Nghiên cứu thu nhận anthocyanin từ phế liệu gạo đen và xác định hoạt tính kháng oxy hóa của anthocyanin

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU THU NHẬN ANTHOCYANIN TỪ PHẾ PHẨM GẠO ĐEN VÀ XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH KHÁNG OXY HĨA Ngành: CƠNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : TS NGUYỄN LỆ HÀ Sinh viên thực MSSV: 1151110362 : LÊ ANH TOÀN Lớp: 11DSH01 TP Hồ Chí Minh, 2015 LỜI CAM ĐOAN Là sinh viê n năm năm c uối Tr ườ ng Đại học Cơng nghệ TP Hồ Chí Minh, vinh dự làm đồ án tốt nghiệp để hoàn t ất c hương trình học mì nh Tơi c am đoan l nghiên cứu tiến hành phòng thí nghiệm Kho a Cơ ng nghê Si nh học-Thực phẩm-Môi trườ ng, Trường Đại học Cô ng nghệ TP Hồ Chí Minh Những số liệu, hì nh ảnh ho àn toàn trung th ực chưa có cơng bố Thành phố Hồ Chí Minh, tháng năm 2015 Si nh vi ên thực hi ện Lê Anh To àn LỜI CẢM ƠN Tận đ áy lòng xin gửi vạn lời c ảm ơn đến c mẹ, c mẹ đ ã gian l ao nuôi dạy thành người l người thầy đầu đời c Cha mẹ l uôn c hỗ dựa vững c con, l người giúp co n đứng vững s au l ần vấp ngã, nguồn động viê n, động lực để tiếp t ục phấn đấu sống Với lòng biết ơn sâu sắc Em xin chân thành cảm ơn toàn t hể quý Thầy Cô Khoa Công nghệ sinh học- Thực phẩm-Môi trường, c ùng to àn thể Thầy Cô Tr ường Đại học Cơng nghệ TP Hồ Chí Minh nhiệt tình giảng dạy truyền đạt c ho em kiến thức quý báo sở ngành c huyên ngành t ngày em bước chân vào gi ảng đường đ ại học Đặc biệt, em xi n chân t hành cảm ơn TS.Nguyễ n Lệ Hà, người thầy đáng kính, đ ã ln t ận tình dẫn tạo điều kiện thuận lợi cho em ho àn thành phần thực nghiệm c đồ án Em xi n chân thành cảm ơn t hầy Huỳnh Văn Thành thầy Nguyễ n Tr ung Dũng tạo điều kiệ n thuận lợi cho em thực hiệ n đồ án t ại phò ng thí nghiệm Khoa Cơng nghệ sinh học- Thực phẩm- Môi trường, Trường Đại học Cơ ng nghệ TP Hồ Chí Minh Cảm ơn t ất bạn lớ p 11DSH01 đ ã luô n khíc h lệ, động viên giúp đỡ suốt trình học t ập trường trình l àm đồ án tốt nghiệp Xin c hân t hành c ảm ơn! TP Hồ Chí Mi nh, t háng năm 2015 SVTH: Lê Anh To àn ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP MỤC LỤC MỤC LỤC i DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT iv DANH MỤC ẢNH HÌNH v DANH MỤC BẢNG vii MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Gạo đen .5 1.1.1 Giới thiệu gạo đen 1.1.2 Thành phần di nh dưỡ ng 1.1.3 Những lợi c ho sức khỏe 1.2 ANTHOCYANIN .9 1.2.1 Giới thiệu 1.2.2 Phân loại anthocyanin .9 1.2.3 Cấu tr úc hó a học ant hocyanin 10 1.2.4 Đặc điểm, tính chất anthocyanin 12 1.2.5 Đặc tí nh quang phổ ant hocyani n 13 1.2.6 Sự phân bố anthocyanin 13 1.2.7 Sự c huyển đổi cấu trúc anthocyanin môi trường lỏng .15 1.2.8 Một số yếu tố ảnh hưởng đế n độ màu Ant hocyani n (tính khơ ng bền)(Chunhui Ma cộng sự, 2012); (Mazza Mi nitiati, 1993); (Fr ancis, 1989) 17 1.2.9 Khả ứng dụng nguồn anthocyani n 24 1.2.10 Vai trò c ác hợp chất ant hocyani n 25 i ĐỒ ÁN TỐT 1.3 Phương pháp trích lyNGHIỆP .29 i ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP 1.3.1 Tríc h ly lỏng – lỏng 29 1.3.2 Tríc h ly rắn – lỏng 31 1.3.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến q trình trích ly 32 1.4 Những nghiên cứu nước t hế giới 33 1.4.1 Tro ng nước .33 1.4.2 Trê n t hế giới .34 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 37 2.1 Thời gi an đị a điểm .37 2.2 Vật liệu – Hó a chất – Dụng cụ t hiết bị 37 2.2.1 Nguyên Liệu .37 2.2.2 Dụng cụ .37 2.2.3 Thiết bị 37 2.2.4 Hóa c hất 38 2.3 Phương pháp nghiên cứu 38 Bố trí thí nghiệm .40 2.3.1 Thí nghiệm 1: Xác định độ ẩm nguyên liệu 40 2.3.2 t Thí nghiệ 40 2.3.3 Thí nghiệm 3: Khảo s át ảnh hưởng c kíc h thước nguyên liệu đến khả trích ly màu anthocyanin 41 2.3.4 Thí nghiệm 4: Khảo s át ảnh hưởng c nhiệt độ xử lý nguyê n liệu sơ đến khả trích ly màu anthocyanin 43 2.3.5 Thí nghiệm 5: Tối ưu hóa tỷ lệ Et hanol:HCl (1%) l àm dung mơi trích ly ant hocyani n 45 2.3.6 Thí nghiệm 6: Khảo sát ảnh hưở ng nhiệt độ đến khả trích ly ant hocyani n 47 ii ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP 2.3.7 Thí nghiệm 7: khảo sát ảnh hưởng thời gi an đến khả trích ly ant hocyani n 49 2.3.8 ươ DPPH 50 2.3.9 Thí nghiệm 9: Khảo s át ảnh hưởng c thời gi an cô - quay đến hoạt tính o xy hó a anthocyanin 51 2.4 Các phươ dụng nghiên c u 52 2.5 Các phương pháp thố ng kê xử lý số liệu 52 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 53 3.1 Độ ẩm nguyê n liệu 53 3.2 Bước sóng hấp thu cực đ ại Ant hocyani n 53 3.3 Ảnh hưởng kích thước nguyê n liệu đến khả trích l y 54 3.4 Ảnh hưởng nhiệt độ xử lí nguyê n liệu sơ 56 3.5 Khảo sát tối ưu hó a tỷ lệ Et hanol HCl(1%) làm dung mơi trích l y .57 3.6 Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ đến khả trích ly 59 3.7 Khảo sát ảnh hưởng t hời gian đến khả trích l y 61 3.8 ương DPPH 63 3.9 Thí nghiệm 9: Khảo s át ảnh hưởng c thời gi an quay đến hoạt tính oxy hóa ant hocyani n 64 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 69 4.1 4.2 Kết luận 69 KIẾN NGHỊ 72 TÀI LIỆU THAM KHẢO 73 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydr azyl) IC50 (Effecti ve concentration of 50%) EtOH (Et hanol) MeOH ( Methanol) ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1Gạo đen Hình 1.2 Thành phần di nh dưỡng có 100 gr am gạo đen .6 Hình 1.3Sự chuyển hó a cấu tr úc phân tử Anthocyanin mơi trường lỏng 16 Hình 1.4Cấu trúc c huyển hó a anthocyanin nước 17 Hình 1.5 Ảnh hưởng pH lên tốc độ thủy phân dâu đun nóng t ại 45 C trường hợp có Oxygen ho ặc Nitrogen 19 Hình 1.6Sự biến tí nh ant hocyani n 3,5-di Glucoside t ại pH 3,7 20 Hình 1.7Sự biến tí nh anthocyanin với phản ứng oxy hóa catechol 21 Hình 1.8Phản ứng ngưng t ụ 22 Hình 1.9Sơ đồ Jurd phản ứng t huận nghịch gi ữa SO2 anthocyanin 23 Hình 1.10Sự chuyể n hóa mal vi n mal vo ne H2 O2 tạo thành từ s ự oxy hóa vit ami n C 24 Hình 1.11Sơ đồ trích ly t heo đoạn 30 Hình 1.12Sơ đồ trích ly t heo nhiều đoạn giao dòng 30 Hình 1.13Sơ đồ trích ly liên t ục nhiề u đoạn nghịch dòng 31 Hình 2.1 Sơ đ quy trình tóm t nội dung t hí nghi ệm 39 Hình 2.3Quy trình trích l y Ant hocyani n .40 ảo sát kích t hước nguyê n liệu đến khả 42 ảo sát xử lí nhiệt độ nguyê n liệu đến khả 44 ối ưu hóa t ỷ lệ Ethanol:HCl (1%) l àm dung môiđ ến khả .46 ảo sát ảnh hưởng nhiệt độ đến khả 48 ảo sát ảnh hưởng t hời gian đến khả 50 Hình 3.1Bước sóng hấp t hu cực đại c ant hocyani n đo quang 53 Hình 3.2 Ảnh hưởng kích t hước nguyê n liệu đến khả trích l y .55 Hình 3.3Đồ t hị biển diễn hàm l ượng anthocyanin trích ly xử lý nhiệt sơ .56 Hình 3.4Đồ t hị hàm lượng ant hocyani n trích l y với t ỷ lên dung môi Et hnol:HCl (1%) khác 58 Hình 3.5Đồ t hị hàm lượng ant hocyani n với c ác nhiệt độ trính l y khác 59 ĐỒ ÁN TỐT Hình 3.6Biểu đồ thể hàm NGHIỆP l ượng anthocyanin trích ly với c ác thời gi an khác 62 Hình 3.7 Mối tương quan t uyến tí nh % gốc tự DPPH bị ức chế với LogCo (Co nồng độ ant hocyani n mg/ml) .63 Hình 3.8Mối tương quan % gốc tự DPPH bị ức c hế với Lo g( Ascorbic acid, µg/ ml) 63 Hình 3.9.Sự t hay đổi nồng độ anthocyani n dịch c hiết bán thành phẩm theo thời gi an cô quay .64 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Bảng Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Count o 90 C/5p o 80 C/5p Nhiet phong Mean 3.38175 3.65313 7.32371 Homogeneous Groups X X X 5: Xác đị nh ảnh hưởng c tỷ l ệ EtOH HCl 1% pha dung môi đến hi ệu trí ch l y Bảng 5.giá trị OD cùa thí nghiệm tối ưu hóa tỉ lệ dung mơi EtOH:HCl 1% việc trích l y anthocyani n từ gạo đen TLDM pH1 V: v 535mn 80:20 0.270 0.260 0.263 0.267 0.265 0.269 0.268 85:15 0.313 0.309 0.301 0.307 0.312 0.311 0.308 0.306 90:10 0.302 0.276 0.318 0.311 0.315 0.305 95:5 0.432 0.433 0.439 0.434 0.438 0.430 pH45 700nm 535nm 0.081 0.490 0.077 0.481 0.078 0.485 0.080 0.487 0.076 0.488 0.081 0.489 0.082 0.486 0.121 0.488 0.134 0.479 0.133 0.480 0.124 0.481 0.130 0.487 0.128 0.485 0.132 0.482 0.125 0.486 0.124 0.456 0.110 0.464 0.136 0.487 0.133 0.458 0.130 0.483 0.121 0.462 0.234 0.464 0.238 0.458 0.261 0.458 0.250 0.462 0.249 0.457 0.241 0.461 700nm 0.321 0.318 0.319 0.320 0.317 0.319 0.318 0.335 0.340 0.351 0.342 0.350 0.349 0.350 0.338 0.325 0.346 0.349 0.329 0.344 0.326 0.345 0.349 0.357 0.346 0.355 0.348 13 n A a (mg/L) TB ( mg/L) 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 0.020 0.020 0.019 0.020 0.018 0.018 0.018 0.039 0.036 0.039 0.044 0.045 0.047 0.044 0.033 0.047 0.048 0.044 0.049 0.046 0.048 0.079 0.086 0.077 0.068 0.087 0.076 3,340 3,340 3,173 3,340 3,006 3,006 3,006 6,513 6,012 6,513 7,348 7,514 7,848 7,348 5,511 7,848 8,015 7,348 8,182 7,681 8,015 13,192 14,361 12,858 11,355 14,528 12,691 3.173 ± 0.167 6.826 ±0.815 7.848 ±0.298 12.92 ±1.256 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP 0.435 0.437 0.272 0.276 0.288 0.279 0.280 0.285 0.283 0.273 0.213 0.209 0.215 0.211 0.215 0.208 0.212 0.214 98:2 99:1 0.257 0.245 0.124 0.119 0.116 0.122 0.117 0.121 0.118 0.120 0.121 0.134 0.113 0.130 0.129 0.131 0.118 0.128 0.465 0.456 0.256 0.264 0.277 0.259 0.271 0.261 0.274 0.263 0.208 0.199 0.218 0.204 0.214 0.201 0.217 0.211 0.353 0.344 0.125 0.126 0.121 0.123 0.127 0.124 0.121 0.119 0.129 0.140 0.130 0.133 0.139 0.134 0.138 0.137 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 0.066 0.080 0.017 0.019 0.016 0.021 0.019 0.027 0.012 0.009 0.013 0.016 0.014 0.010 0.011 0.010 0.015 0.012 11,021 13,359 2,839 3,173 2,672 3,507 3,173 4,509 2,004 1,503 2,171 2,672 2,338 1,670 1,837 1,670 2,505 2,004 2.923 ±0.919 2.108 ±0.378 Bảng Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Count 99:1 98:2 80:20 85:15 90:10 95:5 Mean 2.10838 2.9225 3.173 6.82587 7.84817 12.9206 Homogene ous Groups X X X X X X 6: Xác đị nh nhi ệt độ thí ch hợp để trí ch l y ant hocyani n Bảng giá trị OD t hí nghiệm tối ưu hóa nhiệt độ trích ly anthocyanin t gạo đen o ( C) 50 pH1 535m n 0.065 0.069 0.074 700n m 0.029 0.029 0.030 pH45 535n m 0.041 0.045 0.048 700n m 0.035 0.039 0.038 14 A 10 10 10 0.03 0.03 0.03 a (mg/L) 5.010 5.628 5.678 TB (mg/L) 5.543 ±0.676 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP 0.072 0.067 0.073 0.065 0.071 0.070 55 0.027 0.030 0.028 0.024 0.031 0.042 0.047 0.040 0.046 0.050 0.041 0.034 0.039 0.033 0.037 0.031 0.040 10 10 10 10 10 10 0.133 0.046 0.071 0.035 10 0.129 0.048 0.070 0.037 10 0.131 0.134 0.128 0.132 0.129 0.133 0.130 60 0.025 0.121 0.125 0.123 0.120 0.124 0.127 0.044 0.045 0.046 0.050 0.045 0.042 0.041 0.045 0.049 0.047 0.046 0.044 0.050 0.069 0.072 0.068 0.067 0.073 0.067 0.069 0.069 0.070 0.067 0.071 0.068 0.065 0.031 0.036 0.033 0.035 0.038 0.030 0.032 0.039 0.038 0.036 0.035 0.037 0.040 15 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 0.03 0.03 0.03 0.02 0.02 0.03 0.05 0.04 0.04 0.05 0.04 0.05 0.04 0.05 0.05 0.04 0.04 0.04 0.03 0.04 0.05 6.513 5.344 6.012 4.676 4.676 6.346 8.516 8.405 ±0.391 8.015 8.182 8.850 7.848 8.349 8.182 9.017 8.683 7.681 7.348 7.514 6.346 8.182 8.683 7.310 ±0.866 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP 0.119 0.048 0.072 0.038 10 0.126 0.043 0.069 0.031 10 0.121 65 0.087 0.088 0.090 0.086 0.083 0.087 0.089 70 0.051 0.018 0.020 0.021 0.019 0.021 0.016 0.022 0.070 0.059 0.064 0.069 0.063 0.067 0.066 0.059 0.038 0.019 0.024 0.026 0.020 0.025 0.019 0.022 10 10 10 10 10 10 10 10 0.085 0.018 0.068 0.023 10 0.069 0.025 0.049 0.030 10 0.070 0.023 0.051 0.028 10 0.072 0.029 0.046 0.029 10 0.071 0.027 0.047 0.031 10 0.067 0.073 0.069 0.072 0.022 0.030 0.024 0.031 0.050 0.045 0.048 0.051 0.027 0.033 0.034 0.028 Bảng Multiple Range Tests 16 10 10 10 10 0.03 0.04 0.03 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.03 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.03 0.03 0.01 6.179 7.514 6.346 4.843 4.237 ±0.585 4.676 4.342 4.008 3.340 4.008 5.010 3.674 4.175 4.008 4.342 4.676 3.674 5.177 5.177 3.006 4.279 ±0.741 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Method: 95.0 percent LSD Count NhietDo TrichLy_65 NhietDo TrichLy_70 NhietDo TrichLy_50 NhietDo TrichLy_60 NhietDo TrichLy_55 ạo Mean 4.23762 4.27937 5.54256 7.31033 8.40467 Homogeneous Groups X X X X X 7: Xác đị nh thời gi an thí ch hợp trí ch l y ant hocyani n từ g đen Bảng giá trị OD t hí nghiệm tối ưu hóa thời gi an trích ly ant hocyanin từ gạo đen ) 50 55 pH45 535n 700n m m 0.042 0.035 10 0.069 0.028 0.039 0.028 10 0.061 0.030 0.036 0.037 10 0.071 0.027 0.041 0.029 10 0.068 0.029 0.037 0.031 10 0.063 0.031 0.042 0.033 10 0.069 0.033 0.036 0.036 10 0.073 0.025 0.038 0.028 10 0.065 0.030 0.042 0.032 10 0.131 0.050 0.076 0.039 10 0.127 0.050 0.069 0.035 10 0.135 0.052 0.072 0.038 10 0.129 0.051 0.073 0.034 10 pH1 535m 700n m n 0.075 0.031 17 A a (mg/L) TB (mg/L) 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 0.02 0.03 0.03 0.02 0.04 0.04 0.04 0.03 6.179 5.307 ±0.859 5.010 5.344 5.344 5.511 3.841 6.012 6.346 4.175 7.348 7.181 8.182 6.513 7.570 ±0.783 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP 60 65 0.132 0.048 0.078 0.037 10 0.128 0.053 0.071 0.040 10 0.130 0.049 0.075 0.036 10 0.134 0.052 0.073 0.041 10 0.136 0.047 0.069 0.034 10 0.135 0.040 0.055 0.035 10 0.136 0.039 0.051 0.036 10 0.139 0.043 0.056 0.036 10 0.138 0.039 0.052 0.034 10 0.131 0.042 0.055 0.037 10 0.140 0.037 0.049 0.033 10 0.137 0.035 0.053 0.040 10 0.136 0.040 0.050 0.039 10 0.133 0.038 0.057 0.034 10 0.095 0.020 0.060 0.021 10 0.090 0.018 0.063 0.031 10 0.090 0.023 0.070 0.036 10 0.091 0.019 0.062 0.022 10 0.093 0.021 0.065 0.029 10 0.096 0.017 0.069 0.033 10 0.092 0.022 0.061 0.026 10 0.095 0.019 0.063 0.030 10 18 0.04 0.04 0.04 0.05 0.05 0.07 0.08 0.07 0.08 0.07 0.08 0.08 0.08 0.07 0.03 0.04 0.03 0.03 0.03 0.04 0.03 0.04 7.181 7.348 7.014 8.349 9.017 12.524 13.322 ±1.097 13.693 12.691 13.526 11.856 14.528 14.862 14.194 12.023 6.012 6.680 5.511 5.344 6.012 7.181 5.845 7.181 6.030 ±0.877 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP 70 0.097 0.023 0.071 0.024 10 0.063 0.022 0.044 0.026 10 0.071 0.021 0.050 0.029 10 0.065 0.027 0.041 0.031 10 0.069 0.023 0.046 0.027 10 0.064 0.026 0.049 0.032 10 0.070 0.022 0.042 0.024 10 0.067 0.020 0.045 0.028 10 0.072 0.025 0.043 0.030 10 0.065 0.019 0.051 0.029 10 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.03 0.03 0.03 0.02 4.509 3.841 4.56 ±0.678 4.843 4.676 4.509 3.507 5.010 5.010 5.678 4.008 Bảng 10 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Count Tgi anTLy_70 Tgi anTLy_50 Tgi anTLy_65 Tgi anTLy_55 Tgi anTLy_60 Mean 4.56467 5.30689 6.03056 7.57033 13.3219 Homogeneous Groups X XX X X X Thí nghi ệm 8: Xác đị nh ho ạt tí nh kháng oxy hóa c anthocyani n Bảng 12.OD xác đị nh hàm lượng ant hocyani n để xác định giá trị IC50 mẫu pH1 535nm 0.649 0.647 0.652 pH4,5 700nm 535nm 0.331 0.969 0.330 0.972 0.333 0.970 DF A a (mg/mL) a TB ( mg/mL) 700nm 0.678 100 0.027 45.087 0.683 100 0.028 46.757 0.679 100 0.028 46.757 19 46.200 ±0,964 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Bảng 13.gi trị OD t ại λ=516nm xác định hoạt tí nh kháng DPPH anthocyanin Bl ank Vi tami ne C Co DF 4.62 0.1000 Lần 2.153 0.068 A1 A2 0.083 0.082 Lần 2.142 0.067 A3 Q1 0.085 99.231 3.08 0.0667 0.127 0.133 0.138 97.116 1.54 0.0333 0.312 0.321 0.329 88.225 1.026 0.0222 0.77 0.0167 0.825 0.830 0.827 63.569 0.996 1.001 1.006 55.351 0.513 0.0111 1.335 1.315 1.325 39.058 0.385 0.0083 1.535 1.533 1.531 29.446 0.308 0.0067 1.624 1.608 1.615 25.168 0.256 0.0056 0.154 0.0033 1.702 1.701 1.698 21.419 1.872 1.863 1.871 13.249 0.102 0.0022 67 2.053 2.045 2.049 4.550 Q2 99.27 96.82 87.79 63.32 55.11 40.01 29.54 25.93 21.46 13.68 4.934 2.148 0.066 Q3 99.13 96.58 87.39 63.47 54.87 39.53 29.63 25.60 21.61 13.29 4.742 Tr ung 2.148 0.067 Qtb 99.21 96.84 87.80 63.45 55.11 39.53 29.54 25.56 21.50 13.40 4.742 bì nh logCo 0.664 0.488 0.187 0.011 -0.114 -0.29 -0.415 -0.511 -0.591 -0.812 -0.989 Phần trăm bắt gốc tự DPPH c hất nghiên cứu tí nh theo cơng t hức sau: Tro ng đó: A độ hấp thu c dung dịc h chứa mẫu thử A0 độ hấp t hu DPPH khơng có m ẫu t Ac độ hấp t hu dung dịch chứa c hất đối chiếu Q % gốc tự bị ức c hế 20 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Bảng 14.gi trị OD xác định ho ạt tính kháng DPPH Ascorbic acid Lần Bl ank 1.642 Co (µg/ml ) A1 100.000 0.064 50.000 0.080 10.000 1.272 5.000 1.434 1.000 1.467 0.500 1.483 0.100 1.512 0.050 1.573 A2 0.070 0.078 1.271 1.474 1.432 1.497 1.650 1.577 Lần 1.657 A3 0.070 0.077 1.254 1.433 1.467 1.432 1.548 1.550 Q1 96.079 95.099 22.075 12.150 10.129 9.148 7.372 3.635 1.598 Q2 95.712 95.222 22.136 9.700 12.273 8.291 -1.082 3.390 Q3 95.712 95.283 23.177 12.212 10.129 12.273 5.166 5.044 Tr ung 1.632 Qtb 95.834 95.201 22.463 11.354 10.843 9.904 3.819 4.023 bì nh logCo 2.000 1.699 1.000 0.699 0.000 -0.301 -1.000 -1.301 Thí nghi ệm 9: Xác đị nh thông số c ho q trì nh cơ-quay thu nhận dị ch chi ết anthocyani n Bảng15.Khối lượng t hể tích dịch trước sau cô quay Khối l ượng cốc dị ch quay (g) Khối l ượng dị ch l ại (g) m mo m3 m6 m9 m12 m15 m18 114.012 195.883 179.103 165.001 157.697 146.864 131.440 124.727 81.871 65.091 50.989 43.685 32.853 17.429 10.715 Thể tí ch dị ch l ại (ml) 100.00 79.50 62.28 53.36 40.13 21.29 13.09 Bảng 16.gi trị OD hàm l ượng anthocyanin dịch trước sau cô quay 21 Thời gi an phút ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP pH1 pH4,5 Hệ DF A 535n 700nm 535n 700nm số m m pha loãng 0.649 0.331 0.969 0.678 1.00 10 0.02 0.647 0.330 0.972 0.683 1.00 10 0.02 0.652 0.333 0.970 0.679 1.00 10 0.02 22 a (mg/m L) 4.509 4.676 4.676 a TB (mg/mL) 4.620 ±0.096 phút phút phút 12 phút 15 phút 18 phút 0.648 0.329 0.969 0.679 1.26 10 0.647 0.329 0.970 0.678 1.26 10 0.649 0.330 0.972 0.680 1.26 10 0.642 0.325 0.964 0.673 1.61 10 0.643 0.329 0.962 0.676 1.61 10 0.643 0.328 0.968 0.678 1.61 10 0.639 0.325 0.965 0.677 1.87 10 0.641 0.328 0.967 0.681 1.87 10 0.639 0.327 0.966 0.679 1.87 10 0.637 0.323 0.961 0.670 2.49 10 0.639 0.321 0.967 0.675 2.49 10 0.638 0.326 0.963 0.676 2.49 10 0.635 0.316 0.949 0.656 4.70 10 0.634 0.315 0.956 0.660 4.70 10 0.636 0.319 0.952 0.659 4.70 10 0.635 0.637 0.638 0.316 0.313 0.317 0.949 0.947 0.949 0.650 0.645 0.649 7.64 7.64 7.64 10 10 10 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.020 0.022 0.021 6.092 5.742 ±0.321 5.462 5.672 6.973 7.062 ±0.409 7.509 6.705 8.136 8.136 ±0.313 8.449 7.823 9.571 10.265 ±0.636 10.820 10.403 20.393 19.086 ±1.198 18.040 18.824 25.519 28.071 26.795 26.795 ±1.276 Bảng 17 OD hiệu s uất t hu hồi anthocyanin dịch trích ly sau quay Thời gi an phút pH1 534n 700n m m pH4,5 534n 700n m m D F A 0.64 0.96 10 0.027 0.33 0.67 a (mg/mL) a TB (mg/mL ) 4.509 4.620 Hi ệu suấtt hu hồi % 100 phút phút phút 12 phút 15 phút 18 phút 0.64 0.65 0.64 0.64 0.64 0.64 0.64 0.64 0.63 0.64 0.63 0.63 0.63 0.63 0.63 0.63 0.63 0.63 0.63 0.63 0.33 0.33 0.32 0.32 0.33 0.32 0.32 0.32 0.32 0.32 0.32 0.32 0.32 0.32 0.31 0.31 0.31 0.31 0.31 0.31 0.97 0.97 0.96 0.97 0.97 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.94 0.95 0.95 0.94 0.94 0.94 0.68 0.67 0.67 0.67 0.68 0.67 0.67 0.67 0.67 0.68 0.67 0.67 0.67 0.67 0.65 0.66 0.65 0.65 0.64 0.64 ±0.096 10 0.028 4.676 10 0.028 4.676 10 0.029 4.843 4.564 ±0.255 99 4.397 ± 0.255 95 4.342 ±0.167 94 4.119 ± 0.255 89 4.063 0.255 88 3.507 ± 0.167 76 10 0.026 4.342 10 0.027 4.509 10 0.026 4.342 10 0.028 4.676 10 0.025 4.175 10 0.026 4.342 10 0.027 4.509 10 0.025 4.175 10 0.023 3.841 10 0.026 4.342 10 0.025 4.175 10 0.026 4.342 10 0.023 3.841 10 0.024 4.008 10 0.020 3.340 10 0.022 3.674 10 0.021 3.507 Bảng 18.Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Count Mean phút 4.62033 phút 5.742 phút 7.06233 phút 8.136 12 phút 10.2647 15 phút 19.0857 18 phút 32.7497 Homogeneous Groups X X X X X X X Bảng 19 OD khảo sát khả kháng DPPHcủa dịch trích ly anthoc yanin từ gạo đen trước sau cô quay Bl ank Vi tami ne C Thời gi an Co (mg/ml) cô quay 0(p)phút 4.620±0.096 phút 4.564±0.255 phút 4.397±0.255 phút 4.342±0.167 12 phút 4.119±0.255 15 phút 3.618±0.420 18 phút 3.340±0.167 Lần 0.612 0.118 Lần 0.633 0.12 0.626 0.066 Tr ung bì nh 0.624 0.122 A1 A2 A3 %Q1 %Q2 %Q3 Qtb ( %)±SD 0.373 0.374 0.375 0.379 0.385 0.398 0.425 0.378 0.378 0.377 0.378 0.381 0.387 0.429 0.374 0.376 0.374 0.376 0.383 0.397 0.428 49.967 49.801 49.602 48.805 47.610 45.020 39.641 48.970 49.004 49.203 49.004 48.406 47.211 38.845 49.767 49.402 49.801 49.402 48.008 45.219 39.044 49.568±0.527 49.402±0.399 49.535±0.305 49.070±0.304 48.008±0.398 45.817±1.212 39.177±0.414 Bảng 20 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Count Mean 18 phút 39.1767 15 phút 45.8167 12 phút 48.008 phút 49.0703 phút 49.4023 phút 49.5353 Homogeneous Groups X X X X X X ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP phút 49.568 X 25 ... Chống oxy hóa Nhiều nghiên cứu chứng mi nh gạo đen giúp thể giải độc làm sạc h chất độc gan nhờ vào hoạt tính chất chống oxy hó a có gạo đen( Dr.AXE) Một nghiên c ứu gần đây, tì nh tr ạng c hống oxy. .. - Xác đị nh ho ạt tính kháng oxy hóa c ant hocyani n đặc - Xác đị nh thông số cho q trình quay thu nhận dịch c hiết anthocyanin cô Phương pháp nghi ên cứu Để thực mục đích nghiên cứu, nhó m nghiên. .. hứng đỏ bừng số người việc điều hòa chất Ho ạt tính chống oxy hóa tìm thấy ca phê trà ngày xác định nhiều gạo đen Một vài nghiên cứu chứng mi nh gạo đen chứa nhiều ant hocyani n, t hành phần l àm