- Phòng bệnh:
4.3.1.Kết quả xác ựịnh serotype của các chủng vi khuẩ nẠ pleuropneumoniae và P multocida phân lập ựược.
4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
4.3.1.Kết quả xác ựịnh serotype của các chủng vi khuẩ nẠ pleuropneumoniae và P multocida phân lập ựược.
pleuropneumoniae và P. multocida phân lập ựược.
Chúng tôi tiến hành ựịnh type huyết thanh học của các chủng vi khuẩn: - Với vi khuẩn Ạ pleuropneumoniae phân lập ựược dựa vào kháng huyết thanh chuẩn của Nhật Bản và Úc.
- Với vi khuẩn P. multocida, chúng tôi sử dụng phản ứng Multiplex PCR ựể xác ựịnh các type giáp mô A, B, D của các chủng P. multocida phân lập ựược theo quy trình ựược chuẩn hóa của Bộ môn Vi trùng - Viện Thú y
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 54 (đỗ Ngọc Thúy và cs, 2007 [17]. Giáp mô là yếu tố ựộc lực quan trọng của vi khuẩn P. multocida, nó ựóng vai trò quan trọng trong quá trình gây bệnh của vi khuẩn nàỵ P. multocida ựược chia làm 5 type giáp mô là A, B, D, E và F tùy thuộc vào cấu trúc của Polysaccharide bề mặt. Trong ựó các type gây bệnh ở lợn ựược thông báo là A, B và D.
Các cặp mồi mà chúng tôi sử dụng cho phản ứng PCR ựịnh type giáp mô vi khuẩn P. multocida là: CAPA-F và CAPA-R dùng ựể xác ựịnh type A cho kắch cỡ sản phẩm là 1044bp, CAPB-F và CAPB-R ựể xác ựịnh type B cho sản phẩm là 760bp, CAPD-F và CAPD-R ựể xác ựịnh type D cho sản phẩm là 657bp. Các bước tiến hành phản ứng PCR như ựã mô tả ở phần nguyên liệu và phương pháp nghiên cứụ
Kết quả xác ựịnh serotype của các chủng vi khuẩn Ạ pleuropneumoniae và
P. multocida phân lập ựược trình bày ở bảng 4.5. Kết quả ở bảng 4.5 cho thấy:
- Trong số 18 chủng Ạ pleuropneumoniae phân lập ựược thì có ựến 13 chủng thuộc serovar 2 (chiếm tỷ lệ 72,22%), có 5 chủng thuộc serovar 5 (chiếm tỷ lệ 27,78%), không có chủng nào thuộc serovar 1 (chiếm tỷ lệ 0,0%). Như vậy, các chủng Ạ pleuropneumoniae mà chúng tôi phân lập ựược ựều thuộc các serovar 2 và 5, nên có thể thấy vai trò của chúng rất lớn với bệnh viêm phổi của lợn, ựặc biệt là serovar 2.
Kết quả ựịnh type của chúng tôi cũng khá tương ựồng với kết quả nghiên cứu của tác giả Nguyễn Lê Hoa (2001) [5], xác ựịnh ựược 3 serovar 1, 2, 5 song tỷ lệ khác với chúng tôị Riêng serovar 1 chiếm ựến 10,3%, serovar 2 và 5 cùng chiếm tỷ lệ cao 41,4%.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 55
Bảng 4.5. Kết quả xác ựịnh serotyp của các chủng vi khuẩn
Ạ pleuropneumoniae và P. multocida phân lập ựược
Vi khuẩn Số chủng kiểm tra Phương pháp Kết quả ựịnh typ Số mẫu (+) Tỷ lệ (%) Serovar 1 0 0,0 Serovar 2 13 72,22 Ạ pleuropneumoniae 18 Ngưng kết Serovar 5 5 27,78 Typ A 11 68,75 P. multocida 16 PCR Typ D 5 31,25
Theo tác giả Trịnh Quang Hiệp, 2004 [4], Cù Hữu Phú và cs, 2005 [8]. Các tác giả cho biết cũng xác ựịnh ựược các vi khuẩn Ạ pleuropneumoniae
phân lập ựược ở một số trại lợn ở nước ta thuộc các serovar 1, 2 và 5, tuy nhiên theo hai nhóm tác giả này thì tỷ lệ serovar 5 cao hơn so với serovar 2, không giống với kết quả chúng tôi thu ựược.
Theo Desrosiers và cs, 1984 [29], Brandreth và Smith, 1985 [21]: Bệnh viêm phổi truyền nhiễm của lợn có phân bố rộng rãị Nó ngày càng trở nên quan trọng do việc chăn nuôi lợn ngày một phát triển. Bệnh có mặt và lan truyền ở hầu hết các nước châu Âu và một phần ở Mỹ, Canada, Mexico, Nam Mỹ, Nhật Bản, Hàn Quốc và Úc. Mặc dù chỉ một vài serovar là thịnh hành trên những nước nhất ựịnh, như serovar 2 ở Thụy điển, đức và Thụy Sĩ và serovar 1 và 5 ở Mỹ và Canada nhưng cũng có thể thấy một số serovar ở cùng một nước. Một số serovar ựược coi là ắt ựộc (vắ dụ như serovar 3 có ựộc lực rất thấp) và về dịch tễ chúng không quan trọng ở một số nước nhưng lại có thể gây nên dịch ở một số nước khác.