- Giếng 6, 8: đ/C âm
4.3.2.Kết quả xác ựịnh serotype của các chủng vi khuẩn S.suis phân lập ựược
ựược
Chúng tôi tiến hành xác ựịnh serotype của các chủng S. suis phân lập ựược dựa vào phản ứng Multiplex PCR sử dụng các cặp mồi ựể nhận biết các serotyp 1, 2, 7 và 9. đây là những serotype gây bệnh chắnh thường gặp của vi khuẩn S. suis. Các cặp mồi sử dụng trong phương pháp Multiplex PCR ựược lựa chọn dựa vào chuỗi gen mã hóa quá trình sinh tổng hợp thành phần polysaccharide của giáp mô (cps), gồm có 4 cặp mồi sau: cps 1 J-F và cps 1 J-R (ựể xác ựịnh serotype 1), cps 2 J-F và cps 2 J-R (ựể xác ựịnh serotype 2), cps 7 H-F và cps 7 H-R (ựể xác ựịnh serotype 7), cps 9 H-F và cps 9 H-R (ựể xác ựịnh serotype 9). Các cặp mồi này cho sản phẩm có kắch cỡ tương ứng là 637 bp, 498 bp, 379 bp và 303 bp.
Kết quả xác ựịnh serotyp của 48 chủng S. suis phân lập ựược trình bày ở bảng 4.6.
Bảng 4.6. Kết quả xác ựịnh serotyp của các chủng vi khuẩn
S. suis phân lập ựược
Kết quả ựịnh type
Serotype 1 Serotype 2 Serotype 7 Serotype 9 Serotype khác Số chủng S. suis kiểm tra (+) (%) (+) (%) (+) (%) (+) (%) (+) (%) 48 0 0,0 14 29,17 9 18,75 18 37,50 7 14,58
Kết quả ở bảng 4.6 cho thấy: Trong số 48 chủng vi khuẩn S. suis phân lập ựược ựem ựịnh type thì có ựến 18 chủng thuộc serotype 9 (chiếm tỷ lệ 37,50%), tiếp ựến có 14 chủng thuộc serotype 2 (chiếm tỷ lệ 29,17%), 9 chủng thuộc serotyp 7 (chiếm tỷ lệ 18,75%), không có chủng thuộc serotyp 1 (chiếm tỷ lệ 0,0%). Còn lại 7 chủng khác (tỷ lệ 14,58%) không xác ựịnh ựược
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 59 serotype vì cho phản ứng âm tắnh với phản ứng Multiplex PCR sử dụng 4 cặp mồi nói trên. Theo chúng tôi, 7 chủng này có thể không thuộc 1 trong các serotype 1, 2, 7 và 9 mà thuộc các serotype khác của vi khuẩn S. suis. Do ựiều kiện hiện tại chưa có ựủ hóa chất cần thiết nên chúng tôi sẽ tiến hành xác ựịnh serotype của những chủng này khi có ựiều kiện.
Ảnh 4.9. Các sản phẩm của phản ứng PCR sau quá trình ựiện di ựể xác ựịnh serotype của vi khuẩn S. suis.
M: 100 bp marker. Giếng 1 và 7: serotype 7. Giếng 2, 3, 4: serotype 2. Giếng 5, 6: serotype 9.
Kết quả này của chúng tôi khá tương ựồng với kết quả nghiên cứu của tác giả Silva và cộng sự, 2006 [51], tác giả cũng ựã sử dụng 4 cặp mồi của 4 serotype 1, 2, 7 và 9, cho sản phẩm có kắch cỡ tương ứng là 637 bp, 498 bp, 379 bp và 303 bp ựể xác ựịnh các serotype của 210 chủng S. suis phân lập từ lợn bệnh, tỷ lệ các chủng thuộc serotype 2 cao nhất là 24,7%, tiếp ựến là các
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 60 chủng thuộc serotype 9 và 7 chiếm tỷ lệ tương ứng là 10% và 8,6%.