KHẢO SÁT ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA VIÊN BAO PHIM SIMVASTATIN 20 mg

Bệnh tim mạch là nguyên nhân gây tử vong hàng đầu trên thế giới. Chính vì vậy mà trong 6 thập niên qua y học trên thế giới đã tập trung rất nhiều tài lực để nghiên cứu về bệnh tim mạch và các yếu tố gây nên bệnh này. Một trong những nguyên nhân gây ra bệnh tim mạch là lượng cholesterol trong máu tăng cao. Vào thập niên 1950, dựa vào phân tích công trình nghiên cứu Framingham (Mỹ), các nhà khoa học tập trung vào một giả thiết duy nhất có thể tạm gọi là “giả thiết chất béo”. Chính giả thiết này nếu làm giảm cholesterol sẽ ngăn ngừa họăc làm giảm nguy cơ tử vong. Một trong những can thiệp được quảng bá rộng rãi hiện nay là dùng thuốc thuộc nhóm statin để làm giảm cholesterol trong máu. Thuốc nhóm statin thường được mô tả là vị cứu tinh của nhân lọai, là những thuốc vô hại. 67 Simvastatin là một thuốc làm giảm cholesterol trong máu thuộc nhóm ức chế men 3hydroxy3methylglutarylcoenzym A reductase (thuộc nhóm statin). Do có tác dụng tốt trên cả cholesterol và triglycerid nên simvastatin là thuốc hạ mỡ máu đang được sử dụng rộng rãi nhất hiện nay trên thế giới, chiếm 8090% tổng lượng thuốc giảm cholesterol trong máu được sử dụng ở các nước phát triển.67 Hiện nay trên thị trường các sản phẩm ngoại nhập thuộc nhóm statin rất nhiều: Atorvastatin (Lipitor®), Fluvastatin (Lescol®), Lovastatin (Mevacor®, Altoprev™), Pravastatin (Pravachol®) Rosuvastatin Calcium (Crestor®), Simvastatin (Zocor®)… tuy nhiên các sản phẩm này chưa được nghiên cứu nhiệt đới hoá để phù hợp với điều kiện khí hậu nước ta. Do đó hạn dùng ghi trên nhãn chưa thật chính xác, cần được xác định lại trong điều kiện khí hậu và điều kiện bảo quản ở Việt nam. Nhóm thuốc statin được sản xuất trong nước còn rất hạn chế, một số chế phẩm chưa được nghiên cứu kỹ lưỡng về độ bền vững đã đưa vào sản xuất chỉ nhằm đáp ứng được nhu cầu của thị trường Việt nam. Hạn dùng ghi trên nhãn thường chỉ là hạn dùng biểu kiến hoặc được suy từ hạn dùng của nguyên liệu. Để có được một sản phẩm tốt đáp ứng được nhu cầu sử dụng do đó Công Ty IMEXPHARM đã nghiên cứu sản xuất chế phẩm viên bao phim simvastatin 20 mg với mong muốn thay thế hàng ngoại nhập. Vì vậy chúng tôi tiến hành đề tài:“ KHẢO SÁT ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA VIÊN BAO PHIM SIMVASTATIN 20 mg”Nhằm mục đích: Khảo sát các yếu tố ảnh hưởng đến độ ổn định thuốc. Dự đoán tuổi thọ của sản phẩm simvastatin. Góp phần hoàn thiện sản phẩm viên bao phim Simvastatin 20mg.

MỤC LỤC MỤC LỤC DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU ĐẶT VẤN ĐỀ .3 TỔNG QUAN .5 2.1 TỔng quan vỀ simvastatin 2.1.1 Nguồn gốc .5 2.1.2 Công thức cấu tạo 2.1.3 Tính chất 2.1.4 Tác dụng dược lý chế tác dụng .5 2.1.5 Định tính 2.1.6 Định lượng: 2.2 ĐỘ Ổn định cỦa thuỐc 10 2.2.1 Khái niệm chung 10 2.2.2 Một số yếu tố tác động đến độ ổn định 10 2.2.3 Phương pháp nghiên cứu độ ổn định thuốc 12 2.2.4 Phương pháp tính tuổi thọ hạn dùng thuốc .13 2.3 MỘt sỐ chẾ phẨm cÓ chỨa simvastatin thỊ trưỜng 14 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 3.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU: 14 3.2 ĐỊA ĐIỂM, TRANG THIẾT BỊ: 14 3.2.1 Địa điểm: .14 3.2.3 Trang thiết bị 15 3.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .15 3.3.1 Xây dựng thẩm định quy trình định lượng 15 3.3.2 Xác định độ hòa tan simvastatin 16 3.3.3 Xây dựng tiêu chuẩn sở viên bao phim SIMVASTATIN 20 mg 17 3.3.4 Khảo sát yếu tố ảnh hưởng tới độ ổn định Simvastatin 18 3.3.5 Khảo sát độ ổn định dự đoán hạn dùng 18 4.KẾ HOẠCH THỰC HIỆN 18 TRIỂN VỌNG CỦA ĐỀ TÀI 19 NƠI THỰC HIỆN ĐỀ TÀI 19 DỰ TRÙ KINH PHI 19 TÀI LIỆU THAM KHẢO 19 CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU Bảng 2.2: Các điều kiện triển khai HPLC Bảng 2.2: Ty lệ dung môi triển khai HPLC (*)[9] Bảng 2.3 : Một số biệt dược có Simvastatin 14 ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh tim mạch nguyên nhân gây tử vong hàng đầu giới Chính mà thập niên qua y học giới tập trung nhiều tài lực để nghiên cứu bệnh tim mạch yếu tố gây nên bệnh Một nguyên nhân gây bệnh tim mạch lượng cholesterol máu tăng cao Vào thập niên 1950, dựa vào phân tích công trình nghiên cứu Framingham (Mỹ), nhà khoa học tập trung vào giả thiết tạm gọi “giả thiết chất béo” Chính giả thiết làm giảm cholesterol ngăn ngừa họăc làm giảm nguy tử vong Một can thiệp quảng bá rộng rãi dùng thuốc thuộc nhóm statin để làm giảm cholesterol máu Thuốc nhóm statin thường mô tả vị cứu tinh nhân lọai, thuốc vô hại [6][7] Simvastatin thuốc làm giảm cholesterol máu thuộc nhóm ức chế men 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzym A reductase (thuộc nhóm statin) Do có tác dụng tốt cholesterol triglycerid nên simvastatin thuốc hạ mỡ máu sử dụng rộng rãi giới, chiếm 80-90% tổng lượng thuốc giảm cholesterol máu sử dụng nước phát triển.[6][7] Hiện thị trường sản phẩm ngoại nhập thuộc nhóm statin nhiều: Atorvastatin (Lipitor®), Fluvastatin Altoprev™), Pravastatin (Pravachol®) (Lescol®), Lovastatin Rosuvastatin Calcium (Mevacor®, (Crestor®), Simvastatin (Zocor®)… nhiên sản phẩm chưa nghiên cứu nhiệt đới hoá để phù hợp với điều kiện khí hậu nước ta Do hạn dùng ghi nhãn chưa thật xác, cần xác định lại điều kiện khí hậu điều kiện bảo quản Việt nam Nhóm thuốc statin sản xuất nước hạn chế, số chế phẩm chưa nghiên cứu kỹ lưỡng độ bền vững đưa vào sản xuất nhằm đáp ứng nhu cầu thị trường Việt nam Hạn dùng ghi nhãn thường hạn dùng biểu kiến suy từ hạn dùng nguyên liệu Để có sản phẩm tốt đáp ứng nhu cầu sử dụng Công Ty IMEXPHARM nghiên cứu sản xuất chế phẩm viên bao phim simvastatin 20 mg với mong muốn thay hàng ngoại nhập Vì tiến hành đề tài: “ KHẢO SÁT ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA VIÊN BAO PHIM SIMVASTATIN 20 mg” Nhằm mục đích: - Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến độ ổn định thuốc - Dự đoán tuổi thọ sản phẩm simvastatin Góp phần hoàn thiện sản phẩm viên bao phim Simvastatin 20mg TỔNG QUAN 2.1 TỔNG QUAN VỀ SIMVASTATIN 2.1.1 Nguồn gốc Simvastatin thuộc nhóm thuốc trị tăng lipid huyết 2.1.2 Công thức cấu tạo Simvastatin, CTPT: C25H38O5 , M = 418,566 [3][7] [10][12] Tên khoa học 1S,3R,7S,8S,8aR)-8-{2-[(2R,4R)-4-hydroxy-6-oxooxan-2-yl]ethyl}-3,7dimethyl-1,2,3,7,8,8a-hexahydronaphthalen-1-yl 2,2-dimethylbutanoate 2.1.3 Tính chất Bột kết tinh màu trắng đến gần trắng, không tan nước, tan nhiều methylen chlorid, tan hoàn toàn alcohol 2.1.4 Tác dụng dược lý chế tác dụng + Dược động học:[3] Sau hấp thu từ ống tiêu hóa, Simvastatin chuyển hóa vượt qua lần đầu mạnh gan Do sinh khả dụng thuốc vòng tuần hoàn lớn thấp biến đổi 5% liều uống ghi nhận đến tuần hoàn dạng chất chuyển hóa có hoạt tính Thuốc gắn kết mạnh với protein huyết tương (95%) Simvastatin đươc thủy phân gan thành dạng acid beta-hydroxy có hoạt tính Ba chất chuyển hóa khác phân lập dẫn chất 6-hydroxy, 6hydroxy methyl 6-exomethylen Simvastatin giải trừ phần lớn qua phân, chủ yếu phần thuốc không hấp thu chiếm 60% liều uống Khoảng 10-15% thuốc thải trừ qua đường thận Thời gian bán hủy chất chuyển hóa có hoạt tính 1,9 Hình 2.1: Simvastatin chất phân hủy [9] + Chỉ định Simvastatin dùng để hổ trợ cho chế độ dinh dưỡng bệnh nhân tăng cholesterol máu nguyên phát gây tăng lipoprotein cholesterol trọng lượng phân tử thấp (LDL) bệnh nhân có nguy bệnh động mạch vành mà không đáp ứng với chế độ ăn kiêng Simvastatin dùng để làm giảm nồng độ cholesterol lipoprotein trọng lượng phân tử thấp (LDL) bệnh nhân vừa tăng cholesterol, vừa tăng triglicerid máu + Tác dụng phụ Tác dụng phụ nhẹ, thường gặp, hồi phục: Nhức đầu, khó tiêu, trung tiện, táo bón, đau bụng Các tác dụng phụ nặng, gặp: Tăng transaminase huyết biểu độc gan (1 – 1,5 %), tăng creatin kinase, bệnh (< 1%) Bệnh cơ, thường xảy phối hợp với thuốc ức chế miễn dịch cycloserin thuốc hạ lipid khác gemfibrozil, niacin gây globin - niệu kịch phát (rhabdomyolysis) với biểu myoglobin niệu suy thận Cần theo dõi chức thận: Mức creatinin, BUN + Liều dùng Simvastatin sử dụng đường uống Cần cho người bệnh dùng chế độ dinh dưỡng giảm cholesterol chuẩn trước dùng simvastatin người bệnh cần tiếp tục ăn kiêng suốt trình điều trị với Simvastatin Liều khởi đầu 5-10 mg/ngày, uống vào buổi tối.Liều tối đa 40 mg/ngày Liều dùng cần điều chỉnh theo đáp ứng cá thể 2.1.5 Định tính +Thử nghiệm A: Phổ hấp thu hồng ngoại - Mẫu thử: Nghiền mịn nhẹ nhàng mg chất thử cối chày mã não, thêm giọt parafin lỏng, phân tán để tạo thành bột nhão mịn kẹp bột nhão viên kali bromid quét phổ theo SOP 2.147 hành vùng từ 4000 cm-1 đến 600 cm-1 - Mẫu chuẩn: Nghiền mịn nhẹ nhàng mg chuẩn đối chiếu Simvastatin cối chày mã não tiến hành song song điều kiện mẫu thử - Mẫu trắng: Dùng viên kali bromid kẹp lại để quét phổ - Đánh giá: Phổ truyền quang chất thử phải giống với phổ truyền quang chất chuẩn vị trí cường độ tương đối cực đại hấp thu +Thử nghiệm B: Phổ hấp thu tử ngoại - Dung dịch thử: Cân xác khoảng 20 mg chất thử cho vô bình định mức 20 ml, hòa tan pha loãng với acetonitril vừa đủ 20 ml, lắc (dung dịch 1%) Hút xác ml dung dịch 0,1% cho vô bình định nức 20 ml, pha loãng với acetonitril vừa đủ 20 ml, lắc Hút xác ml dung dịch pha loãng với acetonitril vừa đủ 10 ml, lắc - Dung dịch chuẩn: cân xác khoảng 20 mg chuẩn Simvastatin cho vô bình định mức 20 ml, hòa tan pha loãng với acetonitril vừa đủ 20 ml, lắc (dung dịch 0,1%) Hút xác ml dung dịch 0,1% cho vô bình định mức 20 ml, pha loãng với acetonitril vừa đủ 20 ml Hút xác ml dung dịch pha loãng với acetonitril vừa đủ 10 ml, lắc Quét phổ dung dịch chuẩn thử vùng 200 nm – 400 nm - Đánh giá: Phổ hấp thu tử ngoại dung dịch thử chuẩn phải giống vị trí tương đối cực đại cực tiểu ghi điều kiện 2.1.6 Định lượng: Có nhiều quy trình định lượng Simvastatin phương pháp HPLC công bố Bảng 2.2: Các điều kiện triển khai HPLC Điều kiện [8] Điều kiện [9] Cột C-18 Luna X-Terra™ RP18 4.6 mm × 50 mm, 3.5 μm Detector 231 nm 238 nm 1,8 ml/phút 0.3 mL min−1 methanol: acetonitrile: water 75:18.75:6.25 v/v/v Microemulsion (*) Tốc độ dòng Pha động simvastatin, lovastatin, hydroxy acid, methylsimvastatin, acetate ester, anhydrosimvastatin Tách Bảng 2.2: Ty lệ dung môi triển khai HPLC (*)[9] No Dung môi hữu Chất diện hoạt Đồng diện hoạt Pha nước /pH Heptane SDS n-Butanol 25 mM phosphate/pH 7.0 disodium Cyclohexane SDS n-Butanol 25 mM phosphate/pH 7.0 disodium Diisopropyl ether SDS n-Butanol 25 mM phosphate/pH 7.0 disodium Ethylacetate SDS n-Butanol 25 mM phosphate/pH 7.0 disodium Diisopropyl ether SDS n-Penthanol 25 mM phosphate/pH 7.0 disodium Diisopropyl ether SDS n-Propanol 25 mM phosphate/pH 7.0 disodium Diisopropyl ether SDS n-Acetonitrile 25 mM phosphate/pH 7.0 disodium Diisopropyl ether SDS nTetrahydrofuran 25 mM phosphate/pH 7.0 disodium Mọi dung môi (*) pha theo tỷ lệ 1:2:6.6:90.4 (w/w/w/w) Ngoài số tài liệu khác đề cập đến việc sử dụng lovastatin làm chuẩn nội ? (Nếu ko dùng chuẩn nội bỏ dung dịch chuẩn gốc) - Dung dịch thử: Cân xác khoảng 30 mg chất thử cho vô bình định mức 100 ml hòa tan pha loãng với dung môi hòa tan vừa đủ 100 ml, lắc Lọc qua màng lọc 0,45µl, bỏ vài ml dịch lọc đầu - Dung dịch chuẩn gốc: Cân xác khoảng mg chuẩn làm việc lovastatin (mcL) cho vô bình định mức 20 ml hòa tan pha loãng với dung môi hòa tan vừa đủ 20 ml, lắc - Dung dịch chuẩn: Cân xác khoảng 30 mg chuẩn làm việc Simvastatin cho vô bình định mức 100 ml, thêm xác ml dung dịch chuẩn gốc hòa tan pha loãng với dung môi hòa tan vừa đủ 100 ml, lắc lọc qua màng lọc 0,45µm, bỏ vài ml dịch lọc đầu + Điều kiện phân tích 2.2 ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA THUỐC 2.2.1 Khái niệm chung Độ ổn định thuốc khoảng thời gian mà thuốc giữ đặc tính (về chất lượng hàm lượng) theo qui định tiêu chuẩn kỹ thuật Độ ổn định thuốc đặc trưng hạn dùng hay tuổi thọ thuốc Hạn dùng ngày ghi bao bì, nhãn sản phẩm cho biết thời hạn thuốc đạt chất lượng quy định bảo quản với điều kiện xác định Tuổi thọ xác định vào yếu tố: t90 = khoảng thời gian mà hàm lượng thuốc 90% so với hàm lượng ban đầu tx = khoảng thời gian mà hàm lượng sản phẩm phân hủy giới hạn cho phép Hạn dùng = tuổi thọ + ngày sản xuất [1] [2] 2.2.2 Một số yếu tố tác động đến độ ổn định Những trình xảy bảo quản thuốc dẫn đến thay đổi thành phần hóa học tính chấy vật lý chúng (tạo cặn, thay đổi màu sắc trạng thái) Những trình làm dần hoạt tính sinh học tạo tạp chất làm thay đổi hiệu lực tác dụng thuốc 10 + Nguyên liệu: Tất thành phần cấu tạo nên viên thuốc như: hoạt chất chính, loại tá dược… phải tinh khiết, hàm lượng tạp chất nằm giới hạn cho phép Với nguyên liệu có thời hạn kháng sinh, sản phẩm sinh học… phải hạn dung đủ dài trước đưa vào sản xuất Các nguyên liệu cận date bào chế sản phẩm bị phân hủy nhanh + Kỹ thuật bào chế: Việc lựa chọn kỹ thuật bào chế phù hợp cho loại hoạt chất giúp nhà sản xuất đạt mục tiêu sản xuất thuốc có chất lượng tốt, bị biến đổi Kỹ thuật bào chế thích hợp bao gồm điều kiện trang thiết bị sản xuất phù hợp, nhà máy cần đạt chuẩn GMP Công thức pha chế cần lưu ý tránh phối hợp thành phần làm tăng pjân hủy hoạt chất hay tá dược có thành phẩm + Bao bì: Bao bì vật tiếp xúc trực tiếp hay gián tiếp với thành phần thuốc, nên có ảnh hưởng đến độ ổn định thuốc Khả tương tác chất cấu thành bao bì với thành phần có thuốc lớn Do việc lựa chọn bao bì nắp đậy liên quan nhiều đến độ ổn định thuốc Mặt khác bao bì giúp thuốc tránh tác động lợi từ bên độ ẩm, xạ, oxy… + Sự ảnh hưởng điều kiện khí hậu: [2] Trong số yếu tố vật lý, tác động nhiếu đến tính ổn định thuốc nhiệt độ, độ ẩm ánh sáng + Nhiệt độ: Nhiệt độ đóng vai trò quan trọng ổn định thuốc Khi nhiệt độ tăng trình hóa lý thuốc xảy nhanh làm cho tốc độ phản ứng tăng nhanh Nhiệt độ cao làm bốc dung môi, hoạt chất kéo theo việc làm 11 giảm thành phần Ngược lại nhiệt độ thấp tạo nên kết thành khối, tái kết tinh ảnh hưởng đến độ rã khả giải phóng hoạt chất + Độ ẩm: [4] Độ ẩm không khí giảm làm giảm hàm lượng nước kết tinh thuốc, độ ẩm không khí tăng ảnh hưởng đến lý tính dược phẩm làm tăng trình thủy phân tạo sản phẩm phân hủy dạng sản phẩm khô bị hút ẩm, dạng bột đông khô, sủi bọt, làm phai màu viên bao, làm thuốc bột bị vón, tạo điều kiện cho xuất tăng trưởng vi sinh vật, làm giảm hoạt tính + Ánh sáng:[4] Ánh sáng có tác động khác dược phẩm Thông thường ánh sáng xúc tác phản ứng oxy hóa cách tạo gốc tự do, thúc đẩy trình phân hủy thuốc, làm thuốc dễ chuyển màu Tác động ánh sáng thường tia hồng ngoại có bước sóng từ 750 nm – 10.000 nm, kích thích oxy không khí làm tăng khả oxy hóa tia tử ngoại có bước sóng từ 50 nm – 400 nm, đặc biệt tia có bước sóng từ 200 nm – 290 nm tác động tia tử ngoại nguyên tử oxy kết hợp với ion oxy hay phân tử oxy tạo ozon có khả oxy hóa mạnh oxy 2.2.3 Phương pháp nghiên cứu độ ổn định thuốc + Phương pháp già hóa cấp tốc: [4][5][11] Là phương pháp phân hủy nhân tạo đặt thuốc điều kiện khắc nghiệt nhiệt độ cao nhiệt độ bảo quản bình thường, làm cho tốc độ phân hủy thuốc tăng nhanh hơn, rút ngắn thời gian theo dõi, đánh giá chất lượng thuốc Được phép sử dụng nhiệt độ cao để đảm bảo xác định tuổi thọ thuốc thời gian ngắn nhất, nhiệt độ không vượt nhiệt độ làm phân hủy thuốc Nghĩa nhiệt độ thử nghiệm phải nằm giới hạn không làm thay đổi chế phản ứng thuốc, không làm biến đổi trạng thái, 12 cấu trúc hóa lý nguyên liệu thành phẩm dạng bào chế,… + Phương pháp theo dõi tự nhiên: Điều kiện bảo quản thuốc thực nghiệm gần với điều kiện bảo quản thực thuốc lưu hành thị trường Sau thời gian định kỳ đánh giá chất lượng theo tiêu chuẩn qui định Dựa phân tích thống kê kết tính toán để xác định độ ổn định (tuổi thọ) thuốc Hoặc theo dõi diễn biến giảm hàm lượng 90% theo thời gian điều kiện bảo quản dự kiến mà sản phẩm lưu hành thị trường 2.2.4 Phương pháp tính tuổi thọ hạn dùng thuốc + Phương pháp Arrhenius: [5] Lão hóa cấp tốc nhiều nhiệt độ: Mẫu đặt tủ vi khí hậu nhiệt độ t 0C bình thường + 100C, + 200C, + 300C hay Xác định hàm lượng thuốc phương pháp qui định sau khoảng thời gian định để tủ vi khí hậu Xây dựng đường biểu diễn ln[D%]=f(t) hay lg[D%]=f(t) t0C bảo quản Xác định hệ số k điều kiện bảo quản Thiết lập bảng tương ứng lnk (hay lgk) 1000/T Từ đường biểu diễn suy lnk25 Từ lnk 25 tính k25 t90 theo công thức: t90 = 0,1053 K 25 + Phương pháp van’t Hoff: Xác định hàm lượng theo thời gian Vẽ đường ln[D]=f(t) để tính k1 Tính tuổi thọ nhiệt độ t1 = t90(t1) Sử dụng công thức van’t Hoff để suy tuổi thọ nhiệt độ cần bảo quản t 13 (k: hệ số tra theo bảng van’t Hoff) C = K.C* Trong đó: C*= tuổi thọ nhiệt độ già hóa cấp tốc =t90(t) = 0,1053/k C = tuổi thọ nhiệt độ bảo quản = t90(t2) K: hệ số van’t Hoff = ∆ t/10 2.3 MỘT SỐ CHẾ PHẨM CÓ CHỨA SIMVASTATIN TRÊN THỊ TRƯỜNG Bảng 2.3 : Một số biệt dược có Simvastatin Biệt dược Công ty Dược Quốc gia Lodalès: Sanofi Winthrop Pháp Zocor: Simvastatin 20mg Merck Mỹ Malaysia Simvastatin 20mg Tenamyd Canada Simvastatin 20mg Simvastatin 20mg Malaysia Domesco Việt Nam ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU: Chế phẩm viên bao phim Simvastatin 20 mg ( Imexpharm ) Chất đối chiếu Simvastatin: Viện Kiểm Nghiệm TP Hồ Chí Minh Chất đối chiếu Lovastatin: Viện Kiểm Nghiệm TP Hồ Chí Minh 3.2 ĐỊA ĐIỂM, TRANG THIẾT BỊ: 3.2.1 Địa điểm: Nghiên cứu thử nghiệm tiến hành tại: - Bộ môn Hoá phân tích - Kiểm nghiệm, Khoa dược - Trường Đại học Y Dược TP HCM 14 - Phòng kiểm tra chất lượng - Công ty cổ phần Imexpharm 3.2.3 Trang thiết bị Máy đo độ hòa tan: ERWEKA, DT6RE, Germany TDTF, RC806, China Máy đo quang phổ: UV Lambda 650, Perkin Elmer, USA Máy sắc ký lỏng hiệu cao: Lachrom Elite, L 2000, Hitachi - Japan Cân phân tích: độ xác 0,01 mg, Mettler AT 201, AT 201, Witzerland Máy lắc: Mini Shaker, MSR - 8572338, Germany Máy khuấy từ có điều nhiệt: Variomag, 40S, Germany Tủ sấy áp suất giảm: HERAEUS, VTR 5022 - D 63450, Germany Máy pH kế: InoLab, 720 – 06250590, Germany Máy lắc siêu âm: Elma, T840 HD, Germany 3.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.3.1 Xây dựng thẩm định quy trình định lượng Simvastatin viên bao phim SIMVASTATIN 20 mg HPLC + Pha động : hỗn hợp acetonitril : dd đệm phosphat pH 4,5 (65: 35)( tt/tt) + Dung dịch chuẩn: Cân xác lượng chuẩn làm việc simvastatin tương đương 50 mg cho vào bình định mức 50 ml Hoà tan dung môi hòa tan vừa đủ 50 ml Lắc Hút xác 50 ml dịch thu cho vào bình đinh mức 50 ml, pha loãng với dung môi hòa tan vừa đủ 50 ml, lắc Lọc qua lọc 0,45µm + Dung dịch thử: Cân xác 20 viên bao, tính khối lượng trung bình tán thành bột mịn Cân lượng bột viên tương đương 20 mg simvastatin cho vào bình định mức 100 ml, thêm ml nước, lắc cuộn tròn cho bột phân tán hoàn toàn, thêm 15 dung môi hòa tan đến vạch, xử lí siêu âm 15 phút làm nguội đến nhiệt độ phòng, lắc Ly tâm dung dịch phút Lấy xác ml dịch pha loãng với dung môi hòa tan vừa đủ 10 ml, lắc Lọc qua lọc 0,45µm Điều kiện sắc ký: Cột sắc ký: Lichrospher RP 18 (5µm , × 250 mm) Nhiệt độ cột: 450 C Phát hiện: UV detector 238 nm 3.3.2 Xác định độ hòa tan simvastatin + Môi trường hòa tan: Dung dịch đệm pH 7,0 chứa natri dodecyl sulfat 0,5% dung dịch natri phosphat 0,01M Dung dịch đệm pH 7,0 chứa natri dodecyl sulfat 0.5% dung dịch natri phos phat 0,01M: Hòa tan 30g natri dedocyl sulfat 8,28 g natri dihydrophosphat 6000 ml nước, điều chỉnh dung dịch natri hydroxyd 50% ( kl/ tt) tới pH 7,0 Mangan dioxyd rửa trước : Cân khoảng 20g vào bình nón có nút mài 250ml (*) Thêm 100 ml môi trường hòa tan, lắc mãnh liệt phút, tốc độ khuấy 400 rpm, lọc qua giấy whatman 1, (xếp chữ v ) Chuyển toàn cắn thu giấy lọc vào bình nón 250 ml (*), lặp lại trình ban đầu lần với 100 ml môi trường với 100 ml nước Lưu ý: chia hỗn hợp thành nhiều phần để lọc 4-5 giấy lọc Sấy chất rắn 1000C trước dùng + Điều kiện thử: Thiết bị : kiểu cánh khuấy 16 Môi trương hoa tan : dung dịch đệm pH 7,0, 900 ml / cốc, cốc Nhiệt độ : 37C+_ 0,5C Tốc độ quay : 50 vòng / phút Thời gian quay : 30 phút + Dung dịch thử: Sau 30 phút máy hoạt động, rút khoảng 60 ml hỗn dịch cốc, lọc qua giấy lọc xanh , bỏ khoảng 10 ml dịch lọc đầu, làm nguội dịch lọc sau, đến nhiệt độ phòng Hút xác 25 ml dịch lọc cho vào bình định mức 50 ml, pha loãng với môi trường hòa tan vừa đủ 50 ml, lắc Lấy khoảng 30 ml dung dịch vừa pha cho vào bình nón 100 ml, thêm khoảng 300 mg mangan dioxyd rửa trước Lắc để yên hỗn hợp 30 phút với lắc (5 phút/ lần), sau lọc qua giấy lọc whatman lọc tiếp qua màng lọc 0,45 µm Dung dich chuẩn: tiến hành dung dịch thử Cân lương chuẩn đối chiếu tương đương 22 mg simvastatin cho vào bình định mức 20ml, hòa tan pha loãng vừa đủ 20 ml với môi trường hòa tan, (lắc siêu âm, cần ) lắc Hút xác 1ml dung dịch pha loãng với môi trường hòa tan vừa đủ 100ml, lắc lấy 30 ml dung dịch thu cho vào bình nón 100 ml, tiến hành dung dịch thử “thêm 300 mg mangan dioxyd rửa trước (*) ” Mẫu trắng: dùng 30 ml, môi trường hòa tan thay cho 30 ml dung dịch lọc, tiến hành dung dịch thử “ thêm 300 ml mangan dioxyd rửa trước ” Đo độ hấp thu chuẩn (Ac 247,Ac 257) thử (At 247, At 257) bước sóng 247 nm 257nm 3.3.3 Xây dựng tiêu chuẩn sở viên bao phim SIMVASTATIN 20 mg 17 3.3.4 Khảo sát yếu tố ảnh hưởng tới độ ổn định Simvastatin 3.3.5 Khảo sát độ ổn định dự đoán hạn dùng Simvastatin viên bao phim SIMVASTATIN 20 mg 4.KẾ HOẠCH THỰC HIỆN STT Công việc cần thực Dự kiến Kết cần đạt thời gian Thu thập nhiều tài Tham khảo tài liệu Simvastatin 05/ 2009 – liệu simvastatin 08/ 2009 Xây dựng thẩm định quy trình Hoàn chỉnh phương định lượng Simvastatin viên 08/ 2009 – pháp định lượng bao phim SIMVASTATIN 20 mg 09/ 2009 HPLC Xác định độ hòa tan 09/ 2009 – Hoàn chỉnh phương pháp thử độ hòa tan 10/ 2009 simvastatin Xây dựng tiêu chuẩn sở viên bao phim SIMVASTATIN 20 mg 09/ 2009 – 10/ 2009 sở viên bao phim Simvastatin 20mg Khảo sát yếu tố ảnh hưởng tới độ 09/ 2009 – Xác định yếu tố ảnh ổn định Simvastatin 12/ 2009 Tính toán cỡ mẫu hạn dùng Simvastatin viên bao phim SIMVASTATIN 20 mg phương pháp lão hóa cấp hưởng Dự đoán tuổi thọ thuốc Khảo sát độ ổn định dự đoán Hoàn chỉnh tiêu chuẩn 01/ 2009 – 06/ 2010 tốc điều kiện trung gian điều kiện thường 18 Viết luận văn chuyên khoa I 07/ 2010 – Hoàn thành luận văn 08/ 2010 chuyên khoa I TRIỂN VỌNG CỦA ĐỀ TÀI Kết nghiên cứu sở khoa học cung cấp thêm liệu cho việc sản xuất thuốc simvastatin góp phần phục vụ ngành dược NƠI THỰC HIỆN ĐỀ TÀI Bộ môn phân tích - Kiểm nghiệm - Khoa Dược - Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Viện Kiểm Nghiệm TP.Hồ Chí Minh Phòng QC - Công Ty Cổ Phần Dược Phẩm Imexpharm DỰ TRÙ KINH PHÍ 7.1 Dự trù kinh phí Kinh phí dự kiến: 20.000.000 đồng Nguồn kinh phí: Do Công Ty Cổ Phần Dược Phẩm Imexpharm tài trợ TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Bộ Y tế (2002) Dược Điển Việt Nam III, NXB Y Học Hà Nội, trang 19, phụ lục 18, 23, 32, 82-87, 131-136 [2] Lê Thị Thiên Hương (2006), Độ ổn định thuốc, Tài liệu giảng dạy sau đại học, trang 1-13 [3] Trần Thị Thu Hằng (2004), Dược lực học, Đại Học Y Dược TP Hồ Chí Minh, trang 515 – 516 [4] Võ Thị Bạch Huệ, Đặng Văn Hòa (2008), Đại cương độ ổn định thuốc, Tài liệu giảng dạy sau đại học, trang 1- 40 19 [5] Võ Thị Bạch Huệ, Đặng Văn Hòa (2008), Cơ sở tính toán tuổi thọ thuốc, Tài liệu giảng dạy sau đại học, trang 1- 48 Tiếng nước [6] American Heart Association 8, 18, 2009 [7] Goodman and Gilman’s The pharmacological Basis of therapeutic, 11th, (2005) 948-953 [8] Nilesh Jain*1, Ruchi Jain1, Hemant Swami2 and Deepak Kumar Jain (2008) RP-HPLC Method for Simultaneous Estimation of Simvastatin and Ezetimibe in Bulk Drug and its Combined Dosage Form (có HPLC) [9] Malenović Anđelijaa, Ivanović Darkoa, Medenica Mirjanab, Jančić Biljanaa and Marković Slavkoc (2006) Influence of structural and interfacial properties of microemulsion eluent on chromatographic separation of simvastatin and its impurities có HPLC bảng phân hủy Simvas [10] The United States Pharmacopeia 27 (2006) ,volume II, Tr 1692 -1693 [11] ICH stability testing of new drugs and products (revised)-step 5, Q1A(R2) [12] The United States Pharmacopeia 29 (năm),volume II, Tr 1964 -1966 20 ... chuẩn sở viên bao phim SIMVASTATIN 20 mg 17 3.3.4 Khảo sát yếu tố ảnh hưởng tới độ ổn định Simvastatin 3.3.5 Khảo sát độ ổn định dự đoán hạn dùng Simvastatin viên bao phim SIMVASTATIN 20 mg 4.KẾ... xuất chế phẩm viên bao phim simvastatin 20 mg với mong muốn thay hàng ngoại nhập Vì tiến hành đề tài: “ KHẢO SÁT ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA VIÊN BAO PHIM SIMVASTATIN 20 mg Nhằm mục đích: - Khảo sát yếu tố... bao phim Simvastatin 2 0mg Khảo sát yếu tố ảnh hưởng tới độ 09/ 200 9 – Xác định yếu tố ảnh ổn định Simvastatin 12/ 200 9 Tính toán cỡ mẫu hạn dùng Simvastatin viên bao phim SIMVASTATIN 20 mg phương