hiệu quả đối kháng với vi khuẩn erwinia sp gây bệnh thối gốc trên lúa của một số nông dược và vi khuẩn vùng rễ trong điều kiện in vitro

GÂY BỆNH THỐI GỐC TRÊN LÚA CỦA MỘT SỐ NÔNG DƯỢC VÀ VI KHUẨN VÙNG RỄ TRONG ĐIỀU KIỆN IN VITRO LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP KỸ SƯ NGÀNH: BẢO VỆ THỰC VẬT TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP

DANH TUẤN

HIỆU QUẢ ĐỐI KHÁNG VỚI VI KHUẨN ERWINIA SP GÂY BỆNH THỐI GỐC TRÊN LÚA CỦA MỘT SỐ

NÔNG DƯỢC VÀ VI KHUẨN VÙNG RỄ

TRONG ĐIỀU KIỆN IN VITRO

LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP KỸ SƯ NGÀNH: BẢO VỆ THỰC VẬT

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG

Cần Thơ, 2013

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG

Luận văn tốt nghiệp kỹ sư Ngành: BẢO VỆ THỰC VẬT

Tên đề tài:

HIỆU QUẢ ĐỐI KHÁNG VỚI VI KHUẨN ERWINIA SP

GÂY BỆNH THỐI GỐC TRÊN LÚA CỦA MỘT SỐ

NÔNG DƯỢC VÀ VI KHUẨN VÙNG RỄ

TRONG ĐIỀU KIỆN IN VITRO

Giảng viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện:

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP VÀ SINH HỌC ỨNG DỤNG

BỘ MÔN BẢO VỆ THỰC VẬT

Chứng nhận luận văn tốt nghiệp kỹ sư Bảo vệ Thực vật với đề tài:

“HIỆU QUẢ ĐỐI KHÁNG VỚI VI KHUẨN

ERWINIA SP GÂY BỆNH THỐI GỐC TRÊN LÚA

CỦA MỘT SỐ NÔNG DƯỢC VÀ VI KHUẨN

VÙNG RỄ TRONG ĐIỀU KIỆN IN VITRO”

Do sinh viên Danh Tuấn thực hiện

Kính trình lên hội đồng chấm luận văn tốt nghiệp

Cần Thơ, ngày tháng 10 năm 2013 Cán bộ hướng dẫn

TS Trần Vũ Phến

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP VÀ SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN BẢO VỆ THỰC VẬT Hội đồng chấm luận văn tốt nghiệp đã chấp nhận luận văn tốt nghiệp kỹ sư ngành Bảo vệ Thực vật với tên: “HIỆU QUẢ ĐỐI KHÁNG VỚI VI KHUẨN ERWINIA SP GÂY BỆNH THỐI GỐC TRÊN LÚA CỦA MỘT SỐ NÔNG DƯỢC VÀ VI KHUẨN VÙNG RỄ TRONG ĐIỀU KIỆN IN VITRO” Do sinh viên Danh Tuấn thực hiện và bảo vệ trước hội đồng Ý kiến của hội đồng chấm luận văn tốt nghiệp:

Luận văn tốt nghiệp hội đồng đánh giá ở mức:

DUYỆT KHOA Cần Thơ, ngày tháng 10 năm 2013

Chủ tịch Hội Đồng

i

LƯỢC SỬ CÁ NHÂN

I LƯỢC SỬ

Họ và tên: DANH TUẤN Giới tính: Nam

Ngày, tháng, năm sinh: 11/01/1988 Nơi sinh: Cờ Đỏ - Cần Thơ

Quê quán: Ấp thới thạnh, Xã thới xuân, Huyện Cờ Đỏ, TP CT

Dân tộc: khmer Tôn giáo: Phật

Chổ ở riêng hoặc địa chỉ liên lạc: Số nhà 822 Ấp Thới thạnh, Xã Thới Xuân Huyện Cờ Đỏ, Thành phố Cần Thơ

Điện thoại: 01634509740

Cha: Danh Sách Sinh năm: 1950

Mẹ: Đào thi Trọng Sinh năm: 1953

II QUÁ TRÌNH HỌC TẬP

Từ năm 1996-2001 học tại Trường tiểu học Thới Đông

Từ năm 2001-2004 học tại Trường PTTH Hà Huy Giáp

Từ năm 2004-2005 học tại Trường THCS Thới Đông

Từ năm 2005-2008 học tại Trường PTTH Dân tộc Nội Trú, Quận Ô Môn T.p Cần Thơ

Từ năm 2009-2013 học trường Đại học Cần Thơ

ii

LỜI CAM ĐOAN

Tôi cam đoan đây là công trình nghiên cứu của bản thân và thầy hướng dẫn, các số liệu kết quả trình bày trong luận văn tốt nghiệp này là trung thực và chưa được ai công bố trong bất kỳ nghiên cứu nào trước đây

Người thực hiện

Danh Tuấn

Anh Huỳnh Văn Nghi và các anh chị trong bộ môn Bảo vệ Thực vật đã đóng góp những ý kiến quý báu và tạo điều kiện cho em hoàn thành tốt thí nghiệm Thành thật cảm ơn,

Cảm ơn bạn Nguyến Tuấn Anh, Nguyễn Trần Quang và Nguyễn Quốc Phong cùng các bạn lớp Bảo vệ Thực vật K35 đã giúp đỡ tôi trong thời gian thực hiện đề tài

Trân trọng!

Danh Tuấn

iv

MỤC LỤC

Lược sử cá nhân i

Lời cam đoan ii

Lời cảm tạ iii

Mục lục iv

Danh sách chữ viết tắt vii

Danh sách bảng viii

Danh sách hình ix

Tóm lược x

Mở đầu 1

CHƯƠNG 1 LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2

1.1 Những đặc tính chung của vi khuẩn Erwinia sp 2

1.1.1 Sơ lược các nguyên cứu về vi khuẩn Erwinia sp 2

1.2 Sơ lược các tác nhân thử đối kháng trong phòng thí nghiệm 4

1.2.1 Các nông dược sử dụng trong phòng thí nghiệm 4

1.2.1.1.LUSATEX 5SL 4

1.2.1.2.AVALON 8WP 5

1.21.3.STANER 2WP 5

1.21.4.ANTI - Xo 200WP 6

1.2.1.5.Agofast.80WP 7

1,21.6.Kasumin.2L (HokkoChemin Co,Ltd.) 7

1.2.1.7.Stepguard 200TB 8

v

1.2.2 Đặc điểm vi khuẩn thuộc chi Bacillus 9

1.2.2.1.Bacillus amyloliquefaciens 10

1.2.2.2.Brevibacillus brevis 11

CHƯƠNG 2 PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP 12

2.1 Phương tiện 12

2.1.1 Địa điểm và thời gian thí nghiệm 12

2.1.2 Vật liệu và thiết bị 12

2.1.3 Dụng cụ thí nghiệm 12

2.2 Phương pháp 13

2.2.1 Hiệu quả ức chế đối với dòng vi khuẩn Erwinia sp -1 gây bệnh thối gốc thân lúa của một số nông dược và vi khuẩn vùng rễ 14

* Bố trí thí nghiệm 14

* Tiến hành thí nghiệm 15

* Ghi nhận chỉ tiêu 15

2.2.2 Hiệu quả ức chế đối với dòng vi khuẩn Erwinia sp -2 gây bệnh thối gốc thân lúa của một số nông dược và vi khuẩn vùng rễ 15

* Tiến hành thí nghiệm 15

2.2.3 Hiệu quả ức chế đối với dòng vi khuẩn Erwinia sp -3 gây bệnh thối gốc thân lúa của một số nông dược và vi khuẩn vùng rễ 15

* Tiến hành thí nghiệm 15

2 3 XỬ LÝ SỐ LIỆU 15

CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 16

3.1 Phân lập vi khuẩn Erwinia sp từ mẫu lúa nhiễm bệnh thối thân từ An Giang và Cần Thơ 16

vi

3.2 Hiệu quả ức chế đối với dòng vi khuẩn Erwinia sp.-1 gây bệnh thối gốc thân

lúa của một số nông dược và vi khuẩn vùng rễ 18

3.3 Hiệu quả ức chế đối với dòng vi khuẩn Erwinia sp.-2 gây bệnh thối gốc thân lúa của một số nông dược và vi khuẩn vùng rễ 20

3.4 Hiệu quả ức chế đối với dòng vi khuẩn Erwinia sp.-3 gây bệnh thối gốc thân lúa của một số nông dược và vi khuẩn vùng rễ 23

CHƯƠNG 4 KẾT LUẬN - ĐỀ NGHỊ 27

4.1 Kết luận 27

4.2 Đề nghị 27

TÀI LIỆU THAM KHẢO 28 PHỤ CHƯƠNG

Er OM4219 Erwinia ssp OM4219

Ba10 6 Bacillus amyloliquefaciens mật số 10 6 cfu/ ml Ba10 8 Bacillus amyloliquefaciens mật số 10 8 cfu/ ml Bre10 6 Brevibacillus brevis mật số 10 6 cfu/ml

Bre10 8 Brevibacillus brevis mất số10 8 cfu /ml

viii

DANH SÁCH BẢNG

Bảng 2.1.1 Các nghiệm thức trong thí nghiệm 14

Bảng 3.1 Bán kính vùng vi khuẩn Erwinia sp - 1 bị ức chế (mm) qua các thời điểm

sau khi thử nghiệm 19

Bảng 3.2 Bán kính vùng vi khuẩn Erwinia sp - 2 bị ức chế (mm) qua các thời điểm

sau khi thử nghiệm 22

Bảng 3.3 Bán kính vùng vi khuẩn Erwinia sp - 3 bị ức chế (mm) qua các thời điểm

sau khi thử nghiệm 25

ix

DANH SÁCH HÌNH

Hình 3.1 Vi khuẩn Erwinia sp -1 (nhuộm chiên mao) 16 Hình 3.2 Vi khuẩn Erwinia sp -2 (nhuộm chiên mao) 17 Hình 3.3 Vi khuẩn Erwinia sp -3 (nhuộm chiên mao) 17

Hình 3.4 Kết quả in vitro ở thời điểm 48 giờ sau thử nghiệm, cho thấy Starner

20WP, Avalon 8WP và Stepguard có tác động ức chế trực tiếp sự phát triển của vi

khuẩn Erwinia sp -1 18

Hình 3.5 Kết quả in vitro ở thời điểm 72 giờ sau thử nghiệm, động ức chế trực tiếp

của Stepguard 200TB lên sự phát triển của vi khuẩn Erwinia sp -2 21

Hình 3.6 Kết quả in vitro của Avalon 8WP, Starner 20WP, Stepguard 200TB và

Brevibacillus brevis ở thời điểm 48 GSTN 24

x

Danh Tuấn 2013 “Hiệu quả đối kháng với vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối gốc trên lúa của một số nông dược và vi khuẩn vùng rễ trong điều kiện in

vitro” Luận văn tốt nghiệp kỹ sư Bảo vệ Thực vật, Khoa Nông nghiệp và Sinh học

ứng dụng, Đại học Cần thơ Cán bộ hướng dẫn TS Trần Vũ Phến

khuẩn vùng rễ có hiệu quả ức chế đối với 3 dòng vi khuẩn Erwinia sp

Các thí nghiệm được thực hiện trong điều kiện in vitro Các nghiệm thức được bố trí theo thể thức hoàn toàn ngẩu nhiên, 5 lặp lại Đánh giá hiệu quả của các

loại nông dược và vi khuẩn vùng rễ đối với 3 dòng Erwinia sp được phân lập trên

giống lúa Jasmine 85, và OM 4218 Kết quả thí nghiệm cho thấy nghiệm thức Stepguard 200TB, Avalon 20WP cho hiệu quả mạnh nhất và duy trì hiệu quả lâu

nhất so với các nghiệm thức còn lại đối với 3 dòng Erwinia sp.-1, Erwinia sp.-2 và

Erwinia sp.-3 ở nồng độ gấp đôi khuyến cáo

Ở các nghiệm thức Lusatex 5SL, Anti_XO 200WP, Agofast 80WP và Kasumin 2SL không có khả năng ức chế vi khuẩn gây bệnh, chỉ riêng ngiệm thức

Starner 20WP cho hiệu quả ức chế vi khuẩn trên 2 dòng vi khuẩn Erwinia sp.-1 và

Erwinia sp.-3

Hiệu quả ức chế của vi khuẩn vùng rễ Bacillus amyloliquefaciens chỉ cho hiệu quả ức chế trên dòng vi khuẩn Erwinia sp.-1 Đối với vi khuẩn vùng rễ

Brevibacillus brevis thì cho hiệu quả ức chế trên dòng vi khuẩn Erwinia sp.-3,

không có khả năng ức chế trực tiếp 2 dòng vi khuẩn thối thân còn lại

1

MỞ ĐẦU

Lúa là một trong năm loại cây lương thực chính của thế giới, đã góp phần nuôi sống hơn phân nửa dân số thế giới Ở Việt Nam, lúa là cây trồng chính và quan trọng nhất trong hệ thống canh tác nông nghiệp và việc sản xuất lúa gạo đã cải thiện

và nâng cao đời sống vật chất của người dân Ngành sản xuất lúa gạo của nước ta còn đạt được những thành tựu rất đáng kể, đưa Việt Nam trở thành nước xuất khẩu gạo lớn thứ hai trên thế giới Từ một nước thiếu lương thực trầm trọng hiện nay, nền nông nghiệp của nước ta đã có những bước phát triển vượt bậc, không chỉ sản xuất đủ một lượng lớn lương thực đáp ứng nhu cầu trong nước mà còn xuất khẩu sang nhiều thị trường lớn trên thế giới

Trước những thành tựu ấy, nhà nước và nhân dân ta ngày càng quan tâm và tìm hiểu nhiều hơn đến việc canh tác và sản xuất nhằm nâng cao năng suất và phẩm chất của lúa gạo Tuy nhiên, bệnh hại trên lúa đã gây không ít khó khăn trong quá trình canh tác, ảnh hưởng đến năng suất và phẩm chất lúa gạo Thời gian gần đây, trên lúa xuất hiện nhiều bệnh nghiêm trọng do vi khuẩn gây ra

Từ năm 2009, tại một số tỉnh ở đồng bằng sông Cửu Long như An Giang, Trà Vinh, Vĩnh Long xuất hiện một loại bệnh mới, gây hại nghiêm trọng ở các cánh đồng lúa Diện tích nhiễm bệnh cao ở một số tỉnh như Trà Vinh, An Giang trên các giống lúa Jasmine 85, OM4218, IR50404, OM3536, OM4218 Triệu chứng đặc trưng là cây lúa bị thối phần gốc kết hợp với lá bị cháy và cây bị chết trong một thời gian ngắn Bệnh thường xuất hiện cùng lúc với bệnh đạo ôn hoặc bệnh càng trầm trọng hơn khi cây lúa bị ngộ độc hữu cơ hoặc có rầy nâu xuất hiện Nông dân và cán

bộ kĩ thuật ở một số địa phương gọi là bệnh đạo ôn cấp tính Tuy vậy, các loại thuốc đạo ôn được sử dụng đều không mang lại hiệu quả, ngay cả ở các ruộng vừa xuất

hiện bệnh Bệnh được xác định là do vi khuẩn Erwinia sp gây ra Do đó, việc vấn

đề rất cần thiết và cấp bách sẽ góp phần làm cơ sở cho việc tìm biện pháp phòng trị

bệnh đạt hiệu quả và bền vững Đó là lý do mà đề tài “Hiệu quả đối kháng với vi

khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối gốc trên lúa của một số nông dược và vi khuẩn vùng rễ trong điều kiện in vitro” được thực hiện nhằm chọn lọc những loại

nông dược và vi khuẩn đối kháng có hiệu quả trong phòng trị bệnh thối gốc thân lúa

2

CHƯƠNG 1

LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU

1.1 NHỮNG ĐẶC TÍNH CHUNG CỦA VI KHUẨN ERWINIA SP

1.1.1 Sơ lược các nghiên cứu về vi khuẩn Erwinia

Là loại vi khuẩn yếm khí tùy ý, có khả năng thích ứng với môi trường, phổ

ký chủ rộng nên Erwinia được xem là chi vi khuẩn quan trọng trong sản xuất Trong

tự nhiên, chúng gây ra một số bệnh đáng lo ngại trên cây trồng như hoại tử và thối mềm Các loại cây thường bị nhiễm bệnh do vi khuẩn này bao gồm: khoai tây, các loại rau, táo, lê, lúa, bắp, mía và cây cảnh ngoài ra còn tìm thấy trên thanh long (http://en.wikipedia.org, 2013)

Vi khuẩn Erwinia là vi khuẩn gram âm (-), thuộc ngành Proteobacteria, lớp

Betaproteobacteria, bộ Enterobacteriales, họ Enterobacteriaceae (hầu hết các loài

vi khuẩn trong họ này đều là tác nhân gây bệnh), giống Erwinia có 32 loài, gồm có:

E amylovora, E Aphidicola, E billingiae, E chrysanthemi, E mallotivora, E persicina, E psidii, E pyrifoliae, E rhapontici, E tracheiphila, E alni, E ananatis,

E cacticida, E carnegieana, E cancerogena, E Carotovora pv carotovora, E Carotovora pv atroseptica, E carotovora pv betavasculorum, E carotovora pv odoriferum, E Carotovora pv wasabiae, E cypripedii, E dissolvens, E herbicola,

E milletiae, E nigrifluens, E nimipressuralis, E paradisiaca, E rubrifaciens, E salicis, E stewartii, E uredovora, E Quercina (Garrity, 2004) Trong đó, có một số

loài phổ biến như E amylovora, E tracheiphila, E carotovora sp carotovora, E

salicis, E chrysanthemi, E herbicola, E rhapontici, E quercina, E uredovora

(Janse, 2009) Nhất là loài Erwinia chrysanthemi, hiện nay loài này đã và đang gây

hại trên những loại cây lương thực chính trong đó có cây lúa, và thiệt hại do chúng gây ra có ảnh hưởng lớn đến năng suất cũng như sức khỏe cây trồng

Tế bào vi khuẩn Erwinia chrysanthemi có khả năng di động nhờ có 4 – 6

chiên mao phát triển theo chu vi tế bào Trên môi trường Extract Pepton Agar, khuẩn lạc có màu trắng xám, dạng tròn, amip hay dạng roi Trên môi trường Potato Sucrose Agar, vi khuẩn tạo sắc tố nâu khuếch tán vào môi trường sau 1 tuần nuôi

3

cấy Một loại môi trường chuyên biệt, thích hợp cho sự sinh trưởng và phát triển

của vi khuẩn Erwinia chrysanthemi trong nuôi cấy nhân tạo đã được phát hiện

(http://en.wikipedia.org, 2013)

Vi khuẩn Erwinia chrysanthemi có thể lên men đường thành acid lactic, sinh

H2S từ cysteine, có enzyme catalase Ngoài ra còn có khả năng phân hủy tryptophan

tạo thành indole, và đây cũng là phản ứng đặc trưng để phân biệt loài Erwinia này với các loài Erwinia khác (Janse, 2009)

Theo Janse (2009), có một số nghiên cứu về đặc tính sinh lý, sinh hóa của

các loại vi khuẩn trong chi Erwinia, phân biệt các đặc tính khác nhau cũng như các

đặc tính đặc trưng để phân biệt giữa loại này với loại khác của chi vi khuẩn này

Một số nghiên cứu về đặc tính của vi khuẩn Erwinia chrysanthemi cũng được thực

hiện như các enzyme pectate lyases của (Castillo và Reverchon, 1997), đặc tính của

gene mã hóa Erwinia chrysanthemi 3937 (Lojkowska và ctv., 1995), và pH đến sự

phát triển của vi khuẩn này (Llama-Palacios và ctv., 2003)

Đã có một số nghiên cứu về loài vi khuẩn này, trong số đó còn có các nghiên

cứu về đặc tính của một số enzyme pectate lyases của vi khuẩn Erwinia

chrysanthemi (Castillo và Reverchon, 1997), đặc tính của gene mã hóa Erwinia chrysanthemi 3937 (Lojkowska và ctv., 1995), và pH ảnh hưởng đến sự phát triển

của loài vi khuẩn này (Llama-Palacios và ctv., 2003)

Năm 2010, tại huyện Tiểu Cần, tỉnh Trà Vinh, Việt Nam đã ghi nhận được trường hợp ruộng lúa bị nhiễm bệnh thối gốc Theo Phạm Văn Kim, đây là 1 bệnh rất ít gặp trên lúa, tác nhân gây bệnh bước đầu được thẩm định là do vi khuẩn

Erwinia sp gây ra Theo Phạm Văn Kim (2002), vi khuẩn xâm nhập qua vết thương,

làm nghẹn mạch, gây héo nhưng lá vẫn còn xanh, nhổ lên bứt gốc, trước tiên bẹ mọng nước sau đó là chết vàng từng chồi lúa, nặng hơn rụi lá từng chòm Đặc điểm

là gốc lúa phân hủy có mùi thối đặc trưng của vi khuẩn Erwinia sp Vi khuẩn theo

nước ruộng tràn vào và lây lan gây hại

Theo Võ Thanh Hoàng và Nguyễn Thị Nghiêm (1993) thì bệnh này được phát hiện đầu tiên năm 1965 ở Indonesia, cho đến năm 1979 tiếp tục Goto phát hiện

ứa ra Đối với chồi lúa bệnh sẽ dễ dàng nhìn thấy mô của các đốt trên và lá đọt bị thối nhũn, lá đọt bị héo rũ và hơi đổi màu, rễ ở các đốt bệnh cũng bị thối và đổi màu (Võ Thanh Hoàng và Nguyễn Thị Nghiêm, 1993)

Khi lây bệnh nhân tạo vào bẹ lá, vết úng nước sẽ xuất hiện sau 20 giờ, lá đọt non sẽ bị héo trong vòng 2 ngày, khoảng 3 – 4 ngày sau vết bệnh sẽ lan toàn bẹ, làm cho các lá non bị héo và thối nâu hơi nhũn nước ở chân bẹ, sau đó đốt thân cũng bị nhiễm

1.2 Sơ lược các tác nhân thử đối kháng trong phòng thí nghiệm

1.2.1 Các nông dược sử dụng trong phòng thí nghiệm

Sử dụng: Thuốc hiện đăng ký phòng trừ nhiều loại bệnh do nấm và vi khuẩn cho nhiều cây trồng như bạc lá, vàng lá, lem lép hạt lúa, héo rũ, sương mai cà chua, xoăn lá ớt, phấn trắng nho, chết nhanh hồ tiêu, chết khô dưa chuột, hoa lá thuốc lá (Nguyễn Mạnh Chinh và ctv., 2012)

Thành phần: hoạt chất oxolinic acid 20%

Công thức hóa học: C13-H11-N-O5

Công dụng: là thuốc đặc trị vi khuẩn gây hại cây trồng

Hướng dẫn sử dụng: đối với bệnh cháy bìa lá pha 30 g cho bình phun 16 lít, phun 2 bình cho 1000 m2

Thuốc giải độc: chưa có thuốc giải độc đặc hiệu, chữa trị theo triệu chứng Thời gian cách ly: ngừng phun thuốc trước khi thu hoạch 7 ngày

LD 50 :525 mg/kg chuột nhắt (nhóm độc 3)

Dạng thuốc: Thuốc dạng bột, màu trắng, hòa tan hoàn toàn trong nước

Đặc tính hoạt chất oxolinic acid (theo Material Safety Data Sheet, 2008): Tên hóa học: 1,3-Dioxolo (4,5-g) quinoline-7-carboxylic acid 5-ethyl-5, 8-dihydro-8-oxo

Trọng lượng phân tử: 261.25 g/mol

6

Oxolinic acid là một dẫn xuất quinolon, một tác nhân kháng khuẩn tổng hợp, kháng nhiều loại vi khuẩn đặc biệt là vi khuẩn gram âm Cơ chế tác động của oxolinic acid là ức chế sự tổng hợp DNA của vi khuẩn bằng enzyme gyrase DNA Độc tính của oxolinic acid tác động chủ yếu lên hệ thần kinh trung ương và hệ tiêu hóa (Chantaraprateep và ctv., 1998) Oxolinic axit được chứng minh là hiệu quả

trong việc phòng ngừa và chữa bệnh của cây gây ra bởi vi khuẩn Pseudomonas sp

và Erwinia sp., có hiệu quả giảm bệnh bạc lá trên lê từ 68 –80% do vi khuẩn E

amylovora gây ra (Hikichi và ctv., 1989; trích bởi Chantarapteep và ctv 1998;

Thuốc phòng trừ vi khuẩn, có khả năng nội hấp

Sử dụng: Chủ yếu dùng phòng trừ bệnh bạc lá lúa (Xanthomonas oryzae pv

oryzae ) Liều dùng 1,0 – 1,5 kg/ha, pha nước với nồng độ 0,2 – 0,3% phun ướt đều

lên cây khi lúa bắt đầu có bệnh Khi bệnh nặng phun 2 lần cách nhau 5 – 7 ngày Khả năng hỗn hợp: Có thể pha chung với nhiều thuốc trừ sâu bệnh khác (Nguyễn Mạnh Chinh và ctv., 2012)

7

1.2.1.5 Agofast 80WP

Tên hóa học: Aluminium tris (O-ethyl phosphonate) (Fosetyl Aluminium)

Công thức hóa học: C6H18AlO9P3

Nhóm hóa học: phosphonate

Tính chất: Thuốc kỹ thuật dạng bột rắn, tan trong nước (120 g/lít), không tan trong nhiều dung môi hữu cơ, phân hủy trong môi trường kiềm và acid Không ăn mòn kim loại, không cháy

Nhóm độc IV, LD50 qua miệng 5000 mg/kg, LD50 qua da > 2000 mg/kg Độc với cá, ít độc với ong TGCL 7 ngày

Thuốc trừ nấm nội hấp, có khả năng lưu dẫn mạnh trong cây Có tác dụng chủ yếu với các nấm lớp tảo khuẩn (Phycomycetes) Ngoài ra có khả năng hạn chế được

vi khuẩn

Sử dụng: Phòng trừ các bệnh sương mai, phấn trắng hại rau, dưa, hành, tỏi, bệnh thối nhũn thuốc lá, bệnh thối noãn dừa, bệnh nứt thân xì mũ cam, quýt, bưởi, sầu riêng, bệnh chết nhanh (chết ẻo) hồ tiêu, bệnh loét mặt cạo cao su, bệnh thối quả nhãn, bệnh thối lá, thối rễ cây hoa cảnh Thuốc còn dùng phòng trừ bệnh bạc lá lúa Liều lượng sử dụng: Agofast 80 WP từ 0,8 – 1,2 kg/ha Pha nước với nồng độ 0,2% phun ướt đều lên cây Pha 20 g/l nước quét lên mặt cạo cao su hoặc chỗ nứt thân xì mũ cam, quýt, sầu riêng

Khả năng hỗn hợp: Có các dạng hỗn hợp với Folpet, Mancozeb Khi sử dụng có thể pha chung với nhiều thuốc trừ sâu bệnh khác (Nguyễn Mạnh Chinh và ctv., 2012)

1.2.1.6 Kasumin 2L (Hokko Chem Ind Co., Ltd.)

Tên hóa học: [5- Amino- 2-metyl-6- (2, 3, 4, 5, 6- pentahidroxi -

clohexyloxi) tetrahidropyran-3-yl] amino iminoaxetic axit

Hoạt chất: Kasugamycin 2%

Công thức hóa học: C14H28ClN3O10

8

Tính chất: Thuốc kỹ thuật dạng tinh thể, điểm nóng chảy 202 – 2040C Tan trong nước (125 g/lít), tan ít trong các dung môi hữu cơ, không bền trong môi trường acid và kiềm mạnh

Nhóm độc IV, LD50 qua miệng 22000 mg/kg, LD50 qua da 4000 mg/kg, không độc với cá và ong Thời gian cách ly: cây ăn quả 14-21 ngày, dưa chuột, cà chua 1 ngày, cải xanh, xà lách, cam, quýt 7 ngày

Thuốc trừ nấm và vi khuẩn, nguồn gốc sinh học, tác động kháng sinh, có khả

năng nội hấp Được sản xuất qua quá trình lên men xạ khuẩn Streptomyces

kasugaensis

Sử dụng: Phòng trừ bệnh đạo ôn, bạc lá hại lúa, bệnh đốm lá và thối nhũn do vi khuẩn hại rau cải, cà chua, ớt, đậu, bệnh phấn trắng, thán thư dưa hấu, xoài, nho, bệnh loét cam quýt…

Kasumin 2L sử dụng với liều lượng 1,5 – 2 lít/ha, pha nước với nồng độ 0,3 – 0,4%, phun ướt đều lên cây

Khả năng hỗn hợp: Khi sử dụng có thể pha chung với nhiều thuốc trừ sâu bệnh khác Không pha chung với các thuốc trừ sâu có nguồn gốc vi sinh (như các thuốc B.T) (Trần Văn Hai, 2003)

1.2.1.7 Stepguard 200TB

Thành phần: Streptomycin sulphate

Tên hóa học: D-Streptamine, O-2-deoxy-2-(methylamino)-α-L

bis(aminoiminomethyl)-,sulfate (2:3) (salt)

glucopyranosyl-(1→2)-O-5-deoxy-3-C-formyl-α-L-lyxofuranosyl-(1→4)-N,N1-Công thức hóa học: (C21H39N7O12)2-3H2SO4

9

Loại thuốc: Thuốc trừ bệnh

Sử dụng: Streptomycin sulphate là một loại thuốc kháng sinh không những cho

người mà cũng được sử dụng như là một loại thuốc bệnh để diệt vi khuẩn, nấm và tảo Streptomycin điều trị các bệnh liên quan đến vi khuẩn và nấm trên một số loại cây ăn quả, rau màu, giống và cây kiểng, và diệt tảo trên ao hồ Công dụng của Streptomycin là phòng trừ thối lê táo ước tính khoảng 58% lê và táo sử dụng thuốc này Công dụng quan trọng nữa là dùng vườn ươm và công viên cây xanh (17% sử dụng thuốc này), trên thuốc lá (7% sử dụng) (Nguyễn Mạnh Chinh và ctv.,2012)

1.2.2 Đặc điểm vi khuẩn thuộc chi Bacillus

Bacillus có dạng hình que với kích thước 1,0 – 1,2 x 3,0– 5 µm, gram dương,

không có lớp capsule, hiếu khí Vi khuẩn tạo nội bào tử có kích thước 1,0 x 1,5 µm (Cook và Bake, 1989, trích dẫn bởi Trần Thị Thúy Ái, 2011) Khuẩn lạc của vi

khuẩn chi Bacillus thường có màu hoặc không màu, mặt khuẩn lạc nhăn Trong môi

trường lỏng chúng tạo thành lớp nhăn, đục và lỏng cặn (Dương Văn Điệu, 1989)

Bacillus có khả năng chịu đựng ở nhiệt độ cao, có thể phát triển nhanh trong

môi trường lỏng và hình thành nội bào tử trong điều kiện khắc nghiệt nên có phân

bố rộng rãi trong tự nhiên và đa dạng về sinh thái Vi khuẩn thuộc chi Bacillus có

tiềm năng lớn về khả năng tiết các enzyme ngoại bào, trong đó có nhiều enzyme có

khả năng thủy phân các phân tử hữu cơ, chính vì thế Bacillus có nhiều ứng dụng

trong các lĩnh vực khác nhau (Gupta và ctv., 2002)

Vi khuẩn này được đánh giá hội tụ những tính năng căn bản trong việc ức chế

bệnh cây trồng Các loài thuộc chi Bacillus đã và đang trở thành những vi sinh vật

quan trọng hàng đầu về mặt ứng dụng (Ngô Tự Thành và ctv., 2009) Chúng được xem như là những tác nhân sinh học an toàn và có tiềm năng cao trong phòng trừ sinh học bệnh cây (Silo-suh và ctv., 1994, trích dẫn bởi Trần Thị Thúy Ái, 2011)

Nhiều kết quả nghiên cứu cho thấy vi khuẩn Bacillus sp Có khả năng sản xuất

một lượng lớn các chất kháng sinh như, gramicidin S, polymyxin, tyrotricidin, bacilysin, chlotetaine, iturin A, mycobacillin, bacilomycin, mycosubtilin, fungistatin và subsporin có thể kiểm soát các bệnh cây trồng (Intana và ctv., 2008, trích dẫn bởi Trần Thị Thúy Ái, 2011)