- Phòng bệnh:
3. đỐI TƯỢNG Ờ NỘI DUN G NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.4.6. Phương pháp xác ựịnh khả năng mẫn cảm với kháng sinh của các chủng vi khuẩn phân lập ựược
ựược
Xác ựịnh ựộc lực của các chủng vi khuẩn Ạ pleuropneumoniae, P.multocida và S. suis phân lập ựược trên chuột bạch theo phương pháp của Sawada (1985)[37]
Sử dụng canh trùng ựược nuôi cấy ở 370C trong 24 giờ của mỗi chủng vi khuẩn cần kiểm tra tiêm vào phúc xoang cho 2 chuột bạch, liều tiêm 0,5 ml/chuột. Theo dõi chuột trong vòng 7 ngàỵ Căn cứ vào số lượng chuột chết, thời gian giết chết chuột ựể ựánh giá ựộc lực của vi khuẩn. Những chuột chết ựược mổ khám quan sát bệnh tắch, lấy máu tim ựể phân lập lại vi khuẩn.
3.4.6. Phương pháp xác ựịnh khả năng mẫn cảm với kháng sinh của các chủng vi khuẩn phân lập ựược chủng vi khuẩn phân lập ựược
Xác ựịnh khả năng mẫn cảm với kháng sinh của các chủng vi khuẩn Ạ pleuropneumoniae, P. multocidavà S. suis phân lập ựược theo phương pháp của Kirty Bauer (1966).
Chủng vi khuẩn cần kiểm tra ựược cấy vào môi trường nước thịt BHI, ựể tủ ấm 370C trong 24 giờ. Dùng tăm bông vô trùng, thấm vào canh trùng rồi
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 41 ựem ria ựều trên bề mặt thạch máụ để cho mặt ựĩa thạch khô tự nhiên ở nhiệt ựộ phòng khoảng 5 phút, rồi tiến hành ựặt các khoanh giấy có tẩm kháng sinh lên bề mặt ựĩa thạch. đọc kết quả sau khi nuôi ở 37oC sau 18-24 giờ bằng cách ựo ựường kắnh vòng vô khuẩn (mm) và ựối chiếu với bảng ựánh giá mức ựộ mẫn cảm của các vi khuẩn với các loại kháng sinh như ở bảng 3.3.
Bảng 3.3. Tiêu chuẩn ựánh giá mức ựộ mẫn cảm và kháng kháng sinh theo NCCLS (1999)
Vòng vô khuẩn (ựường kắnh mm) Kháng sinh Kháng Mẫn cảm trung bình Mẫn cảm Trimethoprim-Sulphamethoxazole < 10 11 Ờ 15 ≥16 Streptomycin < 11 12 Ờ 14 ≥ 15 Gentamicin < 12 13 Ờ 17 ≥ 18 Neomycin < 12 13 Ờ 14 ≥ 15 Cephalothin (KF 30) < 14 15 Ờ 17 ≥18 Amikacin (AK30) < 14 15 Ờ 16 ≥17 Apramycin (APR 15) < 10 11 Ờ 14 ≥15 Ceftiofur (EFT 30) < 17 18 Ờ 20 ≥21 Lincospectinomycin < 10 11 Ờ 13 ≥14 Enrofloxacin (Batril) < 16 17 Ờ 19 ≥20 Ampicillin < 11 12 Ờ 14 ≥ 15 Tetracyclin < 14 15 Ờ 18 ≥ 19 3.4.7. Phương pháp xử lý số liệu
Các kết quả thu ựược trong quá trình thực hiện ựề tài ựược xử lý theo phương pháp thống kê sinh vật học trong chăn nuôi của Nguyễn Văn Thiện, 2000 [16].
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 42