Phân lập, xác định vai trò gây bệnh của một số vi khuẩn gây viêm phổi kế phát trong hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản ở lợn (PRRS) tại bắc giang

B GIÁO D C VÀ ðÀO T O TRƯ NG ð I H C NÔNG NGHI P HÀ N I - - TR N TH TÂM PHÂN L P, XÁC ð NH VAI TRÒ GÂY B NH C A M T S VI KHU N GÂY VIÊM PH I K PHÁT TRONG H I CH NG R I LO N HÔ H P SINH S N L N (PRRS) T I B C GIANG LU N VĂN TH C SĨ NÔNG NGHI P Chuyên ngành : Thú y Mã s : 60.62.50 Ngư i hư ng d n khoa h c : TS NGUY N TR NG KIM PGS.TS NGUY N H U NAM HÀ N I – 2012 L I CAM ðOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên c u c a riêng tơi Các s li u k t qu trình bày lu n văn trung th c chưa t ng đư c cơng b b t kỳ cơng trình khác Tơi xin cam đoan r ng m i s giúp ñ cho vi c th c hi n lu n văn ñã ñư c cám ơn thơng tin trích d n lu n văn ñ u ñã ñư c ch rõ ngu n g c Tác gi Tr n Th Tâm Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… i L I C M ƠN Tôi xin chân thành c m ơn: - T.S Nguy n Tr ng Kim PGS.TS Nguy n H u Nam , ngư i hư ng d n khoa h c tr c ti p ñã giúp ñ , hư ng d n, ch b o t n tình, t o u ki n cho tơi q trình th c hi n đ tài hồn thành lu n văn - T t c cán b công tác t i b môn vi trùng vi n thú y qu c gia, b môn B nh lý thú y trư ng ñ i h c nơng nghi p hà n i, tồn th th y giáo Khoa Thú y; khoa Sau đ i h c - Trư ng ð i h c Nơng nghi p Hà N i t n tình giúp ñ t o m i ñi u ki n cho tơi hồn thành lu n văn - S giúp ñ , t o ñi u ki n c a ñ ng nghi p ñ c bi t gia đình t o m i u ki n thu n l i nh t giúp đ tơi q trình th c hi n đ tài Hà N i, ngày tháng năm 2012 Tác gi TR N TH TÂM Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… ii M CL C L i cam ñoan i L i c m ơn ii M cl c iii Danh m c ch vi t t t ký hi u v Danh m c b ng vi Danh m c nh vii M ð U 1.1 Tính c p thi t c a đ tài 1.2 Ý nghĩa th c t khoa h c c a ñ tài 1.3 M c tiêu c a ñ tài T NG QUAN TÀI LI U 2.1 Tình hình nghiên c u v PRRS 2.2 M t s hi u bi t b n v PRRS vi rút gây b nh 2.3 M t s vi khu n gây viêm ph i PRRS ð I TƯ NG – N I DUNG - NGUYÊN LI U VÀ PHƯƠNG l n 11 PHÁP NGHIÊN C U 33 3.1 ð i tư ng nghiên c u 33 3.2 N i dung nghiên c u 33 3.3 Nguyên li u dùng cho nghiên c u 34 3.4 Phương pháp nghiên c u 35 K T QU NGHIÊN C U VÀ TH O LU N 42 4.1 K t qu phân l p vi khu n A.pleuropneumoniae, P multocida, S suis t i t nh B c Giang 4.2 42 K t qu ki m tra đ c tính sinh hố c a ch ng vi khu n A pleuropneumoniae, P multocida S suis phân l p ñư c Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 44 iii 4.2.1 K t qu ki m tra m t s ñ c tính sinh hố c a ch ng vi khu n A pleuropneumoniae phân l p ñư c 44 4.2.2 K t qu ki m tra m t s ñ c tính sinh hố c a ch ng vi khu n P multocida phân l p ñư c 4.2.3 47 K t qu ki m tra m t s đ c tính sinh hố c a ch ng vi khu n S suis phân l p ñư c 4.3 K t qu xác ñ nh serotype c a ch ng vi khu n 51 A pleuropneumoniae, P multocida S suis phân l p ñư c 4.3.1 K t qu xác ñ nh serotype c a ch ng vi khu n A pleuropneumoniae P multocida phân l p ñư c 4.3.2 53 53 K t qu xác ñ nh serotype c a ch ng vi khu n S suis phân l p ñư c 4.4 58 K t qu xác ñ nh ñ c l c c a ch ng vi khu n phân l p ñư c 60 4.4.1 K t qu ki m tra ñ c l c c a m t s ch ng A pleuropneumoniae phân l p ñư c chu t b ch 4.4.2 K t qu ki m tra ñ c l c c a vi khu n P multocida phân l p ñư c 4.4.3 61 K t qu ki m tra ñ c l c c a m t s ch ng S suis phân l p ñư c chu t b ch 4.5 60 63 K t qu ki m tra kh m n c m v i kháng sinh c a ch ng vi khu n A pleuropneumoniae, P multocida S suis phân l p ñư c 64 K T LU N VÀ ð NGH 68 5.1 K t lu n 68 5.2 ð ngh 68 TÀI LI U THAM KH O Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 69 iv DANH M C CÁC CH VI T T T VÀ KÝ HI U DNA Deoxyribo nucleic Acid AGID Agargel Immuno Diffuse A.pleuropneumoniae Actinobaccillus pleuroneumonica EAV Arterivirus BHI Brain Heart Infusion CAMP Chiristie – Atkinson – Munch – Peterson CFT Complement Fixation Test EDTA Ethylene Diamine Tetra Acetic acid ELISA Enzyme – linked Immunosorbant assay H pleuropneumoniae Haemophilus pleuropneumoniae IHA Indirect Haemagglutination test LPS Lypopolysaccaride LTA Lipoteibic acid LDV Lactate dehydrogenase MR Methyl red NAD Nicotinamide Adenine Dinucleotide PBS Phosphat buffer solution PCR Polymerase Chain Reaction P multocida: Pasteurella multocida PRRS Porcine Reproductive and Respiratory Ryndrome Sta aureus: Staphylococcus aureus S suis Streptococcus suis TSA Tryptic Soy Agar VP : Voges – Prokauer Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… v DANH M C B NG STT 3.1 Tên b ng Trang Trình t c p m i dùng ñ xác ñ nh serotyp A, B, D c a vi khu n P multocida 3.2 38 Trình t c p m i dùng ñ xác ñ nh serotype 1, 2, c a vi khu n Streptococcus suis 3.3 40 Tiêu chu n ñánh giá m c ñ m n c m kháng kháng sinh theo NCCLS (1999) 4.1 41 K t qu phân l p vi khu n A pleuropneumoniae, P multocida S suis t l n m c PRRS 4.2 42 K t qu ki m tra m t s đ c tính sinh hố c a ch ng vi khu n A pleuropneumoniae phân l p ñư c 4.3 45 K t qu ki m tra m t s đ c tính sinh hố c a ch ng vi khu n P multocida phân l p ñư c 4.4 48 K t qu ki m tra m t s đ c tính sinh hố c a ch ng vi khu n S suis phân l p ñư c 4.5 K t qu xác ñ nh serotyp c a ch ng vi khu n 51 A pleuropneumoniae P multocida phân l p ñư c 4.6 K t qu xác ñ nh serotyp c a ch ng vi khu n S suis phân l p ñư c 4.7 61 K t qu ki m tra ñ c l c c a m t s ch ng P multocida phân l p ñư c chu t b ch 4.9 58 K t qu ki m tra ñ c l c c a m t s ch ng A leuropneumoniae phân l p ñư c chu t b ch 4.8 55 62 K t qu ki m tra ñ c l c c a m t s ch ng S suis phân l p ñư c chu t b ch 64 4.10 K t qu xác ñ nh m c ñ m n c m kháng sinh ch ng A pleuropneumoniae, P multocida, S suis Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 65 vi DANH M C NH STT 4.1 Tên nh Trang Khu n l c c a vi khu n A pleuropneumoniae phân l p đư c mơi trư ng th ch máu (C y kèm v i vi khu n Staphylococcus) 46 4.2 Hình thái vi khu n A pleuropneumoniae phân l p ñư c (x1500) 47 4.3 Ph n ng lên men ñư ng c a vi khu n A pleuropneumoniae phân l p ñư c 4.4 47 Khu n l c c a vi khu n P multocida phân l p đư c mơi trư ng th ch máu 49 4.5 Hình thái vi khu n P multocida phân l p ñư c (x 1500 ) 50 4.6 Ph n ng lên men ñư ng c a vi khu n P multocida phân l p ñư c 50 4.7 Hình thái c a vi khu n S suis dư i kính hi n vi (x 1500) 53 4.8 K t qu c a ph n ng PCR ñ nh type vi khu n P multocida 57 4.9 Các s n ph m c a ph n ng PCR sau q trình n di đ xác đ nh serotype c a vi khu n S suis 4.10 59 K t qu th kháng sinh ñ 66 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… vii M ð U 1.1 Tính c p thi t c a đ tài Trong nh ng năm g n ñây, kinh t th trư ng ñư c m r ng, ñ i s ng c a nhân dân ta ngày ñư c nâng cao, kèm v i vi c ñáp ng nhu c u v th c ph m đư c quan tâm Nhà nư c có nhi u sách h tr đ u tư cho chăn ni l n, nhi u d án giúp ngư i nông dân v n k thu t đ tăng su t chăn ni, đàn l n c a ñã tăng lên m t cách rõ r t c v s lư ng ch t lư ng Tuy nhiên, ngành chăn nuôi l n nư c ta v n thư ng xuyên ph i ñ i m t v i nguy d ch b nh x y ra, gây nh hư ng ñ n su t chăn nuôi, ch t lư ng th t thu nh p c a ngư i chăn nuôi H i ch ng r i lo n hô h p sinh s n l n (tên ti ng Anh Porcine Reproductive and Respiratory Syndrom, vi t t t PRRS) hay cịn đư c g i b nh Tai xanh n tr thành d ch l n ñ u tiên 2007 nư c ta vào tháng năm t nh H i Dương, sau lây lan nhanh đ n ñã x y liên ti p ñàn l n h u kh p ñ a phương c nư c, làm ch t ho c bu c ph i tiêu h y m t s lư ng l n l n (trên 15.000 con), gây t n th t r t n ng n cho ngành chăn nuôi l n, gây thi t h i n ng n v kinh t v n ñ an sinh xã h i cho ñ a phương Chúng ta ñã áp d ng nhi u bi n pháp ñ kh ng ch nh m h n ch thi t h i c a b nh gây ð n nay, b nh ñã ñang t ng bư c ñư c kh ng ch bi n pháp ñã s d ng v n chưa cho k t qu cao Nguy d ch tái bùng phát, lây lan t t c ñ a phương c nư c r t cao B c Giang t nh có ngh chăn ni l n phát tri n ñem l i ngu n thu nh p cao cho nhi u h gia đình, theo th ng kê chăn nuôi (1/10/2010) c a C c th ng kê t nh B c Giang, t ng ñàn l n c a t nh ñ t 1.162.349 (trong 185.655 l n nái, 975.040 l n th t) Trong t nh có 430 tr i chăn nuôi l n t p Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… trung (quy mô 20 nái 100 l n th t tr lên) ðây th c s m t bư c ti n m i chăn ni l n c a t nh, góp ph n phát tri n chăn nuôi l n b n v ng, t o s n ph m an tồn có s c c nh tranh cao th trư ng T i Ngh quy t c a ð i h i ñ i bi u ð ng b t nh B c Giang l n th 17, ph n ñ u ñưa t ng s ñàn l n lên 1,5 tri u vào năm 2015 ð ñ m b o cho chăn nuôi phát tri n b n v ng ñ t ñư c m c tiêu tăng t ng s ñàn l n lên 1,5 tri u cơng tác phịng ch ng d ch b nh cho đàn v t ni ngày tr nên c p bách Nh ng năm g n ñây, d ch b nh Tai xanh l n thư ng x y ñ a bàn t nh gây nh ng thi t h i l n cho ngư i chăn nuôi Theo s li u t ng h p c a Phòng D ch t Chi c c Thú y t nh năm 2007 t ng s l n m c b nh 14.223, s ch t tiêu h y 3.384 con; t tháng ñ n tháng năm 2010 ñ a bàn t nh s l n m c b nh 40.618 con, s ch t tiêu h y 14.971 Do v y, b nh Tai xanh ñã tr thành m t hi m h a ñe d a thư ng tr c v i ngành chăn nuôi c a t nh Là m t b nh m i xu t hi n, vi c nghiên c u ñ c ñi m d ch t b nh; vi c l y m u, xác ñ nh vi rút; phân l p vi khu n b i nhi m chưa ñư c th c hi n Thêm vào vi c s d ng phác đ ñi u tr bi n pháp phòng ch ng d ch hi n t i chưa ñ t hi u qu mong mu n M t nh ng nguyên nhân theo nh n ñ nh ñã làm tr m tr ng thêm tình hình d ch PRRS có nh ng b nh c ng phát ho c k phát x y nh ng ñàn l n b nhi m PRRS Trong s ñó ph i k ñ n b nh viêm ph i k phát l n thư ng lo i vi khu n như: Actinobacillus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida Streptococcus suis gây Do đó, vi c nghiên c u m t cách toàn di n v m i liên quan gi a b nh viêm ph i l n vi khu n gây v i PRRS r t c n thi t m t yêu c u c p bách, t xác đ nh đư c gi i pháp phịng ch ng b nh có hi u qu kinh t cao nh t cho ngư i chăn nuôi Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 4.4.3 K t qu ki m tra ñ c l c c a m t s ch ng S suis phân l p ñư c chu t b ch Chúng ti n hành ch n 10 ch ng vi khu n S suis phân l p ñư c, g m ch ng ñ i di n cho serotype 2, ch ng ñ i di n cho serotype 7, ch ng ñ i di n cho serotype ch ng thu c nhóm chưa xác đ nh đư c serotype ñ ti n hành ki m tra ñ c l c chu t b ch M i chu t đư c tiêm 0,5 ml canh trùng ni c y 37°C/24 gi vào phúc xoang Chu t ñư c theo dõi vòng ngày Chu t ch t ñư c ti n hành m khám, ki m tra tri u ch ng, b nh tích phân l p l i vi khu n t máu tim K t qu thu đư c trình bày b ng 4.9 K t qu b ng 4.9 cho th y: Các ch ng vi khu n S suis thu c serotyp ST - VY32, serotyp (ST - VY17, ST - TY12) serotyp (ST - VY21, ST VY22) ñ u gây ch t 100% s chu t thí nghi m th i gian ng n, t 18 - 36 gi Có ch ng thu c serotype ST - HH5 ch ng thu c serotype (STHH8, ST - TY25) ñư c ki m tra ñ u ch gây ch t 50% s chu t thí nghi m Cịn l i ch ng thu c serotype (ST - HH23) ch ng chưa xác ñ nh ñư c serotype (ST-TY9) không gây ch t chu t Nh ng chu t ch t đư c m khám có b nh tích tương ñ i gi ng như: ph t ng b xung huy t, tim xưng, m m, nhão, tích nư c xoang bao tim, vùng xung quanh ch tiêm, đơi có hi n tư ng apxe Khi l y máu tim nuôi c y vào lo i mơi trư ng thích h p đ u phân l p ñư c vi khu n S suis thu n t Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 63 B ng 4.9 K t qu ki m tra ñ c l c c a m t s ch ng S suis phân l p ñư c chu t b ch Ký hi u ch ng Thu c serotype ST-HH5 ST-HH23 ST-VY32 ST-VY17 ST-TY12 ST-HH8 ST-TY25 ST-VY21 ST-VY22 ST-TY9 2 7 9 9 KXD S chu t ch t/ S chu t tiêm (con) ½ 0/2 2/2 2/2 2/2 ½ ½ 2/2 2/2 0/2 T l chu t ch t (%) Th i gian chu t ch t (gi ) 50,0 0,0 100,0 100,0 100,0 50,0 50,0 100,0 100,0 0,0 24 18-24 20-24 18-36 24 36 18-24 20-24 - Phân l p l i VK + + + + + + + + Như v y, có th th y ch ng thu c serotype serotype 9, hai lo i serotype chi m ưu th s ch ng vi khu n phân l p ñư c nh ng ch ng có đ c l c m nh h n, có th gây ch t chu t th i gian ng n T nh ng k t qu th ñ c l c c a ch ng vi khu n A pleuropneumoniae, P multocida S suis phân l p đư c trên, chúng tơi có th k t lu n ch ng vi khu n phân l p ñư c ñ u có đ c l c v y chúng có kh gây b nh cho l n n u có u ki n thích h p tác ñ ng 4.5 K t qu ki m tra kh m n c m v i kháng sinh c a ch ng vi khu n A pleuropneumoniae, P multocida S suis phân l p ñư c Vi c ki m tra kh m n c m v i m t s lo i kháng sinh c a lo i vi khu n gây b nh nói chung ch ng vi khu n A pleuropneumoniae, P multocida S suis phân l p ñư c nói riêng r t c n thi t, s có th đưa nh ng hư ng d n ñ l a ch n nh ng kháng sinh thích h p đ u tr b nh nh ng vi khu n gây l n có hi u qu Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 64 B ng 4.10 K t qu xác ñ nh m c ñ m n c m kháng sinh ch ng A pleuropneumoniae, P multocida, S suis App (n = 18) TT P multocida (n = 16) S suis (n= 48) Lo i kháng sinh S ch ng m n c m T l (%) S ch ng m n c m T l (%) S ch ng m n c m T l (%) 01 Penicillin G 38,89 37,50 26 54,17 02 Amikacin 12 66,67 11 68,75 37 77,08 03 Ceftriaxone 16 88,89 15 93,75 46 95,83 04 Tetracycline 38,89 43,75 23 47,92 05 Ceftiofur 17 94,44 15 93,75 47 97,92 06 Ofloxacin 14 77,78 12 75,00 37 77,08 07 Streptomycin 44,44 11 68,75 16 33,33 08 Amoxicillin 15 83,33 12 75,00 39 81,25 09 Neomycin 38,89 25,00 19 39,58 10 Colistin 44,44 56,25 21 43,75 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 65 T ng h p k t qu ki m tra m c ñ m n c m v i 10 lo i kháng sinh c a ch ng vi khu n A pleuropneumoniae, P multocida S suis phân l p đư c trình bày K t qu b ng 4.10 b ng 4.10 cho th y: Các ch ng vi khu n A pleuropneumoniae, P multocida S suis phân l p ñư c m n c m cao v i lo i kháng sinh như: Ceftriaxone, Ceftiofur, Amoxicillin ñ ng th i m n c m th p v i lo i kháng sinh như: Neomycin, Penicillin G, Tetracycline C th là: - Các ch ng vi khu n A pleuropneumoniae ñem th m n c m cao nh t v i kháng sinh Ceftiofur v i t l 94,44%, ti p ñ n Ceftriaxone v i t l 88,89%, Amoxicillin v i t l 843,33% Ngư c l i, ch ng m n c m th p nh t v i Penicillin G, Neomycin Tetracycline (t l 38,89%) - Các ch ng vi khu n P multocida m n c m cao nh t v i Ceftriaxone Ceftiofur v i t l 93,75%, sau Ofloxacin Amoxicillin v i 75,00% Trong đó, ch có 25,00% s ch ng m n c m v i Neomycin, 37,50% s ch ng m n c m v i Penicillin G - Các ch ng vi khu n S suis m n c m cao nh t v i Ceftiofur v i t l 97,92%, ti p ñ n Ceftriaxone v i t l 95,83% Amoxicillin v i t l 81,25%, ñ ng th i m n c m th p nh t v i Streptomycin (33,33%), Neomycin (39,58%) Colistin (43,75%) nh 4.10 K t qu th kháng sinh ñ Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 66 So sánh v i k t qu nghiên c u c a Tr nh Quang Hi p, 2004 [4], k t qu thu đư c c a chúng tơi có đơi chút khác bi t Theo nghiên c u c a tác gi , ch ng vi khu n A pleuropneumoniae, P multocida S suis phân l p ñư c t đư ng hơ h p c a l n m n c m cao v i lo i kháng sinh Neomycin, Amikacin hay Amoxicillin Tuy nhiên, k t qu thu đư c c a chúng tơi cho th y nh ng lo i kháng sinh có s m n c m th p ho c b kháng v i t l cao ði u có th gi i thích theo th i gian, có hi n tư ng kháng thu c c a lo i vi khu n K t qu thu ñư c cho th y, giai đo n hi n t i có th s d ng lo i kháng sinh Ceftriaxone, Ceftiofur, Amoxicillin đ u tr b nh đư ng hơ h p cho l n Tuy v y, c n có chi n lư c bi n pháp c th đ hư ng d n ngư i chăn ni ch trang tr i s d ng kháng sinh có ý th c th n tr ng, tránh hi n tư ng vi khu n kháng ñ ng th i v i nhi u lo i kháng sinh Có v y, vi c s d ng kháng sinh ñi u tr b nh m i ñem l i hi u qu cao mong ñ i Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 67 K T LU N VÀ ð NGH 5.1 K t lu n T l phân l p vi khu n gây b nh đư ng hơ h p l n t i t nh B c Giang sau: A pleuropneumoniae chi m t l 20,00%, P multocida 17,78% S suis 53,33% Vi khu n A pleuropneumoniae, P multocida, S suis phân l p ñư c ñ u có đ c tính sinh v t hóa h c đ c trưng c a lồi K t qu ñ nh type ch ng vi khu n phân l p ñư c sau: - Trong 18 ch ng A pleuropneumoniae: serovar chi m t l 72,22%, serovar chi m t l 27,78% - Trong 16 ch ng P multocida: serotype A chi m t l 68,75%, serotype D chi m t l 31,25% - Trong 48 ch ng S suis: serotype chi m t l cao nh t 37,50%, ti p ñ n serotype chi m 29,17%, serotype 7chi m 18,75% Các serotype khác chi m t l 14,58% Các ch ng vi khu n A pleuropneumoniae, P multocida S suis phân l p ñư c ñ u có ñ c l c m nh, có kh gây b nh ñàn l n t i t nh B c Giang v i t l gi t ch t chu t t 50 - 100% kho ng th i gian t 12 - 48 gi H u h t ch ng vi khu n A pleuropneumoniae, P multocida S suis ñ u m n c m m nh v i kháng sinh như: Ceftriaxone, Ceftiofur, Amoxicillin 5.2 ð ngh Ti p t c nghiên c u vai trò gây b nh c a vi khu n Actinobacillus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida Streptococcus suis PRRS nh m tìm gi i pháp kh ng ch s ñư ng hô h p nh hư ng c a vi khu n gây b nh l n Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 68 TÀI LI U THAM KH O Tài li u Ti ng Vi t: Bùi Quang Anh, Hoàng Văn Năm, Văn ðăng Kỳ, Nguy n Văn Long, Nguy n Ng c Ti n (2008) H i ch ng r i lo n hô h p sinh s n l n (PRRS) NXB Nông nghi p, tr 7- 21 ð ng Xuân Bình, Nguy n Th Ngân, Phan Th H ng Phúc (2007) Tình hình nhi m Actinobacillus pleuropneumoniae bênh viêm ph i-màng ph i l n T p chí Khoa h c k thu t Thú y, t p XIV, s 2, tr 56-59 Nguy n Bá Hiên, Huỳnh Th M L (2007) M t s hi u bi t v virut gây h i ch ng r i lo n hô h p sinh s n H i th o H i ch ng r i lo n hô h p sinh s n b nh liên c u gây l n 10/2007, Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i, tr 1- 10 Tr nh Quang Hi p (2004) Xác ñ nh m t s ñ c tính sinh v t hố h c, đ c l c vai trò gây b nh viêm ph i l n c a m t s vi khu n: Actinobacilus, Pasteurella Streptococcus Bư c ñ u th nghi m bi n pháp phòng tr Lu n văn Th c sĩ khoa h c nông nghi p, Vi n thú y qu c gia, Hà N i Ngun Lª Hoa (2001): Xác định tỷ lệ nhiễm v số đặc tÝnh sinh vËt hãa häc cđa vi khn g©y bƯnh hô hấp lợn Pasteurella multocida, Bordetella bronchiseptica, H.parasuis, A pleuropneumoniae v biện pháp phòng trị Luận văn Thạc sĩ N«ng nghiƯp Khương Th Bích Ng c (1996) B nh c u khu n m t s s chăn nuôi l n t p trung bi n pháp phòng tr Lu n án PTS khoa h c nông nghi p, Vi n Thú y Qu c Gia, Hà N i Nguy n Ng c Nhiên, Nguy n Th N i, Khương Bích Ng c (1994) Nghiên c u ch t o vacxin phòng H i ch ng ho th truy n nhi m l n k t Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 69 qu áp d ng s n xu t T p chí khoa h c - cơng ngh qu n lý kinh t , 9/1994, tr 356 - 357 Nguy n Ng c Nhiên (1996) Vai trò c a m t s vi khu n đư ng hơ h p h i ch ng ho th truy n nhi m l n bi n pháp phòng tr Lu n án Phó ti n sĩ khoa h c nông nghi p, Hà N i Cù H u Phú, Nguy n Ng c Nhiên (1999) T Haemophilus sp l nhi m vi khu n l p niêm m c đư ng hơ h p c a l n m t s đ c tính sinh v t hoá h c c a ch ng phân l p đư c Báo cáo trình bày t i H i ngh khoa h c B Nông nghi p PTNT t i Hu tháng 6/1999, trang 138 - 143 10 Cù H u Phú, Nguy n Ng c Nhiên, Nguy n Thu H ng, Âu Xuân Tu n, Nguy n Bích Thu , Vũ Ng c Quý (2005) Xác ñ nh nguyên nhân gây b nh ñư ng hô h p c a l n nuôi t i m t s t nh phía B c T p chí KHKT thú y, 7(4), tr 25-32 11 Nguy n Vĩnh Phư c (1978) Giáo trình b nh truy n nhi m gia súc Nhà xu t b n Nông thôn 12 Lê Văn T o (2005) B nh vi khu n Streptococcus gây l n T p chí KHKT thú y, 12(4), tr 71-76 13 Lê Văn T o ð Ng c Thuý (2006) "B nh vi khu n Streptococcus suis gây l n t i t nh T Xuyên - Trung Qu c, nh ng bi n pháp ngăn ch n c a Vi t Nam" T p chí KHKT Thú y, s 3, tr 89-90 14 Nguy n Như Thanh cs (1997) Vi sinh v t thú y Nhà xu t b n Nông nghi p, Hà N i, tr 11 - 17 15 Tô Long Thành (2007) H i ch ng r i lo n sinh s n hơ h p l n T p chí Khoa h c thú y, 14(3), tr 81- 89 16 Nguy n Văn Thi n (2000), Phương pháp nghiên c u chăn nuôi, Nxb nông nghi p Hà N i, tr 180 - 235 17 ð Ng c Thuý cs (2007) ng d ng k thu t PCR ñ ñ nh type giáp mô Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 70 c a ch ng vi khu n P multocida phân l p ñư c t v t ni T p chí KHKT thú y, 14(1), tr 36-41 Tài li u nư c ngoài: 18 Ahn, D.C and Kim, B.H (1994) Toxigenicity and capsular serotypes of pasteurella multocida isolated from pneumonic lungs of slaughter pigs Proc, Int, Pig vet, Soc Congr, p 165 19 Albina, E (1997) Epidemiology of porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) Elsesiver, p 109-316 20 Bergey's Manual of Determinative Bacteriology Ninth Edition (1994) 21 Brandreth, S.R and Smith, I.M (1985) Prevenlence of pig herds affected by pleuropneumonia associated with Haemophilus pleuropneumoniae in eastern England Vet Rec 117: p 143 - 147 22 Carter, G.R (1952) Type specific capsular antigens of Pasteurella multocida Canadian Journal of Medical Science, 30: p 48 – 53 23 Carter, G.R (1955) Studies on Pasteurella multocida I.A Haemagglutination test for identification of serological types American Journal of Veterinary Research, 16: p 481 - 484 24 Carter, G.R (1984) Pasteuralla, Yersinia, and Franciella, p 111 - 121 in: Diagnostic procedures in veterinary bacteriology and Mycology 4th ed (Carter G.R, ed) Charles C, Thomas Publisher, Springfield 25 Carter, G.R (1987) Serological classification of Pasteurella multocida Vet Rec, 121(16), p 382-383 26 Cho, W.S and Chae, C (2001) Expression of the Apx IV Gene in pigs naturally infected with Actinobacillus pleupneumoniae J Comp Path 125, p 34-40 27 Cote, S., Harel, J., Higgins, R., and Jacques, M (1991) Ressistance to antimicrobial agents and prevalence of R plasmids in Pasteurella multocida from swine Am J Vet Res 52 (10): 1653 - 1657 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 71 28 De Alwis, M.C.L (1992) Areview: Pasteurellosis in production animals ACIAR proceedings, 43, p 11-19 29 Desrosiers, R.; Mittal, K.R.; and Malo, R (1984) Porcine pleuropneumonia associated with Haemophilus pleuropneumoniae serotype in Quebec Vet Rec 115: p 628 - 629 30 Dubreuil, J.D.; Jacques, M ; Mittal, K.R Gottschalk, M (2000) Actinobacillus pleuropneumoniae surface polysaccharides: their role in diagnosis and immunogenicity Animal Health Res Rev 2, p 73-93 31 Frey, J.; Bosse, J.T (1993) Actinobacillus pleuropneumoniae RTX toxins: Uniform designation of haemolysins, cytolysins pleurotocin and their genes J Gen Microbiol, 139: p 1723 - 1728 32 Gilbride, K.A and Rosendal, S (1984) Antimicrobial susceptibility of 51 strains of Heamophilus pleuropneumoniae Can J Comp Med, 48: p 47 - 50 33 Gutierrez Martin, C.B and Rodriguez Ferri, E.F (1993) Invitro susceptibility of Pacteurella multocida strains isolated from swine to 42 antimicrobial agents Int J Met Microbiol Virol Parasitol Dis 279 (3): 387 393 34 Heddleston, K.L (1972) Fowl cholera: Gel Diffusion Precipitation test for serotyping Pasteurella multocida of avian species Avian disease, 16, p 925-936 35 Higgins R and Gottschalk M (2002) Streptococcal diseases Diseases of swine, p 563-573 36 Inoue, A Yamamoto, K., Hirano, N and Murakami, T (1984) Drug susceptibility of Haemophilus pleuropneumoniae strains isolated from pigs Jpn J Vet Sci, 46: p 175 - 180 37 Sawada (1985) Relationship between serotypess, dermonecrotic toxin production of Pasteurella multocida isolation and pneumonic lesions of porcine lungs Jpn J Vet Sci 50: p 1200 - 1206 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 72 38 Inzana, T.J (1991) Virulence properties of Actinobacillus pleuropneumoniae Microb Path 11, p 305-316 39 Jacques, M (1987) Adherence of Actinobacillus pleuropneumoniae to porcine upper respiratory tract cells Current Microbiol 15: p 115 - 119 40 Kilian, M., Nicolet, J., and Biberstein, E.L (1978) Biochemical and serological characterization of Haemophilus pleuropneumoniae Int J Syst Bacteriol 28: p 20 - 26 41 Moore, G.M., Basson, R.P and Tonkinson, L.V (1996) Clinical trials with tilmicosin phosphate in feed for the control of naturally - acquired pleuropneumonia caused by Actinobacillus plauroneumoniae and Pasteurella multocida in swine Am J Vet Res 57: p 224 - 228 42 Nadaeu, M., Lariviere, S., Higgins, R., and Martineau, G.P (1988) Minimal inhibitory concentrations of antimicrobial agents againts Actinobacillus pleuropneumoniae Can J Vet Res 52: 315 - 318 43 Nicolet, J and Schifferli, D (1982) In vitro susceptibility of Heamophilus pleuropneumoniae to antimicrobial substances Proc Int Congr Pig Vet Soc 7: p 71 44 Nicolet, J (1995) Taxonomy and serological indentification of Actinobacillus pleuropneumoniae Can Vet J, 29: p 578 - 580 45 Nielsen, J.P and Rosdahl, V.T (1988) Phage - typing of toxigenic Pasteurella multocida Proc Int Congr Pig Vet Soc 10: 34 46 Pijoan, C and Trogo, E (1989) Bacterial adhesion to mucosal surfaces with special reference to the Pasteurella multocida isolates from atrophic rhinitis Can J vet Sci 54: p 516 - 521 47 Pohl, S., Bertschinger, H.U., Frederiksen, W and Maheim, W (1983) Transfer of Haemophilus pleuropneumoniae and the Pasteurella haemolytica - like organism causing porcine necrotic pleuropneumonia to the genus Actinobacillus (Actinobacillus pleuropneumoniae comb Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 73 Nov.) on the basis of phenotypic and deoxyribonucleic acid relatedness Inst J Syst Bacteroil 33: p 510 - 514 48 Pol, J.A., Leengoed, L.A., Van, M.G., Stockhofe, N., Kok, G and Wensvoort, G (1997) Dual infections of PRRS/ influenza or PPRSV/ Actinobacillus pleuropneumoniae in the respiratory tract Vet Micro 55: 259 - 265 49 Prescott, J.F and Baggot J.D (1993) Antimicrobial Therapy in veterinary Medicine Ames: Iowa State Univ Press 50 Salmon, S A., Watts, J.L., Case , C.A., Hoffman L.J., Wegener, H.C and Yancey, R.J (1995) Comparison of MICs of Ceftiofur and other antimicrobial agent against bacterial pathogens of swine from the United State Canada and Denmark J Clin Microbiol 33 (9): p 2435 - 2444 51 Silva, L.M.G., Baums, C.G., Rehm, T., Wisselink, H.J., Goethe, R., Valentin-Weigand, P (2006) Virulence-associated gene profiling of Streptococcus suis isolates by PCR Veterinary Microbiology, No 115, p 117-127 52 Steffens, W.L.; Byrd, W and Kadis, S (1990) identification and localization of surface sialylated glycoconjugates in Actinobacillus pleuropneumoniae by direct enzyme-colloidal gold cytochemistry Vet Microbiol 25, p 217-227 53 Townsend, K.M., Hanh, T.X., O’Boyle, D., Wilkie, I., Phan, T.T., Wijewardana, T.G., Trung, N.T and Frost, A.J (2000) PCR detection and analysis of Pasteurella multocida from the tonsils of slaughtered pigs in Vietnam Vet Microbiol, 72, p 69-78 54 Ward, C.K and Inzana, T.J (1997) Identification and Characterization of a DNA Region Involved in the Export of Capsular Polysaccharide by Actinobacillus pleuropneumoniae Serotype 5a Infect Immun, 65, p 2491-2496 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 74 M TS HÌNH NH C A ð TÀI nh L n m c PRRS t i t nh B c Giang nh Ph i, cu ng h ng c a l n m c b nh t i t nh B c Giang nh B nh tích ph i l n b viêm ph i màng ph i Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 75 nh Ph i c a l n có tri u ch ng b nh đư ng hơ h p nh L y m u b nh ph m c a l n b PRRS (các thùy ñ nh thùy tim có d u hi u nh c hóa) nh L y m u t i tr m Thú Y huy n Vi t Yên Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 76 ... n, ti n hành ñ tài nghiên c u: ? ?Phân l p, xác ñ nh vai trò gây b nh c a m t s vi khu n gây vi? ?m ph i k phát h i ch ng r i lo n hô h p sinh s n l n (PRRS) t i B c Giang? ?? 1.2 Ý nghĩa th c t khoa... 2.3.3 Vi khu n S suis b nh liên c u khu n vi khu n gây l n Vi khu n S suis m t s tác nhân gây b nh quan tr ng l n, nguyên nhân gây b nh th c p tính b i huy t, vi? ?m não, vi? ?m màng tim, vi? ?m kh p, vi? ?m... trình vi? ?m ph i n ng thêm * B nh vi? ?m ph i vi khu n P multocida gây l n: - Tri u ch ng: Tri u ch ng lâm sàng c a b nh vi? ?m ph i P multocida gây r t khác tùy thu c vào t ng ch ng vi khu n gây b