LUẬN văn THẠC sĩ CÔNG NGHỆ SINH học (FULL) nghiên cứu thực trạng nhiễm độc tố aflatoxin trong một số loại nông sản thực phẩm tại khu vực miền núi phía bắc và biện pháp xử lý

1 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan luận văn cơng trình nghiên cứu tơi hướng dẫn PGS.TS Lương Thị Hồng Vân TS Nguyễn Thị Hải Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực Một số kết công bố đồng tác giả chưa cơng bố cơng trình khác Tác giả luận văn LỜI CẢM ƠN Tôi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới giáo NGƯT - PGS.TS Lương Thị Hồng Vân - Phó viện trưởng Viện Khoa học Sự sống - Đại học Thái Ngun TS Nguyễn Thị Hải trưởng mơn hóa sinh - Viện khoa học sống - Đại học Thái Nguyên tận tình bảo hướng dẫn tơi suốt q trình tơi học tập nghiên cứu Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể cán phịng phân tích hóa học - Viện Khoa học sống - Đại học Thái Nguyên Đặc biệt ThS Nguyễn Thế Cường trưởng phịng phân tích hóa học, kĩ thuật viên Vũ Thị Ánh, Bế Văn Thịnh, Nguyễn Thị Duyên, Dương Thị Khuyên, Nguyễn Thương Tuấn,Thái Thị Ngọc Trâm tận tình giúp đỡ, hướng dẫn tạo điều kiện tốt để tơi hồn thành luận văn này, cho lời khuyên quý báu Tôi trân trọng biết ơn giúp đỡ Tơi xin chân thành cảm ơn thầy cô cán sở đào tạo thuộc Trường Đại học Khoa học - Đại học Thái Ngun Cuối cùng, tơi xin cảm ơn gia đình bạn bè động viên, giúp đỡ suốt trình học tập nghiên cứu Tác giả luận văn MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN iv MỤC LỤC v DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT vii DANH MỤC CÁC BẢNG viii MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục tiêu nghiên cứu Nội dung nghiên cứu Ý n ghĩa đề tài Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đặc điểm sinh học nấm mốc 1.2 Đặc điểm độc tố nấm mốc chất aflatoxin 1.2.1 Độc tố nấm mốc 1.2.2 Đặc điểm chất aflatoxin 1.2.3 Điều kiện sản sinh độc tố aflatoxin 1.2.4 Ảnh hưởng aflatoxin đến nông sản thực phẩm 10 1.2.5 Aflatoxin ảnh hưởng tới người vật ni 11 1.2.6 Quy định hàm lượng aflatoxin thực phẩm thức ăn gia súc 16 1.3 Các phương pháp phân tích hàm lượng aflatoxin 20 1.3.1 Phương pháp lý hóa 20 1.3.2 Phương pháp hóa sinh 22 1.4 Xử lý aflatoxin nông sản phụ phẩm chế biến 23 1.4.1 Phương pháp vật lý 23 1.4.2 Phương pháp hóa học 25 1.4.3 Phương pháp sinh học 26 1.5 Tình hình nghiên cứu aflatoxin giới nước 28 1.5.1 Tình hình nghiên cứu giới 28 1.5.2 Tình hình nghiên cứu nước 29 Chương 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 32 2.1 Vật liệu nghiên cứu 32 2.2 Địa điểm, thời gian nghiên cứu 32 2.3 Hóa chất thiết bị nghiên cứu 33 2.3.1 Hóa chất 33 2.3.2 Thiết bị 33 2.4 Phương pháp nghiên cứu 33 2.4.1 Phương pháp lấy mẫu 33 2.4.2 Phương pháp xử lý mẫu 33 2.4.3 Phương pháp xử lý hàm lượng aflatoxin số loại nông sản thực phẩm 34 2.4.4 Phương pháp phân tích hàm lượng aflatoxin 35 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 40 3.1 Kết khảo sát thực trạng nhiễm aflatoxin số loại nông sản thực phẩm 40 3.1.1 Tỷ lệ nhiễm aflatoxin mẫu phân tích 40 3.1.2 Hàm lượng nhiễm aflatoxin mẫu phân tích .42 3.2 Kết phân tích hàm lượng aflatoxin sau xử lý phương pháp vật lý hóa học 44 3.2.1 Hàm lượng aflatoxin sau xử lý phương pháp vật lý 44 3.2.2 Hàm lượng aflatoxin sau xử lý phương pháp hóa học .48 3.3 So sánh hiệu hai phương pháp xử lý hàm lượng aflatoxin nông sản thực phẩm 51 3.3.1 So sánh hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin B1 sau xử lý hai phương pháp vật lý hóa học 51 3.3.2 So sánh hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin B2 sau xử lý hai phương pháp vật lý hóa học 53 3.3.3 So sánh hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin G1 sau xử lý hai phương pháp vật lý hóa học 54 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .57 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH KHOA HỌC LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN VĂN 58 TÀI LIỆU THAM KHẢO 59 vii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ADN : Acid Deoxyribo nucleic ARN : Acid ribonucleic cs : Cộng FDA : Cục quản lý thực phẩm dược phẩm Hoa Kỳ HPLC : High performance liquid chromatography HPTLC : High performance thin layer chromatography ML : Maximum limit ppb : Parts per bllion PTN : Phịng thí nghiệm QĐ-BYT : Quyết định Bộ Y tế QĐ/BNN : Quyết định Bộ nông nghiệp rADTZ : Recombinant aflatoxin detoxifizym enzyme RIA : Radio Immuno Assay TCVN : Tiêu chuẩn Việt Nam TLC : Thin layer chromatography VKHSS : Viện Khoa học sống WHO : Tổ chức Y tế giới DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1.Tích chất hóa lý số aflatoxin .8 Bảng 1.2 Khả gây ung thư aflatoxin động vật thí nghiệm .14 Bảng 1.3 Qui định hàm lượng tối đa độc tô nấm mốc aflatoxin B1 tổng hàm lượng aflatoxin (B1+B2+G1+G2) tính mg kg thức ăn hỗn hợp hoàn chỉnh cho gia súc gia cầm (ppb) 17 Bảng 1.4 Tiêu chuẩn cho phép hàm lượng aflatoxin thực phẩm 17 Bảng 1.5 Giới hạn aflatoxin số nước theo tiêu chuẩn FDA 19 Bảng 1.6 Các giới hạn tối đa (ML) theo quy định FDA .19 Bảng 1.7 Hàm lượng aflatoxin số nguyên liệu làm thức ăn 31 Bảng 3.1 Tỷ lệ mẫu nhiễm độc tố aflatoxin mâu phân tích 40 Bảng 3.2 Hàm lượng aflatoxin mẫu phân tích 42 Bảng 3.3 Hàm lượng aflatoxin mẫu trước sau xử lý hương pháp vật lý 44 Bảng 3.4 Hiệu xử lý aflatoxin mẫu phân tích phương pháp vật lý 46 Bảng 3.5 Hàm lượng aflatoxin mẫu trước sau xử lý phương pháp hóa học 48 Bảng 3.6 Hiệu xử lý aflatoxin mẫu phân tích phương pháp hóa học 50 Bảng 3.7 So sánh hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin B1 sau xử lý hai phương pháp vật lý hóa học 51 Bảng 3.8 So sánh hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin B2 sau xử lý hai phương pháp vật lý hóa học 53 Bảng 3.9 So sánh hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin G1 sau xử lý hai phương pháp vật lý hóa học 54 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Hình ảnh nấm Aspergillus flavus Aspergillus parasiticus [42], [43] Hình 1.2 Các kiểu cuống bào tử đính Aspergillus [41] Hình 1.3 Cấu trúc phân tử Aflatoxin Hình 2.1 Mẫu cám gạo 32 Hình 2.2 Mẫu khơ đỗ tương 32 Hình 2.3 Mẫu ngô .32 Hình 2.4 Sắc đồ aflatoxin mẫu chuẩn 38 Hình 2.5 Sắc đồ aflatoxin chuẩn nồng độ 5; 10; 20 ppb 38 Hình 2.6 Đường tuyến tính aflatoxin chuẩn 39 Hình 3.1 Biểu đồ tỷ lệ mẫu nhiễm độc tố aflatoxin mẫu phân tích 41 Hình 3.2 Biểu đồ hàm lượng aflatoxin mẫu phân tích 43 Hình 3.3 Biểu đồ thể hàm lượng aflatoxin mẫu phân tích sau xử lý phương pháp vật lý 45 Hình 3.4 Biểu đồ tỷ lệ giảm hàm lượng aflatoxin mẫu phân tích phương pháp vật lý 47 Hình 3.5 Biểu đồ thể hàm lượng aflatoxin mẫu phân tích sau xử lý phương pháp hóa học 49 Hình 3.6 Biểu đồ tỷ lệ giảm hàm lượng aflatoxin mẫu phân tích phương pháp hố học 51 Hình 3.7 Biểu đồ hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin B1 sau xử lý hai phương pháp vật lý hóa học 52 Hình 3.8 Biểu đồ hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin B2 sau xử lý hai phương pháp vật lý hóa học 54 Hình 3.9 Biểu đồ hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin G1 sau xử lý hai phương pháp vật lý hóa học 55 MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Nông sản thực phẩm có chất lượng cao sản phẩm có hàm lượng, thành phần chất dinh dưỡng nhiều cân đối bên cạnh tiêu chuẩn màu sắc, mùi vị, hình thức… Người tiêu dùng ngày ý đến việc liệu sản phẩm có bị nhiễm nấm độc tố nấm mốc hay khơng chúng chứng minh gây hại cho người gia súc Trên giới nay, việc nghiên cứu mức độ nhiễm nấm mốc độc tố nấm lương thực, thực phẩm vấn đề quan trọng nhằm bảo vệ sức khoẻ người vật ni Có nhiều loại độc tố nấm mốc phát Trong đó, aflatoxin độc tố quan tâm nghiên cứu nhiều Aflatoxin tên gọi nhóm chất độc, sản phẩm q trình trao đổi chất số lồi nấm mà chủ yếu loài Aspergillus flavus, Aspergillus parasiticus… Trong đó, phổ biến độc aflatoxin B1, G1, B2 G2, gây bệnh mức vi lượng Aflatoxin có khả gây độc cấp tính mãn tính người động vật Nghiêm trọng nguy hiểm khả gây xơ gan ung thư gan Ngồi aflatoxin cịn có khả phá hủy tế bào thận phận khác, ức chế hệ miễn dịch, gây suy dinh dưỡng, chậm lớn [37] Đã có nhiều cơng trình nghiên cứu mức độ nhiễm nấm mốc độc tố nấm mốc, biện pháp phòng trừ độc tố nấm mốc lương thực, thực phẩm Sự nghiên cứu aflatoxin bắt đầu Anh nghề nuôi gia cầm bị tổn thất nặng nề năm 1960, lúc đầu 10000 gà tây chết bệnh gọi “bệnh gà tây X” (Turkey X disease) Đến năm 1961 người ta tìm chất hoá học độc chất Aflatoxin [14] Ở nước ta, với đặc điểm khí hậu nhiệt đới nóng ẩm, độ ẩm khơng khí thường cao, phương tiện thu hoạch, phơi sấy nông sản kém, kho chứa khơng đảm bảo khơ thống mát điều kiện thuận lợi cho nấm mốc phát triển gây nhiễm độc tố cho nông sản thực phẩm, công tác vệ sinh an toàn lương thực, thực phẩm có tiến rõ rệt ngày ý Số hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Theo Lê Anh Phụng cộng (cs) (2001) [13] từ năm 1970 Nguyễn Phùng Tiến cs nghiên cứu mức nhiễm nấm mốc số lương thực như: Đậu, đỗ, lạc Năm 1996, Nguyễn Thuỳ Châu cs nghiên cứu tình hình nhiễm độc tố nấm ngô như: aflatoxin, fumonixin, achotoxin A, deoxynivalenol nivalenol… biện pháp phòng trừ [3] Để tìm hiểu thêm tình trạng nhiễm độc tố nấm mốc aflatoxin số loại nông sản thực phẩm biện pháp xử lý độc tố, tiến hành đề tài: “Nghiên cứu thực trạng nhiễm độc tố aflatoxin số loại nông sản thực phẩm khu vực miền núi phía Bắc biện pháp xử lý” Mục tiêu nghiên cứu Nghiên cứu thực trạng nhiễm độc tố aflatoxin số loại nông sản thực phẩm có nguồn gốc số địa phương thuộc khu vực phía Bắc đánh giá hiệu biện pháp xử lý aflatoxin mức độ phịng thí nghiệm Nội dung nghiên cứu - Nghiên cứu thực trạng nhiễm aflatoxin số loại nông sản thực phẩm - Dùng hai phương pháp vật lý sử dụng sấy khơ phương pháp hóa học sử dụng khí NH3 để xử lý hàm lượng aflatoxin mẫu nơng sản thực phẩm mức độ phịng thí nghiệm - Đánh giá hiệu việc xử lý mẫu nông sản thực phẩm xác định nhiễm độc tố aflatoxin hai phương pháp nói - So sánh hiệu hai phương pháp vật lý hóa học việc xử lý hàm lượng aflatoxin số loại nông sản thực phẩm Ý n ghĩa đề tài Kết đề tài, góp phần đề biện pháp tốt cho việc xử lý aflatoxin nông sản thực phẩm, từ ứng dụng thực tế nhằm nâng cao cơng tác quản lý vệ sinh an tồn thực phẩm bảo vệ sức khỏe người 61 Aflatoxin B1 Trước xử lý Hàm lượng 100 91.083 Aflatoxin B1 Sau xử lý 90 74.038 Aflatoxin B2 Trước xử lý 80 Aflatoxin B2 Sau xử lý 70 Aflatoxin G1 Trước xử lý 60 39.353 50 Aflatoxin G1 Sau xử lý 35.229 40 30 20 10 16.451 16.009 3.362 4.947 Ngô 2.789 Lạc 9.356 2.076 2.164 Khô đỗ tương 9.554 1.723 Cám gạo Loại mẫu Hình 3.5 Biểu đồ thể hàm lượng aflatoxin mẫu phân tích sau xử lý phương pháp hóa học Các mẫu nhiễm độc tố aflatoxin xử lý phương pháp vật lý hóa học Chúng ta có kết phân tích mẫu nhiễm độc tố aflatoxin sau xử lý phương pháp vật lý Và kết phân tích hàm lượng aflatoxin sau xử lý phương pháp hóa học Các mẫu nhiễm độc tố sau xử lý phương pháp hóa học hàm lượng nhiễm aflatoxin giảm nhiều Hàm lượng aflatoxin B1 ngơ giảm xuống cịn có 3,362 ppb, lạc giảm xuống cịn 2,789 ppb, hàm lượng aflatoxin B1 khơ đỗ tương 2,076 ppb, lạc giảm 1,723 ppb Hàm lượng aflatoxin B2 sau xử lý hàm lượng cịn lại thấp Ở ngơ hàm lượng aflatoxin B2 0,968 ppb, lạc cịn 0,944 ppb, khơ đỗ tương cám gạo hàm lượng nhiễm độc tố aflatoxin B2 0,312 ppb 0,175 ppb Với hàm lượng aflatoxin G1 phát ngô khô đỗ tương sau xử lý hàm lượng giảm đáng kể, ngô hàm lượng nhiễm aflatoxin G1 từ 4,947 ppb xuống cịn ppb.Trung Ở khơ tương xuống cịn 0,062 ppb Số0,26 hóa tâmđỗHọc liệu từ 2,164 ppb giảm http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 62 Như sau xử lý phương pháp hóa học hàm lượng nhiễm aflatoxin mẫu phân tích giảm Nhưng mức độ giảm loại aflatoxin khác Điều làm rõ phân tích tỷ lệ giảm loại dựa vào bảng sau: Bảng 3.6 Hiệu xử lý aflatoxin mẫu phân tích phương pháp hóa học Tỷ lệ giảm (%) Tên mẫu Aflatoxin B1 Aflatoxin B2 Aflatoxin G1 Ngô 96,31 94,12 94,74 Lạc 96,23 94,11 Khô đỗ tương 94,73 96,67 Cám gạo 95,11 98,17 97,13 Tỷ lệ giảm 99 B1 (%) 98 97 96.67 96.31 96.23 96 95 97.13 94.74 94.12 98.17 B2 G1 95.11 94.73 94.11 94 93 92 Ngô Lạc Số hóa Trung tâm Học liệu Khơ đỗ tương Cám gạo Loại mẫu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 63 Hình 3.6 Biểu đồ tỷ lệ giảm hàm lượng aflatoxin mẫu phân tích phương pháp hố học Dựa vào bảng biểu đồ thấy rõ mức độ giảm loại aflatoxin mẫu nông sản, thực phẩm Đối với hàm lượng aflatoxin B1 giảm nhiều ngô đạt 96,31%, lạc giảm 96,23% Ở khô đỗ tương giảm 94,73%, cám gạo tỷ lệ giảm 95,11% Với hàm lượng aflatoxin B2 tỷ lệ giảm cao 98,17% cám gạo, khô đỗ tương tỷ lệ giảm 96,67%, cịn ngơ lạc tỷ lệ giảm gần đạt 94,12% 94,11% Tỷ lệ giảm tương đối cao với hàm lượng aflatoxin G1 đạt 97,13% khô đỗ tương đạt 94,74% ngô Như sau xử lý mẫu phân tích bị nhiễm độc tố phương pháp hóa học hàm lượng độc tố giảm đáng kể, tùy loại aflatoxin mà tỷ lệ giảm khác 3.3 So sánh hiệu hai phương pháp xử lý hàm lượng aflatoxin nông sản thực phẩm Sau xử lý mẫu phân tích hai phương pháp vật lý hóa học Để thấy hiệu xử lý hai phương pháp trên, tiến hành so sánh hàm lượng aflatoxin sau xử lý hai phương pháp với chưa xử lý 3.3.1 So sánh hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin B1 sau xử lý hai phương pháp vật lý hóa học Bảng 3.7 So sánh hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin B1 sau xử lý hai phương pháp vật lý hóa học Đơn vị: ppb Phương pháp vật lý Phương pháp hóa học Số mẫu phân tích Trước (X ) (X ) Ngô 16 91,083 6,216 93,13 3,362 96,31 Lạc 16 74,038 5,305 92,83 2,789 96,23 Loại mẫu xử lý Số hóa Trung tâm Học liệu Sau xử lý Tỷ lệ giảm (%) Sau xử lý (X) http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Tỷ lệ giảm (%) 64 Khô đỗ tương Cám gạo 20 39,353 3,648 90,73 2,076 94,73 16 35,229 3,171 91,00 1,723 95,11 Hàm lượng (ppb) Trước xử lý 100 90 80 70 60 50 40 30 20 Xử lý vật lý 91.083 74.038 Xử lý hóa học 39.353 6.216 3.362 10 Ngô 5.305 2.789 Lạc 35.229 3.648 2.076 Khô đỗ tương 3.171 1.723 Cám gạo Loại mẫu Hình 3.7 Biểu đồ hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin B1 sau xử lý hai phương pháp vật lý hóa học Kết bảng 3.7 biểu đồ hình 3.7 cho thấy, sử dụng phương pháp vật lý hóa học để xử lý hàm lượng aflatoxin B1 nông sản, thực phẩm đem lại hiệu tương đối cao Cụ thể, phương pháp xử lý sấy khơ hàm lượng trung bình aflatoxin B1 mẫu từ 35,229 - 91,083 ppb giảm xuống 3,171 - 6,216 ppb, tỷ lệ giảm đạt từ 90,73% - 93,13% Xử lý phương pháp hóa học hàm lượng trung bình aflatoxin B1 giảm xuống từ 1,723 - 3,362 ppb, đạt tỷ lệ giảm từ 94,73 - 96,31% Trong phương pháp hiệu xử lý phương pháp hóa học sử dụng khí NH3 1,5% cao phương pháp sấy khơ, tỷ lệ giảm trung bình phương pháp sấy khơ 91,92%, tỷ lệ giảm trung bình phương pháp sử dụng khí NH3 95,60% Hiệu quảSốxửhóa lý củaTrung phương 3,67% tâmpháp Học hóa liệu học cao sấy khô http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 3.3.2 So sánh hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin B2 sau xử lý hai phương pháp vật lý hóa học Bảng 3.8 So sánh hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin B2 sau xử lý hai phương pháp vật lý hóa học Đơn vị: ppb Phương pháp vật lý Phương pháp hóa học Số mẫu phân tích Trước xử lý Ngô 13 16,451 3,096 81,18 0,968 94,12 Lạc 14 16,009 2,926 81,72 0,944 94,11 Khô đỗ tương 12 9,356 1,794 80,82 0,312 96,67 Cám gạo 9,554 1,559 83,68 0,175 98,17 Loại mẫu Hàm lƣợng (ppb) 18 16.451 16 14 12 10 3.096 0.968 Sau xử lý (X ) (X) Tỷ lệ giảm (%) Tỷ lệ giảm (%) Sau xử lý (X) Trƣớc xử lý Xử lý vật lý Xử lý hóa học 16.009 9.554 9.356 2.926 0.944 NgơLạc Số hóa Trung tâm Học liệu 1.794 0.312 Khô đỗ tƣơng 1.559 0.175 Cám gạo Loại mẫu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Hình 3.8 Biểu đồ hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin B2 sau xử lý hai phương pháp vật lý hóa học Chúng ta nhận thấy mẫu sau tiến hành xử lý phương pháp sấy khô sử dụng khí NH3 1,5% hàm lượng aflatoxin B2 giảm, mức độ giảm hai phương pháp khác Cụ thể, phương pháp sấy khô hàm lượng aflatoxin B2 trung bình mẫu giảm từ 9,356 - 16,451 ppb xuống 1,559 - 3,096 ppb, tương ứng với từ 81,18 - 83,68% Xử lý khí NH3 giảm xuống từ 0,175 – 0,968 ppb, đạt tỷ lệ giảm từ 94,11 - 98,17% Khi đem so sánh hiệu xử lý hai phương pháp để khử aflatoxin mẫu nhiễm ta thấy, phương pháp xử lý khí NH3 cao 13,92% so với phương pháp sấy khô 3.3.3 So sánh hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin G1 sau xử lý hai phương pháp vật lý hóa học Bảng 3.9 So sánh hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin G1 sau xử lý hai phương pháp vật lý hóa học Đơn vị: ppb Loại mẫu Ngơ Khô đỗ tương Phương pháp vật lý Số mẫu Trước xử phân lý tích (X) (X ) 4,947 0,767 10 2,164 0,183 Sau xử lý Tỷ lệ Phương pháp hóa học Sau xử lý Tỷ lệ (X ) giảm (%) 84,50 0,26 94,74 91,54 0,062 97,13 giảm (%) Hàm lƣợng (ppb) 4.947 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0.767 0.0 Trƣớc xử lý Xử lý vật lý Xử lý hóa học 2.164 0.26 NgơKhơ đỗ tƣơng 0.183 0.062 Loại mẫu Hình 3.9 Biểu đồ hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin G1 sau xử lý hai phương pháp vật lý hóa học Sau xử lý hai phương pháp hàm lượng aflatoxin G1 mẫu ngô khô đỗ tương giảm nhiều Đối với phương pháp sấy khô hàm lượng aflatoxin G1 trung bình giảm từ 2,164 - 4,947 ppb xuống 0,183 - 0,767 ppb, tương ứng với từ 84,50 - 91,54% Xử lý khí NH3 giảm xuống 0,062 - 0,26 ppb tương ứng với từ 94,74 - 97,13% Khi đem so sánh hiệu xử lý aflatoxin mẫu nông sản, thực phẩm chế biến hai phương pháp ta thấy, phương pháp xử lý khí NH3 đạt hiệu cao so với phương pháp sấy khơ 7,91% Tóm lại sau xử lý mẫu nông sản thực phẩm bị nhiễm aflatoxin hai phương pháp vật lý hóa học, tiến hành phân tích lại để xác định hàm lượng aflatoxin mẫu, kết nghiên cứu cho thấy, hiệu xử lý phương pháp hóa học sử dụng khí NH3 cao phương pháp vật lý sấy khô Cụ thể phương pháp sấy khô tỷ lệ giảm trung bình aflatoxin tất mẫu 90,78%, phương pháp xử lý khí NH3 hàm lượng aflatoxin trung bình tất mẫu phân tích giảm 95,70% Khi đem so sánh hiệu xứ lý hai phương pháp với thấy, phương pháp sử dụng khí NH3 đạt hiệu cao phương pháp sấy khô 4,92% KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ I Kết luận Thực trạng nhiễm aflatoxin mẫu phân tích: - Có 68/76 mẫu nhiễm aflatoxin B1 (chiếm tỷ lệ 89,47% số mẫu phân tích); có 47/76 mẫu nhiễm aflatoxin B2 (chiếm tỷ lệ 61,84% số mẫu phân tích); có 19/76 mẫu nhiễm aflatoxin G1 (chiếm tỷ lệ 25% số mẫu phân tích); khơng mẫu nhiễm aflatoxin G2 - Có 68/76 mẫu phân tích nhiễm aflatoxin Trong đó, có 60/68 mẫu nhiễm aflatoxin vượt tiêu chuẩn cho phép Hàm lượng aflatoxin mẫu mức độ cao: có 60/68 mẫu nhiễm aflatoxin B1 vượt tiêu chuẩn Bộ Y tế từ 1,04 - 40,42 lần; có 17/47 mẫu nhiễu aflatoxin B2 vượt tiêu chuẩn Bộ Y tế từ 1,01 - 3,36 lần Hiệu xử lý hàm lượng aflatoxin mẫu phân tích hai phương pháp vật lý sử dụng sấy khô phương pháp hóa học sử dụng khí NH3 1,5% - Xử lý hàm lượng aflatoxin phương pháp vật lý sử dụng sấy khơ phương pháp hóa học sử dụng khí NH3 đạt hiệu cao Xử lý phương pháp sấy khơ hàm lượng B1 giảm trung bình 91,92%; B2 giảm trung bình 81,85%; G1 giảm trung bình 88,02% Xử lý phương pháp hóa học sử dụng khí NH3 tỷ lệ B1 giảm trung bình 95,60%, B2 giảm trung bình 95,77%, G1 giảm trung bình 95,94% - Phương pháp xử lý hóa học sử dụng NH3 1,5% cho hiệu cao phương pháp vật lý sử dụng sấy khô 4,92% II Đề nghị - Kết nghiên cứu bước đầu, cần tiếp tục nghiên cứu để có kết toàn diện khách quan - Các quan chức cần quản lý chặt chẽ vấn đề an toàn thực phẩm địa bàn thành phố Thái Nguyên nói riêng nước nói chung - Có thể ứng dụng hai phương pháp xử lý hàm lượng aflatoxin nói vào thực tiễn sản xuất để xử lý nông sản phụ phẩm chế biến nhiễm độc tố aflatoxin DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH KHOA HỌC LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN VĂN Nguyễn Thị Hải, Vũ Thị Ánh, Nguyễn Thị Duyên, Đào Thuỳ Dương (2013), “Nghiên cứu hàm lượng xử lý aflatoxin nông sản thực phẩm phương pháp vật lý hóa học”, Hội nghị Cơng nghệ Sinh học Tồn quốc năm 2013 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu tiếng Việt Bộ Nông nghiệp Phát triển Nông thôn (2001), Quy định hàm lượng tối đa độc tố nấm mốc aflatoxin kilogam (kg) thức ăn hỗn hợp hoàn chỉnh cho gia súc, gia cầm, Quyết định số 104/2001/QĐ/BNN ngày 31 tháng 10 năm 2001 Bộ Y tế Việt Nam (2007), Quy định giới hạn tối đa nhiễm sinh học hóa học thực phẩm, Quyết định số 46/2007/QĐ-BYT ngày 19 tháng 12 năm 2007 Nguyễn Thùy Châu (1996), Nghiên cứu mức độ nhiễm nấm mốc sinh độc tố (Mycotoxin) ngô, gạo Việt Nam biện pháp phòng trừ, Luận văn Phó tiến sỹ Khoa học Sinh học, Bộ Giáo dục Đào tạo, Trường đại học Khoa Học Tự Nhiên Nguyễn Thùy Châu (2009), Nghiên cứu sản xuất số chế phẩm vi sinh để phòng chống nấm sinh độc tố độc tố nấm mốc aflatoxin ngô, lạc ochratoxin cà phê, Báo cáo tổng kết đề tài khoa học cấp Bộ Lê Doãn Diên, Nguyễn Bá Trinh (1981), Nâng cao chất lượng nông sản, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, trang 56 - 58 Bùi Xuân Đồng, Hà Huy Kế (1999), Nấm mốc phương pháp phòng chống, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội, trang 14 - 136 Đậu Ngọc Hào (1996), Nghiên cứu ứng dụng chế phẩm Mycofix plus để làm vô hoạt aflatoxin thức ăn chăn nuôi, Báo cáo tổng kết đề tài khoa học cấp Nhà nước Đâu Ngọc Hào, Lê Thị Ngọc Diệp (2003), Nấm mốc độc tố aflatoxin thức ăn chăn nuôi, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội, trang 53 - 198 Đậu Ngọc Hào (1992), Nghiên cứu hoàn thiện hệ thống nấm mốc, độc tố nấm mốc thức ăn nguyên liệu thức ăn hỗn hợp cho gia súc gia cầm, Báo cáo tổng kết đề tài khoa học cấp Nhà nước 10 Đậu Ngọc Hào (1995), Nghiên cứu xác định tác hại hệ nấm mốc, vi khuẩn gây độc thức ăn, nguyên liệu chế phẩm khác làm thức ăn chăn ni, xây dựng biện pháp phịng chống hạn chế ô nhiễm điều kiện chăn nuôi nhiệt đới, Nhà xuất Nông Nghiệp, trang - 72 11 Nguyễn Đức Lượng (2003), Vệ sinh an toàn thực phẩm, Nhà xuất Khoa Học kĩ thuật Thành phố Hồ Chí Minh, trang 15 - 69 12 Lê Đức Ngoan, Nguyễn Thị Hoa Lý, Dư Thị Thanh Hằng (2005), Giáo trình thức ăn gia súc, Nhà xuất Nông nghiệp Hà Nội, trang 32 - 129 13 Lê Anh Phụng ctv (2001), Khảo sát tình hình nhiễm aflatoxin số bánh dầu khu vực phía nam, Tạp chí Khoa học kĩ thuật nơng lâm nghiệp, số 4, trang 69 14 Trương Quốc Phú (2005), Ảnh hưởng aflatoxin lên tỉ lệ sống tốc độ tăng trưởng cá Tra, Báo cáo tổng kết đề tài khoa học cấp Bộ, Trường Đại học Cần Thơ, Trang 1-5 15 Phạm Hồng Sơn (2005), Giáo trình Vi sinh vật học thú y, Nhà xuất Đại học Huế, trang 216 - 219 16 Võ Văn Thanh, 2010, Xác định aflatoxin nông sản thực phẩm, Báo cáo tổng kết đề tài khoa học, trang - 17 Tiêu chuẩn Việt Nam (2007), Phương pháp lấy mẫu, TCVN 4325: 2007 (ISO 6497: 2002), 18 Tiêu chuẩn Việt Nam (2001), Phương pháp xử lý mẫu, TCVN 6952: 2001 (ISO 6498: 2002) 19 Tiêu chuẩn Việt Nam (2007), Phương pháp xác định hàm lượng aflatoxin, TCVN 7596: 2007 (ISO 16050: 2003) 20 Nguyễn Lê Trang, 2003 Aflatoxin B1: sản xuất giá lực miễn dịch bắt aflatoxin(s) Thuyết minh đề tài nghiên cứu Khoa học Công nghệ cấp bộ, phịng Miễn dịch, viện Pasteur, TP Hồ Chí Minh, Việt Nam 21 Phan Thị Bích Trâm, Nguyễn Văn Bá (2004), “Nghiên cứu mycotoxin bắp tồn trữ”, Tạp chí nghiên cứu khoa học, số 2, trang 116 - 124 22 Vũ Hướng Văn (2007), Thực phẩm mốc, loại thức ăn nguy hiểm, Báo Y khoa Việt Nam 23 http://www.ykhoa.net/duoc/dinhduong/05_0101.htm Nguyễn Thị Cẩm Vi (2010), Aflatoxin - hiểm họa từ nông sản nhiễm mốc, Báo cáo khoa học ứng dụng, số 10, trang 1- II Tài liệu Dịch: 24 Claude Moreau (1980), Nấm mốc độc thực phẩm (Đặng Hồng Miên dịch), Nxb Khoa học kỹ thuật, trang 70 - 155 25 Châu Vĩnh Thi (2009), Trung Quốc nghiên cứu sản xuất loại men tái tổ hợp có khả khử độc tố aflatoxin, Viện Y tế cộng đồng Thành Phố Hồ Chí Minh 26 Van Egmond H.P (1995), Xác định aflatoxin B1 thức ăn chăn nuôi, phụ phẩm chất nhiễm bẩn III Tài liệu tiếng Anh: 27 Bashir Mahmood Bhatti, Tanzeela Talat and S Rozina (2001), Estimation of aflatoxin B1 in feed ingredients and compound poultry feeds, Pakistan Veterinary Journal, pp 57 - 60 28 Cecil Hammond (2009) Treating Aflatoxin-Contaminated Corn with Ammonia, Circular 885, pp - 29 Chavez – Sanchez, C A M Palacios anh I.O.Moreno (1994), Pathological effects of feeding young Oreochromis niloticus diets supplemented with different levels of aflatoxin B1, Aquaculture 127, pp 49 - 60 30 Carnaghan R.B.A (1967), Hepatic tumours and other chronic liver changes in rats following a single oral administration of aflatoxin, in USA , pp 811 - 813 31 Diab A S., S M M Abuzead, M M Abou El Maged (2000), Effect of Aflatoxin B1 on reproductive traits in Oreochromis niloticus and Orechromis aureus and its control Paper presented at the Fifth International Symposium on Tilapia in Aquaculture, Phillipines pp 1- 32 Menbez Albores, Martinez Bustos (2009), “Effect of citric on aflatoxin degradion and on functional and textural propertion of extruded sorghum”, Anim sci technol, 150, pp 316 - 329 33 Nabil Saad (2004), Aflatoxin: Occurrence and Health Risks, http://www.ansci.cornell.edu/plants/toxicagents/aflatoxin/aflatoxin.html 34 Sagado Transido, Menbez Albores, Moreno Martinez (2011), “Effect of citric acid supplementend diets on aflatoxin degradation, growth performance and serum parameters in broiler chickens”, Arch med vet, 43, pp 215 - 222 35 Smith, Tara (2005) "A Focus on Aflatoxin Contamination" United States National Agricultural Library, Food Safety Research Information Office 36 Stubblefleld R D., Shotwell O L , Hesseltine C W., Smith M L., and Hall H H (1967), Production of Aflatoxin on Wheat and Oats: Measurement with a Recording Densitometer, Appl Microbiol, 15(1), pp 186 - 190 37 Reddy KRN, Salleh B, Saad B, Abbas HK, Abel CA, and Shier WT, (2010), An overview of mycotoxin contamination in foods and its implications for human health Toxin Reviews, 29(1),pp - 26 38 Roberts R.J (2002), “Fish Nutrition”, pp 454 - 505 39 Wheater P.R., A Stevens, J S Lowe (1985), Basis histopathology, Churchill Livingstone, Edinburgh London Melbourne and New York, pp 217 40 Batan EI (1986), Aflatoxin in Maize, A Proceedings of the Workshop, Mexico, pp 266 IV Tài liệu Internet: 41 Nguyễn Văn Bá (2009), Đại cương nấm mốc, http://cnx.org/content/m30247/latest/ 42 http://www.doctorfungus.org/thefungi/Aspergillus_flavus.php Số hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 43 Zeu (2013), Control de Aflatoxina B1 y M1, http://www.zeulab.com/blog/control-de-aflatoxina-b1-y-m1/ ... aflatoxin số loại nông sản thực phẩm khu vực miền núi phía Bắc biện pháp xử lý? ?? Mục tiêu nghiên cứu Nghiên cứu thực trạng nhiễm độc tố aflatoxin số loại nơng sản thực phẩm có nguồn gốc số địa phương... nivalenol… biện pháp phịng trừ [3] Để tìm hiểu thêm tình trạng nhiễm độc tố nấm mốc aflatoxin số loại nông sản thực phẩm biện pháp xử lý độc tố, tiến hành đề tài: ? ?Nghiên cứu thực trạng nhiễm độc tố aflatoxin. .. thuộc khu vực phía Bắc đánh giá hiệu biện pháp xử lý aflatoxin mức độ phịng thí nghiệm Nội dung nghiên cứu - Nghiên cứu thực trạng nhiễm aflatoxin số loại nông sản thực phẩm - Dùng hai phương pháp