lệch chuẩn lần lượt là 3,9% và 2,12%. Độ thu hồi trong khoảng 93,8% đến 100,8% [34].

Tao Yi và cộng sự sử dụng phương pháp HPLC với detector PDA và ESI/MS để phân tích định tính, định lượng thành phần hoá học chính trong thân rễ khô cốt khí củ. Dựa trên sắc ký đồ riêng rẽ trên cột Altima C18 sử dụng pha động acid acetic và acetonitril, 9 thành phần bao gồm stilben, stilben glycosid, anthraquinon, anthraquinon glycosid được xác định bằng phân tích ESI/MS và 7 thành phần được xác định bởi HPLC- DAD. Các giá trị thẩm định đầy đủ của phương pháp bao gồm độ nhạy, độ tuyến tính, độ lặp lại, và độ tìm lại đã được kiểm soát. Khoảng nồng độ tuyến tính từ 1- 200 mg/l với R2> 0,999, giới hạn phát hiện trong khoảng 0,51 đến 1,57 ng. Độ lặp lại được xác định với giá trị RSD < 2,2% [50].

Ngoài ra phương pháp HPLC – UV/ DAD cũng được ứng dụng trong phân tích thường quy rượu vang đỏ, vỏ nho và các sản phẩm phụ làm rượu vang để xác định trans-resveratrol và quercetin.

Như vậy phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao với detector UV hoặc detector khối phổ là phương pháp chính được ứng dụng để phân tích resveratrol cho kết quả nhanh nhạy và chính xác.

Một phần của tài liệu Bước đầu xây dựng tiêu chuẩn cao đặc chiết xuất từ vang nho, trần bì và chè xanh (Trang 38)