Nghiên cứu đặc điểm sinh học và biện pháp nhân giống loài hoàng liên ô rô lá dày mahonia bealei fortune pynaert làm cơ sở cho công tác bảo tồn loài cây này tại tỉnh lào cai

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VN VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT BÙI VĂN HƯỚNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC VÀ BIỆN PHÁP NHÂN GIỐNG LOÀI HOÀNG LIÊN Ô RÔ LÁ DÀY (MAHONIA BEALEI (FORTUNE) PYNAERT) LÀM CƠ SỞ CHO CƠNG TÁC BẢO TỒN LỒI CÂY NÀY TẠI TỈNH LÀO CAI LUẬN VĂN THẠC SỸ SINH HỌC Hà Nội, 2017 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VN VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT BÙI VĂN HƯỚNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC VÀ BIỆN PHÁP NHÂN GIỐNG LỒI HỒNG LIÊN Ơ RƠ LÁ DÀY (MAHONIA BEALEI (FORTUNE) PYNAERT) LÀM CƠ SỞ CHO CƠNG TÁC BẢO TỒN LỒI CÂY NÀY TẠI TỈNH LÀO CAI Chuyên ngành: Thực vật học Mã số: 60 42 01 11 LUẬN VĂN THẠC SỸ SINH HỌC Người hướng dẫn khoa học TS BÙI VĂN THANH Hà Nội, 2017 LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn nỗ lực thân, nhận giúp đỡ thầy, cô, nhà khoa học lĩnh vực sinh học, hóa học lâm nghiệp Trước hết tơi xin trân trọng bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Bùi Văn Thanh, người thầy hướng dẫn tận tình giúp đỡ có ý kiến, góp ý vô quý báu để thực hồn thành tốt luận văn Tơi xin trân trọng cảm ơn ý kiến đóng góp thầy, phịng Đào tạo sau đại học - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật trình học tập hồn thiện luận văn Tơi xin trân trọng cảm ơn lãnh đạo quan, đồng nghiệp phòng Bảo tồn Thiên nhiên - Bảo tàng Thiên nhiên Việt Nam tạo điều kiện thuận lợi suốt q trình tơi tham gia khóa học hồn thành luận văn Tôi xin trân trọng cảm ơn giúp đỡ cán phòng Khoa học Hợp tác quốc tế, Vườn Quốc gia Hoàng Liên nhân dân, cán quản lý xã tạo điều kiện, tận tình giúp đỡ tơi suốt q trình điều tra, nghiên cứu thu thập số liệu Tôi xin bày tỏ lịng biết ơn tới người thân gia đình, người ln động viên tơi suốt q trình học tập thực luận văn Đề tài hỗ trợ kinh phí Viện Hàn lâm Khoa học Cơng nghệ Việt Nam (mã số: VAST.ĐLT.04/15-16), Quỹ Phát triển Khoa học Công nghệ Quốc gia - Nafosted (mã số: 106-NN.03-2016.49), Quỹ học bổng Nagao Việt Nam, hỗ trợ thiết bị nghiên cứu thực địa Quỹ IDEAWILD Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Tác giả luận văn Bùi Văn Hướng LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Tất nguồn thơng tin trích dẫn luận văn liệt kê tài liệu tham khảo Nếu có sai sót tơi xin chịu hồn tồn trách nhiệm./ Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Tác giả luận văn Bùi Văn Hướng MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN LỜI CAM ĐOAN DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH ẢNH MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn 3.1 Ý nghĩa khoa học 3.2 Ý nghĩa thực tiễn Cấu trúc luận văn CHƯƠNG TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU Tình hình nghiên cứu giới 1.1 Phân loại thực vật 1.2 Giá trị sử dụng 1.3 Kỹ thuật nhân giống bảo tồn Tình hình nghiên cứu Việt Nam 2.1 Phân loại thực vật 2.2 Giá trị sử dụng 11 2.3 Nghiên cứu nhân giống bảo tồn 11 Đánh giá chung 11 Tổng quan khu vực nghiên cứu 12 4.1 Điều kiện tự nhiên 12 4.2 Điều kiện kinh tế - xã hội 17 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Đối tượng nghiên cứu 19 2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 19 2.3 Nội dung nghiên cứu 19 2.4 Phương pháp nghiên cứu 20 2.4.1 Phương pháp kế thừa 20 2.4.2 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm sinh học Hồng liên rơ dày 20 2.4.3 Phương pháp nghiên cứu nhân giống hữu tính từ hạt 22 2.4.4 Phương pháp nghiên cứu nhân giống vơ tính từ thân, cành 24 2.4.5 Phương pháp nghiên cứu giá trị sử dụng thành phần hóa học lồi Hồng liên ô rô dày 26 2.4.6 Phương pháp xử lý số liệu 29 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 31 3.1 Đặc điểm sinh học Hồng liên rơ dày 31 3.1.1 Đặc điểm hình thái 31 3.1.2 Đặc điểm sinh trưởng, tái sinh mật độ tự nhiên lồi Hồng liên rơ dày 36 3.1.3 Đặc điểm sinh thái học lồi Hồng liên rơ dày 37 3.1.4 Xây dựng đồ phân bố tiềm lồi Hồng liên rơ dày 40 3.2 Kết nhân giống hữu tính lồi Hồng liên ô rô dày từ hạt 43 3.2.1 Một số đặc điểm tiêu hạt Hồng liên rơ dày 43 3.2.2 Tỷ lệ nảy mầm hạt Hồng liên rơ dày 44 3.3 Kết nhân giống vơ tính Hồng liên rơ dày phương pháp giâm hom 45 3.3.1 Ảnh hưởng loại hom kích thước hom đến tỷ lệ sống hom Hồng liên rô dày 45 3.3.2 Ảnh hưởng loại chất nồng độ chất kích thích sinh trưởng đến tỷ lệ sống hom giâm 49 3.3.3 Ảnh hưởng thời vụ giâm hom đến tỷ lệ sống hom Hồng liên rơ dày 53 3.4 Tình hình khai thác giá trị sử dụng lồi Hồng liên rơ dày 56 3.4.1 Tri thức địa khai thác sử dụng lồi Hồng liên rơ dày 56 3.4.2 Thành phần hóa học kết thử nghiệm hoạt tính sinh học 57 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 59 Kết luận 59 Kiến nghị 60 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN VĂN 61 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT Cs Cộng CT Công thức IAA Chất điều hòa sinh trưởng Indol acetic acid IBA Chất điều hòa sinh trưởng Indol butiric acid KBTTN Khu Bảo tồn thiên nhiên LC-MS Liquid chromatography - Mass spectrometry Nxb Nhà xuất OTC Ơ tiêu chuẩn TB Trung bình VQG Vườn Quốc gia -NAA Chất điều hòa sinh trưởng-Napthalen acetic acid DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Chỉ tiêu theo dõi đặc điểm sinh học lồi Hồng liên rơ dày 21 Bảng 2.2 Cơng thức thí nghiệm tỷ lệ nảy mầm hạt 23 Bảng 2.3 Công thức thí nghiệm ảnh hưởng loại hom kích thước hom đến tỷ lệ sống hom giâm 25 Bảng 2.4 Cơng thức thí nghiệm ảnh hưởng loại chất nồng độ chất kích thích sinh trưởng đến tỷ lệ sống hom giâm 26 Bảng 2.5 Cơng thức thí nghiệm ảnh hưởng thời vụ đến tỷ lệ sống hom giâm 26 Bảng 3.1 Đặc điểm hình thái lồi Hồng liên rơ dày 31 Bảng 3.2 Dẫn liệu bổ sung tiêu đặc điểm hình thái lồi Hồng liên ô rô dày 35 Bảng 3.3 Mật độ cá thể lồi Hồng liên rơ dày 37 Bảng 3.4 Đặc điểm tự nhiên khu vực Hồng liên rô dày phân bố 38 Bảng 3.5 Đặc điểm tự nhiên khu vực lồi Hồng liên rơ dày (Mahonia bealei) lồi Hồng liên rơ (Mahonia nepalensis) phân bố 39 Bảng 3.6 Các loài thực vật chủ yếu điểm nghiên cứu có lồi Hồng liên rơ dày phân bố 40 Bảng 3.7 Một số tiêu hạt Hồng liên rơ dày 43 Bảng 3.8 Kết theo dõi độ nảy mầm hạt Hồng liên rơ dày 44 Bảng 3.9 Ảnh hưởng loại hom kích thước hom đến tỷ lệ sống hom 46 Bảng 3.10 Ảnh hưởng loại hom kích thước hom đến hiệu giâm hom Hồng liên rơ dày sau 90 ngày 47 Bảng 3.11 Ảnh hưởng loại chất nồng độ chất kích thích sinh trưởng đến tỷ lệ sống hom 50 Bảng 3.12 Ảnh hưởng loại chất kích thích sinh trưởng nồng độ chúng đến hiệu nhân giống lồi Hồng liên rơ dày sau 90 ngày 52 Bảng 3.13 Ảnh hưởng thời vụ giâm hom đến tỷ lệ hình thành hom Hồng liên rơ dày 54 Bảng 3.14 Ảnh hưởng thời vụ đến hiệu nhân giống lồi Hồng liên rơ dày sau 90 ngày 55 Volume 12 Issue 10 Pages 1529-1672 2017 ISSN 1934-578X (printed); ISSN 1555-9475 (online) www.naturalproduct.us NPC Natural Product Communications EDITOR-IN-CHIEF DR PAWAN K AGRAWAL Natural Product Inc 7963, Anderson Park Lane, Westerville, Ohio 43081, USA agrawal@naturalproduct.us EDITORS PROFESSOR ALEJANDRO F BARRERO Department of Organic Chemistry, University of Granada, Campus de Fuente Nueva, s/n, 18071, Granada, Spain afbarre@ugr.es PROFESSOR MAURIZIO BRUNO Department STEBICEF, University of Palermo, Viale delle Scienze, Parco d’Orleans II - 90128 Palermo, Italy maurizio.bruno@unipa.it PROFESSOR VLADIMIR I KALININ G.B Elyakov Pacific Institute of Bioorganic Chemistry, Far Eastern Branch, Russian Academy of Sciences, Pr 100-letya Vladivostoka 159, 690022, Vladivostok, Russian Federation kalininv@piboc.dvo.ru PROFESSOR YOSHIHIRO MIMAKI School of Pharmacy, Tokyo University of Pharmacy and Life Sciences, Horinouchi 1432-1, Hachioji, Tokyo 192-0392, Japan mimakiy@ps.toyaku.ac.jp PROFESSOR STEPHEN G PYNE Department of Chemistry, University of Wollongong, Wollongong, New South Wales, 2522, Australia spyne@uow.edu.au PROFESSOR MANFRED G REINECKE Department of Chemistry, Texas Christian University, Forts Worth, TX 76129, USA m.reinecke@tcu.edu PROFESSOR WILLIAM N SETZER Department of Chemistry, The University of Alabama in Huntsville, Huntsville, AL 35809, USA wsetzer@chemistry.uah.edu PROFESSOR PING-JYUN SUNG National Museum of Marine Biology and Aquarium Checheng, Pingtung 944 Taiwan pjsung@nmmba.gov.tw PROFESSOR YASUHIRO TEZUKA Faculty of Pharmaceutical Sciences, Hokuriku University, Ho-3 Kanagawa-machi, Kanazawa 920-1181, Japan y-tezuka@hokuriku-u.ac.jp PROFESSOR DAVID E THURSTON Institute of Pharmaceutical Science Faculty of Life Sciences & Medicine King’s College London, Britannia House Trinity Street, London SE1 1DB, UK david.thurston@kcl.ac.uk HONORARY EDITOR PROFESSOR GERALD BLUNDEN The School of Pharmacy & Biomedical Sciences, University of Portsmouth, Portsmouth, PO1 2DT U.K axuf64@dsl.pipex.com ADVISORY BOARD Prof Giovanni Appendino Novara, Italy Prof Norbert Arnold Halle, Germany Prof Yoshinori Asakawa Tokushima, Japan Prof Vassaya Bankova Sofia, Bulgaria Prof Roberto G S Berlinck São Carlos, Brazil Prof Anna R Bilia Florence, Italy Prof Geoffrey Cordell Chicago, IL, USA Prof Fatih Demirci Eskişehir, Turkey Prof Francesco Epifano Chieti Scalo, Italy Prof Ana Cristina Figueiredo Lisbon, Portugal Prof Cristina Gracia-Viguera Murcia, Spain Dr Christopher Gray Saint John, NB, Canada Prof Dominique Guillaume Reims, France Prof Duvvuru Gunasekar Tirupati, India Prof Hisahiro Hagiwara Niigata, Japan Prof Judith Hohmann Szeged, Hungary Prof Tsukasa Iwashina Tsukuba, Japan Prof Leopold Jirovetz Vienna, Austria Prof Phan Van Kiem Hanoi, Vietnam Prof Niel A Koorbanally Durban, South Africa Prof Chiaki Kuroda Tokyo, Japan Prof Hartmut Laatsch Gottingen, Germany Prof Marie Lacaille-Dubois Dijon, France Prof Shoei-Sheng Lee Taipei, Taiwan Prof M Soledade C Pedras Saskatoon, Canada Prof Luc Pieters Antwerp, Belgium Prof Peter Proksch Düsseldorf, Germany Prof Phila Raharivelomanana Tahiti, French Polynesia Prof Stefano Serra Milano, Italy Dr Bikram Singh Palampur, India Prof Leandros A Skaltsounis Zografou, Greece Prof John L Sorensen Manitoba, Canada Prof Johannes van Staden Scottsville, South Africa Prof Valentin Stonik Vladivostok, Russia Prof Winston F Tinto Barbados, West Indies Prof Sylvia Urban Melbourne, Australia Prof Karen Valant-Vetschera Vienna, Austria INFORMATION FOR AUTHORS Full details of how to submit a manuscript for publication in Natural Product Communications are given in Information for Authors on our Web site http://www.naturalproduct.us Authors may reproduce/republish portions of their published contribution without seeking permission from NPC, provided that any such republication is accompanied by an acknowledgment (original citation)-Reproduced by permission of Natural Product Communications Any unauthorized reproduction, transmission or storage may result in either civil or criminal liability The publication of each of the articles contained herein is protected by copyright Except as allowed under national “fair use” laws, copying is not permitted by any means or for any purpose, such as for distribution to any third party (whether by sale, loan, gift, or otherwise); as agent (express or implied) of any third party; for purposes of advertising or promotion; or to create collective or derivative works Such permission requests, or other inquiries, should be addressed to the Natural Product Inc (NPI) A photocopy license is available from the NPI for institutional subscribers that need to make multiple copies of single articles for internal study or research purposes To Subscribe: Natural Product Communications is a journal published monthly 2017 subscription price: US$2,595 (Print, ISSN# 1934-578X); US$2,595 (Web edition, ISSN# 1555-9475); US$2,995 (Print + single site online); US$595 (Personal online) Orders should be addressed to Subscription Department, Natural Product Communications, Natural Product Inc., 7963 Anderson Park Lane, Westerville, Ohio 43081, USA Subscriptions are renewed on an annual basis Claims for nonreceipt of issues will be honored if made within three months of publication of the issue All issues are dispatched by airmail throughout the world, excluding the USA and Canada NPC Natural Product Communications Non-alkaloid Constituents from Mahonia bealei 2017 Vol 12 No 10 1619 - 1621 Bui Van Thanha, Nguyen Thi Van Anha, Do Hoang Giangb, Nguyen Hai Dangb, Luu Dam Ngoc Anhc, Bui Van Huongc, Ngo Duc Phuongd and Nguyen Tien Datb,* a Institute of Ecology and Biological Resources, Vietnam Academy of Science and Technology (VAST), 18-Hoang Quoc Viet, Cau Giay, Hanoi, Vietnam b Department of Bioactive Products, Institute of Marine Biochemistry, VAST, 18-Hoang Quoc Viet, Cau Giay, Hanoi, Vietnam c Vietnam National Museum of Nature, VAST, 18-Hoang Quoc Viet, CauGiay, Hanoi d Hanoi University of Science, Vietnam National University, Hanoi, Vietnam ngtiend@imbc.vast.vn Received: March 21st, 2017; Accepted: June 10th, 2017 A phytochemical investigation of an ethyl acetate fraction of Mahonia bealei trunks led to the isolation of three new and four known compounds By means of NMR and MS spectroscopic methods, the structure of the new compounds was elucidated as bishexadecyl epiphyllate (1), 3-(4-hydroxy-3,5dimethoxyphenyl)-3-ethoxy-2-sulfopropane-1-ol (2), and 6α-acetoxystigmastan-3β-ol (3) Keywords: Mahonia bealei, Berberidaceae, Bishexadecyl epiphyllate, 6α-Acetoxystigmastan-3β-ol In Vietnamese traditional medicine, Mahonia bealei (Fortune) Pynaert (Berberidaceae) is used to treat gastrointestinal disorders, diarrhea, pimples, and acne [1] Previous studies have shown that M bealei has anti-inflammatory, anti-oxidative, antiproliferative, anti-influenza, and antimicrobial activities [2a-d] Previous chemical investigations concentrated on the alkaloid compounds in this plant [3a-c] The current paper describes the isolation and structural elucidation of non-alkaloid constituents (Figure 1) from the methanol extract of M bealei The isolated compounds included a new lignan (1), a new phenylpropanol (2), and a new stigmasterol (3), together with methyl syringate (4), yangambin (5), epiyangambin (6), and daucosterol (7) The 1H-NMR spectrum of showed the presence of three aromatic singlets at δH 7.47 (1H, s, H-7), 6.80 (1H, s, H-2), and 6.51 (1H, s, H-5); two ortho-coupled protons at δH 6.60 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5′) and 6.38 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-6′); two methine protons at δH 4.35 (1H, d, J = 2.5 Hz, H-7′) and 3.89 (1H, d, J = 2.5 Hz, H-8′); two pairs of oxygenated methylenic protons at δH 4.09 (2H, t, J = 6.5 Hz, H-1′′) and 3.97 (2H, t, J = 6.5 Hz, H-1′′′); and a broad triplet characteristic of alkyl methyl protons at 0.87 (6H, t, J = 6.5 Hz, H16′′, 16′′′) The 13C-NMR and HSQC-DEPT spectra of revealed a 1,3,4-tri- and a 1,3,4,6-tetrasubstituted benzene ring; two carboxylic groups at δC 167.8 (C-9) and 174.0 (C-9′); a double-bond at δC 138.4 (C-7) and 121.9 (C-8); and two methines at δC 45.4 (C-7′) and 47.6 (C-8′) These data were identical to those reported for the epiphyllic acid moiety [4] The small coupling constant (2.5 Hz) suggested the trans relationship between H-7′ and H-8′ [5] Two fatty alcohols were also recognized from the signals characteristic of oxygenated methylenes (δ C 65.8 and 65.4), long-chain methylenes (δC 22.6-31.8), and methyl (δC 14.1) The HMBC correlations (Figure 1) from the methylenic protons δH 4.09 and 3.97 to C-9 and C-9′, respectively, indicated that was a bisalkyl epiphyllate High-resolution electrospray ionization mass spectrometry (HR-ESI-MS) revealed an ion peak at m/z 807.5761 [M + H]+, which confirmed the molecular formula of C50H78O8 of The fragment ions at m/z 357.0614 [M – C32H66 + H]+ and 225.2592 Figure 1: Structure and key HMBC () and NOESY () correlations of compounds 1-3 [C16H33]+ suggested the presence of two hexadecyl moieties Accordingly, compound was identified as bishexadecyl epiphyllate The molecular formula of was determined to be C13H21O8S from the ion peak at m/z 337.0963 [M + H]+ A strong S=O stretching band at 1215 cm-1 in the IR spectrum also indicated the presence of sulfonic acid [6] The 1H-NMR spectrum of showed a methyl triplet at δH 1.10 (3H, t, J = 7.0 Hz, H-2′), the broad singlet of two methoxy groups (δH 3.75), six deshielded aliphatic protons (δH 3.334.46), and two-proton aromatic singlets at δH 6.60 (2H, br s, H-2, 6) The 13C-NMR data of were almost identical to those of 3-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-3-ethoxypropane-1,2-diol [7], except for the difference in C-8, which appeared at δC 66.3 This 1620 Natural Product Communications Vol 12 (10) 2017 upfield shift was approximately ppm from similar compounds [7-9], which suggested the presence of a sulfonic group instead of a hydroxyl group at C-8 [9] Therefore, compound was determined to be 3-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-3-ethoxy-2sulfopropane-1-ol Compound was obtained as a white solid and its HR-ESI-MS spectrum revealed the ion peak at m/z 475.4145 [M + H]+ corresponding to the molecular formula C31H54O3 The 1H-NMR spectrum of showed two oxygenated methine protons at δH 4.67 (1H, dt, J = 4.5, 11.0 Hz, H-6) and 3.55 (1H, m, H-3); three methyl singlets at δH 2.02 (3H, br s, CH3CO), 0.86 (3H, s, H-19), and 0.64 (3H, br s, H-18); a methyl doublet at δH 0.90 (3H, d, J = 6.5 Hz, H21); two interchangeable methyl protons at 0.81 (3H, d, J = 6.5 Hz, H-26) and 0.83 (3H, d, J = 6.5 Hz, H-27); and a methyl triplet 0.84 (3H, t, J = 6.5 Hz, H-29) The 13C-NMR and HSQC-DEPT spectra of showed the presence of 31 signals, including seven CH3, eleven CH2, ten CH, and three C atoms The signals at δC 170.8 and 21.2 were characteristic of an acetoxy moiety, while the other 29 signals were assigned to stigmastane-3,6-diol [10] The downfield chemical shift of C-6 (δC 72.5 in / 69.5 in stigmastan-3,6-diol) and the HMBC correlation (Figure 1) from H-6 (δH 4.67) to the carboxylic group (δC 170.8) indicated that the acetoxy moiety was attached to C-6 The relative configuration of was established based on its NMR data compared with the literature The chemical shift of C-19 at δC 13.3 was in agreement with the trans-trans conformation for the A/B and B/C ring junctions [11] This conformation was confirmed by the presence of the NOE relationship between H-6 and H-19 and the lack of H-5/H-19 NOE cross-peak in the NOESY spectrum (Figure 1) The β orientation of the hydroxy group at C-3 was deduced from the NOESY correlation of H-3/H-5 By contrast, the α-orientation of the acetoxy group was deduced from the H-6/H-19 NOESY correlation and the small coupling constant between H-5 and H-6 (J = 4.5 Hz) corresponding to the axial-equatorial relationship Therefore, compound was determined to be 6α-acetoxystigmastan-3β-ol Experimental General: Optical rotations were recorded a JASCO P-2000 digital polarimeter The IR spectrum was obtained from a Tensor 37 FT-IR spectrometer The NMR spectra were recorded on a Bruker AM500 FT-NMR spectrometer using tetramethylsilane (TMS) as the internal standard The HR-ESI-MS was obtained using an API QSTAR PULSAR I of Applied Biosystem Plant material: The trunks of Mahonia bealei were collected from Lao Cai province, Vietnam in Jun 2016 The sample was identified by one of the authors (BVT) and a voucher specimen (M-186.2016) was deposited at the herbarium of the Institute of Ecology and Biological Resources Extraction and isolation: The air-dried and powdered materials (5 kg) were extracted with methanol (5 L × times) in an ultrasonic bath for 30 The combined extracts were concentrated under a vacuum to obtain a crude residue (262 g), which was then resuspended in N HCl (2 L) and extracted with ethyl acetate (each L × times) The organic layers were concentrated (24.9 g) and chromatographed on a silica gel column eluted by a 1%–100% gradient of ethyl acetate in n-hexane to afford nine fractions, F1–F9 Fraction F4 was fractionated in a silica gel column using a gradient of n-hexane:ethyl acetate (4:1 v/v), affording three subfractions Thanh et al F4.1–F4.3 Compound (2.8 mg) was purified from F4.1 by silica gel column chromatography using dichloromethane:methanol (70:1 v/v) as the mobile phase Compound (10.3 mg) was isolated from F4.3 by silica gel column chromatography eluted with nhexane:ethyl acetate (6:1 v/v) Fraction F5 was fractionated in a silica gel column using a gradient of dichloromethane:methanol (40:1 v/v) affording (9.2 mg) and (6.9 mg) and ten subfractions, F5.1–F5.10 Compound (11.0 mg) was isolated from F5.3 by silica gel column chromatography using n-hexane:ethyl acetate (3:1 v/v) Compounds (19.9 mg) and (15.0 mg) were purified from F7 by silica gel column chromatography eluted with dichloromethane:methanol (25:1 v/v) Bishexadecyl epiphyllate (1) Rf: 0.50 (n-hexane-ethyl acetate, 1:1) [α]D24: +34.8 (c 0.2, CH2Cl2) H NMR (500 MHz, CDCl3): δH 7.47 (1H, s, H-7), 6.80 (1H, s, H-2), 6.60 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5′), 6.51 (1H, s, H-5), 6.38 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-6′), 6.43 (1H, s, H-2′), 4.35 (1H, d, J = 2.5 Hz, H-7′), 4.09 (1H, t, J = 6.5 Hz, H-1′′), 3.97 (1H, t, J = 6.5 Hz, H-1′′′), 3.89 (1H, d, J = 2.5 Hz, H-8′), 1.25-1.62 (m, -CH2-), 0.87 (6H, t, J = 6.5 Hz, H-16′′, 16′′′) 13 C NMR (125 MHz, CDCl3): δC 124.0 (C-1), 116.0 (C-2), 143.1 (C-3), 146.4 (C-4), 116.0 (C-5), 130.3 (C-6), 138.4 (C-7), 121.9 (C-8), 167.8 (C-9), 135.0 (C-1′), 114.7 (C-2′), 143.5 (C-3′), 142.7 (C-4′), 115.3 (C-5′), 119.8 (C-6′), 45.4 (C-7′), 47.6 (C-8′), 174.0 (C-9′), 65.8 (C-1′′), 65.4 (C-1′′′), 28.6 (C2′′), 28.4 (C2′′′), 25.9 (C-3′′), 25.7 (C-3′′′), 31.8 (C-14′′, 14′′′), 22.6 (C-15′′, 15′′′), 14.1 (C-16′′, 16′′′) HR-ESI-MS: m/z 807.5761 [M + H]+ (calcd for C50H79O8: 807.5775); 357.0614 [M – C32H66 + H]+ (calcd for C18H13O8: 357.0610]; 225.2592 [C16H33]+, calcd for C16H34: 225.2582] 19.9 mg (3.98×10-6% of dried weight) 3-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-3-ethoxy-2-sulfopropane-1ol (2) Rf: 0.25 (n-hexane-ethyl acetate, 2:1) [α]D24: +11.6 (c 0.05, EtOAc) IR (KBr, film): 3360, 1425, 1215, 1054 cm-1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δH 6.60 (2H, br s, H-2, 6), 4.46 (1H, d, J = 6.0 Hz, H-7), 4.17 (1H, ddd, J = 4.5, 6.0, 6.5 Hz, H-8), 3.75 (6H, br s, OCH3), 3.67 (1H, dd, J = 4.5, 12.0 Hz, H-9a), 3.61 (1H, dd, J = 6.5, 12.0 Hz, H-9b), 3.33 (2H, q, J = 7.0 Hz, H-1′), 1.10 (3H, t, J = 7.0 Hz, H-2′) 13 C NMR (125 MHz, DMSO-d6): δC 128.3 (C-1), 105.1 (C-2, 6), 147.6 (C-3, 5), 135.1 (C-4), 80.7 (C-7), 66.3 (C-8), 62.0 (C-9), 63.9 (C-1′), 15.1 (C-2′), 55.9 (OCH3) HR-ESI-MS: m/z 337.0963 [M + H]+ (calcd for C13H21O8S: 337.0957) 2.8 mg (0.56 ×10-6% of dried weight) 6α-Acetoxystigmastan-3β-ol (3) Rf: 0.25 (CH2Cl2-MeOH, 80:1) [α]D24: +24.3 (c 0.1, CH2Cl2) H NMR (500 MHz, CDCl3): δH 4.67 (1H, dt, J = 4.5, 11.0 Hz, H-6), 3.55 (1H, m, H-3), 2.02 (3H, br s, CH3CO),1.65 (1H, m, H-25), 1.49 (1H, m, H-8), 1.22 (1H, m, H-5), 0.90 (3H, d, J = 6.5 Hz, H-21), 0.86 (s, H-19), 0.64 (3H, br s, H-18), 0.81 (3H, d, J = 6.5 Hz, H-26), 0.83 (3H, d, J = 6.5 Hz, H-27), 0.84 (3H, t, J = 6.5 Hz, H-29) 13 C NMR (125 MHz, CDCl3): δC 37.2 (C-1), 31.2 (C-2), 71.0 (C-3), 32.2 (C-4), 48.7 (C-5), 72.5 (C-6), 37.7 (C-7), 34.1 (C-8), 53.7 (C-9), 36.6 (C-10), 21.1 (C-11), 39.9 (C-12), 42.6 (C-13), 56.2 (C-14), 24.1 (C-15), 28.1 (C-16), 56.1 (C-17), 11.9 (C-18), 13.3 Non-alkaloid constituents from Mahonia bealei (C-19), 36.1 (C-20), 18.7 (C-21), 33.9 (C-22), 26.1 (C-23), 45.8 (C24), 29.1 (C-25), 19.8 (C-26), 19.0 (C-27), 23.1 (C-28),12.0 (C-29), 170.8 (C=O), 21.2 (CH3CO) HR-ESI-MS: m/z 475.4145 [M + H]+ (calcd for C31H55O3: 475.4151) Natural Product Communications Vol 12 (10) 2017 1621 11.0 mg (2.2 ×10-6% of dried weight) Acknowledgments - This work is supported by the Vietnam Academy of Science and Technology (grant code VAST.DLT.04/15-16) and the National Foundation for Science and Technology Development (grant code 106.NN.03-2016.49) References [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] [10] [11] Vo VC (2012) Dictionary of Vietnamese Medicinal Plants, vol I Medicine Publisher, Ho Chi Minh City, Vietnam, pp 1114-1115 (a) Hu W, Wu L, Qiang Q, Ji L, Wang X, Luo H, Wu H, Jiang Y, Wang G, Shen T (2016) The dichloromethane fraction from Mahonia bealei (Fort.) Carr leaves exerts an anti-inflammatory effect both in vitro and in vivo Journal of Ethnopharmacology, 188, 134-143; (b) Hu W, Yu L, Wang MH (2011) Antioxidant and antiproliferative properties of water extract from Mahonia bealei (Fort.) Carr leaves Food and Chemical Toxicology, 49, 799-806; (c) Li AR, Zhu Y, Li XN, Tian XJ (2007) Antimicrobial activity of four species of Berberidaceae Fitoterapia, 78, 379381; (d) Zeng X, Dong Y, Sheng G, Dong X, Sun X, Fu J (2006) Isolation and structure determination of anti-influenza component from Mahonia bealei Journal of Ethnopharmacology, 108, 317-319 (a) Ma WK, Li H, Dong CL, He X, Guo CR, Zhang CF, Yu CH, Wang CZ, Yuan CS (2016) Palmatine from Mahonia bealei attenuates gut tumorigenesis in ApcMin/+ mice via inhibition of inflammatory cytokines Molecular Medicine Reports, 14, 491-498; (b) Zhang SL, Li H, He X, Zhang RQ, Sun YH, Zhang CF, Wang CZ, Yuan CS (2014) Alkaloids from Mahonia bealei possess anti-H⁺/K⁺-ATPase and anti-gastrin effects on pyloric ligation-induced gastric ulcer in rats Phytomedicine, 21, 1356-1363; (c) Zhang L, Zhu W, Zhang Y, Yang B, Fu Z, Li X, Tian J (2014) Proteomics analysis of Mahonia bealei leaves with induction of alkaloids via combinatorial peptide ligand libraries Journal of Proteomics, 110, 59-71 Cullmann F, Adam KP, Becker H (1993) Bisbibenzyls and lignans from Pellia epiphylla Phytochemistry, 34, 831-834 Sakakibara I, Ikeya Y, Hayashi K, Mitsuhashi H (1992) Three phenyldihydronaphthalene lignanamides from fruits of Cannabis sativa Phytochemistry, 31, 3219-3223 De Marino S, Iorizzi M, Zollo F, Debitus C, Menou JL, Ospina LF, Alcaraz MJ, Paya M (2000) New pyridinium alkaloids from a marine sponge of the genus Spongia with a human phospholipase A2 inhibitor profile Journal of Natural Products, 63, 322-326 Lee TH, Kuo YC, Wang GJ, Kuo YH, Chang CI, Lu CK, Lee CK (2002) Five new phenolics from the roots of Ficus beecheyana Journal of Natural Products, 65, 1497-1500 Shi C, Xu MJ, Bayer M, Deng ZW, Kubbutat MH, Wätjen W, Proksch P, Lin WH (2010) Phenolic compounds and their anti-oxidative properties and protein kinase inhibition from the Chinese mangrove plant Laguncularia racemosa Phytochemistry, 71, 435-442; Lin S, Wang S, Liu M, Gan M, Li S, Yang Y, Wang Y, He W, Shi J (2007) Glycosides from the stem bark of Fraxinus sieboldiana Journal of Natural Products, 70, 817-823; Kosugi Y, Konishi H (1984) Empirical equations for 13C NMR chemical shifts of alkanesulfonic acids Bunseki Kagaku, 33, E47-E53 (a) Garcez FR, Garcez WS, Miguel DLS, Serea AAT, Prado FC (2003) Chemical constituents from Terminalia glabrescens Journal of the Brazilian Chemical Society, 14, 461-465; (b) Luo Y, Liu Y, Qi H, Wu Z, Zhang G (2006) Steryl esters and phenylethanol esters from Syringa komarowii Steroids, 71, 700-705 Cachet N, Regalado EL, Genta-Jouve G, Mehiri M, Amade P, Thomas OP (2009) Steroidal glycosides from the marine sponge Pandaros acanthifolium Steroids, 74, 746-750 Natural Product Communications Vol 12 (10) 2017 Published online (www.naturalproduct.us) Pseudoalteromone C: a Novel Ubichromenol Derivative from Bacterium Pseudoalteromonas sp CGH2XX Isolated from the Cultured-type Octocoral Lobophytum crassum Yu-Hsin Chen, Wu-Fu Chen, Juan-Cheng Yang, Mei-Chin Lu, Jimmy Kuo, Jui-Hsin Su, Ching-Feng Weng, Yang-Chang Wu and Ping-Jyun Sung Non-alkaloid Constituents from Mahonia bealei Bui Van Thanh, Nguyen Thi Van Anh, Do Hoang Giang, Nguyen Hai Dang, Luu Dam Ngoc Anh, Bui Van Huong, Ngo Duc Phuong and Nguyen Tien Dat Zingerone Suppresses the Shedding of Endothelial Protein C Receptor In-Chul Lee, Dae Yong Kim and Jong-Sup Bae Suppressive Effects of Sulforaphane on TGFBIp-mediated Sepsis In-Chul Lee and Jong-Sup Bae Enzyme-treated Asparagus Extract (ETAS) Enhances Memory in Normal Rats and Induces Neurite-outgrowth in PC12 Cells Tomoko Koda, Jun Takanari, Kentaro Kitadate and Hideki Imai In Vivo and In Vitro Evidence for the Antihyperuricemic, Anti-inflammatory and Antioxidant Effects of a Traditional Ayurvedic Medicine, Triphala Vilasinee Hirunpanich Sato, Bunleu Sungthong, Narawat Nuamnaichati, Prasob-orn Rinthong, Supachoke Mangmool and Hitoshi Sato Comparison of Volatiles of Sideritis caesarea Specimens Collected from Different Localities in Turkey Tuğba Günbatan, Betül Demirci, İlhan Gürbüz, Fatih Demirci and Aye Mine Genỗler ệzkan Chemical Composition of Essential Oil among Seven Populations of Zanthoxylum armatum from Himachal Pradesh: Chemotypic and Seasonal Variation Vinod Bhatt, Sushila Sharma, Neeraj Kumar, Upendra Sharma and Bikram Singh Composition, in vitro Antibacterial and Anti-mildew Fungal Activities of Essential Oils from Twig and Fruit Parts of Eucalyptus citriodora Yu-Chang Su, Kuang-Ping Hsu and Chen-Lung Ho Antibacterial, Antiviral, Antioxidant and Antiproliferative Activities of Thymus guyonii Essential Oil Assia Zeghib, Ahmed Kabouche, Souheila Laggoune, Claude-Alain Calliste, Alain Simon, Philippe Bressolier, Mahjoub Aouni, Jean-Luc Duroux and Zahia Kabouche Chemoinformatic Investigation of Antibiotic Antagonism: The Interference of Thymus glabrescens Essential Oil Components with the Action of Streptomycin Budimir S Ilić, Dragoljub L Miladinović, Branislava D Kocić, Boban R Spalović, Marija S Marković, Hristina Čolović and Dejan M Nikolić Insecticidal Effect of Essential Oils Against Fall Webworm (Hypantria cunea Drury (Lepidoptera: Arctiidae)) Temel Gokturk, Saban Kordali and Ayse Usanmaz Bozhuyuk 1615 1619 1623 1627 1631 1635 1639 1643 1647 1651 1655 1659 Natural Product Communications 2017 Volume 12, Number 10 Contents Original Paper Page Fungal Biotransformation of Cyclademol and Antimicrobial Activities of Its Metabolites Ismail Kiran, Özge Özşen, K Hüsnü Can Başer and Fatih Demirci Quantitative Analysis and Pharmacological Effects of Artemisia ludoviciana Aqueous Extract and Compounds Isabel Rivero-Cruz, Gerardo Anaya-Eugenio, Araceli Pérez-Vásquez, Ana Laura Martínez and Rachel Mata Guaiane Sesquiterpenes from the Rhizome of Curcuma xanthorrhiza and Their Inhibitory Effects on UVB-induced MMP-1 Expression in Human Keratinocytes Ji-Hae Park, Mohamed Antar Aziz Mohamed, Nhan Nguyen Thi, Kyeong-Hwa Seo, Ye-Jin Jung, Sabina Shrestha, Tae Hoon Lee, Jiyoung Kim and Nam-In Baek Further Guaianolides from Chrysophthalmum montanum Perihan Gürbüz and Şengül D Doğan Anti-allergic and Cytotoxic Effects of Sesquiterpenoids and Phenylpropanoids Isolated from Magnolia biondii Thi Tuyet Mai Nguyen, Thi Thu Nguyen, Hyun-Su Lee, Bomi Lee, Byung Sun Min and Jeong Ah Kim Metabolomic and Proteomic Analysis of the Response of Angelica acutiloba after Herbivore Attack Risa Kato, Yusuke Morita, Atsutoshi Ina, Yoshiaki Tatsuo, Takayuki Tamura, Yasuhiro Tezuka and Ken Tanaka Two New Abietane-type Diterpenes from the Bark of Cryptomeria japonica Chi-I Chang, Chien-Chih Chen, Che-Yi Chao, Horng-Huey Ko, Hsun-Shuo Chang, Sheng-Yang Wang, Jih-Jung Chen, Cheng-Chi Chen and Yueh-Hsiung Kuo Complete Structure Elucidation of New Steviol Glycosides Possessing Glucose Units Isolated from Stevia rebaudiana Indra Prakash, Sangphyo Hong, Gil Ma, Cynthia Bunders, Krishna P Devkota, Romila D Charan, Catherine Ramirez and Tara M Snyder Cytotoxic Activities of Different Iranian Solanaceae and Lamiaceae Plants and Bioassay-Guided Study of an Active Extract from Salvia lachnocalyx Hossein H Mirzaei, Omidreza Firuzi, Ian T Baldwin and Amir Reza Jassbi Synthesis and Cytotoxic Evaluation of Betulin–Triazole–AZT Hybrids Dang Thi Tuyet Anh, Le Nhat Thuy Giang, Nguyen Thi Hien, Dinh Thi Cuc, Nguyen Ha Thanh, Nguyen Thi Thu Ha, Pham The Chinh, Nguyen Van Tuyen and Phan Van Kiem A Novel Cycloartane Triterpenoid Bisdesmoside from Actaea vaginata Qiongyu Zou, Meichun Wu, Yindi Zhu, Jinping Shen, Guoxu Ma, Xudong Xu, Gui Chen, Li Zhang, Zijian Zhao, Dizhao Chen and Haifeng Wu Triterpene Saponins from Wisteria floribunda “macrobotrys” and “rosea” Anne-Sophie Champy, Anne-Claire Mitaine-Offer, Thomas Paululat, Anna-Maria Papini and Marie-Aleth Lacaille-Dubois Magnumosides B3, B4 and C3, Mono- and Disulfated Triterpene Tetraosides from the Vietnamese Sea Cucumber Neothyonidium (= Massinium) magnum Alexandra S Silchenko, Anatoly I Kalinovsky, Sergey A Avilov, Vladimir I Kalinin, Pelageya V Andrijaschenko, Pavel S Dmitrenok, Ekaterina A Chingizova, Svetlana P Ermakova, Olesya S Malyarenko and Tatyana N Dautova Chemical Analysis of the Edible Mushroom Tricholoma populinum: Steroids and Sulfinyladenosine Compounds Bernadett Kovács, Zoltán Béni, Miklós Dékány, Orsolya Orbán-Gyapai, Izabella Sinka, István Zupkó, Judit Hohmann and Attila Ványolós A New Steroidal Glycoside Granulatoside C from the Starfish Choriaster granulatus, Unexpectedly Combining Structural Features of Polar Steroids from Several Different Marine Invertebrate Phyla Natalia V Ivanchina, Timofey V Malyarenko, Alla A Kicha, Anatoly I Kalinovsky, Pavel S Dmitrenok and Valentin A Stonik A Novel Cytotoxic Physalin from Physalis angulata Jia-Jia Fan, Xia Liu, Xi-Long Zheng, Hai Yu Zhao, Huan Xia and Yi Sun Efficient Bioproduction of Mycosporine-2-glycine, Which Functions as Potential Osmoprotectant, using Escherichia coli Cells Tanutcha Patipong, Takashi Hibino, Rungaroon Waditee-Sirisattha and Hakuto Kageyama Anti-inflammatory Effect of Discretamine, a Protoberberine Alkaloid Isolated from Duguetia moricandiana Danilo Eduardo Costa Vieira Lemos, Luiz Henrique Agra Cavalcante-Silva, Éssia de Almeida Lima, Adriano Francisco Alves, Ana Silvia Suassuna Carneiro Lúcio, José Maria Barbosa-Filho and Sandra Rodrigues Mascarenhas Asymmetric Synthesis of Tetrahydroisoquinoline Alkaloids Using Ellman's Chiral Auxiliary Y Vikram Reddy, Dhanraj O Biradar, B Jagan Mohan Reddy, Aravinda Rathod, M Himabindu and B V Subba Reddy Chemical Constituents of the Aerial Parts of Santolina chamaecyparissus and Evaluation of Their Antioxidant Activity Fatiha Labed, Milena Masullo, Antonietta Cerulli, Fadila Benayache, Samir Benayache and Sonia Piacente Phenolic Composition of Leaf extracts of Ailanthus altissima (Simaroubaceae) with Antibacterial and Antifungal Activity Equivalent to Standard Antibiotics Danijela Poljuha, Barbara Sladonja, Ivana Šola, Slavica Dudaš, Josipa Bilić, Gordana Rusak, Katlego E Motlhatlego and Jacobus N Eloff Synthesis of an Antileukemic Pyrone from Alternaria phragmospora Yang Qu and George A Kraus Continued inside backcover 1529 1531 1535 1539 1543 1547 1553 1557 1563 1567 1571 1573 1577 1583 1585 1589 1593 1595 1599 1605 1609 1613 Scanned by CamScanner Scanned by CamScanner Scanned by CamScanner Scanned by CamScanner Scanned by CamScanner ... DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VN VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT BÙI VĂN HƯỚNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC VÀ BIỆN PHÁP NHÂN GIỐNG LOÀI HOÀNG LIÊN Ô RÔ LÁ DÀY (MAHONIA. .. biện pháp nhân giống lồi Hồng liên rơ dày (Mahonia bealei (Fortune) Pynaert) làm sở cho công tác bảo tồn loài tỉnh Lào Cai" Mục tiêu nghiên cứu Mục tiêu chung: Xác định số đặc điểm sinh học yếu... hưởng đến khả nhân giống loài Hoàng liên ô rô dày (Mahonia bealei (Fortune) Pynaert) làm sở để bảo tồn loài Lào Cai Mục tiêu cụ thể: - Xác định số đặc điểm sinh học lồi Hồng liên rơ dày - Thử nghiệm