Xác định một số đặc tính sinh học của vi khuẩn Pasteurella Multocida, streptococcus Suis gây viêm phổi ở lợn tại Bắc Giang và biện pháp phòng trị

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TRƢƠNG QUANG HẢI XÁC ĐỊNH MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI KHUẨN PASTEURELLA MULTOCIDA, STREPTOCOCCUS SUIS GÂY VIÊM PHỔI Ở LỢN TẠI BẮC GIANG VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60 62 50 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS. Nguyễn Quang Tính Thái Nguyên, năm 2012 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn này là hoàn toàn trung thực, chưa hề sử dụng cho bảo vệ một học vị nào. Mọi thông tin, tài liệu trích dẫn trong luận văn đã được ghi rõ nguồn gốc. Thái Nguyên, tháng 08 năm 2012 Tác giả luận văn Trƣơng Quang Hải Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ii LỜI CẢM ƠN Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo Viện Thú y Quốc gia, Phòng Quản lý và Đào tạo sau đại học, khoa Chăn nuôi Thú y- Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, Chi cục Thú y tỉnh Bắc Giang đã tạo điều kiện và giúp tôi hoàn thành tập luận văn này. Hoàn thành luận văn này, ngoài sự cố gắng của bản thân, tôi luôn nhận được sự hướng dẫn tận tình, đầy trách nhiệm và hết lòng vì khoa học của các thầy: TS. Nguyễn Quang Tính, GS.TS. Nguyễn Quang Tuyên, PGS.TS. Cù Hữu Phú. Tôi xin trân trọng cảm ơn TS. Hoàng Đăng Huyến, Ths. Lê Văn Dương- Chi cục Thú y tỉnh Bắc Giang và tập thể cán bộ Bộ môn vi trùng - Viện Thú y Quốc gia đã tạo điều kiện thuận lợi nhất cho tôi hoàn thành tập luận văn. Xin chân thành cảm ơn các đồng chí cán bộ Trạm Thú y các huyện Hiệp Hòa, Tân Yên, Việt Yên; cảm ơn các đồng nghiệp Thú y viên cơ sở, các hộ chăn nuôi thuộc 9 xã Đức Thắng, Lương Phong, Hoàng Lương, Việt Ngọc, Ngọc Châu, Cao Xá, Tăng Tiến, Bích Sơn, Tự Lạn. Tôi cũng xin cảm ơn bạn bè, đồng nghiệp và đặc biệt biết ơn gia đình đã luôn tạo điều kiện và giúp đỡ tôi trong suốt quá trình thực hiện luận văn này. Thái Nguyên, tháng 10 năm 2012 Tác giả luận văn Trƣơng Quang Hải Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG vii DANH MỤC CÁC HÌNH ix MỞ ĐẦU 1 1. Tính cấp thiết của đề tài 1 2. Mục tiêu nghiên cứu 2 3. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài 2 Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 1.1. Một số hiểu biết cơ bản về P. multocida và S. suis gây bệnh viêm phổi ở lợn 3 1.1.1. Vi khuẩn P. multocida và bệnh viêm phổi do P. multocida gây ra ở lợn 3 1.1.2. Vi khuẩn S. suis và bệnh liên cầu khuẩn do S. suis gây ra ở lợn 8 1.2. Những nghiên cứu trong và ngoài nước về vi khuẩn P. multocida và S. suis về bệnh viêm phổi ở lợn 15 1.2.1. Vi khuẩn P. multocida 15 1.2.2. Vi khuẩn S. suis 17 1.3. Tình hình dịch bệnh trên đàn lợn của tỉnh Bắc Giang 21 1.3.1. Một số đặc điểm tự nhiên ảnh hưởng đến bệnh viêm phổi ở lợn 21 1.3.2. Tình hình dịch bệnh trên đàn lợn 22 Chƣơng 2: ĐỐI TƢỢNG, NGUYÊN LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.1. Nội dung nghiên cứu 23 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iv 2.2. Đối tượng, địa điểm và thời gian nghiên cứu 23 2.2.1. Đối tượng nghiên cứu 23 2.2.2. Địa điểm nghiên cứu 23 2.2.3. Thời gian nghiên cứu 23 2.3. Nguyên liệu dùng trong nghiên cứu 23 2.3.1. Mẫu bệnh phẩm 23 2.3.2. Các loại môi trường, hoá chất 24 2.3.3. Động vật thí nghiệm 24 2.4. Phương pháp nghiên cứu 24 2.4.1. Phương pháp nghiên cứu dịch tễ 24 2.4.2. Thu thập mẫu và phân lập vi khuẩn 27 2.4.3. Phương pháp kiểm tra các đặc tính sinh hoá và khả năng lên men đường của các chủng vi khuẩn phân lập được 29 2.4.4. Phương pháp xác định serotype của các chủng vi khuẩn phân lập được 31 2.4.5. Phương pháp xác định độc lực của các chủng vi khuẩn phân lập được 34 2.4.6. Phương pháp xác định khả năng mẫn cảm với kháng sinh của các chủng vi khuẩn phân lập được 34 2.4.7. Xây dựng phác đồ điều trị bệnh viêm đường hô hấp, viêm phổi ở lợn tại tỉnh Bắc Giang 36 2.4.8. Phương pháp xử lý số liệu 37 Chƣơng 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 38 3.1. Kết quả nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh viêm phổi ở lợn tại tỉnh Bắc Giang 38 3.1.1. Tỷ lệ lợn mắc bệnh và chết do viêm phổi tại một số huyện của tỉnh Bắc Giang 38 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn v 3.1.2. Tỷ lệ lợn mắc bệnh và chết do viêm phổi theo mùa vụ tại một số huyện của tỉnh Bắc Giang 41 3.1.3. Tỷ lệ lợn mắc bệnh và chết do viêm phổi theo lứa tuổi tại một số huyện của tỉnh Bắc Giang 44 3.2. Kết quả nghiên cứu phân lập, xác định một số đặc tính gây bệnh của vi khuẩn P. Multocida và S. suis gây viêm phổi ở lợn. 46 3.2.1. Kết quả phân lập vi khuẩn S. suis và P. multocida từ mẫu bệnh phẩm lợn mắc bệnh viêm phổi tại Bắc Giang 46 3.2.2. Kết quả giám định một số đặc tính sinh học của các chủng vi khuẩn S. suis và P. multocida phân lập được 48 3.2.3. Kết quả xác định serotype của các chủng vi khuẩn S. suis và P. multocida phân lập được 52 3.2.4. Kết quả kiểm tra độc lực của vi khuẩn S. suis và P. multocida phân lập được 57 3.2.5. Kết quả xác định tính mẫn cảm kháng sinh của các chủng S. suis và P. multocida phân lập được 60 3.3. Kết quả thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh viêm đường hô hấp ở lợn 61 KẾ T LUẬ N 65 TÀI LIỆU THAM KHẢO 65 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn vi DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT 1 ADN Acid Deoxyribo Nucleic 2 AGID Agargel Immuno Diffuse 3 A. pleuropneumoniae Actinobacillus pleuropneumoniae 4 B. bronchiseptica Bordetella bronchiseptica 5 BG Bắc Giang 6 cs Cộng sự 7 DNA Deoxyribonucleic Acid 8 DNT Dermonecrotic Toxin 9 GLYG Glycogen 10 HH Hiệp Hòa 11 HIP Acid hippuric 12 M. hyopneumoniae Mycoplasma hyopneumoniae 13 MP- PCR Multiplex - Polymerase Chain Reaction 14 LAP Leucine AminoPeptidase 15 NIN Ninhydrin 16 PAL Alkaline Phosphatase 17 PCR Polymerase Chain Reaction 18 P. multocida Pasteurella multocida 19 PYRA Pyrrolidonyl Arylamidase 20 RR Relative Risk 21 S. suis Streptococcus suis 22 TY Tân Yên 23 VP Voges Prokauer 24 VY Việt Yên 25 GAL -Galactosidase 26 GUR -Glucuronidase 27 GAL -Galactosidase Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1. Trình tự các cặp mồi dùng để xác định serotype A, B, D của vi khuẩn P. multocida 32 Bảng 2.2. Trình tự các cặp mồi dùng để xác định các serotype 1, 2, 7 và 9 của vi khuẩn S. suis 33 Bảng 2.3. Tiêu chuẩn đánh giá mức độ mẫn cảm và kháng kháng sinh theo NCCLS (1999) 35 Bảng 3.1. Tỷ lệ lợn mắc bệnh và chết do viêm phổi tại một số huyện 38 Bảng 3.2. So sánh nguy cơ mắc viêm phổi ở lợn giữa các huyện 40 Bảng 3.3. Tỷ lệ lợn mắc bệnh và chết do viêm phổi theo mùa vụ 41 Bảng 3.4. So sánh nguy cơ lợn mắc viêm phổi giữa các mùa 43 Bảng 3.5. Tỷ lệ lợn mắc bệnh và chết do viêm phổi theo lứa tuổi 44 Bảng 3.6. So sánh nguy cơ mắc viêm phổi giữa các lứa tuổi lợn 45 Bảng 3.7. Kết quả phân lập vi khuẩn S. suis và P. multocida từ mẫu bệnh phẩm lợn mắc bệnh viêm phổi các lứa tuổi khác nhau 46 Bảng 3.8. Kết quả kiểm tra một số đặc tính sinh học của các chủng S. suis phân lập được 49 Bảng 3.9. Kết quả xác định một số đặc tính sinh vật hóa học của các chủng vi khuẩn S. suis phân lập được bằng hệ thống API 20 Strep 50 Bảng 3.10. Kết quả giám định một số đặc tính sinh học của các chủng vi khuẩn P. multocida phân lập được 52 Bảng 3.11. Kết quả xác định serotype của các chủng S. suis phân lập được 53 Bảng 3.12. Kết quả xác định serotype của các chủng vi khuẩn P.multocida phân lập được bằng phản ứng PCR 55 Bảng 3.13. Kết quả kiểm tra độc lực của các chủng vi khuẩn S. suis phân lập được trên chuột bạch 57 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn viii Bảng 3.14. Kết quả kiểm tra độc lực của các chủng vi khuẩn P. multocida phân lập được 59 Bảng 3.15. Kết quả xác định tính mẫn cảm kháng sinh của các chủng vi khuẩn phân lập được 60 Bảng 3.16. Kết quả thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh viêm phổi cho lợn nuôi tại Bắc Giang 62 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ix DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ, HÌNH Biểu đồ 3.1: Thể hiện tỷ lệ mắc bệnh và chết do viêm phổi tại một số huyện của tỉnh Bắc Giang 39 Biểu đồ 3.2: Tỷ lệ lợn mắc bệnh và chết do viêm phổi theo mùa vụ 42 Biểu đồ 3.3: Thể hiện tỷ lệ lợn mắc bệnh và chết do viêm phổi theo lứa tuổi 45 Biểu đồ 3.4: Kết quả phân lập vi khuẩn S. suis và P. multocida từ mẫu bệnh phẩm lợn mắc bệnh viêm phổi các lúa tuổi khác nhau 48 Hình 1: Các sản phẩm của phản ứng PCR sau quá trình điện di để xác định serotype của vi khuẩn S. suis. 54 Hình 2: Kết quả của phản ứng PCR định type vi khuẩn P. multocida 56 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn [...]... đại học, Khoa Chăn nuôi Thú y Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, dưới sự hướng dẫn của thầy giáo Tiến sĩ Nguyễn Quang Tính chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: Xác định một số đặc tính sinh học của vi khuẩn Pasteurella multocida, Streptococcus suis gây vi m phổi ở lợn tại Bắc Giang và biện pháp phòng trị 2 Mục tiêu nghiên cứu - Xác định một số đặc điểm dịch tễ hội chứng vi m phổi lợn tại một số. .. tỉnh Bắc Giang; - Phân lập, xác định một số đặc tính sinh học của các chủng vi khuẩn P multocida và S suis ở lợn mắc bệnh vi m phổi; - Xây dựng và đề xuất phác đồ điều trị bệnh vi m đường hô hấp, vi m phổi ở lợn đạt hiệu quả cao 3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài - Đề tài là một công trình nghiên cứu có hệ thống, lý luận gắn liền với thực tiễn sản xuất, xác định được một số đặc tính của vi khuẩn. .. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nội dung nghiên cứu - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh vi m phổi ở lợn do 2 loại vi khuẩn P multocida, S suis gây ra tại một số huyện của tỉnh Bắc Giang từ tháng 8/2011 đến tháng 8/2012 - Phân lập, xác định một số đặc tính sinh học của các chủng vi khuẩn P multocida và S suis - Xác định khả năng mẫn cảm với kháng sinh của các chủng vi khuẩn P multocida và S suis phân... não, khớp xương và các mô khác (Lê Văn Tạo, 2005) [15] Vi khuẩn S suis là một trong số các tác nhân gây bệnh quan trọng ở lợn, là nguyên nhân gây ra bệnh ở các thể cấp tính như bại huyết, vi m não, vi m màng trong tim, vi m khớp, vi m phổi, thường dẫn đến chết ở lợn, đặc biệt là giai đoạn lợn đã cai sữa và lợn trưởng thành Bệnh do vi khuẩn này gây Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên... lại vi khuẩn P multocida - Phòng bệnh: hiện nay đã có một số vắc xin vô hoạt dùng cho vi c phòng bệnh vi m phổi do Pasteurella Một vài thông báo gần đây với vắc xin chống lại vi khuẩn P multocida, nhưng không cho kết quả chống lại tính tương đồng Ở Vi t Nam, Cù Hữu Phú và cs (2005) [13] đã thử nghiệm vắc xin phòng bệnh vi m phổi của lợn do một số loại vi khuẩn gây ra trong đó có vi khuẩn P multocida Vi c... Bệnh do vi khuẩn S suis gây ra ở lợn mọi lứa tuổi, nhưng thường gặp nhất ở giai đoạn 3 - 16 tuần tuổi do lợn thời kỳ sau cai sữa trở nên đặc biệt mẫn cảm với vi khuẩn này (Lamont và cs, 1980) [44] Vi khuẩn S suis là nguyên nhân gây ra các thể bệnh như vi m phế quản - phổi, vi m màng phổi và vi m phổi ở các lứa tuổi của lợn (Sanford và Tilker, 1982 [53], Erickson và cs, 1984 [29]) Các triệu chứng của bệnh... sau cai sữa vài tuần Đặc trưng lâm sàng của bệnh là nhiễm trùng huyết, vi m màng não, vi m khớp và vi m phế quản phổi Đặc biệt S suis type 2 có thể gây bệnh cho người Thể nhiễm trùng huyết và vi m não có dịch (thường thấy ở lợn từ 2 - 3 tháng tuổi); thể vi m đường hô hấp (ở lợn từ 2 tuần tuổi đến 2 tháng tuổi); thể vi m âm đạo, tử cung (ở lợn cái hậu bị và lợn mang thai); thể vi m vú (ở lợn đang nuôi... phác đồ điều trị bệnh vi m đường hô hấp, vi m phổi ở lợn 2.2 Đối tƣợng, địa điểm và thời gian nghiên cứu 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu - Lợn mắc bệnh vi m phổi nuôi tại tỉnh Bắc Giang - Vi khuẩn P multocida và S suis gây bệnh vi m phổi ở lợn 2.2.2 Địa điểm nghiên cứu - Địa bàn nghiên cứu: Một số trang trại, hộ gia đình chăn nuôi lợn tại các huyện Hiệp Hòa, Tân Yên, Vi t Yên thuộc tỉnh Bắc Giang - Địa điểm... do một hay nhiều nguyên nhân kết hợp với nhau hoặc tạo điều kiện cho nguyên nhân thứ phát gây bệnh làm cho đặc điểm của bệnh đường hô hấp rất đa dạng Trong số đó phải kể đến bệnh vi m phổi ở lợn do các loại vi khuẩn như: Pasteurella multocida (P muiltocida) và Streptococcus suis (S suis) gây ra Do đó, vi c nghiên cứu một cách toàn diện về vi khuẩn P multocida và S suis gây vi m phổi ở lợn tại tỉnh Bắc. .. lệ lợn mắc vi m phổi (%) = x 100 Tổng số lợn theo dõi Số lợn mắc vi m phổi theo độ tuổi Tỷ lệ mắc vi m phổi theo độ tuổi (%) = x 100 Tổng số lợn theo độ tuổi được theo dõi Số lợn chết do vi m phổi Tỷ lệ chết do vi m phổi (%) = x 100 Tổng số lợn mắc vi m phổi Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 26 2.4.1.4 Phương pháp xác định nguy cơ tương đối (RR) Dùng chỉ tiêu . multocida và S. suis gây bệnh vi m phổi ở lợn 3 1.1.1. Vi khuẩn P. multocida và bệnh vi m phổi do P. multocida gây ra ở lợn 3 1.1.2. Vi khuẩn S. suis và bệnh liên cầu khuẩn do S. suis gây ra ở lợn. tại Bắc Giang và biện pháp phòng trị . 2. Mục tiêu nghiên cứu - Xác định một số đặc điểm dịch tễ hội chứng vi m phổi lợn tại một số huyện thuộc tỉnh Bắc Giang; - Phân lập, xác định một số. đặc tính gây bệnh của vi khuẩn P. Multocida và S. suis gây vi m phổi ở lợn. 46 3.2.1. Kết quả phân lập vi khuẩn S. suis và P. multocida từ mẫu bệnh phẩm lợn mắc bệnh vi m phổi tại Bắc Giang