Nghiên cứu vai trò của E. Coli, Salmonella, Clostridium Perfringens gây tiêu chảy ở lợn tại 3 tỉnh miền núi phía Bắc và biện pháp phòng trị

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC THÁI NGUN –––––––––––––– TRẦN ĐỨC HẠNH NGHIÊN CỨU VAI TRÕ CỦA E. COLI, SALMONELLA, CLOSTRIDIUM PERFRINGENS GÂY TIÊU CHẢY Ở LỢN TẠI 3 TỈNH MIỀN NƯI PHÍA BẮC VÀ BIỆN PHÁP PHÕNG TRỊ Chun ngành: Vi sinh vật học thú y Mã số: 62 64 01 04 LUẬN ÁN TIẾN SĨ NƠNG NGHIỆP Hướng dẫn khoa học : 1. GS.TS. Nguyễn Quang Tun 2. PGS.TS. Cù Hữu Phú THÁI NGUN, 2013 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan rằng: Đây là cơng trình nghiên cứu của riêng tơi, các số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận án này là trung thực và chưa từng được ai cơng bố trong bất kỳ cơng trình nào khác và chưa từng sử dụng để bảo vệ một học vị nào. Tơi xin cam đoan mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện đề tài nghiên cứu và hồn thành luận án đều đã được cảm ơn, các thơng tin trích dẫn chính xác và đã được chỉ rõ nguồn gốc. Thái Ngun, tháng 03 năm 2012 Tác giả NCS. Trần Đức Hạnh Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ ii LỜI CẢM ƠN Trong suốt q trình thực hiện đề tài và hồn thành bản luận án, tơi ln nhận được sự giúp đỡ của nhiểu tổ chức và cá nhân. Nhân dịp này tơi xin cảm ơn Ban Giám đốc Đại học Thái Ngun, Ban Chủ nhiệm Khoa Sau Đại học, Khoa Chăn Ni Thú Y, Trường Đại Học Nơng Lâm Thái Ngun đã tạo điều kiện cho tơi được theo học chương trình đào tạo nghiên cứu sinh tại trường. Tơi xin chân thành cảm ơn tập thể cán bộ thuộc bộ mơn Vi sinh vật-Khoa Chăn Ni Thú Y - Trường ĐHNL Thái Ngun, Bộ Mơn Vi Trùng -Viện Thú Y Quốc Gia đã nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi nhất để tơi hồn thành đề tài nghiên cứu. Đặc biệt, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến các thầy hướng dẫn khoa học là GS.TS. Nguyễn Quang Tun - Phó Viện Trưởng Viện Khoa học và Sự sống thuộc ĐH Thái Ngun và PGS.TS. Cù Hữu Phú - Trưởng Bộ Mơn Vi Trùng - Viện Thú Y Quốc Gia đã trực tiếp hướng dẫn giúp đỡ tơi trong q trình thực hiện đề tài và hồn thành luận án. Tơi xin gửi lời cảm ơn đến Ban lãnh đạo và các thầy cơ giáo - Viện Thú Y Quốc Gia đã cung cấp tài liệu, những ý kiến q báu và hướng dẫn cách thao tác một số thí nghiệm quan trọng để tơi hồn thiện đề tài nghiên cứu. Tơi ln biết ơn gia đình, bạn bè và các học viên cao học, các em sinh viên đã đóng góp cơng sức, động viên, giúp đỡ tơi hồn thành luận án này. Thái Ngun, tháng 03 năm 2012 Tác giả NCS. Trần Đức Hạnh Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ iii BẢNG CÁC CHỮ VIẾT TẮT TRONG LUẬN ÁN A : Adenin ATCC : American Type Culture Collection BHI : Brain Heart Infusion bp : base pair BT : Bình thường C : Cytosin CAMP : Christie Atkins Munch Petersen CFU : Colony Forming Unit cs : Cộng sự Cl. perfringens : Clostridium perfringens DNA : Deoxyribonucleic Acid dNTP : deoxyribonucleotide triphosphate E.coli : Escherichia coli ELISA : Enzyme Linked Immunosorbent Assay ETEC : Enterotoxine của vi khn E.coli EYA : Egg Yolk Agar FAO : Food and Agriculture Organization G : Guanin HBS : Haemorrhagic bowel syndrome kDa : kilo Dalton KM : Khoẻ mạnh LD : Lethal dose LT : Độc tố chịu nhiệt µl : microlitre NCCLS : National Committee of Clinical Laboratory Standards OR : Odds Ratio RNA : Ribonucleic Acid rRNA : Ribosomal Ribonucleic Acid PCR : Polymerase Chain Reaction S : Salmonella STA : Độc tố khơng chịu nhiệt SIM : Sulfide - Indole – Motility T :Thymin TAE : Tris - Acetate – EDTA TE : Tris – EDTA TC : Tiêu chảy TGC : Thioglycollate TGE : Transmissible gastroenteritis TSC : Tryptose Sulphite Cycloserine Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ iv MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Chƣơng 1.TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 1.1. Một số ngun nhân và hiểu biết chung về hội chứng tiêu chảy ở lợn 4 1.1.1. Rối loạn tiêu hóa do mơi trường ngoại cảnh bất lợi 4 1.1.2. Rối loạn tiêu hố do thức ăn, nước uống khơng đảm bảo 5 1.1.3. Một số vi sinh vật gây tiêu chảy gia súc 5 1.2. Vai trò của một số vi khuẩn trong hội chứng tiêu chảy ở lợn 7 1.2.1. Vi khuẩn Escherichia coli (E. coli) 7 1.2.2. Vi khuẩn Salmonella spp. trong hội chứng tiêu chảy ở lợn 20 1.2.3. Vai trò của vi khuẩn đường ruột Clostridium Perfringens (Cl. Perfringens) trong trong hội chứng tiêu chảy ở gia súc 28 1.3. Biện pháp phòng trị hội chứng tiêu chảy ở lợn con do vi khuẩn gây ra 32 1.3.1. Biện pháp phòng 32 1.3.2. Điều trị tiêu chảy ở lợn 35 Chƣơng 2. NỘI DUNG, NGUN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 36 2.1. Nội dung nghiên cứu 36 2.1.1. Nghiên cứu tình hình tiêu chảy ở lợn con tại 3 tỉnh miền núi phía Bắc, Thái Ngun, Bắc Giang, Vĩnh Phúc. 36 2.1.2. Phân lập, xác định 3 loại vi khuẩn là E. coli, Salmonella spp. và Cl. perfringens ở lợn con bình thường và bị tiêu chảy. 36 2.1.3. Nghiên cứu một số đặc tính sinh học của các chủng vi khuẩn phân lập được. 36 2.1.4. Nghiên cứu một số biện pháp phòng và trị hội chứng tiêu chảy ở lợn 36 2.2. Ngun liệu dùng trong nghiên cứu 36 2.2.1. Đối tượng nghiên cứu 36 2.2.3. Địa điểm nghiên cứu 37 2.3. Phương pháp nghiên cứu 37 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ v 2.3.1. Phương pháp điều tra 37 2.3.2. Phương pháp lấy mẫu và phân lập vi khuẩn 38 2.3.3. Nghiên cứu đặc tính sinh vật học của vi khuẩn 38 2.3.4. Phương pháp xác định type kháng ngun của vi khuẩn phân lập được 39 2.3.5. Phương pháp xác định các yếu tố gây bệnh của vi khuẩn phân lập được 43 2.3.6. Phương pháp xác định khả năng mẫn cảm kháng sinh của các chủng vi khuẩn phân lập được 47 2.5. Phương pháp chế tạo autovacxin vơ hoạt có bổ trợ keo phèn 48 2.6. Phương pháp xử lý số liệu 49 Chƣơng 3 : KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 51 3.1. Kết quả điều tra lợn con dưới hai tháng tuổi mắc tiêu chảy tại các tỉnh nghiên cứu 52 3.1.1. Kết quả điều tra tỷ lệ lợn con bị tiêu chảy và chết ở các lứa tuổi 53 3.2. Kết quả xác định số lượng vi khuẩn đường ruột ở lợn con 56 3.2.1. Kết quả xác định số lượng vi khuẩn hiếu khí, Salmonella spp và E. coli ở lợn con 55 3.2.2. Kết quả xác định số lượng vi khuẩn yếm khí và Cl. perfringens ở lợn con 59 3.3. Kết quả phân lập vi khuẩn E. coli, Salmonella spp. và Cl. perfringens ở lợn con 63 3.4. Kết quả xác định một số đặc tính sinh hố của các chủng vi khuẩn phân lập được ở lợn con tiêu chảy 67 3.4.1. Kết quả xác định một số đặc tính sinh hóa của các chủng vi khuẩn E. coli 67 3.4.2. Kết quả xác định một số đặc tính sinh hóa của các chủng vi khuẩn Salmonella spp 68 3.4.3. Kết quả xác định một số đặc tính sinh hóa của các chủng vi khuẩn Cl. perfringens 70 3.5. Kết quả xác định type của các chủng vi khuẩn E. coli, Salmonella spp và Cl. perfringens phân lập được ở lợn con tiêu chảy 71 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ vi 3.5.1. Kết quả xác định type của các chủng vi khuẩn E. coli 71 3.5.2. Kết quả xác định type của các chủng vi khuẩn Salmonella spp 72 3.5.3. Kết quả xác định type của các chủng vi khuẩn Cl. perfringens 75 3.6. Kết quả xác định khả năng dung huyết của các chủng E. coli phân lập được ở lợn con tiêu chảy 77 3.7. Kết quả xác định kháng ngun bám dính của E. coli và Salmonella spp phân lập được từ lợn con tiêu chảy 78 3.8. Kết quả xác định độc lực và độc tố của các chủng vi khuẩn phân lập được ở lợn con tiêu chảy 80 3.8.1. Kết quả xác định các yếu tố gây bệnh của các chủng vi khuẩn E. coli phân lập được 82 3.8.2. Kết quả xác định độc lực của vi khuẩn Salmonella spp phân lập được ở lợn con tiêu chảy 87 3.8.3. Kết quả xác định độc lực của vi khuẩn Cl. perfringens phân lập được ở lợn con tiêu chảy 91 3.9. Kết quả xác định khả năng mẫn cảm với kháng sinh của các chủng vi khuẩn phân lập được 93 3.9.1. Kết quả xác định khả năng mẫn cảm với kháng sinh của các chủng vi khuẩn E. coli phân lập được 95 3.9.2. Kết quả xác định khả năng mẫn cảm với kháng sinh của các chủng vi khuẩn Salmonella spp. phân lập được 97 3.9.3. Kết quả xác định khả năng mẫn cảm với kháng sinh của các chủng vi khuẩn Cl. perfringens phân lập được 99 3.10. Kết quả phòng và điều trị hội chứng tiêu chảy ở lợn con 98 3.10.1. Kết quả đánh giá bước đầu về chế tạo thử nghiệm autovacxin đa giá 100 3.10.2. Kết quả kiểm tra an tồn và hiệu lực của autovacxin trên động vật thí nghiệm 102 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 116 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1: Tỷ lệ lợn con tiêu chảy và chết tại một số địa điểm thuộc các tỉnh nghiên cứu 52 Bảng 3.2: Tỷ lệ lợn con mắc tiêu chảy và chết qua các năm 53 Bảng 3.3: Tỷ lệ lợn con bị tiêu chảy ở các lứa tuổi 54 Bảng 3.4: Tỷ lệ lợn con chết do tiêu chảy ở các lứa tuổi 55 Bảng 3.5: Kết quả xác định số lượng vi khuẩn hiếu khí, Salmonella spp và E. coli/ gam phân ở lợn con 56 Bảng 3.6: Kết quả xác định số lượng vi khuẩn yếm khí và Cl. perfringens/ gam phân ở lợn con 60 Bảng 3.7: Tỷ lệ phân lập một số vi khuẩn trong phân lợn con 62 Bảng 3.8: Tỷ lệ phân lập một số vi khuẩn từ phủ tạng lợn con chết do tiêu chảy 65 Bảng 3.9: Đặc tính sinh hố của các chủng E. coli phân lập được ở lợn con tiêu chảy 68 Bảng 3.10: Đặc tính sinh hóa của các chủng vi khuẩn Salmonella spp. phân lập được ở lợn con tiêu chảy 69 Bảng 3.11: Đặc tính sinh hố của các chủng vi khuẩn Cl. perfringens phân lập được ở lợn con tiêu chảy 70 Bảng 3.12: Kế t quả xá c đị nh serotype khá ng ngun O của các chủng vi kh̉ n E. coli phân lậ p đượ c 71 Bảng 3.13: Kết quả xác định serotype vi khuẩn Salmonella spp. phân lập ở lợn con tiêu chảy 73 Bảng 3.14: Kết quả xác định type của các chủng vi khuẩn Cl. perfringens 77 Bảng 3.15: Kết quả xác định khả năng dung huyết của các chủng E. coli phân lập ở lợn con tiêu chảy 79 Bảng 3.16: Kết quả phản ứng ngưng kết trực tiếp hồng cầu của các chủng E. coli phân lập ở lợn con tiêu chảy 80 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ viii Bảng 3.17: Kết quả phản ứng ngưng kết hồng cầu của các chủng vi khuẩn Salmonella spp. phân lập ở lợn con tiêu chảy 81 Bảng 3.18: Kết quả xác định các yếu tố gây bệnh của các chủng vi khuẩn E. coli 83 Bảng 3.19: Kế t qu ả kiểm tra độc lực của một số chủng E. coli trên cḥ t bạch 86 Bảng 3.20: Kế t quả kiể m tra đợ c lự c củ a mợ t sớ chủ ng vi kh̉ n Salmonella spp. trên cḥ t bạch 88 Bảng 3.21: Kết quả xác định độc tố của các chủng vi khuẩn Salmonella spp. phân lập được ở lợn con tiêu chảy 90 Bảng 3.22: Kế t quả kiểm tra đợ c lự c củ a mợ t sớ chủ ng vi kh̉ n Cl. perfringens trên cḥ t bạch 92 Bảng 3.23: Kết quả xác định độc tố đường ruột của các chủng vi khuẩn Cl. perfringens phân lập được ở lợn con tiêu chảy 94 Bảng 3.24: Kết quả xác định khả năng mẫn cảm với kháng sinh của các chủng E. coli phân lập được 95 Bảng 3.25: Kết quả xác định khả nămg mẫn cảm với kháng sinh của các chủng vi khuẩn Salmonella spp. phân lập được 98 Bảng 3.26: Kết quả xác định khả năng mẫn cảm với kháng sinh của các chủng vi khuẩn Cl. perfringens phân lập được 99 Bảng 3.27: Kết quả kiểm tra một số chỉ tiêu các lơ autovacxin 102 Bảng 3.28: Kết quả thử hiệu lực của autovacxin trên chuột nhắt trắng 104 Bảng 3.29: Kết quả thử an tồn ở lợn sau khi tiêm chế phẩm autovacxin 105 Bảng 3.30: Kết quả khảo sát hiệu giá kháng thể ở lợn thí nghiệm sau khi tiêm autovacxin 107 Bảng 3.31: Kết quả bảo hộ lợn thí nghiệm bằng autovacxin 109 Bảng 3.32: Kết quả thử nghiệm liều và số lần tiêm autovacxin cho lợn 110 Bảng 3.33: Kết quả thử hiệu lực của autovacxin trên chuột nhắt trắng 113 Bảng 3.34: Kết quả điều trị tiêu chảy ở lợn con 114 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ ix DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ VÀ HÌNH Sơ đồ 1: Phân lập và giám định E. coli 40 Sơ đồ 2: Phân lập và giám định Salmonella 41 Sơ đồ 3: Phân lập và giám định vi khuẩn Clostridum 42 Sơ đồ 4: Quy trình sản xuất vacxin vơ hoạt bổ trợ keo phèn 50 Hình 3.1. Biểu đồ tỷ lệ phân lập một số vi khuẩn trong phân lợn con 63 Hình 3.2. Biểu đồ phân lập một số vi khuẩn từ phủ tạng lợn con chết do tiêu chảy 64 Hình 3.3. Biểu đồ kết quả xác định serotype kháng ngun O của các chủng vi khuẩn E.coli phân lập được 72 Hình 3.4. Biểu đồ kết quả xác định serotype của vi khuẩn Sanmonella phân lập được ở lợn con tiêu chảy 74 Hình 3.5. Biểu đồ kết quả xác định serotype của vi khuẩn Cl.perfringens phân lập được ở lợn con tiêu chảy 75 Hình 3.6. Kết quả PCR xác định yếu tố gây bệnh của vi khuẩn E. coli phân lập được 76 Hình 3.7. Biểu đồ tỷ lệ các chủng vi khuẩn E. coli mang các gen quy định các yếu tố gây bệnh trên cḥ t bạch 78 Hình 3.8. Biểu đồ tỷ lệ các chủng vi khuẩn E. coli mang các gen quy định các yếu tố gây bệnh 83 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ [...]... perfringens và vai trò gây bệnh của chúng trong hội chứng tiêu chảy ở lợn con và xây dựng biện pháp phòng trị thích hợp là một vấn đề cấp thiết thì chưa được nghiên cứu một cách đầy đủ, tồn diện và hệ thống Vì vậy, chúng tơi tiến hành triển khai đề tài: "Nghiên cứu vai trò của E .coli, Salmonella và Clostridium perfringens gây tiêu chảy ở lợn tại 3 tỉnh miền núi phía Bắc và biện pháp phòng trị nhằm có... (2005) [36 ] đã cho thấy 100% mẫu phân lợn tiêu chảy phân lập được E coli với số lượng gấp 2,46-2, 73 lần (ở lợn 1-21 ngày tuổi) và 1,88-2,1 lần (ở lợn 22-60 ngày tuổi) so với lợn khơng tiêu chảy Tỷ lệ các chủng E coli phân lập từ lợn con tiêu chảy có độc lực mạnh và các yếu tố gây bệnh cũng cao hơn rất nhiều Yếu tố bám dính ở lợn tiêu chảy là 93, 33% , ở lợn bình thường là 33 ,33 %; khả năng dung huyết ở lợn. .. hơn và giảm thiểu thiệt hại do tiêu chảy gây ra cho lợn con tại một số tỉnh phía Bắc, góp phần tăng thu nhập cho người chăn ni * Mục tiêu của đề tài: - Xác định vai trò gây bệnh của vi khuẩn E coli, Salmonella và Cl perfringens trong hội chứng tiêu chảy ở lợn con, tuyển chọn các chủng vi khuẩn đủ điều kiện để chế tạo chế phẩm phòng bệnh - Xây dựng và đề xuất một số biện pháp phòng trị tiêu chảy ở lợn. .. 53, 33% , ở lợn tiêu chảy là 25,92%; độc tố khơng chịu nhiệt (LT) ở lợn bình thường là 90,0% , ở lợn tiêu chảy là 11,11%; cả hai loại ST và LT ở lợn tiêu chảy là 73, 33% , ở lợn bình thường là l,4%; độc lực mạnh (gây chết 100% chuột) ở lợn tiêu chảy là 90%, ở lợn bình thường là 0% (Phạm Ngọc Thạch, 2005 [49]; Nguyễn Khả Ngự, 2000) [29] Nguyễn Tất Thành (2007) [50], khi tìm hiểu ngun nhân chủ yếu gây tiêu. .. [25]; đã nghiên cứu hội chứng tiêu chảy ở lợn và biện pháp phòng trị Các tác giả trên đã nghiên cứu ngun nhân do vi Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 2 khuẩn như Salmonella, E coli hoặc Cl perfringens gây ra và cho thấy những tác hại do tiêu chảy gây ra đối với lợn là rất lớn Tuy nhiên, việc nghiên cứu sự xuất hiện đồng thời của ba loại vi khuẩn là E coli, Salmonella spp., Cl perfringens. .. của đề tài: - Là một cơng trình nghiên cứu có hệ thống mối liên quan và vai trò gây bệnh của ba loại vi khuẩn E coli, Salmonella spp., Cl perfringens phân lập được từ lợn con bị tiêu chảy - Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của của ba loại vi khuẩn E coli, Salmonella spp., Cl perfringens trong hội chứng tiêu chảy ở lợn con - Nghiên cứu chế tạo autovacxin từ các chủng vi khuẩn phân lập được dùng phòng. .. này ở mức cao trong tế bào sẽ ngăn trở hệ thống chuyển Na+ và Cl-; làm giảm khả năng hấp thu chất điện giải và nước ruột và sinh ra tiêu chảy STa thường thấy ở ETEC gây bệnh ở lợn dưới 2 tuần tuổi và ở lợn lớn STb là một protein có tính kháng ngun yếu, vai trò của STb là kích thích vòng Nucleotit phân tiết dịch độc lập ở ruột non STb được tìm thấy ở lợn con tới trên 75% và ở lợn trưởng thành khoảng 33 %... chứng tiêu chảy Cầu trùng, giun, sán trong đường tiêu hóa là một trong những ngun nhân gây tiêu chảy ở lợn ni trong các hộ gia đình tại Thái Ngun Ở lợn bình thường và lợn bị tiêu chảy đều nhiễm các loại giun đũa, giun lươn, giun tóc và sán lá ruột, nhưng ở lợn tiêu chảy nhiễm tỷ lệ cao hơn và nặng hơn (Nguyễn Thị Kim Lan và cs, 2006a) [21] Phạm Sỹ Lăng (1997) [ 23] cho rằng lợn ni trong các hộ gia đình tại. .. khuẩn E coli, Salmonella spp., Cl perfringens gây ra, đồng thời đóng góp thêm những tư liệu tham khảo dùng cho nghiên cứu, giảng dạy trong các trường Đại học Nơng nghiệp * Ý nghĩa thực tiễn của đề tài: - Autovacxin chế tạo được có thể dùng phòng tiêu chảy cho lợn con, giảm tỷ lệ mắc và chết do tiêu chảy - Kết quả nghiên cứu của đề tài sẽ là cơ sở cho việc đưa ra biện pháp phòng và trị tiêu chảy cho lợn. .. kháng của lợn giảm sút do tác động stress, khi đó vi khuẩn này sẽ tăng số lượng và sinh độc tố Cù Hữu Phú và cs (2004) [34 ] đã cho biết vi khuẩn E coli là ngun nhân chính gây tiêu chảy ở lợn con theo mẹ; các chủng E coli có thể mang tổ hợp các yếu tố gây bệnh như LT+ STA+ STB+ K88+ HLY+ (29.29%) và LT+ STA+ STB+ HLY- (8 ,33 %) Nghiên cứu vai trò gây bệnh của E coli trong hội chứng tiêu chảy ở lợn 160 . diện và hệ thống. Vì vậy, chúng tơi tiến hành triển khai đề tài: " ;Nghiên cứu vai trò của E. coli, Salmonella và Clostridium perfringens gây tiêu chảy ở lợn tại 3 tỉnh miền núi phía Bắc và biện. chứng tiêu chảy ở lợn 20 1.2 .3. Vai trò của vi khuẩn đường ruột Clostridium Perfringens (Cl. Perfringens) trong trong hội chứng tiêu chảy ở gia súc 28 1 .3. Biện pháp phòng trị hội chứng tiêu chảy. chảy ở lợn con do vi khuẩn gây ra 32 1 .3. 1. Biện pháp phòng 32 1 .3. 2. Điều trị tiêu chảy ở lợn 35 Chƣơng 2. NỘI DUNG, NGUN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 36 2.1. Nội dung nghiên cứu 36 2.1.1.