Nghiên cứu một số đặc tính sinh học của vi khuẩn salmonella và tác dụng của chế phẩm biovet đến khả năng sinh trưởng, phòng bệnh thương hàn ở gà nuôi tại huyện yên lạc tỉnh vĩnh phúc

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ ỜI CAM ĐOAN ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM ĐÀO THỊ XUÂN NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI KHUẨN SALMONELLA VÀ TÁC DỤNG CỦA CHẾ PHẨM BIOVET ĐẾN KHẢ NĂNG SINH TRƢỞNG, PHÒNG BỆNH THƢƠNG HÀN Ở GÀ NUÔI TẠI HUYỆN YÊN LẠC TỈNH VĨNH PHÚC Chuyên ngành: Thú y Mã số: 62 64 01 01 LUẬN VĂN THẠC SỸ THÚ Y Người hướng dẫn khoa học: GS.TS. Nguyễn Quang Tuyên Thái Nguyên, 2014 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Với sự cố gắng của bản thân và sự giúp đỡ của cán bộ Viện Khoa học sự sống Đại học Thái Nguyên, các cơ sở chăn nuôi và bạn bè đồng nghiệp về các số liệu và kết quả nghiên cứu. Các số liệu và kết quả trong luận văn này là trung thực, mọi trích dẫn chính xác và đã được chỉ rõ nguồn gốc. Các số liệu và kết quả này chưa từng được ai công bố trong bất kỳ công trình nào khác và chưa từng sử dụng để bảo vệ một học vị nào. Thái Nguyên, ngày 1 tháng 10 năm 2014 Tác giả Đào Thị Xuân ii LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới GS.TS. Nguyễn Quang Tuyên - Phó Viện trưởng Viện Khoa học sự sống Đại học Thái Nguyên. Thầy đã tận tâm hướng dẫn tôi trong suốt quá trình thực hiện nghiên cứu và hoàn thành luận văn này. Đồng thời tôi cũng xin được bày tỏ lòng biết ơn tới các thầy cô, cán bộ kĩ thuật tại bộ môn Công nghệ vi sinh, Công nghệ sinh học, Viện Khoa học sự sống đã giúp đỡ và tạo điều kiện cho tôi thực hiện các thí nghiệm của đề tài. Tôi xin chân thành cảm ơn các anh chị đồng nghiệp đang công tác tại Trường Cao đẳng Kinh tế - kỹ thuật Vĩnh Phúc luôn động viên và giúp đỡ tôi trong thời gian tôi thực hiện đề tài. Cuối cùng tôi xin gửi lời cảm ơn tới gia đình và các bạn đồng nghiệp đã động viên, giúp đỡ tôi hoàn thành luận văn này. Thái Nguyên, ngày 1 tháng 10 năm 2014 Tác giả Đào Thị Xuân iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC HÌNH viii ĐẶT VẤN ĐỀ Error! Bookmark not defined. 1.1. Tính cấp thiết của đề tài 1 1.2. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài 2 1.3. Mục tiêu của đề tài 2 Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 1.1. Bệnh thương hàn ở gà 3 1.1.1. Căn bệnh 3 1.1.2. Triệu chứng 5 1.1.3. Bệnh tích 5 1.2. Đặc điểm của vi khuẩn salmonella 6 1.2.1. Đặc điểm hình thái 6 1.2.2. Đặc điểm nuôi cấy 7 1.2.3. Đặc tính sinh hóa 8 1.2.4. Sức đề kháng 9 1.2.5. Cấu trúc kháng nguyên của Salmonella 10 1.2.6. Các yếu tố gây bệnh của Salmonella 13 1.3. Tình hình nghiên cứu salmonella ở gà 17 1.3.1. Tình hình nghiên cứu Salmonella trên thế giới 18 1.3.2. Tình hình nghiên cứu Salmonella trong nước 22 1.4. Đặc điểm của probiotic và chế phẩm biovet 25 1.4.1. Chế phẩm probiotic 25 1.4.2. Chế phẩm Biovet 26 Chƣơng 2: NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 31 2.1. Nội dung nghiên cứu 31 iv 2.1.1. Điều tra tình hình dịch tễ gà mắc bệnh thương hàn 31 2.1.2. Phân lập và xác định một số đặc điểm sinh học của vi khuẩn Salmonella spp từ gà mắc bệnh thương hàn 31 2.1.3. Xác định độc lực các chủng Salmonella phân lập được 31 2.1.4. Đánh giá tác dụng của chế phẩm Biovet 31 2.1.5. Thử nghiệm một số phác đồ điều trị 31 2.2. Nguyên vật liệu dùng trong nghiên cứu 31 2.2.1. Đối tượng nghiên cứu 31 2.2.2. Nguyên liệu, dụng cụ và trang thiết bị 31 2.2.3. Địa điểm nghiên cứu 32 2.3. Phương pháp nghiên cứu 32 2.3.1. Phương pháp điều tra 32 2.3.2. Phương pháp lấy mẫu 32 2.3.3. Phương pháp nuôi cấy, phân lập vi khuẩn Salmonella spp 33 2.3.4. Phương pháp giám định các đặc tính sinh hóa 34 2.3.5. Phương pháp nhuộm Gram 35 2.3.6. Phương pháp xác định serotype của các chủng Salmonella phân lập được 36 2.3.7. Phương pháp xác định các yếu tố gây bệnh của vi khuẩn phân lập được 37 2.3.8. Phương pháp xác định tính mẫn cảm với một số kháng sinh của vi khuẩn Salmonella gallinarum pullorum 39 2.3.9. Phương pháp nghiên cứu đánh giá tác dụng của chế phẩm Biovet 41 2.3.10. Xây dựng phác đồ điều trị bệnh thương hàn ở gà 43 2.4. Phương pháp xử lý số liệu 43 Chƣơng 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 44 3.1. Kết quả điều tra tình hình dịch tễ gà mắc bệnh thương hàn nuôi trên một số xã của huyện Yên Lạc 44 3.1.1. Kết quả điều tra tỷ lệ gà mắc bệnh thương hàn ở một số xã 44 3.1.2. Kết quả điều tra tỷ lệ gà mắc bệnh thương hàn theo lứa tuổi 46 Bảng 3.2. Tỷ lệ gà mắc bệnh thương hàn theo lứa tuổi 47 3.1.3. Kết quả điều tra tỷ lệ gà mắc bệnh thương hàn theo mùa vụ 48 3.1.4. Kết quả tỷ lệ gà mắc bệnh thương hàn theo phương thức chăn nuôi 49 3.2. Kết quả phân lập vi khuẩn salmonella 50 v 3.2.1. Kết quả phân lập vi khuẩn Salmonella từ các mẫu bệnh phẩm 50 3.2.2. Kết quả xác định tỷ lệ phân lập vi khuẩn Salmonella spp. ở một số cơ quan phủ tạng của gà bệnh 53 3.3. Kết quả giám định một số đặc tính nuôi cấy và sinh hóa của các chủng salmonella phân lập 54 3.4. Kết quả xác định serotype của các chủng salmonella phân lập được 57 3.5. Kết quả xác định độc lực của vi khuẩn salmonella gallinarum - pullorum 59 3.5.1. Kết quả xác định một số yếu tố gây bệnh của vi khuẩn Salmonella gallinarum pullorum 60 3.5.2. Kết quả xác định độc lực của vi khuẩn Salmonella gallinarum-pullorum phân lập được 62 3.6. Đánh giá tác dụng của chế phẩm biovet đến khả năng sinh trưởng và phòng bệnh thương hàn ở gà 64 3.6.1. Kết quả nghiên cứu về khả năng sinh trưởng của gà thí nghiệm 64 3.6.2. Tác dụng của chế phẩm Biovet đến tỷ lệ nuôi sống và phòng bệnh thương hàn ở gà 69 3.6.3. Ảnh hưởng của chế phẩm Biovet đến số lượng vi khuẩn Salmonella 71 3.7. Thử nghiệm một số phác đồ điều trị 71 3.7.1. Kết quả xác định khả năng mẫn cảm với kháng sinh của các chủng Salmonella phân lập được 72 3.7.2. Kết quả thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh thương hàn ở gà 75 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 77 TÀI LIỆU THAM KHẢO 79 vi DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT BGA : Brilliant Green Agar BPW : Buffered Pepton Water CNTY : Chăn nuôi thú y Cs : Cộng sự DPF : Delayer Permebility Factor DT104 : Definitive phage Type 104 ĐC : Đối chứng FAO : Food and Agricultural Organization InvA : Invasion A KHKT : Khoa học kỹ thuật KHKTNN : Khoa học kỹ thuật Nông nghiệp LPS : Lypopolysacharide Nxb : Nhà xuất bản PCR : Polymerase Chain Reaction RPF : Rapid Permebility Factor TN : Thí nghiệm WHO : World Health Organization S : Salmonella Stn : Salmonella toxin TT : Thể trọng TCVN : Tiêu chuẩn Việt Nam XLD : Xylose Lysine Deoxychlate vii DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU Bảng 2.1. Bảng cấu trúc kháng nguyên của một số loài Salmonella 37 Bảng 2.2. Trình tự các cặp mồi và kích cỡ sản phẩm để xác định một số yếu tố gây bệnh của Salmonella phân lập được. 38 Bảng 2.3. Tiêu chuẩn đánh giá mức độ mẫn cảm và kháng kháng sinh theo CCLS (1999) 40 Bảng 3.1. Tỷ lệ gà mắc bệnh thương hàn ở một số xã 44 Bảng 3.2. Tỷ lệ gà mắc bệnh thương hàn theo lứa tuổi 47 Bảng 3.3. Tỷ lệ gà mắc bệnh thương hàn theo mùa vụ 48 Bảng 3.4: Tỷ lệ gà mắc bệnh thương hàn theo phương thức chăn nuôi 50 Bảng 3.5: Kết quả phân lập vi khuẩn Salmonella spp. từ các mẫu phân và phủ tạng 51 Bảng 3.6: Kết quả xác định tỷ lệ nhiễm vi khuẩn Salmonella spp. ở bệnh phẩm 53 Bảng 3.7: Kết quả kiểm tra một số đặc tính nuôi cấy của các chủng vi khuẩn Salmonella phân lập được 55 Bảng 3.8. Kết quả xác định một số đặc tính sinh hoá của vi khuẩn Salmonella phân lập được 56 Bảng 3.9: Kết quả xác định serotype của các chủng vi khuẩn Salmonella phân lập được 58 Hình 3.4. Kết quả xác định serotype của các chủng vi khuẩn Salmonella phân lập được 59 Bảng 3.10. Kết quả xác định yếu tố gây bệnh của Salmonella gallinarum- pullorum bằng phản ứng PCR 61 Bả Salmonella gallinarum-pullorum ạch 63 Bảng 3.12. Sinh trưởng tích lũy của gà thí nghiệm 65 Bảng 3.14. Tác dụng của chế phẩm Biovet đến tỷ lệ nuôi sống và phòng bệnh thương hàn 70 Bảng 3.15. Số lượng vi khuẩn Salmonella có trong đường ruột của gà thí nghiệm 71 Bảng 3.16. Kết quả xác định khả năng mẫn cảm với kháng sinh của các chủng vi khuẩn Salmonella gallinarum pullorum 72 Bảng 3.17: Kết quả thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh thương hàn ở gà đạt kết quả cao 75 viii DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 3.1. Tỷ lệ mắc bệnh thương hàn gà ở 3 xã của huyện Yên Lạc 46 Hình 3.2. Kết quả phân lập vi khuẩn Salmonella spp từ các mẫu phân và phủ tạng 52 Hình 3.3: Kết quả xác định tỷ lệ nhiễm vi khuẩn Salmonella ở bệnh phẩm 54 Hình 3.4. Kết quả xác định serotype của các chủng vi khuẩn Salmonella phân lập được 59 Hình 3.5: Khối lượng bình quân của gà thí nghiệm qua các tuần tuổi 67 Hình 3.6: Sinh trưởng tuyệt đối của gà thí nghiệm 69 Hình 3.7. Khả năng mẫn cảm với kháng sinh của chủng vi khuẩn Salmonella phân lập được 74 Hình 3.8. Hiệu quả một số phác đồ điều trị bệnh thương hàn ở gà 76 1 MỞ ĐẦU 1.1. Tính cấp thiết của đề tài Hiện nay, chăn nuôi đang là ngành giữ vai trò quan trọng trong nền nông nghiệp ở nước ta. Song song với việc chăn nuôi gia súc để lấy thịt, sữa, da, lông,… thì chăn nuôi gia cầm cũng đóng góp một phần không nhỏ trong việc cung cấp những thực phẩm giàu dinh dưỡng, làm phong phú thêm thực đơn trong mỗi bữa ăn. Ngoài ra, phát triển chăn nuôi gia cầm còn mang lại hiệu quả kinh tế khá cao cho các chủ hộ trang trại, gia trại, đồng thời giải quyết việc làm cho nhiều lao động nông thôn và còn là nguồn nguyên liệu cho các ngành công nghiệp chế biến, chăn nuôi gà còn tạo nguồn phân bón hữu cơ, góp phần nâng cao năng suất cây trồng. Khi chăn nuôi gà phát triển thì tình hình dịch bệnh cũng diễn biến phức tạp hơn trong đó có bệnh do vi khuẩn Salmonella. Vi khuẩn Salmonella gallinarum- pullorum gây cho gà ở mọi lứa tuổi. Bệnh có thể lây từ gà ốm sang gà khỏe, qua máy ấp, thức ăn, nước uống và các vật dụng chăn nuôi, nguy hiểm hơn là bệnh truyền qua trứng. Salmonellosis cần được đặc biệt trú trọng đối với cơ sở sản xuất con giống. Bởi lẽ bệnh này không chỉ ảnh hưởng tới các chỉ tiêu kinh tế kỹ thuật của đàn gà mà còn reo rắt mầm bệnh cho thế hệ sau. Mặt khác Salmonellosis còn là nguyên nhân gây chi phí lớn về thuốc thú y, ảnh hưởng tới sức khỏe người tiêu dùng và không ngừng tác động xấu tới vệ sinh môi trường. Theo Trần Thị Hạnh và cs (1997)[8] thì việc điều trị bệnh bằng các loại thuốc kháng sinh không chỉ hạn chế sự phát triển của vi khuẩn mà còn gây ra sự tồn dư các loại thuốc kháng sinh trong các sản phẩm gia cầm làm ảnh hưởng tới sức khỏe của cộng đồng và gây ra tình trạng kháng thuốc của vi khuẩn. Hiện nay, ngoài việc phòng bệnh bằng vệ sinh, bằng vaccine thì việc sử dụng các chế phẩm vi sinh vật cũng đã và đang được ứng dụng rộng rãi trong chăn nuôi. Sử dụng chế phẩm vi sinh vật trong chăn nuôi nói chung và chăn nuôi gà nói riêng có ý nghĩa rất lớn vì ngoài cung cấp các axit amin còn làm cân bằng hệ vi sinh vật đường ruột, từ đó giảm được các bệnh đường tiêu hóa, nhất là bệnh do Salmonella gây ra. Chế phẩm hiện nay có tác dụng như vậy là chế phẩm Biovet. Chế phẩm này góp phần cân bằng hệ vi sinh vật đường ruột như Salmonella và E.coli, nâng cao khả năng tiêu hóa và giá trị của thức ăn thông qua quá trình lên men vi sinh vật. Từ [...]... của vi khuẩn Salmonella và tác dụng của chế phẩm Biovet đến khả năng sinh trưởng, phòng bệnh thương hàn ở gà nuôi tại huyện Yên Lạc - tỉnh Vĩnh Phúc 1.2 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài Kết quả nghiên cứu của đề có ý nghĩa khoa học và thực tiễn sau đây: - Bổ sung thêm những hiểu biết khoa học cơ bản về đặc điểm dịch tễ học của bệnh thương hàn ở gà - Kết quả nghiên cứu của đề tài bổ sung thêm... nghiên cứu về Salmonella trên gà nói riêng và Salmonella trên gia cầm nói chung - Kết quả là cơ sở khoa học cho vi c xây dựng các biện pháp phòng và điều trị bệnh thương hàn ở gà - Là cơ sở khoa học để sản xuất và ứng dụng chế phẩm Biovet trong thực tiễn sản xuất của ngành chăn nuôi 1.3 Mục tiêu của đề tài - Phân lập và xác định một số đặc điểm sinh học của vi khuẩn Salmonella gây bệnh thương hàn ở. .. ở gà - Đánh giá tác dụng của chế phẩm Biovet trong phòng bệnh do Salmonella - Xây dựng phác đồ điều trị bệnh thương hàn cho gà đạt hiệu quả cao 3 Chƣơng 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Bệnh thƣơng hàn ở gà Thương hàn là bệnh truyền nhiễm ở gà do vi khuẩn Salmonella gallinarum pullorum gây ra Bệnh ở thể cấp tính ở gà con và mãn tính ở gà lớn Đặc điểm của bệnh là gây vi m, hoại tử niêm mạc đường tiêu hóa và. ..2 đó tác dụng lên quá trình sinh trưởng, phát triển của gia cầm và hạn chế dịch bệnh, nâng cao hiệu quả kinh tế trong chăn nuôi Đặc biệt, khi Vi t Nam gia nhập Tổ chức thương mại thế giới (WTO) thì vấn đề an toàn vệ sinh thực phẩm, trong đó có thịt gà sạch bệnh, sạch vi khuẩn Salmonella là một yêu cầu cấp thiết Vì vậy, vi c nghiên cứu vi khuẩn Salmonella, tỷ lệ nhiễm và một số đặc tính sinh vật học. .. giống vi khuẩn có khả năng kháng thuốc, giúp vi khuẩn tồn tại rất lâu trong cơ thể người, vật nuôi và môi trường Vi khuẩn đã có sẵn các yếu tố gây bệnh lại cộng thêm khả năng kháng kháng sinh sẽ tăng tính chất gây bệnh của vi khuẩn lên gấp bội Salmonella là một ví dụ trong các giống vi khuẩn đó Ở những vi khuẩn có sẵn những yếu tố gây bệnh lại có thêm khả năng kháng kháng sinh sẽ tăng tính chất gây bệnh. .. là 2 loại vi khuẩn gây ra 2 bệnh khác nhau trên gà Salmonella pullorum: gây bệnh bạch lỵ gà con và Salmonella gallinarum gây bệnh thương hàn gà lớn Hiện nay người ta thấy khi phân lập căn bệnh từ gà con hoặc gà lớn ốm đều thấy cả 2 loại vi khuẩn, kiểm tra đặc tính sinh học chúng chỉ khác nhau ở một vài đặc tính về chuyển hóa đường Vì thế bệnh được gọi chung là Salmonellosis do trực khuẩn Salmonella. .. nuôi ở Jordani Tác giả tiến hành phân lập 20 vi khuẩn từ 604 gà chết và 150 gà sống nghi mắc Salmonellosi Kết quả cho thấy 164 mẫu bệnh phẩm từ gà chết và 31 mẫu bệnh phẩm từ gà sống đã phân lập được Salmonella Trong đó có 94/604 và 22/150 là Salmonella gallinarum pullorum; 48/64 và 4/150 trường hợp là Salmonella enteritidis; 11 trường hợp Salmonella typhimurium… Tỷ lệ nhiễm Salmonella cao nhất ở gà. .. sưng khớp của gà con Doyle và Mathews đã nghiên cứu những bệnh tích ở gan, phổi, tim, manh tràng và thận của gà mắc bệnh Các nghiên cứu cho biết gan gà con mắc bệnh bị thoái hóa Sunganuma đã nghiên cứu bệnh tích của 459 trường hợp Salmonellosis trên nhiều loại gà (gà dò, gà mái, gà trống) thấy tế bào tăng sinh, phổi và ruột vi m cata Shawabkeh.K, (1996)[62] đã công bố tình hình nhiễm Salmonella của các... gallinarum gây bệnh thương hàn ở gà lớn Đến khi Jones cùng Taylor xác định được chính S pullorum cũng gây bệnh ở gà trưởng thành và S gallinarum cũng gây bệnh ở gà con với cùng bệnh tích giống nhau, thì quan niệm cho rằng bệnh thương hàn gà chỉ gây ra ở gia cầm trưởng thành mới được xóa bỏ 1.3.1 Tình hình nghiên cứu Salmonella trên thế giới Tên của loài vi khuẩn quen thuộc ngày nay là S cholerae suis,... gây bệnh của chúng là vi c làm cần thiết, để từ đó có cơ sở xây dựng biện pháp phòng, chống bệnh đạt hiệu quả cao, góp phần thúc đẩy chăn nuôi gia cầm nói chung, chăn nuôi gà nói riêng phát triển bền vững, tạo ra sản phẩm an toàn vệ sinh thực phẩm, có sức cạnh tranh cao trên thị trường Xuất phát từ những vấn đề trên, tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: Nghiên cứu một số đặc tính sinh học của vi khuẩn Salmonella . tiến hành nghiên cứu đề tài: Nghiên cứu một số đặc tính sinh học của vi khuẩn Salmonella và tác dụng của chế phẩm Biovet đến khả năng sinh trưởng, phòng bệnh thương hàn ở gà nuôi tại huyện Yên. NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI KHUẨN SALMONELLA VÀ TÁC DỤNG CỦA CHẾ PHẨM BIOVET ĐẾN KHẢ NĂNG SINH TRƢỞNG, PHÒNG BỆNH THƢƠNG HÀN Ở GÀ NUÔI TẠI HUYỆN YÊN LẠC TỈNH VĨNH PHÚC. năng sinh trưởng của gà thí nghiệm 64 3.6.2. Tác dụng của chế phẩm Biovet đến tỷ lệ nuôi sống và phòng bệnh thương hàn ở gà 69 3.6.3. Ảnh hưởng của chế phẩm Biovet đến số lượng vi khuẩn Salmonella