khuếch đại gen bằng kỹ thuật pcr

... đầu khuyếch đại thành hàng triệu vòng vài Do tính đơn giản kỹ thuật nên máy PCR chế tạo để thực công việc cách tự động Khi ADN khuếch đại, chúng phân tích theo hướng khác Kỹ thuật PCR có nhiều ... hợp phải sử dụng kỹ thuật Southern blotting để thay Do ưu việt kỹ thuật PCR, nên PCR sử dụng phổ biến chẩn đoán bệnh di truyền, pháp y di truyền học tiến hóa PCR thay cho kỹ thuật Southern blotting ... thuật khác (2) Do kỹ thuật PCR nhạy nên dễ bị nhiễm ADN từ nguồn khác phòng thí nghiệm (3) PCR khó áp dụng với đoạn ADN dài đến vài kb nên kỹ thuật sử dụng để phát đột biến đoạn gene lớn đoạn ADN...

Ngày tải lên: 12/03/2014, 06:20

... việc phân tích đa hình DNA kỹ thuật RFLP ngƣời ta đƣa kỹ thuật PCR – RFLP PCR – RFLP kỹ thuật dựa sở khuyếch đại có chọn lọc đoạn DNA kỹ thuật PCR trƣớc Sau tiến hành phân cắt đoạn DNA enzyme thích ... enzyme cắt theo đầu dính cắt theo đầu bằng:  Kiểu cắt đầu bằng:  Kiểu cắt đầu dính: 16 2.6.2.9 Ứng dụng kỹ thuật PCR Kỹ thuật PCR có nhiều ứng dụng ngành sinh học PCR với cặp primer đƣợc thiết kế ... kiểu gen Prolactin receptor số giống heo công nghiệp kỹ thuật PCR- RFLP ” 2 1.2 Mục đích Sử dụng kỹ thuật PCR- RFLP để xác định kiểu gen prolactin receptor (PRLR) Tìm hiểu mối tƣơng quan kiểu gen...

Ngày tải lên: 06/11/2012, 09:49

... việc phân tích đa hình DNA kỹ thuật RFLP ngƣời ta đƣa kỹ thuật PCR – RFLP PCR – RFLP kỹ thuật dựa sở khuyếch đại có chọn lọc đoạn DNA kỹ thuật PCR trƣớc Sau tiến hành phân cắt đoạn DNA enzyme thích ... enzyme cắt theo đầu dính cắt theo đầu bằng:  Kiểu cắt đầu bằng:  Kiểu cắt đầu dính: 16 2.6.2.9 Ứng dụng kỹ thuật PCR Kỹ thuật PCR có nhiều ứng dụng ngành sinh học PCR với cặp primer đƣợc thiết kế ... kiểu gen Prolactin receptor số giống heo công nghiệp kỹ thuật PCR- RFLP ” 2 1.2 Mục đích Sử dụng kỹ thuật PCR- RFLP để xác định kiểu gen prolactin receptor (PRLR) Tìm hiểu mối tƣơng quan kiểu gen...

Ngày tải lên: 17/11/2012, 09:47

... polyacrylamide Nhân đoạn gen phản ứng chuỗi polymerase (PCR) Kỹ thuật PCR kết hợp với kỹ thuật đa hình chiều dài đoạn cắt giới hạn (PCRRFLP) Nhân dòng sản phẩm PCR vào vector pGEM-T Giải trình tự nucleotide ... biến gen ty thể người Việt Nam kỹ thuật PCR- RFLP”, chúng tơi tập trung nghiên cứu đột biến đoạn bp CCCCCTCTA vùng khơng mã hóa (vùng V) nằm gene mã cho cytochrome c oxidase subunit II (COII) gen ... bp PCR- RFLP Vì đoạn gen mang đột biến A8344G liên quan đến hội chứng MERRF nằm gần đoạn lặp bp CCCCCTCTA, nên nghiên cứu có mặt hai đột biến Nhân đoạn gen từ 8155-8366 PCR Chúng đã dùng kỹ thuật...

Ngày tải lên: 10/02/2014, 20:48

... 1995) Sử dụng PCR để phân tích trực tiếp gen cho phép xác định xác khác mặt di truyền các thể Ngoài ra, kỹ thuật PCR đơn giản kỹ thuật khác nhƣ DAF RAPD Đó sở ứng dụng phƣơng pháp PCR việc xác ... 12 2.2 Kỹ thuật PCR 13 2.2.1 Lịch sử PCR 13 2.2.2 Nguyên tắc PCR 14 2.2.3 Các thành phần phản ứng PCR 14 2.2.4 Ƣu điểm nhƣợc điểm PCR ... phổ biến PCR khuếch đạt hiệu sản phẩm lên đến - kb 17 2.2.4 Ƣu điểm nhƣợc điểm PCR Ƣu điểm Thời gian thực cực nhanh: cần để khuếch đại trình tự quan tâm, so với phƣơng pháp tạo dòng kỹ thuật tái...

Ngày tải lên: 25/02/2014, 15:20

... việc phân tích đa hình DNA kỹ thuật RFLP ngƣời ta đƣa kỹ thuật PCR – RFLP PCR – RFLP kỹ thuật dựa sở khuyếch đại có chọn lọc đoạn DNA kỹ thuật PCR trƣớc Sau tiến hành phân cắt đoạn DNA enzyme thích ... enzyme cắt theo đầu dính cắt theo đầu bằng:  Kiểu cắt đầu bằng:  Kiểu cắt đầu dính: 16 2.6.2.9 Ứng dụng kỹ thuật PCR Kỹ thuật PCR có nhiều ứng dụng ngành sinh học PCR với cặp primer đƣợc thiết kế ... kiểu gen Prolactin receptor số giống heo công nghiệp kỹ thuật PCR- RFLP ” 2 1.2 Mục đích Sử dụng kỹ thuật PCR- RFLP để xác định kiểu gen prolactin receptor (PRLR) Tìm hiểu mối tƣơng quan kiểu gen...

Ngày tải lên: 19/03/2014, 19:20

... sản phẩm PCR thực PCR mẫu với cặp primer W11 F sản phẩm PCR thực PCR mẫu với cặp primer T1 – sản phẩm PCR thu đƣợc thực multiplex PCR mẫu -6 với cặp primer T1 W11 Khi chạy multiplex PCR với mẫu, ... kb Hình 4.5 Sản phẩm PCR với quy trình nhiệt L: ladder (1 kb) N: đối chứng âm (khơng có DNA) - - 10 sản phẩm PCR khuếch đại cặp primer T1 thực PCR mẫu – 10 Điện di sản phẩm PCR gel agarose 1,5%,ở ... Bố trí thí nghiệm phản ứng PCR Thực PCR theo trình tự sau: Bƣớc 1: thực PCR với cặp primer T1 Thiết kế phản ứng PCR Lập lại 30 chu kỳ 27 Bảng 3.1 Thành phần phản ứng PCR với cặp primer T1 Thành...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 02:21

... phổ biến PCR khuếch đạt hiệu sản phẩm lên đến - kb 17 2.2.4 Ƣu điểm nhƣợc điểm PCR Ƣu điểm Thời gian thực cực nhanh: cần để khuếch đại trình tự quan tâm, so với phƣơng pháp tạo dòng kỹ thuật tái ... DNA mẫu sử dụng PCR khác nhau, ví dụ: g DNA genome ngƣời, 10 ng DNA genome nấm, ng DNA genome E coli (McPherson Moller, 2000) Buffer PCR: hầu hết nhà sản xuất cung cấp buffer PCR 10X với Taq ... lợi cho việc hoa, kết trái nên suất đu đủ trung bình khoảng 20 tấn/ha 2.2 Kỹ thuật PCR 2.2.1 Lịch sử PCR Sự phát triển PCR đƣợc so sánh nhƣ phát triển Internet Cả hai phát triển vƣợt xa dự tính...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 02:21

... đơn vị ATPase; gen nad1-6 nad 4L mã hóa cho tiểu đơn vị 1-6 4L NADH dehydrogenase; gen cob mã hóa cho cytochrome b Các gen khác bao gồm gen mã hóa rRNA (gen rrnS mã hóa 12S rRNA gen rrnL mã hóa ... marmoreus -400C -400C -400C 3.2 Nhân đoạn gen mã hóa 16S rRNA trình tự ITS2 mẫu ốc cối kỹ thuật PCR Đoạn gen mã hóa 16S rRNA đoạn chèn ITS2 loài ốc cối khuếch đại sử dụng hai cặp mồi tham khảo 16S ... nồng độ DNA khuếch đại tối đa nhất, lượng dNTP chất lượng enzyme DNA polymerase, mồi bị giảm rõ rệt, phản ứng khuếch đại kết thúc Các cặp mồi chọn để nhân đoạn gen mã hóa 16S rRNA (hệ gen ty thể)...

Ngày tải lên: 14/08/2014, 18:20

... COL1A1 cần ý tới kỹ thuật là: PCR, RT -PCR giải trình tự gen 1.4.1 Kỹ thuật Polymerase Chain Reaction (PCR) : PCR kỹ thuật nhân DNA ống nghiệm Nguyên tắc phản ứng PCR dựa đặc điểm trình tự chép ... hiệu Sau đó, q trình PCR sử dụng để khuếch đại lượng cDNA tạo thành với cặp mồi đặc hiệu cho đoạn gen cần khuếch đại Thực chất RT -PCR kết hợp hai trình: phiên mã ngược (RT) PCR Quá trình phiên ... khuếch đại sản phẩm cDNA phương pháp RT -PCR đế biết exon bị từ mRNA Tuy nhiên mẫu bệnh phẩm phải lấy vùng có biểu protein collagen týp I (da, xương) Như để phát đột biến gen COL1A1 cần ý tới kỹ thuật...

Ngày tải lên: 07/10/2014, 01:31

... có kỹ thuật đáp ứng tiêu chuẩn đƣợc dùng để xác định TLTBAT là: 15 - Kỹ thuật tế bào dòng chảy - Kỹ thuật RT -PCR sử dụng tổ hợp gen để xác định bất thƣờng NST - Kỹ thuật PCR khảo sát kiểu TSX gen ... lƣợng sản phẩm PCR dựa lƣợng huỳnh quang phát suốt q trình khuếch đại phản ứng Hiện có loại kỹ thuật RQ -PCR [30]: - Kỹ thuật RQ -PCR sử dụng thuốc nhuộm SYBR Green I - Kỹ thuật RQ -PCR sử dụng đoạn ... chế kỹ thuật RT -PCR tổ hợp gen không cho biết lƣợng tế bào ác tính lại mà đánh giá TLTBAT thơng qua mức độ biểu gen tổ hợp gen bất thƣờng 2.3 Kỹ thuật PCR khảo sát kiểu TSX gen Ig/TCR Các gen...

Ngày tải lên: 11/02/2015, 01:24

... Nhân đoạn gen phản ứng chuỗi polymerase (PCR) 30 2.2.7 Kỹ thuật PCR kết hợp với kỹ thuật đa hình chiều dài đoạn cắt giới hạn (PCR- RFLP) 31 2.2.8 Nhân dòng sản phẩm PCR vào vector ... tính phóng xạ để phát đánh giá biến dị Cùng với phát triển kỹ thuật PCR, kỹ thuật RFLP trở nên đơn giản Kĩ thuât PCR gọi kỹ thuật nhân gen in vitro Karl Mullis cộng phát minh vào năm 1985 Nguyên ... biến gen Tuy kỹ thuật tốn thời gian chi phí cao, kỹ thuật xác định trình tự thường sử dụng để khẳng định có mặt đột biến có đột biến mtDNA 1.3.4 PCR định lượng Về nguyên tắc kỹ thuật Real time-PCR...

Ngày tải lên: 31/03/2015, 16:20

... lớn phổ biến kỹ thuật MLPA MLPA (Multiplex Ligationdependent Probe Amplification) kỹ thuật dựa việc khuếch đại đồng thời nhiều đầu dò thay khuếch đại trực tiếp từ khn ADN Quy trình kỹ thuật bao ... 2.2.3 Kỹ thuật PCR đa mồi Trong nghiên c ứu này, phản ứng PCR sử dụng để khuếch đại đoạn nội kiểm, đoạn mang đột biến kiểm tra vector mang đoạn chèn sau tách dòng Phản ứng PCR đa mồi khuếch đại ... ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - - Trần Tuấn Anh XÁC ĐỊNH ĐỘT BIẾN GEN ALPHA GLOBIN GÂY BỆNH THALASSEMIA BẰNG KỸ THUẬT PCR ĐA MỒI Chuyên ngành:...

Ngày tải lên: 18/05/2015, 23:29

... định đột biến gen F8 2.3.3.1 Xác định đột biến đảo đoạn Itron 22 kỹ thuật Inversion PCR Kỹ thuật Inversion PCR (I -PCR) gồm bước: (1) Cắt DNA enzyme BclI, (2) Nối T4 ligate, (3) Khuyếch đại phản ứng ... phân tích gen tiến hành nhanh chóng , kết thu có độ tin cậy cao, dễ thực 2.3.3.2 Phát đột biến đảo đoạn Itron kỹ thuật multiplex PCR Kỹ thuật multiplex PCR: Thiết kế hai phản ứng multiplex PCR phát ... 1323bp 1776bp tương ứng phản ứng phản ứng 2.3.3.3 Phat đột biến exon kỹ thuật PCR 2.3.3.4 Phát đột biến điểm kỹ thuật giải trình tự gen 4 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên...

Ngày tải lên: 01/07/2016, 11:12

Ngày tải lên: 01/12/2016, 11:13

... DNA Sau giữ lạnh -20oC để sử dụng cho phản ứng PCR Phương pháp khuyếch đại DNA (Kỹ thuật PCR) Sản phẩm DNA sau ly trích trộn chung với hỗn hợp gồm có PCR buffer, MgCl2, dNTP/s, Taq DNA polymerase ... Kết luận - Sử dụng kỹ thuật PCR cho phép chẩn đoán xuất gen Invertase gen CryIA(b) với thành phần hóa chất chu trình nhiệt cụ thể cặp primer tìm - Với primer Gic chuyên biệt cho gen Invertase, tất ... gồm: PCR buffer, MgCl2, dNTP/s, Taq DNA polymerase, nước cất, primer xuôi primer ngược Thành phần hỗn hợp cho phản ứng PCR trình bày qua bảng Bảng Thành phần hóa chất cho phản ứng PCR H2O caát PCR...

Ngày tải lên: 30/10/2012, 16:45

... 1995) Sử dụng PCR để phân tích trực tiếp gen cho phép xác định xác khác mặt di truyền các thể Ngoài ra, kỹ thuật PCR đơn giản kỹ thuật khác nhƣ DAF RAPD Đó sở ứng dụng phƣơng pháp PCR việc xác ... 12 2.2 Kỹ thuật PCR 13 2.2.1 Lịch sử PCR 13 2.2.2 Nguyên tắc PCR 14 2.2.3 Các thành phần phản ứng PCR 14 2.2.4 Ƣu điểm nhƣợc điểm PCR ... phổ biến PCR khuếch đạt hiệu sản phẩm lên đến - kb 17 2.2.4 Ƣu điểm nhƣợc điểm PCR Ƣu điểm Thời gian thực cực nhanh: cần để khuếch đại trình tự quan tâm, so với phƣơng pháp tạo dòng kỹ thuật tái...

Ngày tải lên: 05/11/2012, 14:01

... Thuỳ Dƣơng, 2003) 2.3.1 Nguyên tắc kỹ thuật PCR Kỹ thuật PCR (polymerase chain reaction) phƣơng pháp tổng hợp DNA dựa mạch khn trình tự đích DNA ban đầu, khuếch đại, nhân số lƣợng khuôn thành hàng ... PCR đƣợc áp dụng để khuếch đại đoạn DNA có chiều dài 200 – 2000 bp 15 2.3.2 Các yếu tố ảnh hƣởng đến phản ứng PCR 2.3.2.1 DNA mẫu Phản ứng khuếch đại tối ƣu xảy DNA thật tinh Tuy nhiên, kỹ thuật ... đặc biệt đƣợc khuếch đại lên nhiều lần Sự khuếch đại đƣợc tính nhƣ sau: Tổng lƣợng DNA khuếch đại = m x 2n m: Là số chuỗi mã hóa n: Là số chu kỳ 14 Hình 2.1: Nguyên tắc phản ứng PCR (nguồn Andy...

Ngày tải lên: 17/11/2012, 09:39

... ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC ….  … PHÁT HIỆN BỆNH KHẢM LÁ MÍA BẰNG KỸ THUẬT ELISA VÀ BƢỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU PHÁT HIỆN BỆNHCẰN MÍA GỐC BẰNG KỸ THUẬT PCR Luận văn kỹ ... TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC ….  … PHÁT HIỆN BỆNH KHẢM LÁ MÍA BẰNG KỸ THUẬT ELISA VÀ BƢỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU PHÁT HIỆN BỆNH CẰN MÍA GỐC BẰNG KỸ THUẬT PCR Giáo ... vào kỹ thuật sinh học phân tử  Chẩn đoán dựa vào việc sử dụng đầu dò DNA Chung ctv (1994) sử dụng kỹ thuật lai vết bệnh (dot blot hybridization) với đầu dò DNA đặc hiệu cho Lxx  Kỹ thuật PCR Kỹ...

Ngày tải lên: 17/11/2012, 09:45

... Thuỳ Dƣơng, 2003) 2.3.1 Nguyên tắc kỹ thuật PCR Kỹ thuật PCR (polymerase chain reaction) phƣơng pháp tổng hợp DNA dựa mạch khn trình tự đích DNA ban đầu, khuếch đại, nhân số lƣợng khuôn thành hàng ... PCR đƣợc áp dụng để khuếch đại đoạn DNA có chiều dài 200 – 2000 bp 15 2.3.2 Các yếu tố ảnh hƣởng đến phản ứng PCR 2.3.2.1 DNA mẫu Phản ứng khuếch đại tối ƣu xảy DNA thật tinh Tuy nhiên, kỹ thuật ... đặc biệt đƣợc khuếch đại lên nhiều lần Sự khuếch đại đƣợc tính nhƣ sau: Tổng lƣợng DNA khuếch đại = m x 2n m: Là số chuỗi mã hóa n: Là số chu kỳ 14 Hình 2.1: Nguyên tắc phản ứng PCR (nguồn Andy...

Ngày tải lên: 19/11/2012, 15:14