Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý của lợn con theo mẹ mắc bệnh viêm ruột hoại tử do clostridium perfringens và đề xuất biện pháp phòng trị

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM  NGUYỄN VIỆT DŨNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ CỦA LỢN CON THEO MẸ MẮC BỆNH VIÊM RUỘT HOẠI TỬ DO CLOSTRIDIUM PERFRINGENS VÀ ĐỀ XUẤT BIỆN PHÁP ĐIỀU TRỊ CHUYÊN NGÀNH : THÚ Y MÃ SỐ : 60.64.01.01 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC : PGS.TS. NGUYỄN HỮU NAM HÀ NỘI – 2014 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu do tôi trực tiếp thực hiện cùng với sự cộng tác giúp đỡ của PGS.TS Nguyễn Hữu Nam - Trưởng bộ môn Bệnh lý - Học viện Nông nghiệp Việt Nam. Các số liệu, hình ảnh và kết quả trong luận văn là trung thực và chưa từng được công bố trong bất kỳ một công trình nào khác. Tôi xin đảm bảo rằng các thông tin, trích dẫn trong luận văn đã được chỉ rõ nguồn gốc. Tác giả luận văn Nguyễn Việt Dũng Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page ii LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn Học viên Nông nghiệp Việt Nam, Bộ môn bệnh lý thú y và Trường Đại học Nông Lâm Bắc Giang đã tạo điều kiện giúp đỡ cho tôi hoàn thành luận văn này. Xin bày tỏ lòng biết ơn PGS. TS. Nguyễn Hữu Nam, trưởng bộ môn Bệnh lý thú y, người đã tận tình hướng dẫn, chỉ bảo và giúp đỡ tôi hoàn thành luận văn của mình. Để góp phần thực hiện thành công luận văn này, tôi đã nhận được sự giúp đỡ động viên lớn của gia đình và đồng nghiệp. Nhân dịp này, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành đối với mọi sự giúp đỡ quí báu đó. Xin trân trọng cảm ơn ! Hà Nội, ngày tháng năm 2014 Nguyễn Việt Dũng Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt v Danh mục bảng vi Danh mục biểu đồ viii Danh mục hình ảnh ix MỞ ĐẦU 1 1 Tính cấp thiết của đề tài 1 2 Mục tiêu 2 3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn 2 CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 1.1 Tình hình nghiên cứu ở Việt Nam và trên thế giới 3 1.1.1 Tình hình nghiên cứu ở Việt Nam 3 1.1.2 Tình hình nghiên cứu trên thế giới 5 1.2 Một số hiểu biết về vi khuẩn C. perfingens 6 1.2.1 Tổng quan về giống, chi Clostridium 6 1.2.2 Đặc điểm hình thái và tính chất nuôi cấy 7 1.2.3 Độc tố của vi khuẩn 8 2.2.4 Các typ của vi khuẩn C. perfringens 10 1.3 Một số hiểu biết về bệnh do C. perfringens gây ra ở lợn con 11 1.3.1 Bệnh viêm ruột hoại tử ở lợn con do C. perfringens typ C gây ra 11 1.3.2 Bệnh viêm ruột hoại tử ở lợn con do C. perfringens typ A gây ra 15 1.3.3 Chẩn đoán bệnh do C. perfingens gây ra ở lợn 17 1.3.4 Điều trị bệnh 19 2.3.5 Phòng bệnh 19 CHƯƠNG 2. NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 Đối tượng nghiên cứu 22 2.2 Địa điểm và thời gian nghiên cứu 22 2.2.1 Địa điểm 22 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iv 2.2.2 Thời gian nghiên cứu 22 2.3 Nội dung nghiên cứu 22 2.4 Nguyên liệu 22 2.5 Phương pháp nghiên cứu 23 2.5.1 Cách tiếp cận nghiên cứu 23 2.5.2 Phương pháp quan sát, thống kê sinh học 23 2.5.3 Phương pháp lấy mẫu 23 2.5.4 Phương pháp mổ khám 24 2.5.5 Phương pháp phân lập vi khuẩn 24 2.5.6 Phương pháp xác định khả năng mẫn cảm với kháng sinh của chủng C. perfringens phân lập được 26 2.5.7 Phương pháp làm tiêu bản bệnh lý vi thể 26 2.5.8 Phương pháp xác định các chỉ tiêu huyết học 28 2.5.9 Phương pháp xử lý số liệu 28 CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 29 3.1 Kết quả xác định tỷ lệ mắc, tỷ lệ chết và tỷ lệ tử vong của lợn con mắc VRHT nghi do C. perfringens. 29 3.2 Kết quả phân lập vi khuẩn từ phủ tạng của lợn mắc VRHT 33 3.3 Kết quả triệu chứng lâm sàng của lợn mắc VRHT 36 3.4 Bệnh tích đại thể của lợn mắc VRHT 38 3.5 Bệnh tích vi thể của lợn mắc VRHT 41 3.6 Kết quả một số chỉ tiêu huyết học của lợn mắc VRHT 48 3.6.1 Kết quả xác định một số chỉ tiêu hệ hồng cầu của lợn bệnh 48 3.6.2 Kết quả xác định một số chỉ tiêu hệ bạch cầu của lợn bệnh 52 3.7 Kết quả xác định khả năng mẫn cảm với kháng sinh của chủng C. perfringens phân lập được 55 3.8 Đề xuất phác đồ điều trị 58 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 60 1 Kết luận 60 2 Đề nghị 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO 62 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT C. perfringens Clostridium perfringens CFU Colony Forming Unit Cs. Cộng sự E. coli Escherichia coli ELISA Enzyme Linked Immunosorbent Assay EU European Union PCR Polymerase Chain Rection PED Porcine Epidemic Diarrhea TGE Transmissible Gastro Enteritis VRHT Viêm ruột hoại tử Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vi DANH MỤC BẢNG STT Tên bảng Trang 1.1 Đặc tính sinh hóa của vi khuẩn C. perfingens 18 2.1 Tiêu chuẩn đánh giá mức độ mẫn cảm và kháng kháng sinh 26 3.1 Kết quả điều tra tỷ lệ mắc, tỷ lệ chết, tỷ lệ tử vong ở lợn mắc VRHT tại một số xã thuộc huyện Việt Yên 29 3.2 Kết quả xác định tỷ lệ mắc, tỷ lệ chết, tỷ lệ tử vong ở lợn do mắc bệnh VRHT theo giai đoạn phát triển 31 3.3 Kết quả kiểm tra dương tính với C. perfringens 34 3.4 Kết quả phân lập vi khuẩn C. perfringens trong bệnh phẩm của lợn bị tiêu chảy 34 3.5 Kết quả giám định đặc tính sinh học của các chủng C. perfringens phân lập được 36 3.6 Biểu hiện lâm sàng ở lợn từ 1 - 30 ngày tuổi mắc VRHT 37 3.7 Biến đổi bệnh tích đại thể của các lợn mổ khám 39 3.8 Biến đổi bệnh tích vi thể ở ruột lợn mắc VRHT 42 3.9 Bệnh tích vi thể ở một số cơ quan của lợn mắc VRHT 44 3.10 Kết quả khảo sát một số chỉ tiêu hệ hồng cầu của lợn mắc VRHT 49 3.11 So sánh số lượng hồng cầu của lợn bệnh và lợn đối chứng 49 3.12 So sánh giá trị trung bình hàm lượng Hemoglobin (g/l) của lợn bệnh và lợn đối chứng 50 3.13 So sánh giá trị trung bình tỷ khối huyết cầu của lợn bệnh và lợn đối chứng 50 3.14 So sánh giá trị trung bình thể tích bình quân hồng cầu của lợn bệnh và lợn đối chứng 51 3.15 So sánh giá trị trung bình lượng huyết sắc tố bình quân trong một hồng cầu ở lợn bệnh và lợn đối chứng 51 3.16 Kết quả khảo sát các chỉ tiêu hệ bạch cầu của lợn mắc VRHT 52 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vii 3.17 So sánh giá trị trung bình số lượng bạch cầu của lợn bệnh với lợn đối chứng 53 3.18 So sánh giá trị trung bình bạch cầu đa nhân trung tính của lợn bệnh với lợn đối chứng 53 3.19 So sánh giá trị trung bình bạch cầu ái toan của lợn bệnh với lợn đối chứng 54 3.20 So sánh giá trị trung bình bạch cầu ái kiềm của lợn bệnh với lợn đối chứng 54 3.21 So sánh giá trị trung bình bạch cầu đơn nhân lớn của lợn bệnh với lợn đối chứng 55 3.22 So sánh giá trị trung bình tế bào lympho của lợn bệnh với lợn đối chứng 55 3.23 Kết quả kiểm tra khả năng mẫn cảm với kháng sinh của chủng C. perfringens phân lập được 56 3.24 Đề xuất phác đồ điều trị bệnh VRHT ở lợn con theo mẹ 58 3.25 Kết quả điều trị thử nghiệm bệnh VRHT ở lợn con 59 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page viii DANH MỤC BIỂU ĐỒ STT Tên biểu đồ Trang 3.1 Biểu đồ so sánh tỷ lệ mắc, tỷ lệ chết, tỷ lệ tử vong ở lợn do mắc VRHT tại một số xã thuộc huyện Việt Yên 30 3.2 Biểu đồ so sánh tỷ lệ mắc VRHT ở lợn theo lứa tuổi 31 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page ix DANH MỤC HÌNH ẢNH STT Tên hình Trang 2.1 Sơ đồ quy trình phân lập và giám đinh vi khuẩn C. perfringens 25 3.1 Lợn ủ rũ, gầy yếu, phân dính quanh hậu môn 40 3.2 Lợn con ỉa ra máu tươi màu đỏ sẫm 40 3.3 Ruột căng phồng, xuất huyết 40 3.4 Hạch màng treo ruột sưng 40 3.5 Tế bào biểu mô ruột bị hoại tử bắt màu hồng đều (H.E 20X) 46 3.6 Tăng sinh các nang lympho thành ruột (H.E 10X) 46 3.7 Ruột sung huyết, hoại tử (H.E 20X) 46 3.8 Thâm nhiễm tế bào viêm ở hạ niêm mạc ruột (H.E 10X) 46 3.9 Lách sung huyết, hồng cầu dày đặc trong phần tủy đỏ (H.E 20X) 46 3.10 Xuất huyết ở đỉnh lông nhung (H.E 20X) 46 3.11 Gan sung huyết nghiêm trọng, hồng cầu tràn ngập vi quản xuyên tâm (H.E 10X) 47 3.12 Lách sung huyết, hồng cầu dày đặc trong phần tủy đỏ (H.E 10X) 47 3.13 Lông nhung ruột đứt nát 47 3.14 Sung huyết lớp hạ niêm mạc ruột (H.E 10X) 47 3.15 Tăng sinh tế bào viêm ở ruột (H.E 20X) 47 3.16 Tăng sinh tế bào kẽ ở phổi 47 [...]... perfringens gây ra Xuất phát từ thực tiễn nêu trên cũng như để hiểu biết rõ hơn về bệnh viêm ruột hoại tử do vi khuẩn C perfringens gây ra, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý của lợn con theo mẹ mắc bệnh viêm ruột hoại tử do Clostridium perfringens và đề xuất biện pháp điều trị 2 Mục tiêu - Làm rõ đặc điểm bệnh lý của lợn con theo mẹ bị VRHT do C perfringens - Đề xuất một số... nhầy, lợn con chết nhanh và chết nhiều Theo Phan Thanh Phượng và cs (1996), vi khuẩn C perfringens gây viêm ruột hoại tử xuất huyết trầm trọng, cấp tính ở lợn sơ sinh, tỷ lệ chết do bệnh này gây ra từ 50 – 100% Tuy nhiên, đặc điểm bệnh lý trên lợn bệnh do C perfringens gây ra chưa có những nghiên cứu đầy đủ, do đó người chăn nuôi chưa hiểu rõ về mức độ nghiêm trọng của bệnh viêm ruột hoại tử do C perfringens. .. typ gây ra bệnh viêm ruột hoại tử ở lợn con là do C perfringens typ A và typ C 1.3.1 Bệnh viêm ruột hoại tử ở lợn con do C perfringens typ C gây ra Bệnh VRHT ác tính ở lợn gây ra bởi C perfringens typ C thường gặp nhất ở giai đoạn lợn con theo mẹ 1 - 14 ngày tuổi và đặc biệt xảy ra trầm trọng lúc sơ sinh, dưới 1 tuần tuổi Bệnh có biểu hiện lâm sàng tiêu chảy xuất huyết nặng và có tỷ lệ tử vong cao... Nam - Địa điểm theo dõi lợn bệnh và lấy mẫu: Việt Yên - Bắc Giang 2.2.2 Thời gian nghiên cứu - Từ tháng 8/2013 đến tháng 10/2014 2.3 Nội dung nghiên cứu - Xác định tỷ lệ mắc, tỷ lệ chết của lợn con mắc VRHT nghi do C perfringens - Phân lập vi khuẩn C perfringens - Xác định triệu chứng lâm sàng của lợn mắc VRHT - Xác định bệnh tích đại thể của lợn mắc VRHT - Nghiên cứu bệnh tích vi thể của ruột, gan,... PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu - Lợn con dưới 30 ngày tuổi (lợn trắng chủ yếu là landrace và yorkshire) khỏe mạnh và mắc bệnh VRHT do vi khuẩn C perfringens gây ra - Bệnh phẩm của lợn bệnh và chết được mổ khám 2.2 Địa điểm và thời gian nghiên cứu 2.2.1 Địa điểm - Phòng thí nghiệm bộ môn Bệnh lý - Khoa thú y của Học viện Nông nghiệp Việt Nam - Phòng thí nghiệm trọng điểm công nghệ sinh... ở những đám hoại tử thấy có nhiều trực khuẩn C perfringens và tổ chức viêm tiến triển 1.3.2 Bệnh viêm ruột hoại tử ở lợn con do C perfringens typ A gây ra Vi khuẩn C perfringens typ A là vi khuẩn thường xuyên có sẵn trong đường ruột của lợn, có thể là nguyên nhân gây bệnh viêm ruột ở lợn con theo mẹ và lợn sau cai sữa Mầm bệnh có mặt ở trong đất, phân, chất chứa đường tiêu hóa nên bệnh có thể xảy ra... trong những bệnh tiêu chảy ở lợn con gây thiệt hại lớn về kinh tế cho người chăn nuôi là bệnh viêm ruột hoại tử (VRHT) ở lợn con theo mẹ Nguyên nhân gây tiêu chảy ra máu ở lợn chủ yếu là do vi khuẩn Clostridium perfringens (C perfringens) typ C gây ra Đây là một trong những bệnh truyền nhiễm nguy hiểm với lợn con Bệnh gây viêm ruột hoại tử, rối loạn đường tiêu hóa, khi mắc bệnh thường tiêu chảy ra máu,... cấp, dùng để phòng bệnh viêm dạ dày ruột (TGE); tiêu chảy do Rotavirus; phòng, chống bệnh E coli (K88,K99, F41, 987P) và do C perfingens typ C gây ra ở lợn + Colisuin – CL: là vaccine vô hoạt bổ trợ dầu, do hãng HIPRA (Tây Ban Nha) cung cấp, dùng để phòng bệnh E coli (K88, K99, 987P), bệnh viêm ruột hoại tử ở lợn con do C perfingens typ C gây ra và bệnh chết đột ở lợn nái, lợn vỗ béo do C novyi typ... novyi typ B + SCOURMUNE® - C: do hãng Schering – Plough Animal Health Corp (Mỹ) cung cấp, phòng bệnh do E coli (K88, K99, 987P) và bệnh do C perfingens typ C gây ra + ZAMBAC MD 100: do công ty CTCBIO sản xuất, dùng để kiểm soát và phòng ngừa bệnh viêm ruột hoại tử do C perfingens trên gia súc, cải thiện năng suất nái và heo con Để phòng bệnh do C perfingens cho lợn con, theo Bergeland (1992), có thể... = Tổng số con mắc bệnh Tổng số con theo dõi x 100 Tỷ lệ chết (%) = Tổng số con chết vì bệnh Tổng số con theo dõi x 100 Tỷ lệ tử vong (%) = Tổng số con chết vì bệnh Tổng số con mắc bệnh x 100 2.5.3 Phương pháp lấy mẫu - Mẫu phân: dùng tăm bông vô trùng, ngoáy sâu vào trực tràng của lợn bị tiêu chảy ra máu nghi do C perfringens gây ra Ghi ký hiệu mẫu, ngày và địa điểm lấy mẫu Mẫu phân của lợn bị tiêu . bệnh lý của lợn con theo mẹ mắc bệnh viêm ruột hoại tử do Clostridium perfringens và đề xuất biện pháp điều trị . 2. Mục tiêu - Làm rõ đặc điểm bệnh lý của lợn con theo mẹ bị VRHT do C. perfringens. GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM  NGUYỄN VIỆT DŨNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ CỦA LỢN CON THEO MẸ MẮC BỆNH VIÊM RUỘT HOẠI TỬ DO CLOSTRIDIUM. của vi khuẩn C. perfringens 10 1.3 Một số hiểu biết về bệnh do C. perfringens gây ra ở lợn con 11 1.3.1 Bệnh viêm ruột hoại tử ở lợn con do C. perfringens typ C gây ra 11 1.3.2 Bệnh viêm ruột