NGHIÊN cứu bán TỔNG hợp và xác ĐỊNH HOẠT TÍNH KHÁNG OXY HOÁ của DIOSMIN và dẫn XUẤT

BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ Hướng dẫn khoa học: Hướng dẫn khoa học: TS. Hoàng Thị Kim Dung TS. Hoàng Thị Kim Dung Học viên thực hiện: Học viên thực hiện: Huỳnh Thị Kim Chi Huỳnh Thị Kim Chi NGHIÊN CỨU BÁN TỔNG HỢP VÀ XÁC NGHIÊN CỨU BÁN TỔNG HỢP VÀ XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH KHÁNG OXY HOÁ ĐỊNH HOẠT TÍNH KHÁNG OXY HOÁ CỦA DIOSMIN VÀ DẪN XUẤT CỦA DIOSMIN VÀ DẪN XUẤT BÁO CÁO LUẬN VĂN THẠC SĨ BÁO CÁO LUẬN VĂN THẠC SĨ CẨN THƠ 10/2012 CẨN THƠ 10/2012 1 1  TỔNG QUAN  MỤC TIÊU  THỰC NGHIỆM  KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN  KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 2 NỘI DUNG TRÌNH BÀY TỔNG QUAN 3 Tên thường gọi: diosmin. Tên khoa học: diosmetin-7-rhamnoglucoside hoặc 5‑Hydroxy‑2‑(3‑hydroxy‑4‑methoxyphenyl)‑7‑[(2S, 3R,4S,5S,6R)‑3,4,5‑trihydroxy‑6‑[[(2R,3R,4R,5R,6S) ‑3,4,5‑trihydroxy‑6‑methyloxan‑2‑yl]oxymethyl]oxan ‑2‑yl]oxychromen-4-one. TỔNG QUAN 1. DIOSMIN 4 7 6 5 10 9 8 4 3 2 O 1 OH O O 1' 6' 5' 4' 3' 2' OH OCH 3 1'' O 5'' 4'' 3'' 2'' OH HO 6'' O 1''' HO 2''' 3''' 4''' 5''' O OH HO HO H 3 C 6''' DIOSMIN DIOSMIN Scrophularia nodosa Hyssopus officinalis Citrus Fabaceae 1. DIOSMIN 6 Ứng dụng Suy tĩnh mạch Bệnh trĩ Sưng phù do rối loạn hệ bạch huyết Tiểu đường Ung thư 1. DIOSMIN 7 O OH O O OH OCH 3 O OH HO O HO O OH HO HO H 3 C Hesperidin O OCCH 3 O O OCCH 3 OCH 3 O OCCH 3 H 3 CCO O H 3 CCO O OCCH 3 H 3 CCO H 3 CCO H 3 C O O O O O O O O i. Acetate hóa ii. Tác nhân khử iii. Thủy phân O OH O O OH OCH 3 O OH HO O HO O OH HO HO H 3 C Diosmin 2. TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRÊN THẾ GIỚI 8  CHUYỂN ĐỔI QUA TRUNG GIAN ACETATE O OCCH 3 O O OCCH 3 OCH 3 O OCCH 3 H 3 CCO O H 3 CCO O OCCH 3 H 3 CCO H 3 CCO H 3 C O O O O O O O O O OH O O OH OCH 3 O OH HO O HO O OH HO HO H 3 C Diosmin ii. NBS, benzoyl peroxide iii. NaOH H=10.96% o Sử dụng tác nhân NBS, benzoyl peroxide 1 (1) N. B. Lorette et al, The use of N‑Bromosuccinimide and pyridinium bromide perbromide in the conversion of flavanones into flavones, 1951, The journal of organic chemistry, 16, pp. 930-933. 2. TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRÊN THẾ GIỚI 9 O OCCH 3 O O OCCH 3 OCH 3 O OCCH 3 H 3 CCO O H 3 CCO O OCCH 3 H 3 CCO H 3 CCO H 3 C O O O O O O O O O OH O O OH OCH 3 O OH HO O HO O OH HO HO H 3 C Diosmin ii. SeO 2 iii. NaOH H=66.12% o Sử dụng tác nhân selen dioxide 2 (2) Redaeill, Claudlo et al, Process for producing flavone derivatives with medicinal activity, European Patent Application, 1982. 2. TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRÊN THẾ GIỚI 10 O OCCH 3 O O OCCH 3 OCH 3 O OCCH 3 H 3 CCO O H 3 CCO O OCCH 3 H 3 CCO H 3 CCO H 3 C O O O O O O O O O OH O O OH OCH 3 O OH HO O HO O OH HO HO H 3 C Diosmin ii. Bromo lỏng iii. NaOH H=37% o Sử dụng tác nhân bromo lỏng 3 (3) Sakhardande Rajiv (2010), Process for the preparation of diosmin, World Intellectual Property Organization. 2. TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRÊN THẾ GIỚI [...]... preparation of diosmin, World Intellectual Property Organization 13 2 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU Ở VIỆT NAM Năm 2011, Nguyễn Thị Mỹ Duyên (đại học Y dược TP.HCM) nghiên cứu theo quy trình dùng tác nhân NBS (45.8%) và sử dụng oxone®/sodium bromide 14 MỤC TIÊU Xác định khả năng kháng oxy hóa Hesperidin Diosmin Dẫn xuất diosmin Xác định khả năng gây độc tế bào 15 THỰC NGHIỆM 16 1 NGUYÊN LIỆU - Hesperidin được... Châu Âu và các hoá chất khác đủ tiêu chuẩn, tinh khiết 17 2 PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC - Kết tinh, sử dụng sắc ký cột silica gel pha thường, kỹ thuật sắc ký lớp mỏng -Sử dụng các phương pháp phổ: IR, HPLCHRMS, NMR 18 3 PHƯƠNG PHÁP THỬ NGHIỆM HOẠT TÍNH SINH HỌC - Thử nghiệm khả năng kháng oxy hóa theo phương pháp DPPH - Thử nghiệm khả năng gây độc tế bào theo phương pháp SRB 19 4 QUY TRÌNH TỔNG HỢP OH... OH Diosmin OH Hesperidin O OCH3 HO O OH O Diosmetin O OCCH3 OCH3 O H3CCO O O OCH3 OCH3 H3CO H2C O DTA O OCCH3 OCH2 CH OCH3 OCH3 O DTM HC H2CO O DTAl O OCH2 CH CH2 CH 4 QUY TRÌNH TỔNG HỢP 21 4 QUY TRÌNH TỔNG HỢP Diosmin H = 76% 22 Diosmetin HO H3C H = 87% OH HO O OH O O HO HO OH OCH3 O O OH H2SO4/CH3COOH/H2O OCH3 HO O + C6H12O6 OH O Diosmin OH O Diosmetin Glucose + C6H12O5 Rhamnose 23 3′ ,5,7−triacetoxy−4′... 1 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC A Diosmin - Có dạng bột màu trắng - Tan tốt trong DMSO, DMF, dung dịch kiềm - Tnc = 278−280°C 28 OH HO 4''' HO H 3C Phổ IR của diosmin 6''' 3''' 5''' O 2''' OH 1''' 3' O 6'' 4'' HO HO 2' 5'' O 2'' 3'' 1'' O 7 9 DIOSMIN 1' 5' 6 10 3 4 O 1609 3467 D:\KETQUA11\P49\090911\CHI.1 2 OCH3 4' 6' OH OH O OH 5 Giãn – C=C– vòng thơm 1 8 29 SOLID 2011/09/09 Page 1/1 OH HO 4''' Phổ HRMS của diosmin. .. OH HO 4''' HO H 3C 6''' Phổ H-NMR của diosmin 1 3''' 5''' O 2''' OH 1''' 3' O 6'' 4'' HO HO 2' 5'' O 2'' 3'' 1'' 1 8 O 7 9 O 2 1' 5' 6' OH 6 5 OH 10 3 4 O 3H của đường rhamnose -OCH3 OCH3 4' Các proton kề oxy của đường 31 Phổ 1H-NMR của hesperidin OH 3' 2' Rh 5H vòng benzene Gl 1 8 O 7 9 O 2 1' OCH3 4' 5' 6' 6 5 OH 10 4 3 Hesperidin O H-2 H-3 32 32 Phổ 1H-NMR của diosmin OH 3' 2' Rh Gl 1 8 O 7 9 O... HÌNH NGHIÊN CỨU TRÊN THẾ GIỚI o Sử dụng tác nhân 2-carboxy ethyl triphenyl phosphonium bromide3 O O OCCH3 O H3CCO H3CCO H3C O O OCCH3 O O H3CCO H3CCO O HO H3C OCH3 O O P+ Br- ii O OH OCH3 O O OH O O OCCH3 O O O OCCH 3 OH HO iii n-C4H9OK HO HO O O OH OH O Diosmin (3) Sakhardande Rajiv (2010), Process for the preparation of diosmin, World Intellectual Property Organization 11 2 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRÊN... HO O O OH OH O Diosmin (3) Sakhardande Rajiv (2010), Process for the preparation of diosmin, World Intellectual Property Organization 12 2 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRÊN THẾ GIỚI o Sử dụng tác nhân potassium iodine3 OH HO HO H3C O HO H3C OH OCH3 O O HO HO OH HO O O O KI OH O Hesperidin OCH3 O O OH OH H=73% HO HO O O OH OH O Diosmin (3) Sakhardande Rajiv (2010), Process for the preparation of diosmin, World... Diosmetin Glucose + C6H12O5 Rhamnose 23 3′ ,5,7−triacetoxy−4′ −methoxyflavone (DTA) H = 83% O OH OCCH3 OCH3 2 HO O + 3 (CH3CO)2O OH O OCH3 O CH3COONa 2 H3CCO O + 3H2O t0 O OCCH3 O 24 3′ ,4′ ,5,7−tetramethoxyflavone (DTM) H = 85% OCH3 OH OCH3 OCH3 2 HO O + 3 (CH3O)2SO2 K2CO3 t0 H 3CO O 2 + 3H2SO4 Acetone OH O OCH3 O 3′ ,5,7−triallyloxy−4′ −methoxyflavone (DTAl) H = 80.4% OCH2 CH OH OCH3 OCH3 2 HO O + 6 CH2... của diosmin OH 3' 2' Rh Gl 1 8 O 7 9 O 2 1' OCH3 4' 5' 6' 6 5 OH 10 4 O 3 Diosmin 3H vòng benzene H-3 2H vòng benzene OH HO 4''' HO H 3C 6''' Phổ C-NMR của diosmin 13 3''' 5''' O 2''' OH 1''' 3' O 6'' 4'' HO HO 2' 5'' O 2'' 3'' 1'' 1 8 O 7 9 O 2 1' OCH3 4' 5' 6' OH 6 5 OH 3 10 4 O 28 mũi tín hiệu = 28C 34 OH HO 4''' Phổ DEPT của hesperidin HO H3C 6''' 2''' 3''' 5''' O OH 1''' 3' O 6'' 4'' HO HO 2'... 2'' 3'' 1'' 1 8 O 7 9 O 2 1' 5' 6' OH Hesperidin OCH3 4' 6 5 OH 10 3 4 O -CH2- 35 OH HO 4''' HO H 3C 6''' Phổ DEPT của diosmin 3''' 5''' O 2''' OH 1''' 3' O 6'' 4'' HO HO 2' 5'' O 2'' 3'' 1'' 1 8 O 7 9 O 2 1' OCH3 4' 5' 6' OH 6 5 OH 3 10 4 O 28 mũi tín hiệu = 28C 16 nhóm CH 6C bậc bốn kề oxy -CH3 -OCH3 -CH22C bậc bốn C=O 36 . Chi NGHIÊN CỨU BÁN TỔNG HỢP VÀ XÁC NGHIÊN CỨU BÁN TỔNG HỢP VÀ XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH KHÁNG OXY HOÁ ĐỊNH HOẠT TÍNH KHÁNG OXY HOÁ CỦA DIOSMIN VÀ DẪN XUẤT CỦA DIOSMIN VÀ DẪN XUẤT BÁO CÁO LUẬN VĂN THẠC SĨ BÁO. NBS (45.8%) và sử dụng oxone ® /sodium bromide. 14 2. TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU Ở VIỆT NAM 15 Xác định khả năng kháng oxy hóa Xác định khả năng gây độc tế bào Hesperidin Diosmin Dẫn xuất diosmin MỤC. hoặc 5‑Hydroxy‑2‑(3‑hydroxy‑4‑methoxyphenyl)‑7‑[(2S, 3R,4S,5S,6R)‑3,4,5‑trihydroxy‑6‑[[(2R,3R,4R,5R,6S) ‑3,4,5‑trihydroxy‑6‑methyloxan‑2‑yl]oxymethyl]oxan ‑2‑yl]oxychromen-4-one. TỔNG QUAN 1. DIOSMIN 4 7 6 5 10 9 8 4 3 2 O 1 OH O O 1' 6' 5' 4' 3' 2' OH OCH 3 1'' O 5'' 4'' 3'' 2'' OH HO 6'' O 1''' HO 2''' 3''' 4''' 5''' O OH HO HO H 3 C 6''' DIOSMIN DIOSMIN Scrophularia