xây dựng và thẩm định phương pháp kiểm nghiệm thuốc xịt mũi nasonex

TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN NGUYỄN LÊ NGỌC HIỀN XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH PHƢƠNG PHÁP KIỂM NGHIỆM THUỐC XỊT MŨI NASONEX LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH HÓA DƢỢC CẦN THƠ – 2013 TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN NGUYỄN LÊ NGỌC HIỀN XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH PHƢƠNG PHÁP KIỂM NGHIỆM THUỐC XỊT MŨI NASONEX LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH: HÓA DƢỢC CÁN BỘ HƢỚNG DẪN ThS. NGUYỄN ĐỨC TUẤN Ts. NGUYỄN TRỌNG TUÂN CẦN THƠ – 2013 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN ------  -----Năm học 2013-2014 ĐỀ TÀI: XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH PHƢƠNG PHÁP KIỂM NGHIỆM THUỐC XỊT MŨI NASONEX LỜI CAM ĐOAN Tôi tên Nguyễn Lê Ngọc Hiền, tác giả Luận văn xin xác nhận Luận văn đƣợc chỉnh sửa hoàn chỉnh theo ý kiến góp ý Thầy, Cô phản biện thành viên Hội đồng chấm Bảo vệ luận văn. Cần Thơ, ngày tháng năm 2013 Sinh viên thực Nguyễn Lê Ngọc Hiền Luận văn tốt nghiệp đại học Chuyên ngành: Hóa dƣợc Đã bảo vệ đƣợc duyệt Hiệu trƣởng:…………………………. Trƣởng Khoa:…………………………. Trƣởng Chuyên ngành Cán hƣớng dẫn Ths. Nguyễn Đức Tuấn TS. Nguyễn Trọng Tuân Trƣờng Đại học Cần Thơ Khoa Khoa học Tự nhiên Bộ môn Hóa học CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc -----  ----- NHẬN XÉT ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ HƢỚNG DẪN Cán hƣớng dẫn: ThS. Nguyễn Đức Tuấn TS. Nguyễn Trọng Tuân Đề tài: Xây dựng thẩm định phƣơng pháp kiểm nghiệm thuốc xịt mũi Nasonex Sinh viên thực hiện: Nguyễn Lê Ngọc Hiền MSSV: 2102445 Lớp: Hóa dƣợc Khóa: 36 Nội dung nhận xét: a. Nhận xét hình thức luận văn tốt nghiệp: b. Nhận xét nội dung luận văn tốt nghiệp:  Đánh giá nội dung thực đề tài:  Những vấn đề hạn chế: c. Nhận xét sinh viên tham gia thực đề tài: d. Kết luận, đề nghị điểm: Cần Thơ, ngày tháng năm 2013 Cán hƣớng dẫn Nguyễn Đức Tuấn Nguyễn Trọng Tuân Trƣờng Đại học Cần Thơ Khoa Khoa học Tự nhiên Bộ môn Hóa học CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc ------  ------ NHẬN XÉT ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ CHẤM PHẢN BIỆN Cán chấm phản biện: Đề tài: Xây dựng thẩm định phƣơng pháp kiểm nghiệm thuốc xịt mũi Nasonex Sinh viên thực hiện: Nguyễn Lê Ngọc Hiền MSSV: 2102445 Lớp: Hóa dƣợc Khóa: 36 Nội dung nhận xét: a. Nhận xét hình thức luận văn tốt nghiệp: b. Nhận xét nội dung luận văn tốt nghiệp:  Đánh giá nội dung thực đề tài:  Những vấn đề hạn chế: c. Nhận xét sinh viên tham gia thực đề tài: d. Kết luận, đề nghị điểm: Cần Thơ, ngày tháng năm 2013 Cán chấm phản biện LỜI CẢM ƠN Khoảng thời gian hai tháng rƣỡi thực đề tài công ty Cổ phần xuất nhập y tế Domesco khoảng thời gian vô quý giá, giúp có hội học hỏi thêm nhiều kinh nghiệm thực tế nhƣ kiến thức bổ ích cho công việc sau này. Đầu tiên, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến anh Lê Văn Nhã Phƣơng, anh Nguyễn Đức Tuấn toàn thể anh chị phòng QC – RD thuộc công ty Cổ phần xuất nhập y tế Domesco nhiệt tình giúp đỡ, dẫn, chia sẻ kinh nghiệm thực tế quý báu tạo điều kiện thuận lợi để hoàn thành đề tài mình. Xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy Nguyễn Trọng Tuân, cô Tôn Nữ Liên Hƣơng Thầy, Cô môn Hóa – Khoa Khoa học Tự nhiên tận tình dạy dỗ, truyền đạt kiến thức hữu ích giúp đỡ, động viên thời gian qua. Tôi xin đƣợc cảm ơn bạn lớp Hóa dƣợc K36 ủng hộ, động viên giúp đỡ suốt trình học tập nghiên cứu. Sau cùng, xin cảm ơn gia đình nguồn động viên tinh thần to lớn, vững giúp vƣợt qua khó khăn để thực đề tài. Chân thành cảm ơn! Cần Thơ, ngày tháng năm 2013 Sinh viên thực Nguyễn Lê Ngọc Hiền i TÓM TẮT Đối với loại chế phẩm, việc xây dựng phƣơng pháp kiểm nghiệm phù hợp với công thức bào chế nhƣ điều kiện thực tiễn phòng thí nghiệm điều cần thiết. Đề tài “Xây dựng thẩm định phương pháp kiểm nghiệm thuốc xịt mũi Nasonex” đƣợc thực nhằm nghiên cứu phƣơng pháp kiểm nghiệm thành phẩm Nasonex 0,05% chứa hoạt chất Mometasone furoate thẩm định phƣơng pháp kiểm nghiệm xây dựng. Đề tài sử dụng phƣơng pháp sắc ký lớp mỏng sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) cho phép thử định tính, phƣơng pháp HPLC để định lƣợng hoạt chất Mometasone furoate thành phẩm. Kết xây dựng đƣợc phƣơng pháp kiểm nghiệm thành phẩm Nasonex thẩm định quy trình định lƣợng Mometasone furoate với độ đặc hiệu tốt, hệ số tƣơng quan r = 0,9999, độ lặp lại với RSD = 0,77%, độ với tỉ lệ phục hồi 100,52%, giới hạn phát LOD = 0,29 g/mL giới hạn định lƣợng LOQ = 0,89 g/mL. Kết thu đƣợc cho thấy phƣơng pháp kiểm nghiệm thành phẩm Nasonex xây dựng đáng tin cậy, khả thi, ứng dụng vào kiểm nghiệm. Từ khóa: Nasonex, Mometasone furoate, HPLC, kiểm nghiệm. ii ABSTRACT For each type of final product, it is necessary to determine suitable testing methods for the preparation formula as well as the reality condition of each laboratory. The thesis “Determining and validating testing method for Nasonex nasal spray” was conducted to research on the method for testing Nasonex 0,05 % which contains active compound is Mometasone furoate and validating testing method has been built. Using Thin Layer Chromatography (TLC) and High Performance Liquid Chromatography (HPLC) to identify, uses HPLC to quantify Mometasone furoate in Nasonex. As a result, the testing method for Nasonex nasal spray was established and the quantitative process of Mometasone furoate was validated with good specificity, the correlation coefficient r = 0,9999, repeatability with RSD = 0,77 % , accuracy with the recovery rate 100,52 %, limit of detection LOD = 0,29 g/mL and limit of quantitation LOQ = 0,89 g/mL. The obtained result shows that the established testing method for Nasonex is reliable and applicable for testing. Key words: Nasonex, Mometasone furoate, HPLC, testing. iii Trƣờng Đại học Cần Thơ Khoa Khoa học Tự Nhiên Bộ môn Hóa học ------  -----Năm học 2013-2014 ĐỀ TÀI: XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH PHƢƠNG PHÁP KIỂM NGHIỆM THUỐC XỊT MŨI NASONEX CAM KẾT KẾT QUẢ Tôi xin cam đoan luận văn đƣợc hoàn thành dựa kết nghiên cứu kết nghiên cứu chƣa đƣợc dùng cho luận văn cấp khác. Cần Thơ, ngày tháng năm 2013 Sinh viên thực Nguyễn Lê Ngọc Hiền iv Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN i TÓM TẮT . ii ABSTRACT . iii CAM KẾT KẾT QUẢ iv DANH MỤC BẢNG viii DANH MỤC HÌNH . ix DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT . xi Chƣơng 1: GIỚI THIỆU .1 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu nội dung nghiên cứu .2 1.2.1 Mục tiêu nghiên cứu .2 1.2.2 Nội dung nghiên cứu Chƣơng 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU .4 2.1 Giới thiệu chung bệnh mũi 2.1.1 Các bệnh mũi thƣờng gặp triệu chứng .4 2.1.2 Nguyên nhân gây bệnh mũi 2.1.3 Điều trị bệnh mũi .5 2.2 Giới thiệu chung hoạt chất Mometasone furoate thành phẩm Nasonex .6 2.2.1 Hoạt chất Mometasone furoate .6 2.2.2 Thành phẩm Nasonex .7 2.3 Phƣơng pháp định lƣợng Mometasone furoate .9 2.3.1 Giới thiệu phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 2.3.2 Nguyên tắc, cấu tạo hệ thống máy HPLC 10 2.3.3 Định lƣợng Mometasone furoate HPLC . 11 2.4 Thẩm định quy trình phân tích . 11 2.4.1 Tầm quan trọng việc thẩm định 11 2.4.2 Các tiêu thẩm định quy trình phân tích . 12 Chƣơng 3: PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU . 16 3.1 Phƣơng tiện nghiên cứu 16 3.1.1 Địa điểm thời gian thực 16 v Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 E.5 Sắc ký dồ dung dịch chuẩn 80% khảo sát tính tuyến tính 67 Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 E.6 Sắc ký dồ dung dịch chuẩn 100% khảo sát tính tuyến tính 68 Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 E.7 Sắc ký dồ dung dịch chuẩn 120% khảo sát tính tuyến tính 69 Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 E.8 Sắc ký dồ dung dịch chuẩn 180% khảo sát tính tuyến tính 70 Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 E.9 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn xác định độ lặp lại độ 71 Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 72 Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 E.10 Sắc ký đồ dung dịch thử khảo sát độ lặp lại 73 Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 74 Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 75 Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 76 Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 E.11 Sắc ký độ dung dịch thử 10% khảo sát độ 77 Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 78 Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 E.12 Sắc ký đồ dung dịch thử 15% khảo sát độ 79 Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 80 Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 E.13 Sắc ký đồ dung dịch thử 20% khảo sát độ 81 Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 82 [...]... có phƣơng pháp kiểm nghiệm đƣợc quy định chung tại các Dƣợc điển Tuy nhiên, đối với mỗi loại chế phẩm thì việc khảo sát lại để xây dựng một phƣơng pháp kiểm nghiệm phù hợp với công thức bào chế cũng nhƣ điều kiện thực tiễn của mỗi phòng thí nghiệm là điều cần thiết Do 1 Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 đó, đề tài Xây dựng và thẩm định phƣơng pháp kiểm nghiệm thuốc xịt mũi Nasonex đƣợc lựa chọn... cứu sản xuất thuốc generic từ thuốc brand name 1.2 MỤC TIÊU VÀ NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 1.2.1 Mục tiêu nghiên cứu - Kiểm tra các chỉ tiêu chất lƣợng của nguyên liệu Mometasone furoate - Xây dựng phƣơng pháp kiểm nghiệm thành phẩm Nasonex - Thẩm định phƣơng pháp kiểm nghiệm đã xây dựng 1.2.2 Nội dung nghiên cứu - Kiểm nghiệm các chỉ tiêu của nguyên liệu Monetasone furoate: + Cảm quan + Tính tan + Định tính... nhằm đƣa ra một phƣơng pháp kiểm nghiệm phù hợp đối với thành phẩm Nasonex cũng nhƣ với điều kiện kiểm tra tại Trung tâm Nghiên cứu và Phát triển thuộc công ty Cổ phần xuất nhập khẩu y tế Domesco, sau đó tiến hành thẩm định lại phƣơng pháp đã xây dựng Bên cạnh đó, thuốc xịt mũi Nasonex hiện tại vẫn là một thuốc brand name đƣợc đăng ký bản quyền cho đến tháng 07/2014 nên việc chọn Nasonex làm đối tƣợng... bị nghẹt mũi nặng hơn, đƣa đến vòng lẩn quẩn là bị “viêm mũi do thuốc Đối với trẻ nhỏ, không nên dùng thuốc nhỏ mũi loại này vì có thể gây choáng, tím tái - Thuốc glucocorticoid xịt mũi: thuốc hiệu quả trong trị viêm mũi dị ứng, dùng lâu dài nhằm phòng ngừa viêm mũi dị ứng - Thuốc nhỏ mũi hoặc phun xịt NaCl 0,9% (chứa dung dịch còn đƣợc gọi là nƣớc biển, nƣớc muối sinh lý): có tác dụng rửa mũi, giải... CÁC BỆNH VỀ MŨI 2.1.1 Các bệnh về mũi thƣờng gặp và triệu chứng - Viêm mũi dị ứng: biểu hiện đầu tiên là hắt hơi liên tục (hay còn gọi là nhảy mũi) kèm theo các triệu chứng nhƣ cơ thể mệt mỏi, chảy nƣớc mũi, nghẹt mũi, ho, ngứa mũi, đau đầu nhẹ, đau mặt, giảm cảm giác về mùi và hƣơng vị, cảm giác đầy và ù tai, đôi mắt sƣng lên và buồn ngủ [1] - Viêm mũi cấp tính: biểu hiện ban đầu là ngứa mũi, hắt hơi,... sinh mũi không đúng cách, thƣờng xuyên ngoáy mũi khiến mũi bị viêm nhiễm - Sức đề kháng của cơ thể yếu 4 Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 2.1.3 Điều trị các bệnh về mũi [4] Mục tiêu điều trị các bệnh lý về mũi là giảm đến mức tối thiểu các triệu chứng và lựa chọn các thuốc vừa hiệu quả, vừa ít có tác dụng phụ độc hại Có nhiều nhóm thuốc trị bệnh lý về mũi và đƣợc phân ra 2 loại thuốc uống và thuốc. .. chỗ (nhỏ hoặc phun xịt vào mũi) nhƣ sau:  Loại thuốc uống - Nhóm thuốc uống kháng histamine trị dị ứng: nhƣ clorpheniramine, loratidine giúp giảm triệu chứng ngứa mũi, nhảy mũi, sổ mũi, chảy nƣớc mắt nhƣng không có tác dụng đối với nghẹt (tắc) mũi - Nhóm thuốc uống cƣờng giao cảm gây co mạch: gồm ephedrine, pseudoephedrine, phenylpropanolamine giúp thông mũi, trị nghẹt mũi tốt - Nhóm thuốc uống glucocorticoid:... dexamethasone, chỉ uống khi bị viêm mũi xoang nặng và mạn tính - Nhóm thuốc uống kháng sinh: dùng khi bệnh lý về mũi có liên quan đến nhiễm khuẩn  Loại thuốc dùng tại chỗ (nhỏ hoặc phun xịt vào mũi) - Thuốc co mạch nhỏ mũi: chứa dƣợc chất nhƣ naphtazoline, oxymetazoline, có tác dụng thông mũi tốt nhƣng chỉ nên nhỏ mũi trong thời gian ngắn 7 ngày Lý do là nếu dùng lâu bị quen thuốc, bị hiệu ứng “dội” phải... 18 3.2 Phƣơng pháp nghiên cứu .19 3.2.1 Kiểm nghiệm nguyên liệu Mometasone furoate 19 3.2.2 Kiểm nghiệm thành phẩm Nasonex 23 3.2.3 Thẩm định quy trình phân tích thành phẩm Nasonex bằng HPLC 25 Chƣơng 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 29 4.1 Kiểm nghiệm nguyên liệu Mometasone furoate 29 4.1.1 Cảm quan 29 4.1.2 Tính tan 29 4.1.3 Định tính ... khối lƣợng do làm khô + Định lƣợng + Tạp chất liên quan - Kiểm nghiệm các chỉ tiêu của thành phẩm Nasonex: + Cảm quan + Định tính + Định lƣợng 2 Luận văn tốt nghiệp đại học Hóa dược K36 - Thẩm định quy trình phân tích thành phẩm Nasonex: + Khảo sát tính đặc hiệu + Khảo sát tính tuyến tính + Khảo sát độ lặp lại + Khảo sát độ đúng + Xác định giới hạn phát hiện + Xác định giới hạn định lƣợng 3 Luận văn . pháp 42 4.3 .5 Xác định giới hạn phát hiện (LOD) của phƣơng pháp 43 4.3.6 Xác định giới hạn định lƣợng (LOQ) của phƣơng pháp 44 Chƣơng 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 45 5. 1 Kết luận 45 5. 2 Kiến nghị. bằng HPLC 25 Chƣơng 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 29 4.1 Kiểm nghiệm nguyên liệu Mometasone furoate 29 4.1.1 Cảm quan 29 4.1.2 Tính tan 29 4.1.3 Định tính 29 4.1.4 Điểm chảy 32 4.1 .5 Góc quay. nguyên liệu Mometsone furoate 33 Bảng 4 .5 Kết quả định lƣợng nguyên liệu Mometasone furoate 33 Bảng 4.6 Tạp chất liên quan của nguyên liệu Mometasone furoate 35 Bảng 4.7 Tóm tắt kết quả kiểm nghiệm