Hesperetin thô Tách hesperetinKết tinh Hespereti n tinh... Tổng hợp 3’,5,7-triacetoxy-4’-methoxyflavanone ký hiệu HTTA Ester hóa Làm lạnh nhanhLắng 1g hesperetin 15 phút, khuấy HTTA thô.
Trang 3Flavonoid
Là các hợp chất có nguồn gốc từ thiên nghiên
Cấu trúc khung kiểu C6-C3-C6
O
O
1 2
3 4 5
Chalcone
O
OH OH O
1
2 3 4
7
5
6
1' 2'
3' 4' 5' 6'
Aureusidin
O
O
isoflavone
Trang 4Chữa được ung thư đại tràng, tim mạch, bệnh gan, bệnh trĩ,…
Hesperetin
OHO
Trang 6Hesperetin
methoxyflavanone
3’,5,7-triacetoxy-4’- tetramethoxy-6’- hydroxy-chalcone
2’,3,4,4’-Vỏ quít
Xác định hoạt tính kháng oxy hóa
Trang 7Cô thu hồi dung môi
Trang 8Tinh chế hesperidin
Kết tinh
Lọc rửaSấy
Hesperidi
n tinh
Trang 10Hesperetin
thô
Tách hesperetinKết tinh
Hespereti
n tinh
Trang 11Tổng hợp 3’,5,7-triacetoxy-4’-methoxyflavanone (ký hiệu HTTA)
Ester hóa
Làm lạnh nhanhLắng
1g hesperetin
15 phút, khuấy
HTTA thô
Trang 12Tinh chế HTTA
Hòa tan
Lọc nóngLàm lạnhHTTA thô
Trang 13Kết quả pp thường so với pp lò vi sóng
Bảng so sánh phương pháp đun hồi lưu cách cát và phương pháp hồi lưu trong lò vi sóng
Phương
pháp
Khối lượng hesperetin (gram)
Khối lượng sản phẩm thô (gram)
Hiệu suất thô (%)
Khối lượng sản phẩm tinh (gram)
Hiệu suất tinh chế (%)
Thời gian phản ứng (phút)
Trang 14Tổng hợp 3,4,4’,6’-tetramethoxy-2’-hydroxychalcone(HTTM)
Ether hóa
Làm lạnh nhanh
Cô loại dung
môi
1g hesperetin
7h, khuấy
HTTM thô
Trang 15Tinh chế HTTM
Hòa tan
Lọc nóngLoại acetone
Trang 16• Pha 4 chất HD, HT, HTTA, HTTM, mỗi chất 3 lần với 5 nồng độ khác nhau trong DMSO Lấy 0,25ml các mẫu thử trộn với 4,75ml dung dịch DPPH nồng độ 200µM ( pha trong methanol), lắc đều và để ở nhiệt độ phòng trong 30 phút, sau đó đem đo độ hấp thu.
Đo hoạt tính kháng oxy hóa bằng phương pháp DPPH
Trang 17Điểm chảy: 258-260
94,6%
Trang 18D:\KETQUA11\P49\121911\TAM.2 HESPERIDIN SOLID 2011/12/19
Trang 19OH
OCH 3
O OH
O O O O
OH HO
6
10
1' 2'
3' 4'
5' 6' 1''
2'' 3''
2''' 3'''
4'''
5'''
6'''
Trang 20OH
OCH 3
O OH
O O O O
OH HO
10
1' 2'
3' 4'
5' 6' 1''
2'' 3''
2''' 3'''
4'''
5'''
6'''
Trang 21Phổ HSQC
Trang 22Phổ HMBC
Trang 25Vậy hợp chất trên là hesperidin có công thức cấu tạo:
O
OH
OCH3
O OH
O O
O O
OH HO
1''2''
3''
2'''3'''
4'''
5'''
6'''
Trang 26D:\KETQUA11\P49\121911\TAM.1 HESPERETIN SOLID 2011/12/19
Trang 27OH
OCH3
O OH
HO
2 3 4 5
6
7
8 9
1' 2'
3'
4'
5' 6'
OH(7 )
32
8,62’,5’,6’
Trang 28OH
OCH3
O OH
HO
2 3 4 5
6
7
8 9
Trang 29D:\KETQUA11\P49\121911\TAM.0 HT-TAc SOLID 2011/12/19
3 2 1 1 5
500 1500
C=
O ester
Trang 30
3 4 5
6 7
8 1'
2' 3' 4' 5' 6'
86’ 2’ 5’
3
Trang 313 4 5
6 7
8 1'
2' 3' 4' 5' 6'
Trang 331' 2'
3'
4'
5' 6'
5
Trang 341' 2'
3'
4'
5' 6'
Trang 35Kết quả đo hoạt tính kháng oxy hóa
Nồng độ
hesperidin
% ức chế DPPH của vitamin C
% ức chế DPPH của hesperidin
% ức chế DPPH của hesperetin
% ức chế DPPH của HTTA
% ức chế DPPH của HTTM
Trang 36Kết quả đo hoạt tính kháng oxy hóa
Trang 37KẾT LUẬN
- 4 chất thu được là hesperidin, hesperetin, HTTA và HTTM
- Quy trình tổng hợp các hợp chất đạt hiệu suất khá cao
- Tổng hợp HTTA bằng lò vi sóng cho hiệu suất cao hơn
- Hoạt tính kháng oxy hóa tăng dần theo dãy: HTTA< HTTM< hesperidin< hesperetin
- Nhóm hydroxy có vai trò rất quan trọng đối với khả năng kháng oxy hóa của flavonoid
KIẾN NGHỊ
- Thực hiện tiếp phản ứng tổng hợp diosmetin từ HTTA
- Đo hoạt tính kháng nấm, kháng khuẩn, kháng ung thư với các hợp chất đã tổng hợp được
Trang 40Cơ chế phản ứng tổng hợp HTTM
O HO
K2CO3
acetone
Trang 41R R
H + OH + H2O
+
OO H
OOH +
O2
Cơ chế kháng oxy hóa của flavonoid
Hiện tượng oxy hóa trong cơ thể
Trang 42Công thức cấu tạo của vitamin A
Công thức cấu tạo của vitamin C
OH
O
O OH
HO HO
OH