1. Trang chủ
  2. » Luận Văn - Báo Cáo

Xây dựng và thẩm định phương pháp HPLC định lượng EToricoxib trong chế phẩm viên nén

4 548 9

Đang tải... (xem toàn văn)

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Định dạng
Số trang 4
Dung lượng 146,21 KB

Nội dung

Một vài phương pháp định lượng etoricoxib trong chế phẩm của nước ngoài đã được công bố nhưng việc áp dụng vào điều kiện kiểm nghiệm ở Việt Nam gặp rất nhiều khó khăn [1], [2], vỉ vậy ch

Trang 1

Tạp chí NGHIÊN c ứ u D ư ợ c VÀ THÔNG TIN THUỐC S ô '2 năm 2010

XÂY DựNG VÀ THẨM ĐỊN H PHƯƠNG PHÁP HPLC ĐỊNH LƯỢNG ETO R IC O X IB

TRONG CHÊ PHẨM V IÊN NÉN

Vũ Đ ức LỢ i*, Đoàn Cao S ơ n **

* Trường Đại học Dược Hà Nội

* * Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương

Sum m ary

A Sim ple, selective, rapid, p recise and econom ical RP-HPLC m ethod has been developed fo r

estim ation o f etoricoxib in tablets The m ethod was carried out on column N ucteosil C18 (250 X 4

mm, 5 ụm ), with a m obile phase consisting o f M ethanol: w ater (adju sted to pH 3 ,0 with acetic acid)

(7 0 : 30 v/v) a t a flow rate o f 1 m l/ min D etection was carried out a t 234nm The developd m ethod

was validated in term s o f selectivity, accuracy, precision, linearity.

ĐẶT VẤN Đ Ê

Etoricoxib là thuốc thuộc nhóm Coxib, mới

được đưa vào sử dụng từ những năm 2000

Thuốc cũng đang được lưu hành ở khoảng 60

nước trên thế giới trong đó có Việt Nam Hiện

nay, hầu hết Dược điển của các nước như Anh,

Mỹ, Việt Nam chưa có chuyên luận về kiểm tra

chất lượng các chẽ phấm chứa etoricoxib Một

vài phương pháp định lượng etoricoxib trong chế

phẩm của nước ngoài đã được công bố nhưng

việc áp dụng vào điều kiện kiểm nghiệm ở Việt

Nam gặp rất nhiều khó khăn [1], [2], vỉ vậy

chúng tôi tiến hành nghiên cứu định lượng etori-

coxib trong chế phấm bằng phương pháp sắc ký

lỏng hiệu năng cao (HPLC) góp phần nâng cao

công tác kiểm tra bảo đảm chất lượng thuốc

ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN

CỨU

Nguyên vật liệu

- Chất chuẩn đối chiếu: etoricoxib hàm lượng

98,0% do Viện KNTTW cung cấp

- Mau thử: viên nén Etotab-60, viên nén bao

film chứa 60mg etoricoxib, nhà sản xuất Micro

Labs - Ấn Độ

- Methanol, acetonitril, acid acetic, nước cất 2

lần dùng cho HPLC

Thiết bị

- Máy sắc ký lỏng hiệu năng cao: DIONEX -

detector PDA

- Máy quang phổ UV-VIS Lambda EZ210

- Bình định mức, cốc có mỏ, pipet, đũa thủy

tinh, màng lọc 0,45|jm

Phương pháp nghiên cứu

- Dựa vào công thức cấu tạo, tính chất hóa lý của etoricoxib và bằng thực nghiệm để xây dựng, thẩm định phương pháp định lượng etoricoxib

- Xử lý kết quả bằng phương pháp tính toán thống kê có sự hỗ trợ của phần mềm Microsoft Excel

THựC NGHIỆM VÀ KẾT QUÀ

1 Xây dựng phướng pháp định lượng etoricoxib bằng HPLC

- Qua tiến hành khảo sát: bước sóng cho hấp thụ cực đại, thành phần và tý lệ pha động, pH dung dịch đệm, tốc độ dòng, nồng độ làm việc chúng tôi đã xây dựng được chương trình sắc ký như sau: Cột sắc ký Nucleosil C18 ( 250x4 mm,5

ụm).

Detector UV: Ả = 234nm; pha động:

methanol: nước (điều chỉnh về pH 3,0 bằng acid acetic) (70 : 30 tt/tt); thể tích tiêm: 20 ụl; tốc độ dòng: l,0ml/phút; nồng độ làm việc 4 g/ml;

nhiệt độ phân tích: nhiệt độ phòng thí nghiệm

- Dung dịch chuẩn: cân chính xác khoảng 20,0mg chất chuẩn etoricoxib cho vào bỉnh định mức dung tích 100,Oml, cho methanol vừa đủ đến vạch, lắc đều Hút chính xác l,0ml dung dịch trên pha loãng với pha động vừa đủ 50,0ml, lắc đều được dung dịch etoricoxib có nồng độ 4|jg/

ml Lọc qua màng lọc 0,45|jm để tiêm sắc ký

- Dung dịch thử: cân xác định khối lượng trung bình của 20 viên chế phẩm, nghiền thành bột mịn Cân chính xác một lượng bột viên đã nghiền mịn tương ứng với khoảng 20,0mg

Trang 2

Tạp chí NGHIÊN c ứ u D ư ợ c VÀ THỐNG TIN THUỐC S ô '2 năm 2010

etoricoxib rồi pha như pha dung dịch chuẩn

2 Thẩm định phưdng pháp định lượng

etoricoxib

2.1 Thử độ thích hợp của h ệ thống

Nguyên tắc: Tiến hành sắc ký lặp lại 5 lần

cùng một dung dịch chuẩn etoricoxib có nồng độ

khoảng 4ụg/ml theo chương trình đã chọn Độ

thích hợp của hệ thống HPLC được biểu thị qua

hệ số bất đối xứng, số đĩa lý thuyết, độ lệch chuẩn tương đối RSD (% ) của thời gian lưu và diện tích pic Kết quả khảo sát được trình bày ở bảng 1

Nhận xét: Kết quả khảo sát cho thấy giá trị RSD đều nhỏ hơn 2%, 0,9 <AF< 2 Chứng tỏ hệ thống HPLC mà chúng tôi sử dụng là phù hợp cho phép phân tích định tính và định lượng etori- coxib

STT

Bảng 1 Kết quả khảo sá t độ thích hợp của hệ thõng sắ c ký

Thdi gian lưu (phút) Diện tích pic (mAU.min) Hệ sô' bất đối xứng (AF)

2.2 Độ đặc hiệu

Đế chứng minh sự có mặt của chất khác hay

dung môi pha động không ảnh hưởng đến việc

định lượng etoricoxib Tiến hành sắc ký và ghi

sẳc ký đồ của dung dịch mẫu trắng, mẫu chuẩn, mẫu thử, mẫu thử thêm chuẩn cho kết quả ở các hình sau:

Hình 3 Sắc ký đồ mẫu chuẩn Hình 4 Sắc ký đõ mẫu thử thêm chuẩn

Trang 3

Tạp chí NGHIÊN c ứ u D ư ợ c VÀ THÔNG TIN THUỐC S ố 2 năm 2010

Nhận xét: sắc ký đồ mẫu trắng không xuất

hiện pic trong khoảng thời gian phân tích 10

phút Sắc ký đồ của mẫu chuẩn, mẫu thử có

chứa etoricoxib, mẫu thử có thêm chất chuẩn

etoricoxib đều cho 1 pic ở thời gian lưu tR =5,84

phút Điều này chứng tỏ pic trên sắc ký đồ là của

hoạt chất etoricoxib

2.3 Độ tuyến tính

- Tiến hành khảo sát sự phụ thuộc tuyến tính giữa nồng độ với diện tích pic của etoricoxib bằng cách pha một dãy dung dịch chuẩn etori- coxib có nồng độ từ 2,6|jg/ml đến 5,6|jg/ml Kết quả khảo sát độ tuyến tính được trình bày ở bảng 2 và hình 5

Bảng 2 K ết quả khảo sá t độ tuyến tính.

STT _ 1 2 3 4 5

Nồng độ dung dịch etoricoxib (ụg/ml) 2,6 3,2 4,0 4,8 5,6

Diện tích pic (mAU.min) 4,850 5,972 7,474 9,061 10,465

Nồng độ c (mcg/ml)

Hình 5 Đồ th ị biếu diễn s ự phụ thuộc tuyến tính giữa nồng độ và diện tích p ic

Nhận xét: Kết quả cho thấy trong khoảng

nồng độ Etoricoxib đã khảo sát (2,6 - 5,6 ụg/ml),

có sự phụ thuộc tuyến tính chặt chẽ giữa diện

tích pic và nồng độ của chúng với hệ số tương

quan r = 0,9996

2.4 Độ chính xá c

Độ chính xác của phương pháp được đánh giá

bằng độ lệch chuẩn tương đối của 6 phép thử song song Tiến hành sẳc ký và ghi sắc ký đồ của

6 mẫu thử và mẫu chuẩn ở nồng độ 4,0 |jg/ml Kết quả khảo sát độ chính xác được trình bày ở bảng 3

Nhận xét: Kết quả thử độ chính xác của phương pháp cho thấy RSD < 2% Như vậy phương pháp có độ chính xác cao

Bảng 3 K ết quả khảo sá t độ chính xá c

TT Lưdng cân mt (g) Diện tích pic (mAU.min) Hàm lưdng % Số liệu thống kê

99,1

m = 0,2156(g)

sc = 7,521(mAU.min)

ĩ = 99,0

RSD(%) = 0,48

Trang 4

Tạp chí NGHIÊN cứu D ư ợ c VÀ THÔNG TIN THUÓC So 2 năm 2010

2.5 Độ đúng chính xác chất chuẩn vào trong mẫu thử sao cho

, - - nồng đô của hoat chất vẫn nằm trong khoảng

Đô đúng của phương pháp được khảo sát y " , ” , Z

L * u r , 7 ' \ " ¿ I n „ Â n M r t u y ế n tính đã khảo sát Kết quả khảo sát độ

bằng phương pháp thêm chuân: thêm một lượng / - , , r

Bảng 4 Kết quả khảo sắ t độ đúng

TT LƯỢng thêm vào (mg) Diện tích pic thử (mAU.min) Lượng tìm lại (mg) % tìm lại

Kết quả khảo sát cho thấy lượng chất chuẩn

thu hồi lại được nằm trong khoảng 98,3% đến

100,2% và RSD < 2% Chứng tỏ phương pháp

trên có độ đúng cao

KẾT LUẬN

Sau khi thẩm định phương pháp, kết quả cho

thấy chúng tôi đã xây dựng được một phương

pháp HPLC đế định lượng etoricoxib trong chế

phẩm viên nén với cách tiến hành nhanh, đơn

giản, cho kết quả có độ đúng, độ chính xác cao,

phù hợp với điều kiện của đa số phòng thí

nghiệm ở Việt Nam và đã áp dụng phương pháp

để định lượng mẫu chế phẩm viên nén Etotab-60

cho hàm lượng là 99,0% so với hàm lượng ghi

trên nhãn

TÀI LIÊU THAM KHÀO

1 Patel HM, Suhagia BN, Shah SA, Rathod

IS (2007), Determination of etoricoxib in phar­

maceutical formulations by HPLC method,

Indian jou rn al o f pharm aceutical scien ces, vol

69, pp 703-705.

2 Shahi S.R., Agrawal G.R., Rathi P.B., Shinde N.V., Somani V.G., Mahamuni S.B and Padalkar A.N (2008), Development and

validation of UV spectrophotometric method for the determination of etoricoxib in bulk and

tablet formulation Journal O f Chem istry, vo l.l,

pp 390-394.

KHÔNG NÊN SỬ DỤNG CÁC THUỐC LONG ĐỜM (tiếp theo trang 72)

TÀI LIỆU THAM KHÀO

5 Mary E Rimsza et al, U nexpected infant deaths associated with use o f cough and cold m edications

Pediatrics 2008; 122: e318 - e322.

6 FDA, CDC, In fa n ts deaths associated with cough and cold m edications - Two sta tes, 2005 MMWR Weekly

Janually 12, 2007/ 56 (01); 1-4.

7 Australia Government, Therapeutic Goods Administration, Sum m ary o f actions taken b y the TGA

and other regulatory agencies regarding cough and cold m edicines in the treatm ent o f children, October

2009.

8 Afssaps, Messages d é s, M ucoiytiques, m ucofluidifiants e t hélicidine Contre-indication chez le nourrisson

de m oins de 2 ans, Avirl 2010.

9 M Chalumeau, et al Mucolytic agents for acute respiratory tract infections in infants: a pharmaco-

epidemiological problem? Archives de Pédiatrie 9 (2002): 1128 - 1136.

10 Duijvestijn YCM et al, A cetyicystein fo r acute upper and low er respiratory tra ct in fection s in paediatric

patien ts w ithout chronic broncho-pulm onary disease (R eview ), The Cochrane Library, 2009, Issue 1.

Ngày đăng: 17/12/2015, 07:42

TỪ KHÓA LIÊN QUAN

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN

w