Phân lập, xác định một số vi khuẩn gây viêm phổi kế phát trong hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản ở lợn (PRRS) và đề xuất giải pháp phòng bệnh

luận văn

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI Lấ TH HIN Phân lập, xác định số vi khuẩn gây viêm phổi kế phát hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn (PRRS) đề xuất giải pháp phòng bệnh LUN VN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành : THÚ Y Mã số : 60.62.50 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS CÙ HỮU PHÚ HÀ NỘI - 2010 Lêi cam ®oan Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tơi xin cam đoan thơng tin trích dẫn luận văn rõ ngn gốc Hà Nội, ngày tháng năm 2010 Tác giả Lê Thế Hiền Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc s nụng nghip i lời cảm ơn Tụi xin chân thành cảm ơn: - PGS TS Cù Hữu Phú, người hướng dẫn khoa học trực tiếp ñã giúp ñỡ, hướng dẫn, bảo tận tình, tạo điều kiện cho tơi q trình thực đề tài hồn thành luận văn - PGS TS Nguyễn Hữu Nam, thầy mơn Bệnh lý tồn thể thầy cô giáo Khoa Thú y; khoa Sau ñại học – Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội ñã tận tình giúp ñỡ tạo ñiều kiện cho tơi hồn thành luận văn - Tồn cô, anh, chị Bộ môn Vi trùng – Viện Thú y Quốc gia ñặc biệt gia đình,cơ quan nơi tơi cơng tác tạo ñiều kiện thuận lợi giúp ñỡ trình thực đề tài Hà Nội, ngày tháng năm 2010 Tác giả Lê Thế Hiền Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ii MơC LơC Lời cam đoan i Lời cám ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt báo cáo Danh mục bảng v vii Mở đầu 1.2 ý nghĩa thực tế khoa học đề tài 1.3 Mục tiêu đề tài 1.4 Đối tợng phạm vi nghiên cứu 2 tổng quan tài liệu 2.1 Tình hình nghiên cứu hội chứng PRRS giới Việt Nam 2.2 Một số hiểu biết PRRS vi rút gây bệnh 2.3 Một số vi khuẩn gây bệnh kế phát hội chứng PRRS lợn nội dung - Đối tợng - nguyên liệu phơng 11 pháp nghiên cứu 32 3.1 Nội dung nghiên cứu 32 3.2 Đối tợng nghiên cøu 32 3.3 Nguyªn liƯu dïng cho nghiªn cøu 32 3.4 Phơng pháp nghiên cứu 33 Kết nghiên cứu thảo luận 40 4.1 Kết phân lập vi khuÈn P multocida, A pleuropneumoniae vµ S suis tõ lợn nghi mắc PRRS 4.2 Kết kiểm tra mẫu dơng tính với PRRS đồng thời phân lập đợc Ýt nhÊt lo¹i vi khuÈn A pleuropneumoniae, Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nơng nghiệp i 40 P multocida vµ S suis 4.3 42 Kết kiểm tra đặc tính sinh ho¸ cđa c¸c chđng vi khn A pleuropneumoniae, P multocida S suis phân lập đợc 43 4.3.1 Kết kiểm tra số đặc tính sinh hoá chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae phân lập đợc 43 4.3.2 Kết kiểm tra số đặc tính sinh hoá chủng vi khuẩn P multocida phân lập đợc 45 4.3.3 Kết kiểm tra số đặc tÝnh sinh ho¸ cđa c¸c chđng vi khn S suis phân lập đợc 4.4 Kết xác định 46 serotyp chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis phân lập đợc 4.4.1 Kết xác định serotyp chủng vi 48 khuẩn A pleuropneumoniae P multocida phân lập đợc 4.4.2 Kết xác định serotyp chủng vi khuẩn S suis phân lập đợc 4.5 48 51 Kết kiểm tra độc lực chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis phân lập đợc 52 4.5.1 Kết kiểm tra độc lực số chủng A pleuropneumoniae phân lập đợc chuột bạch 52 4.5.2 Kết kiểm tra độc lực số chủng P multocida phân lập đợc chuột bạch 53 4.5.3 Kết kiểm tra độc lực số chủng S suis phân lập đợc chuột bạch 4.6 55 Kết kiểm tra khả mẫn cảm với kháng sinh chđng vi khn A pleuropneumoniae, P multocida vµ S suis phân lập đợc Penicillin G 4.7 57 Kết thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh đờng hô hấp lợn đề xuất giải pháp phòng bệnh 4.7.1 Kết thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh đờng hô hÊp ë lỵn Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ii 58 58 4.7.2 Các giải pháp phòng bệnh viêm phổi lợn 60 Kết luận Đề nghị 63 5.1 Kết luận 63 5.2 Đề nghị 64 Tài liệu tham kh¶o Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp iii 65 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU DNA Deoxyribonucleic Acid AGID Agargel Immuno Diffuse A.pleuropneumoniae Actinobaccillus pleuroneumonica EAV Arterivirus BHI Brain Heart Infusion CAMP Chiristie – Atkinson – Munch – Peterson CFT Complement Fixation Test EDTA Ethylene Diamine Tetra Acetic acid ELISA Enzyme – linked Immunosorbant assay H pleuropneumoniae Haemophilus pleuropneumoniae IHA Indirect Haemagglutination test LPS Lypopolysaccaride LTA Lipoteibic acid LDV Lactate dehydrogenase MR Methyl red NAD Nicotinamide Adenine Dinucleotide PBS Phosphat buffur solution PCR Polymerase Chain Reaction P multocida: Pasteurella multocida PRRS Porcine Reproductive and Respiratory Ryndrome Sta aureus: Staphylococcus aureus S suis Streptococcus suis TSA Tryptic Soy Agar VP : Voges – Prokauer Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp iv DANH MơC B¶NG BIĨU STT 3.1 Tên bảng Trang Trình tự cặp mồi dùng để xác định serotyp A, B, D cña vi khuÈn P multocida 3.2 36 Trình tự cặp mồi dùng để xác định serotyp 1, 2, vµ cđa vi khn Streptococcus suis 4.1 37 Kết phân lập vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis từ lợn nghi mắc PRRS 4.2 40 Kết phân lập đợc vi khuÈn A pleuropneumoniae, P multocida vµ S suis mẫu dơng tính với PRRS 42 4.3 Kết kiểm tra số đặc tính sinh hoá chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae phân lập đợc 4.4 44 Kết kiểm tra số đặc tính sinh hoá chủng vi khuẩn P multocida phân lập đợc 4.5 45 Kết kiểm tra số đặc tÝnh sinh ho¸ cđa c¸c chđng vi khn S suis phân lập đợc 4.6 Kết xác định 47 serotyp chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae P multocida phân lập đợc 49 4.7 Kết xác định serotyp chủng vi khuẩn S suis phân lập đợc 51 4.8 Kết kiểm tra độc lực số chủng A pleuropneumoniae phân lập đợc chuột bạch 4.9 53 Kết kiểm tra độc lực số chủng P multocida phân lập đợc chuột bạch 54 4.10 Kết kiểm tra độc lực số chủng S suis phân lập đợc chuột bạch 56 4.11 Kết thử kháng sinh đồ chủng vi khuẩn phân lập đợc 57 4.12 Kết thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh đờng hô hấp ë lỵn 59 Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp v Mở đầu 1.1 Đặt vấn đề Trong năm gần đây, kinh tế thị trờng đợc mở rộng, đời sống nhân dân ta ngày đợc nâng cao, kèm với việc đáp ứng nhu cầu thực phẩm đợc quan tâm Nhà nớc đj có nhiều sách hỗ trợ đầu t cho chăn nuôi lợn, nhiều dự án đj giúp ngời nông dân vốn kỹ thuật để tăng suất chăn nuôi, đàn lợn đj tăng lên cách rõ rệt số lợng chất lợng Tuy nhiên, ngành chăn nuôi lợn nớc ta thờng xuyên phải đối mặt với nguy dịch bệnh xảy ra, gây ảnh hởng đến suất chăn nuôi, chất lợng thịt thu nhập ngời chăn nuôi Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn (viết tắt PRRS), hay đợc gọi bệnh Tai xanh nổ lần nớc ta vào tháng năm 2007 tỉnh Hải Dơng, sau lây lan nhanh đến đj xảy liên tiếp đàn lợn hầu khắp địa phơng nớc, làm chết buộc phải tiêu hủy số lợng lớn lợn, gây tổn thất nặng nề cho ngành chăn nuôi lợn, gây thiệt hại nặng nề kinh tế nh vấn đề an sinh xj hội cho địa phơng Chúng ta đj áp dụng nhiều biện pháp để khống chế nhằm hạn chế thiệt hại bệnh gây Đến nay, bệnh đj bớc đợc khống chế nhng biện pháp đj sử dụng cha cho kết nh mong muốn Nguy dịch tái bùng phát, lây lan tất địa phơng nớc cao Một nguyên nhân theo nhận định đj làm trầm trọng thêm tình hình dịch bệnh PRRS có bệnh cộng phát kế phát xảy đàn lợn bị nhiễm PRRS Trong số phải kể đến bệnh viêm phổi kế phát lợn thờng loại vi khuẩn nh Actinobacillus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida Streptococcus suis gây Do đó, việc nghiên cứu cách toàn diện mối liên quan bệnh viêm phổi lợn vi khuẩn gây với bệnh PRRS cần thiết yêu Trng i học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nụng nghip cầu cấp bách, từ xác định đợc giải pháp phòng chống bệnh có hiệu kinh tế cao cho ngời chăn nuôi Xuất phát từ tình hình thực tiễn, nhằm đáp ứng sở khoa häc cho viƯc phßng chèng bƯnh PRRS nãi chung bệnh viêm phổi lợn nói riêng, tạo tiền đề cho ngành chăn nuôi lợn nớc ngày đứng vững phát triển, tiến hành đề tài nghiên cứu: Phân lập, xác định số vi khuẩn gây viêm phổi kế phát hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn (PRRS) đề xuất giải pháp phòng bệnh" 1.2 ý nghĩa thực tế khoa học đề tài - Đáp ứng yêu cầu đòi hỏi cấp thiết thực tiễn phòng trị bệnh viêm phổi kế phát hội chứng PRRS cho lợn - Xác lập sở khoa học cho nghiên cứu khác hội chứng PRRS lợn Việt Nam, góp phần công tác phòng trị bệnh lợn nuôi địa phơng 1.3 Mục tiêu đề tài - Phân lập, xác định số đặc tính quan trọng chủng vi khuẩn Actinobacillus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida Streptococcus suis gây bệnh viêm phổi kế phát hội chứng PRRS lợn nuôi tỉnh Bắc Giang, Hng Yên Thái Nguyên - Đề xuất giải pháp phòng trị bệnh viêm phổi kế phát thích hợp cho lợn tạicác địa phơng 1.4 Đối tợng phạm vi nghiên cứu - Vi khuẩn Actinobacillus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida Streptococcus suis gây bệnh viêm phổi kế phát hội chứng PRRS lợn - Lợn nghi mắc PRRS nuôi tỉnh Bắc Giang, Hng Yên Thái Nguyên Trng i hc Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... bệnh vi? ?m phổi lợn nói riêng, tạo tiền đề cho ngành chăn nuôi lợn nớc ngày đứng vững phát triển, tiến hành đề tài nghiên cứu: Phân lập, xác định số vi khuẩn gây vi? ?m phổi kế phát hội chứng rối loạn. .. pleuropneumoniae bệnh vi? ?m phổi màng phổi vi khuẩn gây lợn Vi khuẩn A pleuropneumoniae tác nhân gây bệnh vi? ?m phổi màng phổi lợn Bệnh có phân bố rộng rji ngày trở nên quan trọng vi? ??c chăn nuôi lợn ngày phát. .. rối loạn hô hấp sinh sản lợn (PRRS) đề xuất giải pháp phòng bệnh" 1.2 ý nghĩa thực tế khoa học đề tài - Đáp ứng yêu cầu đòi hỏi cấp thiết thực tiễn phòng trị bệnh vi? ?m phổi kế phát hội chứng PRRS