Dựa trên kết quả tham khảo từ BP 2012, đề tài đề xuất xây dựng phƣơng pháp định lƣợng Mometasone furoate trong thành phẩm bằng phƣơng pháp HPLC, có sự biến đổi so với BP 2012 cho phù hợp với dạng bào chế và điều kiện thực tiễn tại phòng kiểm nghiệm của công ty Domesco.
Nguyên liệu Mometasone furoate sau khi kiểm nghiệm nếu đạt các chỉ tiêu chất lƣợng so với BP 2012 và tiêu chuẩn của nhà sản xuất sẽ đƣợc dùng làm chuẩn đối chiếu để kiểm nghiệm thành phẩm Nasonex.
3.2.2.1 Cảm quan
Lấy khoảng 5,000 g dịch chất (thành phẩm Nasonex) cho vào một đĩa petri thủy tinh, quan sát bằng mắt thƣờng.
3.2.2.2 Định tính
Sắc ký lớp mỏng
- Dung môi khai triển: CH3OH:1,2-dichloroethane = 3:97
- Dung dịch chuẩn: pha dung dịch chuẩn Mometasone furoate ở nồng độ 1 mg/mL trong acetone.
- Dung dịch thử: lấy chính xác một lƣợng dịch chất (sau khi lắc đều) tƣơng ứng khoảng 1 mg Mometasone furoate cho vào bercher 100 mL, thêm vào khoảng 10 mL methylene chloride. Khuấy đều. Cách thủy ở 40-50ºC trong khoảng 5 phút. Để nguội. Gạn lấy lớp dung dịch không màu. Lặp lại thêm 2 lần, mỗi lần với 10 mL methylene chloride. Thu gom lớp dung dịch không màu, làm bay hơi dung môi đến cô cạn và hòa tan trở lại với 1 mL acetone.
- Tiến hành:
+ Chấm riêng biệt trên bản mỏng 20 L mỗi dung dịch chuẩn và dung
dịch thử. Khai triển bản mỏng trong dung môi khai triển đến khi dung môi đi đƣợc một đoạn khoảng 10 cm. Lấy bản mỏng ra và làm khô trong không khí.
+ Phát hiện: quan sát dƣới ánh sáng UV 254 nm hoặc phun thuốc thử sulfuric acid 20% trong ethanol, nung nóng ở 120ºC trong vòng 10 phút hoặc cho đến khi các vết xuất hiện, để nguội, quan sát dƣới ánh sáng ban ngày.
24
Sắc ký lỏng (HPLC)
So sánh sắc ký đồ của dung dịch chuẩn và dung dịch thử thu đƣợc từ kết quả định lƣợng. 3.2.2.3 Định lƣợng Điều kiện sắc ký: - Cột C18 (10 cm 3 mm, 3 m) - Detector: UV - Bƣớc sóng: 238 nm - Nhiệt độ cột: 60ºC - Thể tích tiêm: 5,0 L - Tốc độ dòng: 1,0 mL/phút
- Pha động: H2O:CH3OH = 30:70, điều chỉnh tỉ lệ nếu cần
Tiến hành
- Dung dịch chuẩn: cân chính xác khoảng 20 mg Mometasone furoate chuẩn cho vào bình định mức 100 mL. Thêm methanol đến vừa đủ. Lắc đều. Hút chính xác 5 mL dung dịch này cho vào bình định mức 50 mL, pha loãng vừa đủ với methanol. Lắc đều.
- Dung dịch thử: lấy chính xác một lƣợng dịch chất (sau khi lắc đều) tƣơng ứng khoảng 1 mg Mometasone furoate cho vào bình định mức 50 mL, thêm khoảng 30-40 mL methanol. Siêu âm khoảng 15 phút. Cách thủy ở 60-70ºC trong vòng 10 phút. Để nguội, thêm tiếp methanol đến vừa đủ. Lắc đều.
- Lọc dung dịch thử và dung dịch chuẩn qua giấy lọc 0,45 m.
- Tiêm dung dịch chuẩn và thử vào hệ thống sắc ký. Ghi lại sắc ký đồ.
Hàm lƣợng Mometasone furoate theo lƣợng Mometasone furoate ghi trên nhãn đƣợc xác định bằng công thức:
% Mometasone furoate = ST
SC ×
mC (tinh khiết)
mT × 0,05 × 5 × 100
Trong đó: ST là diện tích peak trung bình của Mometasone furoate
trong dung dịch thử
SC là diện tích peak trung bình của Mometasone furoate
25 (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
mT là khối lƣợng của mẫu thử (mg)
mC (tinh khiết) là khối lƣợng của chuẩn tinh khiết (mg)