khảo sát các kiểu tái sắp xếp gen ig-tcr trên bệnh nhân bạch cầu cấp dòng lympho b bằng kỹ thuật pcr tại bệnh viện truyền máu huyết học

Kết quả xác định được tần suất biểu hiện đặc trưng cho BN BCCDL-B của 19 kiểu TSX gen Ig/TCR.. Sự tương đồng giữa kết quả đánh tồn lưu tế bào ác tính TLTBAT bằng PCR bán định lượng và đị

ỦY BAN NHÂN DÂN TP.HCM

SỞ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ THÀNH ĐOÀN TP HỒ CHÍ MINH

CHƯƠNG TRÌNH VƯỜN ƯƠM SÁNG TẠO KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ TRẺ

 * 

BÁO CÁO NGHIỆM THU

KHẢO SÁT CÁC KIỂU TÁI SẮP XẾP GEN IG/TCR TRÊN BỆNH NHÂN BẠCH CẦU CẤP DÒNG LYMPHO B BẰNG KỸ THUẬT PCR TẠI BỆNH VIỆN TRUYỀN MÁU

I

TÓM TẮT NỘI DUNG NGHIÊN CỨU

Bạch cầu cấp dòng lympho (BCCDL) là một bệnh lý ác tính về máu thường gặp ở trẻ em Kỹ thuật PCR dựa vào vùng nối của sự tái sắp xếp (TSX) gen Ig/TCR là một trong 3 kỹ thuật được khuyến cáo sử dụng để theo dõi bệnh BCCDL Vì vậy, chúng tôi đã tiến hành khảo sát 19 kiểu TSX gen Ig/TCR trên 90 mẫu BN BCCDL-B tại Bệnh viện Truyền máu Huyết học TP HCM

Kết quả xác định được tần suất biểu hiện đặc trưng cho BN BCCDL-B của 19 kiểu

TSX gen Ig/TCR Với 19 kiểu TSX gen Ig/TCR, chúng tôi có thể theo dỗi điều trị được 86,67% BN BCCDL-B nếu sử dụng một kiểu TSX gen Ig/TCR, còn sử dụng 2 kiểu TSX gen

thì theo dõi điều trị được 51,11% BN BCCDL-B

Từ kết quả trên chúng tôi đã xác định được một số kiểu TSX gen Ig/TCR có giá trị

trong theo dõi điều trị BCCDL-B như: Vd2-Dd3 là kiểu TSX có mức độ biểu đặc trưng cho BCCDL-B chiếm tỷ lệ cao nhất (46,67%), kế tiếp là VkI-Kde (21,11%), VkII-Kde (15,56%), VgIV-Jg1.1/2.1 (13,33%), In-Kde (12,22%), VgI-Jg1.1/2.1 (11,11%), VgI-Jg1.3/2.3 (10,00%), VkIII-Kde và VgII-Jg1.3/2.3 đều chiếm 8,89%

Sự tương đồng giữa kết quả đánh tồn lưu tế bào ác tính (TLTBAT) bằng PCR bán định lượng và định lượng bằng RQ-PCR sử dụng SYBR Green khảo sát các kiểu TSX

gen Ig/TCR với kết quả RT-PCR các tổ hợp gen (E2A/PBX1, MLL/AF4, BCR/ABL và

TEL/AML1) và kỹ thuật dấu ấn miễn dịch đã khẳng định giá trị theo dõi điều trị bệnh của

các kiểu TSX gen Ig/TCR trên BN BCCDL-B Từ đó, bước đầu đánh giá TLTBAT bằng

kỹ thuật PCR bán định lượng và định lượng bằng RQ-PCR sử dụng SYBR Green khảo

sát các kiểu TSX gen Ig/TCR

Kỹ thuật PCR dựa trên các kiểu TSX gen Ig/TCR đơn giản, độ nhạy cao và chuyên biệt bệnh nhân Vì vậy, có thể sử dụng kỹ thuật PCR khảo sát các kiểu tái sắp xếp

gen Ig/TCR giúp chọn lọc được những kiểu tái sắp xếp gen Ig/TCR đặc trưng cho

BCCDL-Bvà RQ-PCR sử dụng SYBR Green để đánh giá TLTBAT, góp phần theo dõi điều trị bệnh BCCDL-B tại Việt Nam được tốt hơn

II

ABSTRACT

Purpose: To detect common Ig/TCR gene rearrangements which are used to

monitor minimal residual disease (MRD) in childhood B-cell acute lymphoblastic leukemia (B-ALL) Vietnamese patients The junctional regions of Ig/TCR gene rearrangements contain unique sequences owing to the deletion and random insertion of nucleotides during the rearrangement process Since an ALL is derived from a single transformed lymphoid precursor cell, all ALL cells of a patient in principle have the same Ig/TCR gene rearrangements with identical junctional region sequences that can be regarded as leukemia-specific fingerprints

Methods: In this study, 19 common Ig/TCR gene rearrangements were analyzed in

90 bone marrow samples from childhood B-ALL patients and 10 healthy control samples

at Blood Transfusion and Hematology hospital of Ho Chi Minh City Initially,

expressions of Ig/TCRs rearrangements are evaluated by semiquantitative PCR

Result: Seventy eight of 90 patients (86.67%) strongly expressed one or more

Ig/TCR rearrangements The strong expression of Ig/TCR rearrangements were Vd2-Dd3

(46,67%), VkI-Kde (21,11%), VkII-Kde (15,56%), VgIV-Jg1.1/2.1 (13,33%), In-Kde (12,22%), VgI-Jg1.1/2.1 (11,11%), VgI-Jg1.3/2.3 (10,00%), VkIII-Kde and VgII-Jg1.3/2.3 (8,89%) Detection of MRD in B-ALL by semi-quantitative PCR and RQ-PCR

using SYBR Green of Ig/TCR rearrangements are concordance with result of

RT-PCR-based detection of fusion gene transcripts and flow-cytometric immunophenotyping

Conclusion: The results of this study help to select frequent strong expression of

Ig/TCR rearrangements in Vietnamese patients Moreover, our results indicated that and

RQ-PCR using SYBR Green of Ig/TCR rearrangements is simple and suitable method for

MRD monitoring in childhood B-ALL Then, these results are the profile to develop time PCR technique for monitoring MRD in B-ALL

real-III

DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT

VIẾT TẮT THUẬT NGỮ TIẾNG VIẾT

IV

DANH MỤC CÁC BẢNG

Bảng 1.1 Phân loại BCCLD theo miễn dịch tế bào dựa vào các CD 2 Bảng 1.2 Đánh giá tiên lượng BCCDL theo di truyền học phân tử 3 Bảng 1.3

Bảng 2.1

Cấu trúc của các gen Ig/TCR Các mồi sử dụng trong phản ứng PCR khảo sát các kiểu TSX gen Ig/TCR

7

19 Bảng 2.2 Các cặp mồi sử dụng trong phản ứng PCR để khảo sát 19 kiểu TSX

Bảng 2.3 Đánh giá mức độ biểu hiện của các kiểu TSX gen Ig/TCR theo

BN BCCDL-B biểu hiện mạnh các kiểu TSX gen Ig/TCR

Tỷ lệ mức độ biểu hiện của các kiểu TSX gen Ig/TCR trên BN BCCDL-B

Ig/TCR ở mức 3 điểm giữa NBT và BN

Tỷ lệ các kiểu TSX gen Ig/TCR đặc trưng cho BN BCCDL-B

So sánh tỷ lệ của các kiểu TSX gen Ig/TCR đặc trưng cho quần thể TBAT với nghiên cứu khác

Mức độ biểu hiện của các kiểu TSX gen Ig/TCR đặc trưng cho BN mã B-ALL-036 trước và sau điều trị

Sự thay đổi mức độ biểu hiện của các kiểu TSX gen Ig/TCR đặc trưng cho BN BCCDL-B âm tính với các tổ hợp gen trước và sau điều trị bằng PCR bán định lượng

Sự thay đổi mức độ biểu hiện của các kiểu TSX gen Ig/TCR đặc trưng cho BN BCCDL-B dương tính với tổ hợp gen trước và sau điều trị bằng PCR bán định lượng

đặc trưng cho BN BCCDL-B trước và sau điều trị Kết quả theo dõi điều trị bằng RQ-PCR Ig/TCR và PCR các tổ hợp gen thường gặp ở BCCDL trên nhóm BN dương tính với các tổ hợp gen Kết quả theo dõi điều trị bằng RQ-PCR Ig/TCR và Dấu ấn miễn dịch trên BN âm tính với các tổ hợp gen thường gặp

23

25

26

27

V

DANH MỤC CÁC HÌNH, ĐỒ THỊ

Hình 1.1 Tỷ lệ các bất thường NST thường gặp trên BCCDL trẻ em 4

trên gen Igλ, Igκ và IgH Quá trình TSX của các gen Ig/TCR

10

11

12

13 Hình 2.1 Thang điểm đánh giá mức độ biểu hiện của các kiểu TSX gen

Ig/TCR dựa trên độ đậm của sản phẩm PCR điện di trên gel

VI

PHẦN MỞ ĐẦU

dòng lympho B bằng kỹ thuật PCR tại Bệnh viện Truyền máu Huyết học TP.HCM

Chủ nhiệm: ThS Cao Sỹ Luân

Cơ quan chủ trì: Trung tâm Phát triển Khoa học và Công nghệ Trẻ

Thời gian thực hiện: 12 tháng (từ tháng 12/2013 đến tháng 12/2014)

Kinh phí được duyệt: 80.000.000 VNĐ

Kinh phí đã cấp: VNĐ theo TB số: TB-SKHCN ngày

kỹ thuật PCR tại Bệnh viện Truyền máu Huyết học Tp Hồ Chí Minh

- Xác định tần suất của 19 kiểu TSX gen Ig/TCR đặc trưng cho quần thể tế

bào ác tính trên bệnh nhân BCCDL-B Việt Nam

- Xác định các kiểu TSX gen Ig/TCR có giá trị trong chẩn đoán TLTBAT

trên bệnh nhân BCCDL-B Việt Nam

VII

STT Nội dung đăng ký Nội dung đã thực hiện

1 Thu thập bệnh phẩm là tủy xương của

bệnh nhân BCCDL-B trẻ em lúc chẩn

đoán và sau điều trị và mẫu máu ngoại vi

của người bình thường

Thu thập được 122 mẫu

2 Thực hiện tách chiết genomic DNA từ

tủy xương và máu ngoại vi bằng kit của

SIGMA

Thực hiện thành công trên 122 mẫu

3 Tần suất biểu hiện của 19 kiểu TSX gen

Ig/TCR đặc trưng cho quần thể tế bào ác

tính trên bệnh nhân BCCDL-B Việt Nam

Xác định được tần suất biểu hiện

của 19 kiểu TSX gen Ig/TCR trên

bệnh nhân BCCDL-B Việt Nam

4 Các kiểu TSX gen Ig/TCR có giá trị trong

chẩn đoán TLTBAT trên bệnh nhân

Hoàn thành báo cáo chuyên đề

6 Bài báo khoa học được đăng trên các tạp

chí chuyên ngành trong nước

Bài báo khoa học đăng trên tạp chí

Y học Việt Nam 2012

7 Viết báo cáo nghiệm thu Báo cáo nghiệm thu đầy đủ nội

dung nghiên cứu

MỤC LỤC

Trang

2

MỤC LỤC

CHƯƠNG I: TỔNG QUAN VỀ BỆNH BẠCH CẦU CẤP DÒNG LYMPHO

1.1 Khái niệm 5

1.2 Phân loại 5

1.3 Các yếu tố nguy cơ gây bệnh 7

1.4 Các bất thường nhiễm sắc thể trong bạch cầu cấp dòng lympho 9

1.5 Phương pháp chẩn đoán 10

1.6 Phương pháp điều trị 11

1.7 Tình hình bệnh bạch cầu cấp dòng lympho 13

CHƯƠNG II: CÁC KỸ THUẬT XÁC ĐỊNH TỒN LƯU TẾ BÀO ÁC TÍNH TRONG BỆNH BẠCH CẦU CẤP DÒNG LYMPHO 2.1 Kỹ thuật tế bào dòng chảy 16

2.2 Kỹ thuật PCR xác định các tổ hợp gen bất thường 17

2.3 Kỹ thuật PCR khảo sát các kiểu TSX gen Ig/TCR 18

3

DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮTVIẾT TẮT THUẬT NGỮ TIẾNG VIẾT

EFS Thời gian sống không sự kiện

TLTBAT Tồn lưu tế bào ác tính

PCR Phản ứng khuếch đại chuỗi

Ig/TCR Immunoglobulin/T cell receptor

4

DANH MỤC CÁC BẢNG VÀ HÌNH

Bảng 1.1: Phân loại BCCLD theo miễn dịch tế bào dựa vào các CD 6

Bảng 1.2: Đánh giá tiên lượng BCCDL theo di truyền học phân tử 7

Bảng 2.1: Một số đặc điểm của các kỹ thuật xác định TLTBAT trong BCCDL 21

Hình 1.1: Tỷ lệ các bất thường NST thường gặp trên BCCDL trẻ em 8

Hình 2.1: Biểu đồ phân tích đường cong nóng chảy sản phẩm PCR để phân biệt giữa sản phẩm PCR chuyên biệt và không chuyên biệt 22

Từ đó, tạo nên những kiểu hình miễn dịch đặc trưng cho tế bào ung thư Tế bào ung thư phân chia chậm hơn và cần nhiều thời gian để tổng hợp DNA hơn so với tế bào bạch cầu bình thường nhưng chúng lại được tích lũy không ngừng bởi vì sự đáp ứng với các tín hiệu tăng trưởng và chết của chu trình tế bào đã bị biến đổi Sự tăng sinh và tích lũy các tế bào non trong tủy xương làm ức chế quá trình tạo máu bình thường, dẫn tới các biểu hiện như: thiếu máu, giảm tiểu cầu và giảm bạch cầu hạt Ngoài tủy xương thì tế bào non còn tích tụ trong các cơ quan khác, đặc biệt là trong màng não, gan, lách, tuyến ức, tuyến sinh dục và hạch lympho [34]

1.2 Phân loại

Có hai loại tế bào lympho khác nhau là tế bào B và tế bào T Thông thường bệnh BCCDL xảy ra ở giai đoạn rất sớm trong quá trình biệt hóa của các tế bào lympho, trước khi chúng phát triển thành các tế bào B hoặc tế bào T trưởng thành [14] BCCDL có nhiều thể khác nhau được phân loại dựa vào hình thái tế bào, nhuộm hóa tế bào và dấu ấn miễn dịch

- Phân loại theo hình thái học tế bào và hóa học tế bào: phân loại BCCDL theo hình thái tế bào là sự phân tích tế bào về hình thái của các tế bào trên tiêu bản tủy đã nhuộm Romanowsky (Wright-Giemsa hay May-Grunwald-Giemsa) [33] Phân loại theo hình thái học dựa trên hệ thống French-American-British (FAB) thì BCCDL được chia thành

3 thể từ L1 đến L3 với các hình thái tế bào đặc trưng cho từng cho từng thể

 L1: chiếm 86%, với đặc điểm là tế bào kích thước nhỏ và đồng đều; tế bào ít nguyên sinh chất và hạt nhân không rõ

 L2: chiếm 13%, với đặc điểm là tế bào to nhỏ không đều, nhiều nguyên sinh chất

và màng nhân không đều

6

 L3: chiếm khoảng 1% với đặc điểm là tế bào có nguyên sinh chất bắt kiềm mạnh

và đa số là tế bào lớn có không bào (thể Brukitt) [22]

Ngoài việc phân tích dựa trên hình thái học thì cần phải làm thêm nhuộm hóa tế bào để phân biệt giữa BCCDL và bạch cầu cấp dòng tủy (BCCDT) Trong đó, nhuộm myeloperosidase, sudden black và ASD-chloroacetate esterase thì đặc hiệu cho tế bào myeoloblast Thuốc thử periodic acid-schiff thì cho kết quả dương tính với hơn 70% BCCDL, còn acid phosphatase thì cho phản ứng với gần 70% BCCDL-T [21]

- Phân loại dưới nhóm theo dấu ấn miễn dịch tế bào: các kiểu hình miễn dịch cần thiết

để chẩn đoán dưới nhóm bệnh BCCDL theo các giai đoạn biệt hóa Vì vậy, những loại kháng thể nhận diện các kháng nguyên trên bề mặt tế bào bạch cầu ở những giai đoạn biệt hóa khác nhau được thiết lập Những loại kháng nguyên bề mặt này được gọi là những dấu ấn tế bào (CD) Hầu hết những CD này thiếu tính chuyên biệt nên cần phải thiết lập một danh mục các CD đặc trưng cho từng loại, từng nhóm tế bào ở từng giai đoạn biệt hóa khác nhau Một danh mục CD cần có ít nhất một CD có độ nhạy cao và một CD có tính chuyên biệt cao [34] BCCDL phân loại theo miễn dịch tế bào có thể được phân chia dựa vào các CD theo Bảng 1.1

Bảng 1.1: Phân loại BCCLD theo miễn dịch tế bào dựa vào các CD [34,7]

Loại tế bào Dấu ấn miễn dịch Tỷ lệ ở trẻ em (%)

Nguyên bào B CD19+, CD22+, CD79a+, cIg±, sIgµ-,

HLA-DR+

Pre-B sớm CD10+, CD34+, TdT+, CD19+, CD45+ 63

Tế bào B CD19+, CD22+, CD79a+, cIg+, sIgµ+,

sIgK+ hoặc sIg+

7

1.3 Các bất thường nhiễm sắc thể (NST) trong BCCDL

BCCDL xuất phát từ một tế bào tiền thân của dòng lympho với những thay đổi gen chuyên biệt dẫn tới sự chuyển dạng ác tính và tăng sinh không kiểm soát Do đó, đánh giá tiên lượng BCCDL dựa vào di truyền học được là phương pháp thích hợp và đáng tin cậy hơn so với các phương pháp trước đó Hơn 75% trường hợp BCCDL được đánh giá tiên lượng hay phân nhóm điều trị và theo dõi điều trị dựa trên số lượng NST, các kiểu tái sắp xếp (TSX) NST chuyên biệt hay các thay đổi di truyền ở mức độ phân tử [34] Các đặc trưng về di truyền học phân tử thường gặp ở BCCDL được phân nhóm tiên lượng theo Bảng 1.2

Bảng 1.2: Đánh giá tiên lượng BCCDL theo di truyền học phân tử [34]

Đa bội (> 50 NST) Thường xảy ra ở nguyên bào B, lượng

bạch cầu thấp, thường xảy ra ở trẻ em từ 1-9 tuổi

Thiểu bội (< 46 NST) Thường xảy ra ở nguyên bào B, lượng

bạch cầu tăng cao, tiên lượng xấu t(12;21)(p13;q22)[ETV6-RUNX1] Thường xảy ra ở nguyên bào B với kiểu

hình CD13± /CD33±, thường xảy ra ở trẻ

em từ 1-9 tuổi, tiên lượng tốt

t(1;19)(q23;p13.3)[TCF3-PBX1] Thường xảy ra ở tế bào pre-B với kiểu

hình CD10± /CD20-/CD34-, bạch cầu tăng cao

t(9;22)(q34;q11.2)[BCR-ABL1] Thường xảy ra ở nguyên bào B, lượng

bạch cầu tăng cao, thường xảy ra ở người trưởng thành

t(4;11)(q21;23)[MLL-AF4] Thường xảy ra ở nguyên bào B với kiểu

hình CD10± /CD15±/CD33±/CD65±, thường xảy ra ở trẻ sơ sinh và người trung niên

t(8;14)(q24;q32.3) Thường xảy ra ở tế bào B, hình thái tế bào

L3, thường xảy ra ở nữ, tiên lượng tốt với hóa trị liệu

Đột biến NOTCH 1 Thường xảy ra ở tế bào T, tiên lượng tốt

Biểu hiện vượt mức HOX11 Thường xảy ra ở tế bào T với kiểu hình

CD10+, tiên lượng tốt với hóa trị liệu đơn

3 NST số 21 Thường xảy ra ở nguyên bào B, lượng

bạch cầu thấp

8

Đối với bất thường về số lượng NST trong BCCDL thì có đa bội > 50 NST, đa bội

47-50 NST và thiểu bội < 46 NST Thể đa bội thường gặp trong BCCDL hơn là BCCDT 33 Trong

đó, thể đa bội > 50 NST chiếm gần 25 % còn thiểu bội < 44 NST chỉ chiếm khoảng 1% [4]

Còn bất thường liên quan tới cấu trúc NST thì có khoảng 75% BCCDL ở trẻ em có các chuyển đoạn NST như t(12;21), t(9;22), t(1;19), t(8;14), t(8;22) và t(2;8) tạo ra các tổ hợp gen

ETV6-RUNX1 (TEL/AML1), BCR-ABL, TCF3-PBX1 (E2A/PBX1), cMYC/IgH, cMYC/IgL và IgK/cMYC tương ứng Chuyển đoạn t(9;22) thường xảy ra ở BCDDL người lớn (17-25%)

nhiều hơn so với trẻ em (2-3%) Trong khi đó, chuyển vị t(12;21) thì lại chủ yếu xảy ra ở BCCDL trẻ em (> 20%) Ngoài ra, trong BCCDL cũng có thể xảy ra sự biểu hiện quá mức của

CRLF2 và thường đi kèm với đột biến JAK1/2 dẫn tới sự hoạt hóa protein kinase [33,4]

Hình 1.1: Tỷ lệ các bất thường NST thường gặp trên BCCDL trẻ em [4]

Các rối loạn phân tử quan trọng ở BCCDL-B giai đoạn tiền tế bào B (BCCDL-B

precursor) bao gồm BCR-ABL, TEL-AML1, E2A-PBX1 và các TSX gen MLL Những bất

thường NST này rất có ý nghĩa trong tiên lương và điều trị Chẳng hạn, nếu BN có chuyển vị

t(9;22), tức có BCR-ABL thì có tiên lượng rất xấu với thời gian sống không sự kiện (EFS) trung bình là 30%, còn nếu BN có chuyển vị t(12;21) với tổ hợp gen TEL/AML1 thì có tiên lượng tốt

với thời gian sống lâu dài (long term survival) khoảng 90% [33,15]

9

1.4 Các yếu tố nguy cơ gây bệnh

Hiện nay người ta còn chưa xác định được chính xác các nguyên nhân gây bệnh ung thư nói chung, cũng như nguyên nhân gây ung thư máu nói riêng Các nghiên cứu chỉ ra một số yếu tố nguy cơ được coi là nguyên nhân gây bệnh hoặc tạo điều kiện thuận lợi cho bệnh phát triển, bao gồm:

- Các yếu tố liên quan di truyền: khoảng 5% trường hợp BCCDL có liên quan tới yếu

tố di truyền Trẻ em bị hội chứng Down có tỷ lệ mắc bệnh bạch cầu cao hơn từ 10 đến

30 lần BCCDL ở BN bị hội chứng Down thì ngoài bất thường ở NST 21, còn có thêm các bất thường NST khác như đa bội (>50 NST), chuyển vị t(12;21)(p13;q22), +X, del(9)

và TSX gen CEBPD Ngoài ra, cũng có một số hội chứng di truyền khác có liên quan tới bệnh BCCDL như hội chứng Ataxia-Telangiectasia, Nijmegen breakage, Kliefelter, Wiskott-Aldrich và Bloom Những BN với hội chứng Ataxia-Telangiectasia có tỷ lệ mắc bệnh BCCDL- T cao hơn 70 lần so với người bình thường (NBT) [27,34]

- Các yếu tố không không liên quan di truyền:

 Tia xạ là một trong những tác nhân làm tăng nguy cơ bị BCCDL Những người tiếp xúc với tia phóng xạ liều cao sẽ có nguy cơ cao bị các bệnh bạch cầu, trong đó

có BCCDL Vụ nổ bom nguyên tử ở Hiroshima Nhật Bản trong chiến tranh thế giới thứ 2 đã tạo nên hàm lượng phóng xạ rất cao Nhiều người sống sót sau vụ nổ bom hạt nhân cho thấy nguy cơ mắc các bệnh bạch cầu tỷ lệ thuận với liều nhiễm Người

có tiền sử được điều trị bằng tia xạ trị khi điều trị ung thư hoặc các bệnh khác từ

trước cũng có nguy cơ cao bị bạch cầu mạn dòng tủy, BCCDT và BCCDL Tuy

nhiên, khi chụp tia X trong chẩn đoán răng hàm mặt hoặc các biện pháp chụp X quang chẩn đoán khác (như CT Scan) người ta tiếp xúc tia X với hàm lượng ít hơn nhiều Hiện tại vẫn chưa xác định mối liên quan giữa sự tiếp xúc với nồng độ tia thấp với bệnh bạch cầu cấp ở trẻ em và người lớn Các nhà khoa học đang nghiên cứu mối liên quan giữa nguy cơ mắc bệnh bạch cầu và tiền sử chụp X quang nhiều lần hoặc chụp cắt lớp khi còn nhỏ Thuốc lá cũng là một tác nhân làm tăng nguy cơ mắc bệnh bạch cầu cấp Nhiều nghiên cứu chỉ ra rằng hút thuốc lá hoặc uống rượu trong quá trình mang thai cũng làm tăng nguy cơ mắc bệnh BCCDL ở thai nhi [13,27,34]