BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI BẠCH THÚY ANH XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI HYPOGLYCIN A VÀ (METHYLENCYCLOPROPYL)GLYCIN TRONG QUẢ VẢI TẠI CAO BẰNG BẰNG SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ HAI LẦN LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI BẠCH THÚY ANH XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI HYPOGLYCIN A VÀ (METHYLENCYCLOPROPYL)GLYCIN TRONG QUẢ VẢI TẠI CAO BẰNG BẰNG SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ HAI LẦN LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: KIỂM NGHIỆM THUỐC – ĐỘC CHẤT MÃ SỐ: 8720210 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Lê Thị Hồng Hảo PGS.TS Phạm Thị Thanh Hà HÀ NỘI 2019 LỜI CẢM ƠN Trong thời gian thực luận văn này, may mắn nhận giúp đỡ tận tình thầy giáo, chun gia, nghiên cứu viên, anh chị kỹ thuật viên tình cảm khích lệ mà gia đình bạn bè dành cho Tôi xin bày tỏ kính trọng lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Lê Thị Hồng Hảo, PGS.TS Phạm Thị Thanh Hà ln tâm huyết tận tình hướng dẫn, bảo suốt thời gian thực hồn thành luận văn Tơi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc chân thành tới TS Trần Cao Sơn cho lời khuyên quý báu, dành nhiều thời gian tạo điều kiện tối đa giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn anh chị khoa Độc học & dị nguyên – Viện kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm Quốc gia tạo điều kiện nhiệt tình giúp đỡ tơi thời gian thực luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban Giám Hiệu, phòng Sau đại học, mơn Hóa phân tích độc chất – trường Đại học Dược Hà Nội, thầy cô giảng dạy giúp đỡ tơi q trình học tập trường Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn đến gia đình bạn bè – người đồng hành thiếu học tập sống ln động viên khích lệ tơi ngày qua Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày…tháng 03 năm 2019 Học viên Bạch Thúy Anh MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG BIỂU DANH MỤC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan vải 1.1.1 Đặc điểm thực vật 1.1.2 Phân bố, sinh thái phận dùng 1.1.3 Thành phần hóa học 1.2 Tổng quan Hypoglycin A (Methylencyclopropyl)glycin 1.2.1 Nguồn gốc HGA MCPG từ thực phẩm 1.2.2 Độc tính HGA MCPG 1.2.3 Quy định hành HGA MCPG 1.2.4 Cấu tạo tính chất Hypoglycin A (Methylencyclopropyl)glycin 1.3 Phương pháp xác định HGA MCPG 1.3.1 Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao 1.3.2 Phương pháp sắc ký khí khối phổ 10 1.4 Tổng quan phương pháp sắc ký lỏng khối phổ hai lần (LC – MS/MS) 15 1.4.1 Nguyên lý hoạt động 15 1.4.2 Hệ thống sắc ký lỏng hiệu cao 16 1.4.3 Khối phổ (Mass Spectrometry) 18 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Đối tượng nghiên cứu 19 2.2 Phương tiện nghiên cứu 19 2.2.1 Thiết bị, dụng cụ 19 2.2.2 Dung mơi, hóa chất 20 2.2.3 Chất chuẩn 20 2.2.4 Chuẩn bị dung dịch chuẩn 20 2.3 Nội dung nghiên cứu 22 2.3.1 Khảo sát điều kiện xác định LC-MS/MS 22 2.3.2 Khảo sát điều kiện xử lý mẫu 22 2.3.3 Khảo sát ảnh hưởng 23 2.3.4 Xác nhận giá trị sử dụng 23 2.3.5 Đánh giá hàm lượng HGA MCPG mẫu thực tế 23 2.4 Phương pháp nghiên cứu 23 2.4.1 Phương pháp lấy mẫu 23 2.4.2 Phương pháp xử lý mẫu 24 2.4.3 Phương pháp sắc ký lỏng khối phổ hai lần (LC-MS/MS) 25 2.4.4 Phương pháp thẩm định 25 2.4.5 Phương pháp xử lý số liệu 27 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 28 3.1 Nghiên cứu phương pháp xác định đồng thời HGA MCPG vải 28 3.1.1.Khảo sát điều kiện LC-MS/MS 28 3.1.2 Khảo sát quy trình xử lý mẫu 33 3.1.3 Khảo sát ảnh hưởng 40 3.2 Thẩm định phương pháp 41 3.2.1 Độ đặc hiệu 41 3.2.2 Giới hạn phát (LOD) giới hạn định lượng (LOQ) 43 3.2.3 Khoảng làm việc 44 3.2.4 Độ lặp lại, độ thu hồi 46 3.2.5 Độ tái lặp nội 48 3.3 Ứng dụng phương pháp để phân tích mẫu vải 48 CHƯƠNG BÀN LUẬN 50 KẾT LUẬN 52 Kết luận 52 Kiến nghị 52 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nội dung ACN Acetonitril EtOH Ethanol ESI Ion hóa tia điện (ElectroSpray Ionization) GC-MS/MS Sắc ký khí khối phổ hai lần (Gas chromatography tandem mass spectrometry) HGA Hypoglycin A MCPG (Methylencyclopropyl)glycin MeOH Methanol FDA Cục quản lý thực phẩm dược phẩm Hoa Kỳ (United States Food and Drug Administration) LC-MS/MS Sắc ký lỏng khối phổ hai lần (Liquid chromatography tandem mass spectrometry) LOD Giới hạn phát (Limit of detection) LOQ Giới hạn định lượng (Limit of quantification) PhA SPE Phenylalanin Chiết pha rắn (Solid phase extraction) DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1.1 Danh sách trường hợp ngộ độc độc HGA xảy toàn cầu Bảng 1.2 Một số nghiên cứu HGA MCPG 12 Bảng 2.1 Pha dung dịch chuẩn trung gian 21 Bảng 2.2 Pha dung dịch chuẩn làm việc 21 Bảng 3.1 Các điều kiện MS dùng để phân tích HGA MCPG 28 Bảng 3.2 Các thông số tối ưu MS 30 Bảng 3.3 Điều kiện gradient 32 Bảng 3.4 Ảnh hưởng mẫu HGA 40 Bảng 3.5 Tỷ lệ ion HGA MCPG 42 Bảng 3.6 Độ lặp lại, độ thu hồi HGA 46 Bảng 3.7 Độ lặp lại, độ thu hồi MCPG 47 Bảng 3.8 Độ tái lặp nội 48 Bảng 3.9 Kết phân tích mẫu thực tế 49 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cây vải (Litchi chinensis Sonn) Hình 1.2 Quá trình chuyển hóa Hypoglycin A Hình 1.3 Cơng thức cấu tạo HGA Hình 1.4 Cơng thức cấu tạo MCPG Hình 1.5 Mơ hình hệ thống LC-ESI-MS/MS 16 Hình 1.6 Sơ đồ cấu trúc thiết bị khối phổ MS 18 Hình 2.1 Cơng thức cấu tạo Phenylalanin 22 Hình 3.1 Phổ khối chất phân tích 29 Hình 3.2 Sắc đồ Dns-HGA, Dns-MCPG Dns-PhA sử dụng cột C18 31 Hình 3.3 Sắc đồ tổng HGA MCPG 32 Hình 3.4 Sắc đồ MRM HGA MCPG 33 Hình 3.5 Biểu đồ kết khảo sát dung mơi chiết 34 Hình 3.6 Biểu đồ kết khảo sát nồng độ dung môi 35 Hình 3.7 Biểu đồ kết khảo sát SPE 36 Hình 3.8 Sắc ký đồ khảo sát dung mơi rửa tạp, rửa giải 37 Hình 3.9 Sắc đồ khảo sát thể tích dung mơi rửa giải 38 Hình 3.10 Quy trình xử lý mẫu tối ưu 39 Hình 3.11 Đường chuẩn dung mơi mẫu thực 40 Hình 3.12 Sắc đồ mẫu trắng, mẫu chuẩn mẫu trắng thêm chuẩn HGA 42 Hình 3.13 Sắc đồ mẫu trắng, mẫu chuẩn mẫu trắng thêm chuẩn MCPG 43 Hình 3.14 Sắc đồ mẫu trắng thêm chuẩn mức nồng độ 0,05 mg/kg 44 Hình 3.15 Sắc ký đồ đường chuẩn phân tích HGA 45 Hình 3.16 Sắc ký đồ đường chuẩn phân tích MCPG 45 ĐẶT VẤN ĐỀ Việt Nam quốc gia nằm khu vực nhiệt đới gió mùa, có hệ thực vật vơ phong phú đa dạng Do nước ta mạnh loài ăn quả, nhiều loài đặc sản tiếng giới biết đến bưởi, long, vú sữa, xồi,… Trong đó, vải loại trái nhiều người ưu thích xuất ngày nhiều sang thị trường quốc tế Tuy nhiên, số trường hợp ngộ độc sau ăn vải chưa chín xảy nhiều quốc gia Ấn Độ, Bangladesh, Jamaica,…[8] Năm 2017 Việt Nam xảy vụ ngộ độc với cháu nhỏ, nghi ăn vải rừng tỉnh Cao Bằng Theo nghiên cứu, thịt hạt vải nói riêng số loại thuộc họ Bồ nói chung (chơm chơm, ackee…) chứa độc chất Hypoglycin A (HGA) (Methylencyclopropyl)glycin (MCPG) [6], [9] Do nghiên cứu hai độc chất HGA MCPG quan tâm đến Hiện nay, giới có số nghiên cứu phương pháp xác định HGA MCPG vải Tuy nhiên, Việt Nam chưa có phương pháp tiêu chuẩn áp dụng Do đó, đề tài “Xây dựng thẩm định phương pháp xác định đồng thời Hypoglycin A và( Methylencyclopropyl)glycin vải Cao Bằng sắc ký lỏng khối phổ hai lần” thực ý nghĩa mặt khoa học mà có ý nghĩa thực tiễn việc tìm hiểu, ngăn ngừa hỗ trợ điều trị ca nhiễm độc liên quan đến chất Mục tiêu đề tài bao gồm: Xây dựng thẩm định phương pháp xác định đồng thời HGA MCPG vải sắc ký lỏng khối phổ hai lần Ứng dụng phương pháp để xác định hàm lượng HGA MCPG số mẫu vải tỉnh Cao Bằng 51 xanh 121 7,5 0,65 52 xanh 122 5,9 0,68 53 xanh 123 9,3 0,81 54 xanh 124 9,2 0,65 55 xanh 125 6,7 0,67 56 xanh 126 7,6 0,91 57 xanh 127 7,9 1,2 58 xanh 128 7,1 1,0 59 xanh 129 7,5 0,97 60 xanh 130 7,5 0,87 61 xanh 131 6,3 0,65 62 xanh 132 6,1 0,69 63 xanh 133 6,0 0,73 64 xanh 134 5,3 0,82 65 xanh 135 5,6 0,88 66 xanh 136 6,3 0,86 67 xanh 137 8,7 0,91 68 xanh 138 8,5 1,2 69 xanh 139 8,6 1,1 70 xanh 140 7,6 1,3 Đợt 3: Lấy mẫu Thông Nông – Cao Bằng (lần 2) Thời gian lấy mẫu: 04/06/2018 – 08/06/2018 STT Tên mẫu Hàm lượng HGA (mg/kg) Hàm lượng MCPG (mg/kg) chưa chín 01 2,1 1,04 chưa chín 02 2,1 0,37 chưa chín 03 1,9 0,35 chưa chín 04 2,3 0,87 chưa chín 05 1,7 0,89 chưa chín 06 1,4 0,51 chưa chín 07 1,8 0,78 chưa chín 08 1,4 0,37 chưa chín 09 1,7 0,87 10 chưa chín 10 1,4 0,52 11 chưa chín 11 1,7 0,56 12 chưa chín 12 1,7 0,51 13 chưa chín 13 2,3 0,52 14 chưa chín 14 2,3 0,43 15 chưa chín 15 2,4 0,59 16 chưa chín 16 2,0 0,51 17 chưa chín 17 2,1 0,51 18 chưa chín 18 2,2 0,47 19 chưa chín 19 1,9 0,78 20 chưa chín 20 2,0 0,43 21 chưa chín 21 1,9 0,87 22 chưa chín 22 1,6 1,02 23 chưa chín 23 1,7 0,89 24 chưa chín 24 1,7 0,51 25 chưa chín 25 2,3 0,96 26 chưa chín 26 2,2 0,47 27 chưa chín 27 2,2 0,59 28 chưa chín 28 2,1 0,89 29 chưa chín 29 2,1 0,51 30 chưa chín 30 2,2 0,51 31 chưa chín 31 2,0 0,51 32 chưa chín 32 1,5 0,78 33 chưa chín 33 1,5 0,89 34 chưa chín 34 2,3 0,51 35 chưa chín 35 1,6 0,47 36 chưa chín 36 1,9 0,51 37 chưa chín 37 1,9 0,87 38 chưa chín 38 1,9 0,78 39 chưa chín 39 1,8 1,03 40 chưa chín 40 1,9 0,51 41 chưa chín 41 1,9 0,87 42 chưa chín 42 2,2 1,02 43 chưa chín 43 2,2 0,96 44 chưa chín 44 2,4 0,87 45 chưa chín 45 2,3 1,02 46 chưa chín 46 2,0 0,49 47 chưa chín 47 2,2 0,56 48 chưa chín 48 1,9 0,51 49 chưa chín 49 1,9 0,52 50 chưa chín 50 2,0 0,43 51 chưa chín 51 1,9 0,59 52 chưa chín 52 1,6 0,87 53 chưa chín 53 1,7 0,49 54 chưa chín 54 1,7 0,49 55 chưa chín 55 2,3 0,96 56 chưa chín 56 2,2 0,78 57 chưa chín 57 2,2 0,56 58 chưa chín 58 2,1 0,51 59 chưa chín 59 2,1 0,51 60 chưa chín 60 2,2 0,89 61 chưa chín 61 2,0 0,87 62 chưa chín 62 1,9 0,47 63 chưa chín 63 1,8 1,02 64 chưa chín 64 1,9 1,02 65 chưa chín 65 1,9 0,87 66 chưa chín 66 2,2 0,78 67 chưa chín 67 2,2 0,47 68 chưa chín 68 2,4 0,51 69 chưa chín 69 2,2 0,89 70 chưa chín 70 1,6 0,51 Đợt 4: Lấy mẫu Nguyên Bình – Cao Bằng Thời gian lấy mẫu: 21/06/2018 – 25/06/2018 Tên mẫu Hàm lượng HGA (mg/kg) Hàm lượng MCPG (mg/kg) chưa chín 71 1,3 0,31 chưa chín 72 1,0 0,32 chưa chín 73 1,4 0,34 chưa chín 74 1,5 0,36 chưa chín 75 1,6 0,30 chưa chín 76 2,0 0,29 chưa chín 77 2,5 0,34 chưa chín 78 1,5 0,41 chưa chín 79 2,3 0,42 STT 10 chưa chín 80 1,4 0,39 11 chưa chín 81 1,6 0,41 12 chưa chín 82 1,7 0,26 13 chưa chín 83 2,3 0,25 14 chưa chín 84 2,1 0,30 15 chưa chín 85 2,0 0,34 16 chưa chín 86 1,8 0,36 17 chưa chín 87 2,3 0,27 18 chưa chín 88 2,3 0,35 19 chưa chín 89 1,7 0,35 20 chưa chín 90 1,6 0,28 21 chưa chín 91 1,8 0,29 22 chưa chín 92 2,0 0,33 23 chưa chín 93 2,0 0,31 24 chưa chín 94 1,4 0,24 25 chưa chín 95 1,6 0,26 26 chưa chín 96 2,0 0,27 27 chưa chín 97 2,1 0,63 28 chưa chín 98 1,9 0,24 29 chưa chín 99 1,6 0,35 30 chưa chín 100 1,7 0,36 31 chưa chín 101 1,4 0,36 32 chưa chín 102 1,5 0,30 33 chưa chín 103 1,6 0,29 34 chưa chín 104 1,2 0,34 35 chưa chín 105 1,3 0,41 36 chưa chín 106 1,0 0,42 37 chưa chín 107 1,3 0,40 38 chưa chín 108 1,7 0,37 39 chưa chín 109 1,6 0,34 40 chưa chín 110 1,4 0,29 41 chưa chín 111 2,3 0,27 42 chưa chín 112 1,4 0,34 43 chưa chín 113 2,0 0,38 44 chưa chín 114 2,0 0,25 45 chưa chín 115 1,6 0,25 46 chưa chín 116 1,7 0,31 47 chưa chín 117 1,9 0,32 48 chưa chín 118 1,9 0,34 49 chưa chín 119 1,4 0,36 50 chưa chín 120 1,6 0,30 51 chưa chín 121 1,7 0,29 52 chưa chín 122 2,3 0,34 53 chưa chín 123 1,7 0,34 54 chưa chín 124 1,9 0,36 55 chưa chín 125 1,9 0,27 56 chưa chín 126 1,4 0,25 57 chưa chín 127 1,6 0,25 58 chưa chín 128 1,4 0,31 59 chưa chín 129 1,6 0,32 60 chưa chín 130 2,0 0,34 61 chưa chín 131 2,1 0,36 62 chưa chín 132 1,9 0,30 63 chưa chín 133 1,5 0,26 64 chưa chín 134 1,5 0,25 65 chưa chín 135 1,8 0,30 66 chưa chín 136 1,6 0,34 67 chưa chín 137 1,7 0,36 68 chưa chín 138 1,6 0,27 69 chưa chín 139 1,8 0,31 70 chưa chín 140 2,0 0,30 Đợt 5: Lấy mẫu Bảo Lạc – Cao Bằng (lần 2) Thời gian lấy mẫu: 02/07/2018 – 06/07/2018 STT Tên mẫu Hàm lượng HGA (mg/kg) Hàm lượng MCPG (mg/kg) chưa chín 141 3,4 0,25 chưa chín 142 2,8 0,25 chưa chín 143 3,6 0,21 chưa chín 144 2,8 0,15 chưa chín 145 3,4 0,16 chưa chín 146 2,8 0,20 chưa chín 147 3,4 0,19 chưa chín 148 3,4 0,18 chưa chín 149 4,6 0,19 10 chưa chín 150 4,6 0,17 11 chưa chín 151 3,0 0,16 12 chưa chín 152 3,0 0,30 13 chưa chín 153 4,6 0,20 14 chưa chín 154 3,2 0,21 15 chưa chín 155 3,8 0,23 16 chưa chín 156 3,8 0,22 17 chưa chín 157 3,8 0,24 18 chưa chín 158 3,6 0,25 19 chưa chín 159 3,8 0,25 20 chưa chín 160 3,8 0,26 21 chưa chín 161 4,4 0,22 22 chưa chín 162 4,4 0,29 23 chưa chín 163 4,8 0,27 24 chưa chín 164 4,6 0,24 25 chưa chín 165 4,0 0,28 26 chưa chín 166 4,4 0,31 27 chưa chín 167 3,8 0,35 28 chưa chín 168 3,8 0,24 29 chưa chín 169 4,0 0,16 30 chưa chín 170 3,8 0,19 31 chưa chín 171 3,2 0,19 32 chưa chín 172 3,4 0,18 33 chưa chín 173 3,4 0,23 34 chưa chín 174 4,6 0,21 35 chưa chín 175 4,4 0,19 36 chưa chín 176 4,4 0,21 37 chưa chín 177 4,2 0,18 38 chưa chín 178 4,2 0,19 39 chưa chín 179 4,4 0,24 40 chưa chín 180 4,0 0,27 41 chưa chín 181 3,8 0,25 42 chưa chín 182 3,6 0,26 43 chưa chín 183 3,8 0,25 44 chưa chín 184 3,8 0,25 45 chưa chín 185 4,4 0,21 46 chưa chín 186 4,4 0,15 47 chưa chín 187 4,8 0,16 48 chưa chín 188 4,4 0,20 49 chưa chín 189 2,6 0,19 50 chưa chín 190 2,0 0,18 51 chưa chín 191 2,8 0,19 52 chưa chín 192 3,0 0,19 53 chưa chín 193 3,2 0,18 54 chưa chín 194 4,0 0,23 55 chưa chín 195 5,0 0,21 56 chưa chín 196 3,0 0,19 57 chưa chín 197 4,6 0,21 58 chưa chín 198 2,8 0,18 59 chưa chín 199 3,2 0,15 60 chưa chín 200 3,4 0,16 61 chưa chín 201 4,6 0,20 62 chưa chín 202 4,2 0,19 63 chưa chín 203 4,0 0,18 64 chưa chín 204 3,6 0,19 65 chưa chín 205 4,6 0,19 66 chưa chín 206 3,4 0,19 67 chưa chín 207 3,2 0,18 68 chưa chín 208 3,6 0,23 69 chưa chín 209 4,0 0,21 70 chưa chín 210 4,0 0,19 Đợt 6: Lấy mẫu Bảo Lạc – Cao Bằng (lần 3) Thời gian lấy mẫu: 16/07/2018 – 20/07/2018 Tên mẫu Hàm lượng HGA (mg/kg) Hàm lượng MCPG (mg/kg) chín 01 0,65 KPH chín 02 0,8 KPH chín 03 0,6 KPH chín 04 1,0 KPH chín 05 1,1 KPH chín 06 0,78 KPH chín 07 0,97 KPH chín 08 1,1 KPH chín 09 1,1 KPH STT 10 chín 10 0,96 KPH 11 chín 11 0,67 < 0,015 12 chín 12 0,88 < 0,015 13 chín 13 0,78 KPH 14 chín 14 0,87 KPH 15 chín 15 0,84 KPH 16 chín 16 0,97 KPH 17 chín 17 0,87 KPH 18 chín 18 0,65 KPH 19 chín 19 0,69 KPH 20 chín 20 0,73 KPH 21 chín 21 0,82 KPH 22 chín 22 0,88 KPH 23 chín 23 0,86 KPH 24 chín 24 0,91 KPH 25 chín 25 0,74 KPH 26 chín 26 1,0 KPH 27 chín 27 0,96 KPH 28 chín 28 0,56 KPH 29 chín 29 0,78 KPH 30 chín 30 0,95 KPH 31 chín 31 0,64 KPH 32 chín 32 0,66 KPH 33 chín 33 0,83 KPH 34 chín 34 0,84 KPH 35 chín 35 0,93 KPH 36 chín 36 0,77 KPH 37 chín 37 0,84 KPH 38 chín 38 0,75 KPH 39 chín 39 1,0 KPH 40 chín 40 0,99 KPH 41 chín 41 1,1 KPH 42 chín 42 0,87 KPH 43 chín 43 0,86 < 0,015 44 chín 44 1,1 < 0,015 45 chín 45 0,87 KPH 46 chín 46 0,86 KPH 47 chín 47 0,95 KPH 48 chín 48 0,56 KPH 49 chín 49 0,89 KPH 50 chín 50 1,0 KPH 51 chín 51 0,86 KPH 52 chín 52 0,68 KPH 53 chín 53 0,63 KPH 54 chín 54 0,97 KPH 55 chín 55 0,70 KPH 56 chín 56 0,61 KPH 57 chín 57 0,78 KPH 58 chín 58 0,95 KPH 59 chín 59 0,93 KPH 60 chín 60 0,92 KPH 61 chín 61 0,87 KPH 62 chín 62 0,65 KPH 63 chín 63 0,69 KPH 64 chín 64 0,73 KPH 65 chín 65 0,82 KPH 66 chín 66 0,88 KPH 67 chín 67 0,86 KPH 68 chín 68 0,91 KPH 69 chín 69 0,95 KPH 70 chín 70 0,95 KPH ... cảm ơn! Hà Nội, ngày…tháng 03 năm 2019 Học viên Bạch Thúy Anh MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG BIỂU DANH MỤC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN ... Thị Hồng Hảo PGS.TS Phạm Thị Thanh Hà HÀ NỘI 2019 LỜI CẢM ƠN Trong thời gian thực luận văn này, may mắn nhận giúp đỡ tận tình thầy giáo, chuyên gia, nghiên cứu viên, anh chị kỹ thuật viên tình cảm... (Limit of quantification) PhA SPE Phenylalanin Chiết pha rắn (Solid phase extraction) DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1.1 Danh sách trường hợp ngộ độc độc HGA xảy toàn cầu Bảng 1.2 Một số nghiên cứu HGA MCPG