Vai trò của escherrichia coli, salmonella trong hội chứng tiêu chảy ở lợn tại tỉnh đắc lắc, biện pháp phòng trị
BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI NGUYỄN CẢNH TỰ VAI TRÒ CỦA ESCHERICHIA COLI, SALMONELLA TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở LỢN TẠI TỈNH ðĂK LĂK, BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ Chuyên ngành: Vi sinh vật học Thú y Mã số: 62 62 50 10 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SỸ NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI – 2011 BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI NGUYỄN CẢNH TỰ VAI TRÒ CỦA ESCHERICHIA COLI, SALMONELLA TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở LỢN TẠI TỈNH ðĂK LĂK, BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ Chuyên ngành: Vi sinh vật học Thú y Mã số: 62 62 50 10 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SỸ NÔNG NGHIỆP Người hướng dẫn khoa học: 1. PGS.TS: Trương Quang 2. PGS.TS: Phùng Quốc Chướng HÀ NỘI – 2011 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp……………………………. i LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan ñây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các số liệu và kết quả nghiên cứu là trung thực. Mọi trích dẫn ñều ñược chỉ rõ nguồn gốc. Các số liệu và kết quả của nghiên cứu này chưa ñược ai công bố và sử dụng ñể bảo vệ bất kỳ học vị nào . Ký tên Nguyễn Cảnh Tự Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp……………………………. ii LỜI CÁM ƠN Tôi vô cùng biết ơn và tỏ lòng kính trọng sâu sắc ñến PGS. TS. Trương Quang, PGS. TS. Phùng Quốc Chướng - những người thầy ñã tận tình, chu ñáo hướng dẫn và giúp ñỡ tôi hoàn thành luận án. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn ñối với sự ñộng viên, giúp ñỡ nhiệt tình của: - TS YGhi Niê – Giám ñốc, lãnh ñạo và cán bộ, công viên chức Sở Khoa học và Công nghệ tỉnh ðăk Lăk. - Các thầy cô giáo và các anh, các chị Khoa Thú y, Viện ðào tạo sau ðại học - Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội. - Cán bộ, nhân viên Khoa Nông Lâm nghiệp - Trường ðại học Tây Nguyên. - Lãnh ñạo và cán bộ, nhân viên Cục Thú Y - Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn. - GS. TSKH. Hồ Văn Nam; GS.TS. Nguyễn Như Thanh; PGS.TS. Phan Văn Lục. Xin chân thành cám ơn tất cả bạn bè, ñồng nghiệp và người thân ñã giúp ñỡ và ñộng viên tôi vượt qua khó khăn ñể hoàn thành công trình nghiên cứu này. Hà Nội, tháng 8 năm 2011. Tác giả Nguyễn Cảnh Tự Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp……………………………. iii MỤC LỤC LỜI CAM ðOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC .iii CÁC CHỮ VIẾT TẮT TRONG LUẬN ÁN .vii DANH MỤC CÁC BẢNG viii DANH MỤC HÌNH . x MỞ ðẦU . 1 TÍNH CẤP THIẾT CỦA ðỀ TÀI 1 MỤC TIÊU CỦA ðỀ TÀI . 2 Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA ðỀ TÀI . 2 NHỮNG ðÓNG GÓP MỚI CỦA ðỀ TÀI . 3 CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 1.1. CÁC GIỐNG LỢN VÀ TÌNH HÌNH CHĂN NUÔI LỢN Ở ðĂK LĂK……………………… …………………………………… 4 1.1.1. Giống lợn Sóc (ðê)……………………………………………… .4 1.1.2. Giống lợn rừng…………………………………………………… 5 1.2. HỆ VI KHUẨN ðƯỜNG RUỘT CỦA GIA SÚC…………………….6 1.3. NGUYÊN NHÂN GÂY TIÊU CHẢY……………………………… .8 1.3.1. Nguyên nhân do vi sinh vật……………………………………… 8 1.3.2. Nguyên nhân do ký sinh trùng………………………………… 13 1.3.3. Nguyên nhân do nấm mốc…….………………………………….14 1.3.4. Nguyên nhân khác……………………………………………… .15 1.4. VAI TRÒ CỦA E.COLI VÀ SALMONELLA TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở LỢN…………………………………………….….17 1.4.1. Vi khuẩn E. coli và vai trò của chúng trong hội chứng tiêu chảy ở lợn …………………………………………………… .17 1.4.2 . Vi khuẩn Salmonella và vai trò của chúng trong hội chứng tiêu chảy ở lợn…………………………………………………… .28 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp……………………………. iv 1.5. BIỆN PHÁP PHÒNG VÀ ðIỀU TRỊ HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY DO E.COLI VÀ SALMONELLA GÂY RA 41 1.5.1. Phòng bệnh…………………………………………………….… 41 1.5.2. ðiều trị…………………………………………………………… 45 CHƯƠNG 2. ðỐI TƯỢNG - NỘI DUNG – NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU…………………………………….48 2.1. ðỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU………………………………….… …48 2.2. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU………………………………………….48 2.2.1. ðiều tra tình hình hội chứng tiêu chảy ở ñàn lợn nuôi tại ðăk Lăk…….…………… ……………………………….…… .48 2.2.2. Xác ñịnh số lượng vi khuẩn hiếu khí, E.coli và Salmonella/gam phân ở lợn bị tiêu chảy và không bị tiêu chảy………….…………48 2.2.3. Xác ñịnh yếu tố gây bệnh của các chủng E.coli, Salmonella spp phân lập ñược ở lợn bị tiêu chảy và không bị tiêu chảy…….…… … 48 2.2.4. Xác ñịnh ñộ mẫn cảm của vi khuẩn E.coli, và Salmonella spp phân lập ñược ở lợn bị tiêu chảy với một số loại kháng sinh….….48 2.2.5. ðiều trị hội chứng tiêu chảy ở lợn nuôi tại ðăk Lăk bằng kháng sinh có tác dụng tốt với E. coli và Salmonella spp dựa vào kết quả kháng sinh ñồ ………….…………………… …………………48 2.3. NGUYÊN LIỆU ……………….…………………………………… 49 2.4. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU…………………………………….49 2.4.1. Phương pháp chọn mẫu và lấy mẫu ………………………………49 2.4.2. ðiều tra tình hình hội chứng tiêu chảy ở ñàn lợn nuôi tại ðăk Lăk…………… .…… ………………………………….50 2.4.3. Xác ñịnh số lượng vi khuẩn hiếu khí, E.coli và Salmonella/gam phân …………………………… .………… ………………….50 2.4.4. Phương pháp xác ñịnh yếu tố gây bệnh của E.coli và Salmonella spp phân lập ñược………….… .………………………………… .…… 51 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp……………………………. v 2.4.5. Phương pháp xác ñịnh ñộ mẫn cảm của vi khuẩn E. coli và Salmonella spp phân lập ñược ở lợn bị tiêu chảy với một số loại kháng sinh thường dùng….…………………………………………… 55 2.4.6. ðiều trị hội chứng tiêu chảy ở lợn nuôi tại ðăk Lăk ……… .57 2.4.7. Xử lý số liệu…………………………………………….…………57 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN……….…… 58 3.1. KẾT QUẢ ðIỀU TRA TÌNH HÌNH HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở ðÀN LỢN NUÔI TẠI ðĂK LĂK…………….………….………….58 3.1.1. Kết quả ñiều tra tình hình hội chứng tiêu chảy ở các giống lợn… 58 3.1.2. Kết quả ñiều tra tình hình hội chứng tiêu chảy ở lợn các lứa tuổi….……………………………………………… .……….60 3.2. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU SỰ BIẾN ðỘNG VỀ SỐ LƯỢNG VI KHUẨN HIẾU KHÍ, E.COLI VÀ SALMONELLA/GAM PHÂN LỢN ……………………………………………………….62 3.2.1. Số lượng vi khuẩn hiếu khí, E.coli và Salmonella/gam phân lợn ở các lứa tuổi… .………… ……… .……………………….62 3.2.2. Kết quả xác ñịnh số lượng vi khuẩn hiếu khí, E. coli và Salmonella/ gam phân ở ba giống lợn…………………………………………. . 70 3.3. KẾT QUẢ XÁC ðỊNH YẾU TỐ GÂY BỆNH CỦA CÁC CHỦNG E.COLI VÀ SALMONELLA SPP PHÂN LẬP ðƯỢC… .73 3.3.1. Kết quả xác ñịnh yếu tố bám dính F4, F5, F6 (K88, K99, 987P) của các chủng E.coli phân lập ñược………………………… 73 3.3.2. Kết quả xác ñịnh yếu tố bám dính của các chủng Salmonella spp phân lập ñược …………………………………………………….80 3.3.3 Kết quả xác ñịnh ñộc tố ñường ruột (Enterotoxin) của các chủng E. coli phân lập ñược…………………………………. 86 3.3.4. Kết quả xác ñịnh ñộc tố ñường ruột (Enterotoxin) của các chủng Salmonella spp phân lập ñược…………………………… 92 3.3.5. Kết quả xác ñịnh ñộc lực của các chủng E. coli phân lập ñược … 99 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp……………………………. vi 3.3.6. Kết quả xác ñịnh ñộc lực của các chủng Salmonella spp phân lập ñược 104 3.3.7. Kết quả xác ñịnh yếu tố dung huyết của các chủng E. coli phân lập ñược 110 3.4. KẾT QUẢ XÁC ðỊNH ðỘ MẪN CẢM CỦA VI KHUẨN E.COL VÀ SALMONELLA SPP PHÂN LẬP ðƯỢC Ở LỢN BỊ TIÊU CHẢY VỚI MỘT SỐ KHÁNG SINH ……………………… ….114 3.4.1. ðối với vi khuẩn E. coli …………………………………… 115 3.4.2. ðối với vi khuẩn Salmonella spp ……………………… .… 118 3.5. KẾT QUẢ ðIỀU TRỊ HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở LỢN NUÔI TẠI ðĂK LĂK…………… .……………………… …………… 121 3.6. BIỆN PHÁP PHÒNG BỆNH………………………………….……125 CHƯƠNG 4. KẾT LUẬN VÀ ðỀ GHỊ……………………………………126 4.1. KẾT LUẬN………………………………………………………….126 4.2. ðỀ NGHỊ………………………………………………………….…128 DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH ðà CÔNG BỐ……………………….129 TÀI LIỆU THAM KHẢO………………………………………………….130 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp……………………………. vii CÁC CHỮ VIẾT TẮT TRONG LUẬN ÁN CHO: Chinese Hamster Ovary cell Cs.: Cộng sự E.coli: Escherichia coli ETEC: Enterotoxigenic E.coli DPF: Delayde permeability factor FAO: Food and Agriculture Organization Hly: Heamolysin kDa: kilo Dalton LPS: Lipopolysaccharid LT: Heat Lable Toxin (ðộc tố không chịu nhiệt) MR: Methyl Red NK/TS: Ngưng kết/Tổng số PBS: Phosphate Buffered Saline PCR: Polymerase Chain Reaction RPF: Rapid permeability factor S. cholerae suis: Salmonella cholerae suis ST: Heat stable Toxin (ðộc tố chịu nhiệt) TB: Trung bình TGE: Transmissible gastroenteritis (Bệnh viêm dạ dày và ruột truyền nhiễm) TN: Thí nghiệm UBND: Ủy ban nhân dân VFA: Veryshortchain Fatty Acids (Axit béo bay hơi) VKHK: Vi khuẩn hiếu khí XLD: Xyloze Lysine Desoxycholate Agar. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp……………………………. viii DANH MỤC BẢNG TT Tên bảng Trang 3.1 Kết quả ñiều tra tình hình hội chứng tiêu chảy ở các giống lợn 58 3.2 Kết quả ñiều tra tình hình hội chứng tiêu chảy ở lợn lứa tuổi……………………………………………………………… 60 3.3a Tổng hợp kết quả xác ñịnh số lượng vi khuẩn hiếu khí, E. coli và Salmonella/gam phân ở lợn các lứa tuổi … 64 3.3b Kết quả xác ñịnh số lượng vi khuẩn hiếu khí, E. coli và Salm- onella /gam phân ở lợn các lứa tuổi của từng giống …… . 65 3.4 Kết quả xác ñịnh số lượng vi khuẩn hiếu khí, E.coli và Salmonella/ gam phân ở ba giống lợn ………………… . 71 3.5a Tổng hợp kết quả xác ñịnh yếu tố bám dính F4, F5, F6 (K88, K99, 987P) của các chủng E.coli phân lập ñược ở lợn các lứa tuổi…………………………………………… 75 3.5b Kết quả xác ñịnh yếu tố bám dính F4, F5, F6 (K88, K99, 987P) của các chủng E.coli phân lập ñược ở lợn các lứa tuổi của từng giống…………………………………….……………………… 76 3.6 Kết quả xác ñịnh yếu tố bám dính F4, F5, F6 (K88, K99, 987P) của các chủng E. coli phân lập ñược ở ba giống lợn …………… 78 3.7a Tổng hợp kết quả xác ñịnh yếu tố bám dính của các chủng Salmonella spp phân lập ñược ở lợn các lứa tuổi ………………… 81 3.7b Kết quả xác ñịnh yếu tố bám dính của các chủng Salmonella spp phân lập ñược ở lợn các lứa tuổi của từng giống…………………… 82 3.8 Kết quả xác ñịnh yếu tố bám dính của các chủng Salmonella spp phân lập ở ba giống lợn………………………………………… 84 3.9a Tổng hợp kết quả xác ñịnh ñộc tố ñường ruột của các chủng E.coli phân lập ñược ở lợn các lứa tuổi ………………………………… 87 3.9b Kết quả xác ñịnh ñộc tố ñường ruột của các chủng E.coli phân lập ñược ở lợn các lứa tuổi của từng giống …………………………… 88 . cứu ñề tài: Vai trò của Escherichia coli, Salmonella trong hội chứng tiêu chảy ở lợn tại tỉnh ðăk Lăk, biện pháp phòng trị MỤC TIÊU CỦA ðỀ TÀI ðề. HÀ NỘI NGUYỄN CẢNH TỰ VAI TRÒ CỦA ESCHERICHIA COLI, SALMONELLA TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở LỢN TẠI TỈNH ðĂK LĂK, BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ Chuyên ngành: Vi sinh