Báo cáo thực hành hóa dược 2

KHOA DƯỢC – ĐIỀU DƯỠNG BÀI BÁO CÁO THỰC HÀNH HÓA DƯỢC Giảng viên: Nguyễn Phú Qúy TP.CẦN THƠ, NĂM 2018 Bài 2: Định tính kháng sinh PENICILLIN kiểm định kháng sinh CLORAMPHENICOL I II Dụng cụ hóa chất Dụng cụ - Ống nghiệm mặt kính đồng hồ - Bình định mức 50, 100, 250, 500ml - Cốc thủy tinh dung tích 50, 100, 250, 500ml - Ống đong dung tích 10, 25, 50, 100ml - Phễu lọc thủy tinh dung tích 250ml - Giấy lọc, giấy quỳ tím - Đũa khuấy thủy tinh - Bếp điện bể điều nhiệt - Bể siêu âm - Hệ thống máy quang phổ UV – Vis Hóa chất - Các chế phẩm penicillin G,penicillin V, amoxicillin, chloramphenicol - Acid sulfuric đậm đặc - Acid nitric 2% - Hydroxylamin hydroclorid 1N - Formaldehyd - Thuốc thử Fehling (gồm Fehling A Fehling B) - Natri hydroxid 10% - Bạc nitrat 2% Nội dung thực hành  Định tính kháng sinh PENICILLIN Tính chất - Benzyl penicillin – Penicillin G (dạng muối natri kali) + C16H17O4N2SNa (phân tử lượng: 356,38) + C16H17O4N2SK (phân tử lượng: 372,39) + Bột kết tinh trắng, vị đắng, mùi đặc biệt + Dễ tan nước, cồn + Dễ bị chảy tiếp xúc với khơng khí ẩm - Phenoxy methyl penicillin – Penicillin V + C16H18O5N2S ( phân tử lượng: 350,40) + Bột kết tinh trắng, không mùi, vị đắng chua + Rất tan nước, tan cồn, aceton, chloroform, dung dịch kiềm + Không bị chảy - Amoxicillin + C16H19O5N3S (phân tử lượng: 365,41) + Bột kết tinh trắng, không mùi, vị đắng + Độ ẩm cao nhiệt độ > 37o C ảnh hưởng bất lợi đến độ bền + Độ tan: 1g/370ml nước 1000ml alcol Phản ứng định tính chung Làm lúc chế phẩm mặt kính đồng hồ - Lấy vài tinh thể chế phẩm, cho lên mặt kính đồng hồ - Thêm vài giọt dung dịch (chứa 1ml dung dịch hydroxylamine hydroclorid 1N 0,3 ml dung dịch NaOH 1N), trộn - Sau 2-3 phút, cho vào hỗn hợp giọt dung dịch acid acetic 1N Trộn thật kỹ Thêm giọt CuSO4 Hiện tượng: kết tủa màu xanh ngọc Phản ứng định tính phân biệt Phản ứng màu với H2SO4 đậm đặc - Cho chế phẩm (cỡ hạt gạo) lên mặt kính đồng hồ Nhỏ giọt H2SO4 đậm đặc vào Quan sát tượng + Penicillin G: cho màu vàng nhạt + Penicillin V: cho màu vàng nhạt + Amoxicillin: cho màu vàng Phản ứng với HCHO/H2SO4 đậm đặc - Cho chế phẩm vào dung dịch hỗn hợp HCHO/H2SO4 đậm đặc, lắc nhẹ + Penicillin G: cho màu nâu đỏ + Penicillin V: cho màu đỏ thẫm + Amoxicillin: cho màu vàng nhạt Phản ứng với thuốc thử Fehling - Cho vài tinh thể chế phẩm vào ống nghiệm, thêm 1ml nước cất, lắc Sau thêm 2ml hỗn hợp (gồm 2ml thuốc thử Fehling 6ml nước cất) + Penicillin G: sau phút chuyển dần qua màu xanh thẩm + Penicillin V: cho màu xanh + Amoxicillin: cho màu đỏ tím  Kiểm định kháng sinh Cloramphenicol Tính chất - Bột kết tinh trắng, trắng xám, hay trắng vàng, không mùi, vị đắng - Dễ tan etanol, aceton, ethyl acetat, propylene glycol Ít tan ether chloroform Khó tan nước - Điểm chảy: 148 – 151oC Định tính - Cho chloramphenicol vào ống nghiệm, thêm 2ml dung dịch NaOH 10% Tiến hành đun cách thủy xuất màu vàng tiếp tục đun cách thủy màu vàng dần chuyển sang màu da cam - Đun đến sôi: chức amin bị thủy phân, đồng thời N bị tách dạng NH3 (phát qua mùi giấy quỳ tím), có kết tủa đỏ gạch - Để nguội dung dịch, acid hóa HNO3 lỗng, lọc bỏ kết tuả Thêm vào dung dịch lọc thu vài giọt AgNO3 2% xuất kết tủa màu trắng Bài 3: TỔNG HỢP KHÁNG SINH SULFACETAMID I II Dụng cụ hóa chất Dụng cụ - Ống nghiệm mặt kính đồng hồ - Bình định mức 50, 100, 250, 500ml - Cốc thủy tinh, bình tam giác dung tích 50, 100, 250, 500ml - Ống đong dung tích 10, 25, 50, 100ml - Phễu lọc thủy tinh dung tích 250ml - Giấy lọc, giấy đo pH - Than hoạt tẩy màu - Đũa khuấy thủy tinh - Bể điều nhiệt - Hệ thống lọc áp suất giảm - Tủ sấy Hóa chất - Sulfanilamid - Anhydrid acetic (acid acetic băng) - Kẽm clorid 5% acid acetic băng - Hydroxylamin hydroclorid 1N - Dung dịch NH3 đậm đặc - Acid clohydric 10% - Natri hydroxid 30% 10% Nội dung thực hành  Nguyên tắc Sulfacetamid điều chế từ sulfanilamide phản ứng acetyl hóa thủy phân khơng hồn tồn  Tiến hành thí nghiệm Chuẩn bị nồi thủy nhiệt độ 70-80oC Cho 5g sulfanilamide vào erlen 100ml đặt vào cách thủy 70-80oC Thêm 9ml anhydride acetic 2-3ml dung dịch ZnCl2 50% acid acetic băng Khuấy giữ 75oC khoảng 20 phút - Kiểm tra phản ứng kết thúc cách: + Cho hỗn hợp phản ứng (khoảng nửa hạt bắp) vào ống nghiệm chứa sẵn khoảng 10ml dung dịch ammoniac đậm đặc, hỗn hợp phải tan hoàn toàn + Cho hỗn hợp phản ứng (khoảng hạt bắp) vào ống nghiệm khác chứa sẵn khoảng 10ml dung dịch HCl 10%, hỗn hợp không tan Thêm 50ml nước cất vào hỗn hợp phản ứng khuấy lọc áp suất giảm thu kết tủa Dùng nước tráng erlen rửa tủa Chuyển tủa vào bercher 100ml, thêm 25ml dung dịch NaOH 30% khuấy cho tan hết Chuyển hỗn hợp sang erlen 250ml để thực phản ứng - Hồ tinh bột NỘI DUNG THỰC HÀNH TÍNH CHẤT - Bột màu trắng ánh vàng bột kết tinh, không màu, không mùi, vị lúc đầu thoảng ngọt, đắng - Dễ tan nước , khó tan alcol, ether, clorofom - Điểm nóng chảy 170oC – 174oC TIẾN HÀNH THÍ NGHIỆM 2.1 Định tính 2.1.1 phản ứng tạo phức với natri nitroprussiat - Hòa tan 0,01g chế phẩm vào 10ml nước - Thêm vào 1ml dung dịch giọt dung dịch natri nitroprussiat 5%, giọt dung dịch NaOH 10% gọt aicd acetic loãng Xuất màu đỏ da cam - Thêm giọt HCl màu đỏ da cam chuyển sang màu nâu đỏ Nếu tiếp tục cho HCl chuyển sang màu vàng 2.1.2 Phản ứng tạo tủa với CuSO4 - Hòa tan 0,1g chế phẩm vào 5ml nước Thêm giọt dung dịch CuSO4 xuất màu xanh lam có kết tủa Đun nóng dung dịch này, màu xanh lam chuyển sang xanh ngọc thạch, đồng thời có bọt khí bay lên 2.2 Định lượng 2.2.1 Nguyên tắc - Oxy hóa Rimifon iod dư mơi trường kiềm nhẹ, sau định lượng iod dư natri thiosulfate 2.2.2 Thực - Cân xác 0,1g chế phẩm - Cho vào erlen nút mài 250ml, thêm 100ml nước cất để hòa tan Thêm 2g NAHCO3, 50ml dung dịch iod 0,1N - Để yên tối 30 Phút, để 10 phút nước đá tối, thêm từ từ đến hết 20ml dung dịch acid HCl 10% - Vẫn làm lạnh định lượng iod thừa dung dịch Na2S2O3 0,1N với thị hồ tinh bột  Chú ý ( Cho hồ tinh bột vào dung dịch có màu vàng nhạt) - Tiến hành song song mẫu trắng điều kiện Ú Kết V1= 30,1 V2= 29,45 V3= 32,2 Vtrắng= 46  Vtb = 30,58 ml - Ta có: CNa2S2O3 VNa2S2O3= Ciod Viod Viod thừa = Vtb = 30,58 ml Thể tích iod thừa phản ứng với NH2NH2 = Vmẫu trắng – Vtb = 15,42 ml Số mol iod phản ứng với NH2NH2 = CN / V = 0,1 /2 15,42 = 0,77 mol Mà nNH2NH2 = Niod = 0,77/2 = 0,385 mol nRimifon = 0,385 mol MRimifon = 0,385 x 137 = 52,745 mg = 0,52745 g BÀI ĐIỀU CHÊ VÀ ĐỊNH TÍNH BẠC SULFADIAZIN DỤNG CỤ VÀ HĨA CHẤT Dụng cụ - Ống nghiệm mặt kính đồng hồ - Cốc thủy tinh, bình tam giác dung tích 10; 25; 50; 100 ml - Chậu thủy tinh - Giấy lọc, giấy đo ph - Đũa khuấy thủy tinh - Máy khuấy từ - Hệ thống lọc áp suất giảm - Tủ sấy Hóa chất - Natri sulfadiazine sulfadiazine - Anhydrid acetic - Acid clohydric 10% - Natri hydroxid 1N 0,4% - Dung dịch bạc nitrat 0,5N - Dung dịch Natri clorid - Thuốc thử -naphtol - Dung dịch natri nitrit 1% - Dung dịch đồng sulfat NỘI DUNG THỰC HÀNH I ĐIỀU CHẾ BẠC SULFADIAZIN Nguyên tắc Trong môi trường kiềm, sulfadiazine chuyển dạng natri sulfadiazin Sau đó, chất kết hợp với AgNO3 để tạo tủa bạc sulfadiazin Tính chất: - Bột sắn, sẫm màu tiếp xúc với không khí Khơng tan cồn, ether, chloroform Cơng dụng - Bạc sulfadiazine sử dụng với dạng kem 1% để ngăn ngừa điều trị nhiễm trùng trường hợp bỏng nặng Thực hành 2.1 Phương pháp 1: từ nguyên liệu sulfadiazine - Hòa tan 1g sufadiazin 3ml NaOH 1N Điều chỉnh pH dung dịch đến acid HNO3 loãng - Cho từ từ 12ml dung dịch AgNO3 0,5N (vừa cho vừa khuấy đều) , kết tủa trắng xuất Tiếp tục khuấy 10 phút Lọc lấy kết tủa phiễu Buchner , rửa kết tủa nước cất pH = - Sản phẩm sấy tủ sấy chân không 90oC II ĐỊNH TÍNH BẠC SULFADIAZI Phản ứng CuSO4 Hòa tan 0,1g chế phẫm + 3ml H2O + giọt NaOH 10%→ lắc, lọc Lấy dịch lọc thêm vài giọt CuSO4→ kết tủa màu xanh vàng→ để thời gian chuyển sang màu tím Bài 6: KIỂM ĐỊNH VIÊN NÉN METHIONIN I II Dụng cụ hóa chất Dụng cụ - Ống nghiệm mặt kính đồng hồ - Bình định mức 50, 100, 250, 500ml - Cốc thủy tinh, bình tam giác có nút mài dung tích 50, 100, 250, 500ml - Ống đong dung tích 10, 25, 50, 100ml - Phễu lọc thủy tinh dung tích 250ml; đũa thủy tinh để khuấy - Bể điều nhiệt, bếp điện Hóa chất - Chế phẩm methionin - Natri nitroprussiat 2,5% - Natri hydroxid 5% - Hỗn hợp acid phosphoric – acid clohydric (1:9) - Acid Clohydric đậm đặc - Dung dịch CuSO4 5% - Ethanol 70% - Dung dịch Iod 0,1N - Natri hydrocacbonat (rắn) - Natri thiosulfate 0,1N - Hồ tinh bột Nội dung thực hành  Tính chất - Bột kết tinh trắng hay vẩy trắng - Hơi tan nước, khó tan ethanol 96% Tan dung dịch acid hydroxyd kiềm loãng - Điểm chảy khoảng 270oC  Định tính Phương pháp sắc ký lớp mỏng Bản mỏng: Silicagel G Dung môi khai triển: Acid acetic băng (TT) – nước – butanol (TT) (20:20:60) Dung dịch thử: lấy lượng bột viên tương ứng với khoảng 20mg DL-methionin, thêm 50ml nước Lắc kỹ để hòa tan Lọc Dung dịch đối chiếu: Hòa tan 20mg DLmethionin đối chiếu nước vừa đủ 50ml Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 5µL dung dịch Triển khai sắc ký đến dung môi khoảng 10cm, lấy mỏng ra, để khô nhiệt độ phòng Phun dung dịch ninhydrin 1% ethanol (TT) Sấy mỏng 110oC đến xuất vết Phương pháp hóa học Hòa tan lượng bột viên tương ứng với 0,1g DL-methionin 0,1g glycin 4,5ml dung dịch natri hydroxyd loãng, lọc Thêm vào dịch lọc 1ml dung dịch natri nitroprusiat 2,5% pha đun 40oC 10 phút Làm lạnh nước đá thêm 2ml hỗn hợp acid phosphoric – acid hydrochloric (1:9), lắc, hỗn hợp chuyển thành màu đỏ thẫm  Định lượng Nguyên tắc Tiến hành thí nghiệm Cân viên, tính khối lượng trung bình viên nghiền thành bột mịn Cân lượng bột viên tương ứng với khoảng 0,5g DL-methionin cho vào bình định mức 100ml Thêm khoảng 75ml nước, lắc, để yên 30 phút, lắc nhẹ, thêm nước tới định mức Lọc qua giấy lọc khô hứng dịch lọc vào bình khơ Bỏ 20ml dịch lọc đầu Lấy xác 25ml dịch lọc cho vào bình nón nút mài thêm 1,25g dikali hydrophosphat (TT), 0,5g kali dihydrophosphat (TT), 1g kali iodid (TT) lắc cho tan hồn tồn Thêm xác 25ml dung dịch iod 0,1N (CĐ), đậy nút bình, lắc mạnh để yên 30 phút tránh ánh sáng Chuẩn độ iod thừa dung dịch natri thiosulfate 0,1N (CĐ) với thị dung dịch hồ tinh bột (TT) Kết V1=7.9 ml V2=8,2 ml V3=8,1 ml V mẩu trắng=24,3 ml V trung bình=8.07 ml Vpu=24,3 – 8,07=16,23 ml 1ml 16,23 ml 7,461 mg 121,09 mg Hàm lượng: (121,09/500)x100= 24.2% ... NH2NH2 = Vmẫu trắng – Vtb = 15, 42 ml Số mol iod phản ứng với NH2NH2 = CN / V = 0,1 /2 15, 42 = 0,77 mol Mà nNH2NH2 = Niod = 0,77 /2 = 0,385 mol nRimifon = 0,385 mol MRimifon = 0,385 x 137 = 52, 745... bay lên 2. 2 Định lượng 2. 2.1 Nguyên tắc - Oxy hóa Rimifon iod dư môi trường kiềm nhẹ, sau định lượng iod dư natri thiosulfate 2. 2 .2 Thực - Cân xác 0,1g chế phẩm - Cho vào erlen nút mài 25 0ml,... bột (TT) Kết V1=7.9 ml V2=8 ,2 ml V3=8,1 ml V mẩu trắng =24 ,3 ml V trung bình=8.07 ml Vpu =24 ,3 – 8,07=16 ,23 ml 1ml 16 ,23 ml 7,461 mg 121 ,09 mg Hàm lượng: ( 121 ,09/500)x100= 24 .2%