Nghiên cứu khả năng nhân nhanh lan hài giáp paphiopedilum malipoense bằng phương pháp in vitro

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TRỊNH THỊ TUYẾT NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN NHANH LAN HÀI GIÁP (Paphiopedilum malipoens) BẰNG PHƯƠNG PHÁP IN VITRO LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC ỨNG DỤNG THÁI NGUYÊN - 2016 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TRỊNH THỊ TUYẾT NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN NHANH LAN HÀI GIÁP ( Paphiopedilum malipoens) BẰNG PHƯƠNG PHÁP IN VITRO Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã số: 60.42.02.01 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC ỨNG DỤNG Người hướng dẫn khoa học: TS Nguyễn Văn Duy THÁI NGUYÊN - 2016 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi thực hiện dưới sự hướng dẫn TS Nguyễn Văn Duy Mọi trích dẫn luận văn ghi rõ nguồn gốc Các số liệu, kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa công bố công trình khác Tác giả luận văn Trịnh Thị Tuyết ii LỜI CẢM ƠN Lời xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Văn Duy ThS Nguyễn Thị Tình, Khoa CNSH - CNTP, Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên tận tình hướng dẫn, bảo giúp đỡ tơi suốt thời gian thực hiện hoàn thành luận văn Tôi xin cảm ơn thầy cô giáo anh chi ̣ kỹ thuật viên phịng thí nghiệm nuôi cấy mô tế bào thực vật , Khoa CNSH - CNTP, Trường đại học Đại học Nông Lâm Thái Nguyên tạo điều kiện giúp đỡ trình làm luận văn thạc sĩ Tơi xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Trường Đại học Khoa ho ̣c - Đại học Thái Nguyên, Ban chủ nhiệm khoa Khoa ho ̣c Sự số ng thầy cô giáo, cán Khoa, đặc biệt sự quan tâm, giúp đỡ các anh chi ̣kỹ thuâ ̣t viên phịng thí nghiệm Khoa Khoa ho ̣c sự sớ ng Tơi xin cảm ơn gia đình bạn bè ln bên cạnh ủng hộ, khuyến khích, động viên tạo động lực để tơi hồn thành luận văn Trong q trình làm luận văn khơng tránh khỏi sai sót, tơi mong nhận sự đóng góp q báu từ phía thầy bạn bè để tơi làm tốt Tác giả luận văn Trịnh Thị Tuyết iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT v DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục đích nghiên cứu Nội dung nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 4.1 Ý nghĩa khoa học 4.2 Ý nghĩa thực tiễn CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan phân loại đặc điểm lan Hài lan Hài Giáp 1.1.1 Đặc điểm thực vật học lan Hài (Paphiopedilum) 1.1.2 Đặc điểm thực vật học lan Hài Giáp 11 1.2 Khái quát nuôi cấy mô tế bào 15 1.2.1 Các vấn đề thường gặp nhân giống in vitro 15 1.2.2 Ưu nhược điểm phương pháp nuôi cấy mô 16 1.2.3 Quy trình nhân giống in vitro 18 1.2.4 Ứng dụng nuôi cấy mô nghiên cứu ứng dụng nông nghiệp 20 1.3 Tình hình nghiên cứu ni cấy mơ lan Hài giới nước 21 1.3.1 Trên giới 21 1.3.2 Trong nước 24 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 2.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 26 2.2 Phạm vi nghiên cứu 27 2.3 Địa điểm thời gian nghiên cứu 27 iv 2.4 Hóa chất thiết bị nghiên cứu 28 2.4.1 Hóa chất 28 2.4.2 Thiết bị 28 2.4.3 Dụng cụ 28 2.5 Phương pháp nghiên cứu 29 2.5.1 Phương pháp chuẩn bị môi trường điều kiện nuôi cấy 29 2.5.2 Phương pháp nuôi cấy in vitro 30 2.5.3 Phương pháp xử lí số liệu 32 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33 3.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng dung dịch HgCl2 0,1 % đến lan Hài Giáp 33 3.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng môi trường tới khả nảy mầm hạt lan Hài Giáp 35 3.3 Nghiên cứu ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng hợp chất hữu đến khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 36 3.3.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng BA tới khả nhân nhanh chồi lan hài Hài Giáp 36 3.3.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng BA kết hợp với NAA tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 39 3.3.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng dịch chiết chuối xanh tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 42 3.4 Kết nghiên cứu tạo in vitro hoàn chỉnh 45 3.4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA đến khả rễ lan Hài Giáp 45 3.4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA kết hợp với than hoạt tính tới khả rễ 48 3.5 Kết nghiên cứu ảnh hưởng giá thể tới khả sinh trưởng phát triển lan Hài Giáp 50 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 53 TÀI LIỆU THAM KHẢO 54 PHỤ LỤC v DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ADN: Deoxyribonucleic acid B5: Gamborg cs, 1976 BA : - benzyl amino purine CT : Công thức CS : Cộng sự ĐC : Đối chứng KC: Knudson C MS : Murashighe Skoog, 1962 NAA : Naphthalene acetic acid PCR: Polymerase Chain Reaction RAPD: Random Amplification of Polymorphic DNA THT : Than hoạt tính SH: Schenk and Hildebrandt, 1972 VW : Vacin and Went WPM : Woody Plant Medium – Lioyd Mc Cown, 1980 vi DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1: Các nhóm lan Hài Viê ̣t Nam theo thứ ̣ng bảo tồ n của Tổ chức Bảo tồ n Thiên nhiên Quố c tế (IUCN) Bảng 2.1: Hóa chất nghiên cứu 28 Bảng 2.2: Thiết bị nghiên cứu 28 Bảng 3.1: Kết nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng dung dịch HgCl2 0,1% đến lan Hài Giáp 33 Bảng 3.2: Kết nghiên cứu ảnh hưởng môi trường tới khả nảy mầm hạt 35 Bảng 3.3: Kết nghiên cứu ảnh hưởng BA tới khả nhân nhanh lan Hài Giáp 37 Bảng 3.4: Kết nghiên cứu ảnh hưởng BA kết hợp với NAA tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 40 Bảng 3.5: Kết nghiên cứu ảnh hưởng dịch chiết chuối xanh tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 43 Bảng 3.6: Ảnh hưởng NAA tới sự rễ 46 Bảng 3.7: Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA kết hợp với than hoạt tính ảnh hưởng tới khả rễ 48 Bảng 3.8: Sự phát triển lan Hài Giáp số giá thể ngồi mơi trường tự nhiên (sau tuần) 51 vii DANH MỤC HÌNH Hình 1.1: Hình thái lan Hài Giáp 13 Hình 2.1: Cây lan Hài Giáp 27 Hình 2.2: Sơ đồ thí nghiệm 29 Hình 3.1: Ảnh hưởng môi trường tới khả nảy mầm hạt sau 12 tuần 36 Hình 3.2: Ảnh hưởng BA tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 39 Hình 3.3: Ảnh hưởng BA kết hợp với NAA tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 42 Hình 3.4: Ảnh hưởng dịch chiết chuối xanh tới khả nhân nhanh lan Hài Giáp 44 Hình 3.5: Ảnh hưởng NAA tới khả rễ lan Hài Giáp 47 Hình 3.6: Ảnh hưởng NAA kết hợp với THT tới khả rễ lan Hài Giáp 50 Hình 3.7: Ảnh hưởng giá thể tới khả sinh trưởng phát triển lan Hài Giáp 52 MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Hoa lan người biết đến sớm từ 2.800 năm TCN, coi đỉnh cao tiến hóa lồi hoa Hiện giới với 800 chi 25.000 – 30.000 lồi Họ Lan (Orchidaceae) chiếm vị trí thứ hai sau họ Cúc (Asteraceae) ngành thực vật hạt kín [20] Vì hình thái, cấu tạo hệ thống phân loại họ đa đa dạng phức tạp Việt Nam quốc gia đánh giá có sự đa dạng sinh học phong phú, phong lan Việt Nam đa dạng số loài, màu sắc chủng loại với 140 loại phong lan chia thành 1000 giống nguyên thủy Chúng thường phân bố vùng rừng núi Cao Bằng, Sa Pa, Lào Cai, Huế, Hải Vân, Quy Nhơn, Kontum, Pleiku, Ban Mê Thuật, Phan Rang, Đà Lạt, Di Linh, v.v [13] Trong số lồi lan Việt Nam có nhiều quý điển hình giống Lan Hài (Paphiopedilum) gồm 66 loài phân bố từ Ấn Độ, New Ghine vùng Đông Nam Á, người Pháp gọi loài thuộc giống Hài Vệ Nữ Sabot de Venus người Anh dùng với ý nghĩa tương tự Lady's slippers [1] Hiện Việt Nam tìm thấy 22 lồi thuộc chi Paphiopedilum có lồi đặc hữu có giá trị xuất hiện Việt Nam lan Hài Đỏ, lan Hài Vàng, lan Hài Tía, lan Hài Trắng, lan Hài Vân, lan Hài Vân Duyên, lan Hài Đốm, lan Hài Lông hay lan Hài Râu,…[1] Lan Hài Giáp loài lan xuất hiện số tỉnh miền núi phía bắc Bắc Kạn, Hà Giang, Hịa Bình, Lạng Sơn, Sơn La,…Lồi sinh sống khu rừng nguyên sinh rậm, thường xanh rộng hỗn giao kim núi đá vơi kết tinh bị bào mịn mạnh độ cao từ 600 đến 1200m [16] Đây lồi lan Hài đặc biệt có hoa đẹp tao nhã với đài cánh hoa xanh cây, môi xám, xanh nhạt nhị lép trắng với chóp màu nâu tía, hoa có mùi thơm táo nhẹ Chúng có rộng kẻ chữ nhật đốm khảm xanh tươi xanh thẫm, đốm tím tía mặt dưới cụm hoa thường dài mang hoa to đơn Phụ lục 3: Thành phần môi trường B5 (Gamborg cs, 1976) Đa lượng Muối khoáng Nồng dộ (mg/l) (NH4)2SO4 134 CaCl2.2H2O 150 MgSO4.7H2O 246 KNO3 2.258 MnSO4.2H2O 10 KI 0.75 Na2MoO4.2H2O 0.25 Na2H2PO4.2H2O 150 ZnSO4.7H2O 2.0 Na2EDTA.2H2O 37.2 H3BO3 CoCl2.6H2O 0.025 CuSO4.5H2O 0.025 FeSO4.7H2O 27.8 Myo- inositol 100 Nicotinic acid Pyrodoxine HCl Thiamine 10 Đường 30 Vi lượng Các chất hữu Phụ lục 4: Kết xử lý số liệu 4.1 Nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng HgCl2 0,1% đến QUẢ Lan Hài Giáp Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ct 0 ct 229.7 45.94 29.508 ct 358.9 71.78 8.722 ct 305.8 61.16 7.103 ct 5 271.1 54.22 16.852 Df MS ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total SS 15380.42 F 3845.105 309.1666 248.74 20 15629.16 24 P-value F crit 1.13E-17 2.866081 12.437 Kết luận: Qua kết phân tích cho thấy F >F crit nên thời gian xử lý HgCl2 0,1% ảnh hưởng đến kết khử trùng lan Hài Giáp 4.2 Nghiên cứu ảnh hưởng môi trường tới khả nảy mầm hạt lan Hài Giáp Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ct1 67 22.33333 8.163333 ct2 254.1 ct3 215.8 71.93333 10.17333 ct4 188.8 62.93333 9.823333 84.7 17.01 ANOVA Source of Variation SS Df MS F P-value F crit Between Groups 6609.743 1652.436 142.6645 8.96E-09 3.47805 Within Groups 115.8267 10 11.58267 Total 6725.569 14 Kết luận: Qua kết nghiên cứu cho thấy F > Fcrit mơi trường khác có ảnh hưởng tới khả nảy mầm hạt 4.3 Nghiên cứu ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 4.3.1 Chỉ tiêu hệ số nhân chồi Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ct1 7.85 1.57 0.102 ct2 9.52 1.904 0.09758 ct3 12.05 2.41 0.03425 ct4 ct5 5 12.5 9.35 2.5 1.87 0.1148 0.052 ANOVA Source of Variation SS Between Groups Within Groups 3.081064 1.60252 0.770266 9.613184 0.000167 2.866081 20 0.080126 Total 4.683584 24 Df MS F P-value F crit Kết luận: Qua kết phân tích cho thấy F >F crit nên số hệ số nhân chồi khác sự khác hàm lượng BA khác 4.3.2 Chỉ tiêu chiều cao chồi Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count ct ct2 ct3 ct4 ct5 5 5 Sum Average Variance 9.85 9.95 9.65 9.8 7.65 1.97 1.99 1.93 1.96 1.53 0.0095 0.02175 0.0045 0.01675 0.047 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total SS Df MS 0.7576 0.398 20 1.1556 24 F P-value F crit 0.1894 9.517588 0.000177 2.866081 0.0199 Kết luận: Qua kết phân tích cho thấy F >F crit nên chiều cao chồi khác sự khác hàm lượng BA khác 4.4 Nghiên cứu ảnh hưởng BA kết hợp với NAA tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 4.4.1 Chỉ tiêu hệ số nhân chồi Anova: Two-Factor Without Replication SUMMARY Count Sum Average Variance BA mg/l 13.45 2.69 0.4055 BA mg/l 12.45 2.49 0.513 BA mg/l 14.13 2.826 0.31138 BA mg/l 14.92 2.984 0.34753 BA mg/l 13.95 2.79 0.288 NAA mg/l 9.6 1.92 0.02575 NAA 0,1 mg/l 14 2.8 0.15 NAA 0,3 mg/l 15.8 3.16 0.11675 NAA 0,5 mg/l 16.4 3.28 0.15595 NAA mg/l 13.1 2.62 0.137 ANOVA Source of Variation Rows Columns SS Df MS F P-value F crit 0.66576 0.16644 1.588888093 0.225425025 3.00691728 5.7856 1.4464 13.80778502 4.66784E-05 3.00691728 Error 1.67604 Total 8.1274 16 0.104753 24 Qua kết phân tích cho thấy: F rows (BA) < F crit (BA) nên hàm lượng BAkhông ảnh hưởng tới số chồi/ mẫu F colum (NAA) > F crit (NAA) nên hàm lượng NAA ảnh hưởng tới số chồi/ mẫu 4.4.2 Chỉ tiêu chiều cao chồi Anova: Two-Factor Without Replication SUMMARY Count Sum Average Variance BA mg/l 10.7 2.14 0.04425 BA mg/l 10.5 2.1 0.07875 BA mg/l 11.6 2.32 0.08075 BA mg/l 11.65 2.33 0.0311 BA mg/l 10.3 2.06 0.063 NAA mg/l 10.27 2.054 0.04808 NAA 0,1 mg/l 10.8 2.16 0.05675 NAA 0,3 mg/l 11.12 2.224 0.02813 NAA 0,5 mg/l 10.95 2.19 0.103 NAA mg/l 11.61 2.322 0.09442 ANOVA Source of Variation Rows SS Df MS F P-value F crit 0.32 0.08 1.278057353 0.319606187 3.00691728 Columns 0.18988 0.04747 8.758367282 0.567281274 3.00691728 Error 1.00152 Total 1.5114 16 0.062595 24 Qua kết phân tích cho thấy: F rows (BA) < F crit (BA) nên hàm lượng BA không ảnh hưởng tới chiều cao chồi F colum (NAA) > F crit (NAA) nên hàm lượng NAA ảnh hưởng tới chiều cao chồi 4.5 Nghiên cứu ảnh hưởng dịch chiết chuối tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 4.5.1 Chỉ tiêu hệ số nhân chồi Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ct1 9.55 1.91 0.0155 ct2 11.05 2.21 0.4905 ct3 13.8 2.76 0.05175 ct4 12.33 2.466 0.08378 ct5 11.82 2.364 0.18748 ANOVA Source of Variation SS Df MS F P-value F crit Between Groups 1.97316 0.49329 2.975175 0.044382 2.866081 Within Groups Total 3.31604 5.2892 20 0.165802 24 Kết luận: Vì F> Fcrit hàm lượng dịch chuối có ảnh hưởng tới tiêu hệ số nhân 4.5.2 Chỉ tiêu chiều cao chồi Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ct1 11.72 2.344 0.08693 ct2 9.9 1.98 0.01575 ct3 10.1 2.02 0.037 ct4 9.72 1.944 0.00668 ct5 9.47 1.894 0.05168 Df MS ANOVA Source of Variation SS F P-value F crit Between Groups Within Groups Total 0.634416 0.79216 1.426576 0.158604 4.004343 0.015183 2.866081 20 0.039608 24 Kết luận: Vì F> Fcrit hàm lượng dịch chuối có ảnh hưởng tới tiêu chiều cao chồi 4.6 Nghiên cứu ảnh hưởng NAA tới khả rễ lan Hài Giáp 4.6.1 Chỉ tiêu tỷ lệ chồi rễ Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ct 274.5 54.9 0.55 ct2 442.7 88.54 4.463 ct3 411 82.2 4.83 ct4 347.2 69.44 3.313 ct5 325.9 65.18 3.862 Df MS F ANOVA Source of Variation SS Within Groups Total F crit 5.02552 Between Groups P-value 3615.3704 903.8426 68.072 20 3683.4424 24 265.5549 E-17 2.866081402 3.4036 Kết luận: F > Fcrit nồng độ NAA có ảnh hưởng tới tiêu tỷ lệ chồi rễ 4.6.2 Chỉ tiêu số rễ/chồi SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ct1 10.09 2.018 0.03262 ct2 19.79 3.958 0.03832 ct3 18.5 3.7 0.075 ct4 15.6 3.12 0.037 ct5 14.4 2.88 0.057 ANOVA Source of Variation PSS Df MS F Between Groups value F crit 7.24E11.54746 2.886866 60.15808 11 2.866081 Within Groups Total 0.95976 12.50722 20 0.047988 24 Kết luận: Kết nghiên cứu cho thấy F > F crit nên nồng độ NAA ảnh hưởng tới tiêu số rễ/chồi 4.6.3 Chỉ tiêu chiều dài rễ Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ct1 11.3 2.26 0.028 ct2 18.2 3.64 0.053 ct3 17 3.4 0.065 ct4 15.22 3.044 0.05068 ct5 2.7 0.065 13.5 ANOVA Source of Variation SS Df MS F P-value F crit Between Groups 6.043744 1.510936 28.86992 4.68E-08 2.866081 Within Groups Total 1.04672 7.090464 20 0.052336 24 Kết luận: Kết nghiên cứu cho thấy F > F crit nên nồng độ NAA ảnh hưởng tới tiêu chiều dài rễ 4.7 Nghiên cứu ảnh hưởng NAA kết hợp với than hoạt tính 4.7.1 Chỉ tiêu tỷ lệ chồi rễ Anova: Two-Factor Without Replication SUMMARY Count NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l 5 5 Sum 398.9 398.4 410.2 400.7 393.8 Average 79.78 79.68 82.04 80.14 78.76 Variance 62.732 69.147 40.828 85.818 69.063 THT 0mg/l THT 0,5 mg/l THT mg/l THT 1,5 mg/l THT 2mg/l 350.1 386 457.3 415.6 393 70.02 77.2 91.46 83.12 78.6 2.107 4.375 3.343 2.902 9.115 ANOVA Source of Variation SS 29.188 1252.172 58.18 Rows Columns Error Total 1339.54 df 4 16 MS F P-va 7.297 2.006737711 0.14202 313.043 86.0895153 1.3056 3.63625 24 4.7.2 Chỉ tiêu số rễ/chồi Anova: Two-Factor Without Replication SUMMARY NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l THT 0mg/l THT 0,5 mg/l THT mg/l THT 1,5 mg/l THT 2mg/l Count 5 5 Sum 17.3 15.9 17.1 15.9 16.9 Average 3.46 3.18 3.42 3.18 3.38 Variance 0.178 0.182 0.287 0.217 0.257 14.4 16.2 19.5 18 15 2.88 3.24 3.9 3.6 0.057 0.053 0.065 0.115 0.025 ANOVA Source of Variation Rows SS 0.3616 df MS F 0.0904 1.609973286 Columns Error 3.5856 0.8984 16 0.8964 15.96438112 0.05615 Total 4.8456 24 P-value F crit 0.220173 3.006917 1.9209E05 3.006917 4.7.3 Chỉ tiêu chiều dài rễ Anova: Two-Factor Without Replication SUMMARY NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l THT 0mg/l THT 0,5 mg/l THT mg/l THT 1,5 mg/l THT 2mg/l Count 5 5 Sum 16.9 18 17.6 16.3 17.02 Average 3.38 3.6 3.52 3.26 3.404 5 5 15.1 16.6 19.2 17.5 17.42 3.02 3.32 3.84 3.5 3.484 MS F P-value F crit 0.086296 1.003488534 0.434525 3.00691728 0.445096 5.175775617 0.007189 3.00691728 0.085996 ANOVA Source of Variation Rows Columns Error SS 0.345184 1.780384 1.375936 df 4 16 Total 3.501504 24 Variance 0.032 0.25 0.117 0.158 0.23208 0.037 0.082 0.093 0.095 0.12328 4.8 Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể tới khả sinh trưởng phát triển lan Hài Giáp 4.8.1 Chỉ tiêu tỷ lệ sống Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ct1 325.3 65.06 5.743 ct2 379.9 75.98 1.502 ct3 350.7 70.14 1.523 ct4 452.2 90.44 4.428 ct5 425.2 85.04 2.568 MS F ANOVA Source of Variation SS df P-value F crit 3.349EBetween Groups Within Groups Total 2176.9384 544.2346 172.6194 63.056 20 2239.9944 24 15 2.8660814 3.1528 Kết luận: Kết nghiên cứu cho thấy F > F crit nên giá thể có ảnh hưởng tới tiêu tỷ lệ sống 4.8.2 Chỉ tiêu chiều cao Anova: Singl Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance CT1 23.2 4.64 1.208 CT2 24.7 4.94 0.583 CT3 30.1 4.8 0.587 CT4 27.4 6.02 0.192 CT5 24 5.48 0.41 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total SS Df MS 6.4456 11.92 20 18.3656 24 F P-value F crit 1.6114 2.703691 0.05982 2.866081 0.596 Kết luận: Kết nghiên cứu cho thấy F < F crit nên giá thể không ảnh hưởng tới tiêu chiều cao ... thuộc chi Paphiopedilum có lồi đặc hữu có giá trị xuất hiện Việt Nam lan Hài Đỏ, lan Hài Vàng, lan Hài Tía, lan Hài Trắng, lan Hài Vân, lan Hài Vân Duyên, lan Hài Đốm, lan Hài Lông hay lan Hài Râu,…[1]... 3.3 Nghiên cứu ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng hợp chất hữu đến khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 36 3.3.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng BA tới khả nhân nhanh chồi lan hài Hài Giáp ... THỊ TUYẾT NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN NHANH LAN HÀI GIÁP ( Paphiopedilum malipoens) BẰNG PHƯƠNG PHÁP IN VITRO Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã số: 60.42.02.01 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC ỨNG