MỤC LỤCBÀI 2. ĐỊNH TÍNH CÁC KHÁNG SINH PENICILLIN VÀ KIỂM ĐỊNH KHÁNG SINH CLORAMPHENICOL2BÀI 3. TỔNG HỢP KHÁNG SINH SULFACETAMID10BÀI 4. KIỂM ĐỊNH THUỐC KHÁNG LAO RIMIFON11BÀI 5. ĐIỀU CHẾ VÀ ĐỊNH TÍNH BẠC SULFADIAZIN19BÀI 6. KIỂM ĐỊNH VIÊN NÉN METHIONIN26BÀI 2. ĐỊNH TÍNH CÁC KHÁNG SINH PENICILLIN VÀ KIỂM ĐỊNH KHÁNG SINH CLORAMPHENICOLDụng cụ và hoá chất:Dụng cụ: Ống nghiệm và mặt kính đồng hồ Bình định mức 50; 100; 250; 500 mL. Cốc thủy tinh dung tích 50; 100; 250; 500 mL. Ống đong dung tích 10; 25; 50; 100 mL Phễu lọc thủy tinh dung tích 250 mL Giấy lọc, giấy quỳ tím Đũa khuấy bằng thủy tinh, bếp điện hoặc bể điều nhiệt Bể siêu âmHóa chất: Các chế phẩm penicillin G, penicillin V, amoxicillin, cloramphenicol Acid sulfuric đậm đặc Acid nitric 2% Hydroxylamin hydroclorid 1 N Formaldehyd Thuốc thử Fehling (gồm Fehling A và Fehling B) Natri hydroxid 10% Bạc nitrat 2%Nội dung thực hành I. ĐỊNH TÍNH CÁC KHÁNG SINH PENICILLIN1. Định tính chung: làm cùng lúc 3 chế phẩm ( Penicillin G, Penicillin V, Amoxicillin). Lấy vài tinh thể chế phẩm cho lên mặt kính đồng hồ. Pha dung dịch gồm 1ml hydroxylamin hydroclorid 1N và 0,3ml dung dịch NaOH 1N, thêm 2 giọt dung dịch mới pha vào mỗi phần chế phẩm, trộn đều từng phần chế phẩm. Sau 3 phút, cho thêm 1 giọt dung dịch acid acetic 1N vào mỗi phần chế phẩm, trộn. Thêm 1 giọt CuSO4.Quan sát hiện tượng: tủa màu xanh ngọc thạch. 2. Định tính phân biệt:2.1 Phản ứng màu với H2SO4 đậm đặc: cho một ít chế phẩm ( cỡ hạt gạo) lên mặt kính đồng hồ khô. Nhỏ 1 giọt H2SO4 đậm đặc vào quan sát ngay:Penicillin G: màu vàng nhạt.Penicillin V: màu vàng rất nhạt.Amoxicillin: màu vàng. 2.2 Phản ứng với thuốc thử Fehling: cho vài tinh thể chế phẩm vào ống nghiệm, thêm 1ml nước cất, lắc đều. Pha thuốc thử Fehling ( 1ml Fehling A + 1ml Fehling B + 6ml nước cất, trộn đều), cho 2ml hỗn hợp thuốc thử Fehling vào ống nghiệm, quan sát:Penicillin G: sau 5 phút chuyển qua màu xanh thẫm.Penicillin V: cho màu xanh.Amoxicillin: màu đỏ tím. II. Định tính Cloramphenicol: 1. Định tính: Cho một ít Cloramphenicol vào ống nghiệm, thêm 2ml dung dịch NaOH 10%. Đun cách thuỷ xuất hiện màu vàng, đun tiếp chuyển sang màu da cam. Đun đến sôi: NH3 bay lên, có tủa đỏ gạch xuất hiện. III. Câu hỏi thảo luận:Câu 1.Tại sao có tên vòng βlactam?Lactam là amid nội vòng. Vòng βlactam = azetidin – 2 – on, vòng lactam đóng ở vị trí β ở phản ứng trùng ngưng.Câu 2.Cơ chế của Penicillin? Vi khuẩn gram nào dễ bị tấn công hơn? Giải thích? Penicillin tấn công vào các enzym kiến tạo thành tế bào của vi khuẩn. Thành tế bào là một mạng lưới bao quanh và tạo cho vi khuẩn hình dạng cũng như sự toàn vẹn. Một khi thành này bị thủng, vi khuẩn sẽ chết. Betalactam gắn lên và làm bất hoạt transpeptidase (Penicillin Binding Protein) của vi khuẩn, enzyme này có vai trò gắn các chuỗi peptidoglycan (chủ yếu tạo thành bởi Nacetyl glucosamine và Nacetyl muranic acid) lại với nhau. Như vậy, vi khuẩn sẽ không gắn kết các chuỗi peptidoglycan lại để tạo thành vách được, vi khuẩn sẽ chết. Vách tế bào vi khuẩn Gram và Gram+ nhau và khác nhau ở những điểm cơ bản nào? Giống nhau ở chỗ vách của hai loại này đều có sự góp mặt của peptidoglycan nhưng khác nhau ở chỗ vi khuẩn Gram+ có lớp peptidoglycan dày hơn vi khuẩn Gram. Ở Gram, có thêm lớp outer membrane, lớp này là lipopolysaccharide và protein. Do cả Gram và Gram+ đều có cấu tạo vách bằng peptidoglycan nên Penicillin có thể tác động đến quá trình hình thành vách làm vi khuẩn chết đi. Tuy nhiên, do ở vi khuẩn Gram có thêm lớp outer membrane xem như lớp bảo vệ nên tác dụng của penicillin lên Gram thì ít hơn lên Gram+.Câu 3.Tại sao Penicillin G dùng đường tiêm, Pencillin V dùng đường uống?Penicillin G không uống được do điện tử tập trung nhiều ở amid nội vòng có xu hướng phá vỡ vòng để giải phóng điện tử, khi H+ (trong dịch vị) đi qua điện tử sẽ được cho H+ và vòng amid vỡ kháng sinh mất tác dụng.Penicillin V nhóm phenoxy hình thành tâm hút điện tử rất lớn hút điện tử giữ nguyên vòng amid bền trong acid dịch vị. .Câu 4.Tại sao Amoxcillin uống được?Amoxcillin uống được do cấu trúc tương tự phenicillin V, có nhóm amino hút điện tử nên vòng amid không bị phá vỡ trong môi trường H+ dạ dày.Câu 5.Fehling A, Fehling B là chất gì? Tại sao không trộn sẵn thuốc thử Fehling trước? Thuốc thử Fehling có 2 loại là Fehling A có công thức CuSO4 và Fehling B là hỗn hợp của NaOH với muối tartrate của Na và K có công thức NaOOCCHOHCHOHCOOK (trong đó OOCCHOHCHOHCOO là gốc tartrate) Khi trộn Fehling A và Fehling B với nhau thì lúc đầu sẽ xảy ra phản ứng tạo kết tủa Cu(OH)2, sau đó Cu(OH)2 phản ứng tiếp với muối tartrate tạo phức đồng tartrate màu xanh 2Na+ + 2C4H4O62 + 2K+ + Cu2+ + 2OH = Cu(C4H4O6)24 + 2Na+ + 2K+ Hiện tượng hóa học : khi cho andehit vào dung dịch thuốc thử Fehling (A và B) thấy xuất hiện kết tủa đỏ gạch. Dùng Fehling để cho phản ứng xảy ra dễ,đẹp, hiện tương rõ ràng hơn là dùng Cu(OH)2 được điều chế từ NaOH và CuSO4, vì có thể nó bị phân hủy tạo ra chất màu đen. Nguyên nhân là để lâu thì phức đồng tartarate không bền để lâu phân giải ra Cu2+ Cu2+ +2 NaOH Cu(OH)2 + 2Na+ Khi đó Cu(OH)2 kết tủa làm Fehling không thể làm thuốc thử được nữa.Câu 6.Cơ chế tác động của Cloramphenicol?Gắn vào tiểu phần 50S của ribosome nên ngăn cản ARNm gắn vào ribomsome, đồng thời ức chế transferase nên acid amin được mã hoá không gắn được vào polypeptid. IV.Câu hỏi thảo luận:1.Cơ chế tác động của thuốc kháng lao Isoniazid là gì?Mặc dù isoniazid đã được sử dụng điều trị lao vài thập kỷ và đến nay vẫn được coi là thuốc số một trong điều trị tất cả các thể lao nhưng cơ chế tác dụng của thuốc vẫn còn chưa được giải thích đầy đủ. •Theo Takayama và cộng sự (1975), acid mycolic là một thành phần quan trọng trong cấu trúc màng của trực khuẩn lao. Giai đoạn đầu của quá trình tổng hợp mycolic là sự kéo dài mạch của acid nhờ desaturase. Với nồng độ rất thấp của INH, enzym này bị ức chế làm ngăn cản sự kéo dài mạch của acid mycolic dần dần giảm số lượng lipid của màng vi khuẩn, vi khuẩn không phát triển được. •Ngoài ra, một số tác giả còn cho rằng, INH tạo chelat với Cu2+ và ức chế cạnh tranh với nicotinamid và pyridoxin làm rối loạn chuyển hóa của trực khuẩn lao.2. Phân tích các hiện tượng trong thí nghiệm định tính isoniazid?Khi cho CuSO4 vào sẽ có màu xanh và tủa, đun nóng lên xanh rồi đến xanh ngọc của Cu2+{6NC(O)=NNH2}2 sẽ có bọt khí bay lên của N2 và tủa đỏ của Cu2O xuất hiện. 3. Trình bày nội dung cơ bản của phân tích thể tích:•Chất cần phân tích: Rimifon (isoniazid).•Chất chuẩn: Na2S2O3•Chỉ thị: hồ tinh bột•Môi trường: kiềm nhẹ•Hiện tượng kết thúc chuẩn độ: màu xanh của tinh bột và iod biến mất, dung dịch trong suốt.•Phương pháp chuẩn độ: oxy hoá khử•Kỹ thuật chuẩn độ: chuẩn độ thế4. Vai trò của NaHCO3 trong phương pháp định lượng là gì?•Thêm NaHCO3 để tạo môi trường kiềm nhẹ•Để trong tối nhằm hạn chế sự thăng hoa của iod•Thêm đá hạn chế sự thăng hoa của iod, tăng độ nhạy của chỉ thị hồ tinh bột.•Thêm HCl tạo môi trường acid yếu cho phản ứng của iod và natri thiosulfat5.Tại sao phải để yên trong tối 30 phút?Để trong tối nhằm hạn chế sự thăng hoa của iod6.Tại sao phải để yên trong tối và trong nước đá 10 phút?Thêm đá hạn chế sự thăng hoa của iod, tăng độ nhạy của chỉ thị hồ tinh bột.7.Vai trò của HCl 10% trong phương pháp định lượng là gì?Thêm HCl tạo môi trường acid yếu cho phản ứng của iod và natri thiosulfat.8.Mẫu trắng là gì? Tại sao cần định lượng mẫu trắng?Mẫu trắng là mẫu có đầy đủ thuốc thử và thao tác giống như mẫu thử, nhưng không có chất cần phân tích.Dùng mẫu trắng để tìm thể tích iod thực đã phản ứng (thông qua chuẩn độ trực tiếp bằng chất chuẩn Na2S2O3). Thể tích thực của iod này áp dụng vào tính toán hàm lượng.9.Lập công thức tính toán định lượng.I2 + 2Na2S2O3 > 2NaI + Na2S4O610. Tính toán hàm lượng phần trăm isoniazid trong mẫu. INH → NH2NH20,3508 0,3508NH2NH2 + 2I2 → N2 + 4HI0,3508 0,7015I2 thừa + 2Na2S2O3 → 2Na + Na2S4O6V1 Na2S2O3 = 35,5 mlV1 Na2S2O3 = 34,5 ml V1 Na2S2O3 = 35,5 mlV mẫu trắng = 49,2 mlC Na2S2O3 . V Na2S2O3 = C Iod . V Iod ( C Na2S2O3 = C Iod )V Iod = V trắng Vtb = 49,2 – 35,17 = 14,03 mlCM I2 = CNn = 0,12 = 0,05MSố mol I2 phản ứng n= CM . V = 0,05. 14,03= 0.7015 (mmol)Số mol Rimifon n= n I2 2= 0,3071 (mmol)Khối lượng Rimofon m=n.M= 0,3508. 137= 48,06 mgTa có: 0,1g chế phẩm → 48,06 mg Rimifonm viên: 0,3071 g →147,59 mg Rimofon
TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA DƯỢC – ĐIỀU DƯỠNG BÁO CÁO THỰC HÀNH HÓA DƯỢC NĂM 2020 MỤC LỤC BÀI ĐỊNH TÍNH CÁC KHÁNG SINH PENICILLIN VÀ KIỂM ĐỊNH KHÁNG SINH CLORAMPHENICOL BÀI TỔNG HỢP KHÁNG SINH SULFACETAMID 10 BÀI KIỂM ĐỊNH THUỐC KHÁNG LAO RIMIFON 11 BÀI ĐIỀU CHẾ VÀ ĐỊNH TÍNH BẠC SULFADIAZIN 19 BÀI KIỂM ĐỊNH VIÊN NÉN METHIONIN .26 BÀI ĐỊNH TÍNH CÁC KHÁNG SINH PENICILLIN VÀ KIỂM ĐỊNH KHÁNG SINH CLORAMPHENICOL Dụng cụ hoá chất: *Dụng cụ: - Ống nghiệm mặt kính đồng hồ - Bình định mức 50; 100; 250; 500 mL - Cốc thủy tinh dung tích 50; 100; 250; 500 mL - Ống đong dung tích 10; 25; 50; 100 mL - Phễu lọc thủy tinh dung tích 250 mL - Giấy lọc, giấy quỳ tím - Đũa khuấy thủy tinh, bếp điện bể điều nhiệt - Bể siêu âm *Hóa chất: - Các chế phẩm penicillin G, penicillin V, amoxicillin, cloramphenicol - Acid sulfuric đậm đặc - Acid nitric 2% - Hydroxylamin hydroclorid N - Formaldehyd - Thuốc thử Fehling (gồm Fehling A Fehling B) - Natri hydroxid 10% - Bạc nitrat 2% Nội dung thực hành I ĐỊNH TÍNH CÁC KHÁNG SINH PENICILLIN Tên penicillin R …………………………………………………………………………………………………… ………… Penicillin G Penicillin V Định tính chung: làm lúc chế phẩm ( Penicillin G, Penicillin V, Amoxicillin Amoxicillin) - Lấy vài tinh thể chế phẩm cho lên mặt kính đồng hồ - Pha dung dịch gồm 1ml hydroxylamin hydroclorid 1N 0,3ml dung dịch NaOH 1N, thêm giọt dung dịch pha vào phần chế phẩm, trộn phần chế phẩm - Sau phút, cho thêm giọt dung dịch acid acetic 1N vào phần chế phẩm, trộn Thêm giọt CuSO4 Quan sát tượng: tủa màu xanh ngọc thạch Định tính phân biệt: 2.1 Phản ứng màu với H2SO4 đậm đặc: cho chế phẩm ( cỡ hạt gạo) lên mặt kính đồng hồ khơ Nhỏ giọt H2SO4 đậm đặc vào quan sát ngay: Penicillin G: màu vàng nhạt Penicillin V: màu vàng nhạt Amoxicillin: màu vàng 2.2 Phản ứng với thuốc thử Fehling: cho vài tinh thể chế phẩm vào ống nghiệm, thêm 1ml nước cất, lắc Pha thuốc thử Fehling ( 1ml Fehling A + 1ml Fehling B + 6ml nước cất, trộn đều), cho 2ml hỗn hợp thuốc thử Fehling vào ống nghiệm, quan sát: Penicillin G: sau phút chuyển qua màu xanh thẫm Penicillin V: cho màu xanh Amoxicillin: màu đỏ tím II Định tính Cloramphenicol: Định tính: - Cho Cloramphenicol vào ống nghiệm, thêm 2ml dung dịch NaOH 10% Đun cách thuỷ xuất màu vàng, đun tiếp chuyển sang màu da cam - Đun đến sơi: NH3 bay lên, có tủa đỏ gạch xuất III Câu hỏi thảo luận: Câu 1.Tại có tên vịng -lactam? Lactam amid nội vòng Vòng -lactam = azetidin – – on, vịng lactam đóng vị trí phản ứng trùng ngưng Câu 2.Cơ chế Penicillin? Vi khuẩn gram dễ bị cơng hơn? Giải thích? Penicillin cơng vào enzym kiến tạo thành tế bào vi khuẩn Thành tế bào mạng lưới bao quanh tạo cho vi khuẩn hình dạng toàn vẹn Một thành bị thủng, vi khuẩn chết Beta-lactam gắn lên làm bất hoạt transpeptidase (Penicillin Binding Protein) vi khuẩn, enzyme có vai trò gắn chuỗi peptidoglycan (chủ yếu tạo thành N-acetyl glucosamine N-acetyl muranic acid) lại với Như vậy, vi khuẩn không gắn kết chuỗi peptidoglycan lại để tạo thành vách được, vi khuẩn chết Vách tế bào vi khuẩn Gram- Gram+ khác điểm nào? Giống chỗ vách hai loại có góp mặt peptidoglycan khác chỗ vi khuẩn Gram+ có lớp peptidoglycan dày vi khuẩn Gram- Ở Gram-, có thêm lớp outer membrane, lớp lipopolysaccharide protein Do Gram- Gram+ có cấu tạo vách peptidoglycan nên Penicillin tác động đến trình hình thành vách làm vi khuẩn chết Tuy nhiên, vi khuẩn Gram- có thêm lớp outer membrane xem lớp bảo vệ nên tác dụng penicillin lên Gram- lên Gram+ Câu 3.Tại Penicillin G dùng đường tiêm, Pencillin V dùng đường uống? Penicillin G không uống điện tử tập trung nhiều amid nội vòng có xu hướng phá vỡ vịng để giải phóng điện tử, H + (trong dịch vị) qua điện tử cho H+ vòng amid vỡ kháng sinh tác dụng Penicillin V nhóm phenoxy hình thành tâm hút điện tử lớn hút điện tử giữ nguyên vòng amid bền acid dịch vị Câu 4.Tại Amoxcillin uống được? Amoxcillin uống cấu trúc tương tự phenicillin V, có nhóm amino hút điện tử nên vịng amid khơng bị phá vỡ môi trường H+ dày Câu 5.Fehling A, Fehling B chất gì? Tại khơng trộn sẵn thuốc thử Fehling trước? Thuốc thử Fehling có loại Fehling A có cơng thức CuSO Fehling B hỗn hợp NaOH với muối tartrate Na K có cơng thức NaOOCCHOH-CHOH-COOK (trong -OOC-CHOH-CHOH-COO- gốc tartrate) Khi trộn Fehling A Fehling B với lúc đầu xảy phản ứng tạo kết tủa Cu(OH)2, sau Cu(OH)2 phản ứng tiếp với muối tartrate tạo phức đồng tartrate màu xanh 2Na+ + 2C4H4O62- + 2K+ + Cu2+ + 2OH- = Cu(C4H4O6)24- + 2Na+ + 2K+ Hiện tượng hóa học : cho andehit vào dung dịch thuốc thử Fehling (A B) thấy xuất kết tủa đỏ gạch Dùng Fehling phản ứng xảy dễ,đẹp, tương rõ ràng dùng Cu(OH) điều chế từ NaOH CuSO 4, bị phân hủy tạo chất màu đen Nguyên nhân để lâu phức đồng tartarate khơng bền để lâu phân giải Cu 2+ Cu2+ +2 NaOH Cu(OH)2 + 2Na+ Khi Cu(OH)2 kết tủa làm Fehling khơng thể làm thuốc thử Câu 6.Cơ chế tác động Cloramphenicol? NỘI DUNG THỰC HÀNH I ĐIỀU CHẾ BẠC SULFADIAZIN 1.Nguyên tắc Trong môi trường kiềm, sulfadiazin chuyển dạng natri sulfadiazin Sau đó, chất kết hợp với AgNO3 để tạo tủa bạc sulfadiazin Tính chất Bột trắng, sẫm màu tiếp xúc với không khí Khơng tan cồn, ether, cloroform Cơng dụng Bạc sulfadiazin sử dụng dạng kem 1% để ngăn ngừa điều trị nhiễm trùng trường hợp bỏng nặng 22 2.Thực hành 2.1 Phương pháp : Từ nguyên liệu sulfadiazin Hòa tan 1g sulfadiazin 3mL NaOH 1N Điều chỉnh pH dung dịch đến acid HNO3 loãng -Cho từ từ 12mL dung dịch AgNO 0,5N ( vừa cho vừa khuấy ), kết tủa trắng xuất 23 Tiếp tục khuấy 10 phút Lọc lấy kết tủa phễu Buchner Sấy sản phẩm 90 độ C tủ sấy chân không.( điểm nóng chảy khoảng 2550C, kèm thủy phân) 24 II ĐỊNH TÍNH BẠC SULFADIAZIN Kết tủa bạc sulfadiazin sau điều chế tiến hành định tính theo chuyên luận bạc quy định Dược điển Việt Nam IV Phản ứng với CuSO4 Hoà tan 0,1g chế phẩm 3mL nước giọt NaOH 10%, lắc lọc 25 Thêm vào dịch lọc vài giọt CuSO4, xuất kết tủa màu xanh vàng chuyển sang màu tím để yên thời gian III CÂU HỎI THẢO LUẬN Cơ chế tác động kháng sinh họ sulfamid gì? Cơ chế tác dụng kìm khuẩn sulfamid sulfamid cạnh tranh với acid paraaminobenzoic (A.PAB) tế bào vi khuẩn, làm cho việc tổng hợp vận chuyển acid folic thành nucleoprotein cần cho tế bào sống vi khuẩn bị ngưng trệ, gây rối loạn sinh sản phát triển vi khuẩn Viết chế phản ứng hữu tổng hợp bạc sulfadiazin (viết giai đoạn phản ứng)? Giai đoạn 1: Phản ứng bắt đầu proton hoá acid nitro, nitrozo hoá amin theo trình chậm thành muối diazoni Giai đoạn 2: Phản ứng β-naphtol với NaOH tạo muối khó tan nước, sau muối phản ứng với dd muối diazoni thu giai đoạn thực phản ứng ghép đôi azo phản ứng xảy theo chế điện tử, không kèm theo giải phóng N2 26 Tại cần điều chỉnh pH điều chế bạc sulfadiazin? Vì pH = pH môi trường kiềm mà sulfadiazin mt kiềm chuyển dạng natri sulfadiazin, natri sulfadiazin pứ với AgNO3 tủa bạc sulfadiazin (trong mt acid tủa bị tan) Khi cho AgNO3 vào hỗn hợp phản ứng, ta cho vào nhanh khuấy khơng thu kết tủa xám đen (không thu kết tủa trắng), giải thích tượng? Vì Khi cho AgNO3 vào khuấy tạo bề mặt tiếp xúc chất đồng đều, giúp cho pứ xảy tốt Khi khơng khuấy tạo màu trắng xám Sulfadiazin tiếp xúc không với AgNO3 => pứ xảy chậm, khơng đều, khơng hồn tồn, đồng thời tiếp xúc với khơng khí bạc bị sẫm màu Lập cơng thức tính hiệu suất tổng hợp? (tính khối lượng lý thuyết theo số liệu giáo trình) -Số mol Sulfadiazin =0,004 (mol) -Số mol NaOH CM = n=CM V = 1.0,003= 0,003 (mol) -Số mol AgNO3 n AgNO3= CM.V= 0,5.12.10-3 CM= Khối lượng Bạc Sulfadiazin 357 Sản phẩm sấy 1,8520 g H= 27 BÀI KIỂM ĐỊNH VIÊN NÉN METHIONIN I DỤNG CỤ VÀ HỐ CHẤT *Dụng cụ -Ống nghiệm mặt kính đồng hồ -Bình định mức 50; 100; 250; 500ml -Buret 25mL; Pipet mL; 10mL -Chậu thủy tinh -Cốc thủy tinh bình tam giác có nút mài dung tích 50; 100; 250; 500mL -Ống đong dung tích 10; 25; 50; 100mL -Phễu lọc thủy tinh dung tích 250mL; đũa thủy tinh để khuấy -Bể điều nhiệt, bếp điện *Hoá chất -Chế phẩm methionin -Natri nitroprussiat 2,5% -Natri hydroxid 5% -Hỗn hợp acid phosphoric - acid clohydric (1:9) -Acid Clohydric đậm đặc 28 -Dung dịch CuSO4 5% -Ethanol 70% -Dung dịch Iod 0,1 N -Natri hydrocacbonat (rắn) -Natri thiosulfat 0,1N -Hồ tinh bột II NỘI DUNG THỰC HÀNH 1.Tính chất -Bột kết tinh trắng hay vẩy trắng -Hơi tan nước, khó tan ethanol 96% Tan dung dịch acid hydroxyd kiềm loãng -Điểm chảy khoảng 270 độ C 2.Định tính 2.2 Phương pháp hóa học Hịa tan lượng bột viên tương ứng với 0.1g DL-methionin 0,1g glycin 4,5 ml dd natri hydroxyd loãng Thêm vào dịch lọc ml dd natri nitroprusiat 2,5% pha đun 40 độ C 10 phút Làm lạnh nước đá thêm 2ml hh a.phosphoric - a.hydrochloric (1:9), lắc, hỗn hợp chuyển thành màu đỏ thẫm III Định lượng 29 Nguyên tắc Methionin tan tốt nước, ta dùng nước hòa tan methionin chế phẩm Methionin a.amin có nhóm thioether nên thể tính khử tác dụng dung dịch I2 Dựa vào đặc tính phản ứng oxi-hóa khử này, định lượng Methionin cách chuẩn độ ngược, chuẩn độ I thừa dung dịch Na2S2O3 với thị hồ tinh bột Dung dịch chuyển từ màu xanh đậm sang không màu Lưu ý không cho thị hồ tinh bột từ đầu mà cho vào gần đến điểm kết thúc, thêm hồ tinh bột từ đầu, hấp phụ I 2, I2 bị hấp phụ lên hồ tinh bột bị giảm hấp chậm nên chuẩn độ lượng Na 2S2O3 dư mà màu xanh chưa mất, chuẩn độ điểm tương đương nhiều nên kết sai Phương trình phản ứng: Hay: 2Na2S2O3 + I2 Na2S4O6 + 2NaI Tiến hành thí nghiệm Cân viên tính khối lượng trung bình viên nghiền thành bột mịn 30 Viên Viên Vỏ viên Vỏ viên Cân lượng bột viên tương ứng với khoảng 0,5g DL-methionin cho vào bình định mức 100ml Thêm khoảng 75ml nước, lắc, để yên 30 phút, lắc nhẹ, thêm nước tới định mức 31 Loc qua giấy lọc khô vào hứng dịch lọc vào bình khơ Bỏ 20ml dịch lọc đầu Lấy xác 25ml dịch lọc cho vào bình nón nút mài thêm 1,25g dikali hydrophosphat (TT), 0,5g kali dihydrophosphat (TT), 1g kali iodid (TT) lắc cho tan hồn tồn 32 Thêm xác 25ml dung dịch iod 0,1N (CĐ), đậy nút bình, lắc mạnh để yên 30 phút tránh ánh sáng 33 Chuẩn độ iod thừa dung dịch natri thiosulfal 0,1N (CĐ) với thị dung dịch hồ tinh bột (TT) Song song tiến hành màu trắng điều kiện “1ml dd iod 0,1N (CĐ) tương đương với 7,461 mg C5H11NO2S DĐVNIV” IV Câu hỏi thảo luận Công dụng methionin gì? Methionin tăng cường tổng hợp gluthation sử dụng thay cho acetylcystein để điều trị ngộ độc paracetamol đề phòng tổn thương gan Methionin dùng theo đường uống để làm giảm pH nước tiểu Chủ yếu dùng điều trị liều paracetamol acetylcystein Trình bày nội dung phân tích thể tích: Phương trình chuẩn độ: Oxy hóa khử Kỹ thuật chuẩn: định lượng Methionin cách chuẩn độ ngược Chất cần phân tích: Methionin Chất chuẩn: Na2S2O3 0,1N Chỉ thị: hồ tinh bột Môi trường: môi trường kiềm Hiện tượng kết thúc phản ứng: Dung dịch chuyển từ màu xanh đậm sang khơng màu Vai trị K2HPO4 KH2PO4 phương pháp định lượng gì? KH2PO4 K2HPO4 tạo mức pH ổn định khoảng pH = 4,5 - 8,0 môi trường axit K2HPO4 tạo ion H+ Mẫu trắng gì? Tại cần định lượng mẫu trắng? 34 Mẫu trắng mẫu có đầy đủ thuốc thử thao tác giống mẫu thử, chất cần phân tích Dùng mẫu trắng để tìm thể tích iod thực phản ứng (thơng qua chuẩn độ trực tiếp chất chuẩn Na2S2O3) Thể tích thực iod áp dụng vào tính tốn hàm lượng Lập cơng thức tính tốn định lượng CNa2S2O3 VNa2S2O3 = C Iod V Iod ( Ta có: C Na2S2O3 = C Iod ) Tính tốn hàm lượng phần trăm methionin mẫu n = 0,8430 g m =0,1571 g M thuốc=0,6859 g V mẫu trắng = 24,4 ml V1=10,2 ml Vtb= 9,93 ml V2=9,7 ml V3=9,9 ml CNa2S2O3 VNa2S2O3 = C Iod V Iod ( Ta có: C Na2S2O3 = C Iod ) VI2 phản ứng = 24,4 – 9,93 = 14,47 ml 1ml dd iod 0,1N 7,461 mg C5H11NO2S 14,47 ml 107,96 mg C5H11NO2S 2Na2S2O3 + I2 Na2S4O6 + 2NaI Trong 25ml dịch lọc có 107,96 mg C5H11NO2S Trong 100ml dịch lọc có 431,84 mg C5H11NO2S Hàm lượng = = 86,37 % 35 36 ... NH2NH2 0,3508 0,3508 NH2NH2 + 2I2 → 0,3508 N2 + 4HI 0,7015 I2 thừa + 2Na2S2O3 → 2Na + Na2S4O6 V1 Na2S2O3 = 35,5 ml V1 Na2S2O3 = 34,5 ml Vtb = 35,17ml V1 Na2S2O3 = 35,5 ml V mẫu trắng = 49 ,2 ml... Na2S2O3 = C Iod ) VI2 phản ứng = 24 ,4 – 9,93 = 14,47 ml 1ml dd iod 0,1N 7,461 mg C5H11NO2S 14,47 ml 107,96 mg C5H11NO2S 2Na2S2O3 + I2 Na2S4O6 + 2NaI Trong 25 ml dịch lọc có 107,96 mg C5H11NO2S... tạo kết tủa Cu(OH )2, sau Cu(OH )2 phản ứng tiếp với muối tartrate tạo phức đồng tartrate màu xanh 2Na+ + 2C4H4O 62- + 2K+ + Cu2+ + 2OH- = Cu(C4H4O6 )24 - + 2Na+ + 2K+ Hiện tượng hóa học : cho andehit