Sản xuất thuốc trừ sâu từ vi nấm

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC  BÀI TIỂU LUẬN THUỐC TRỪ SÂU CÓ NGUỒN GỐC TỪ VI NẤM THÁI NGUYÊN – 102014 MỤC LỤC MỞ ĐẦU 3 I. Khái quát về vi nấm và thuốc trừ sâu vi sinh 4 1. Khái quát về vi nấm 4 1.1. Khái niệm về vi nấm 4 1.2. Phân loại vi nấm 4 1.2.1. Nấm men 4 1.2.2. Nấm sợi (nấm mốc) 6 2. Khái quát thuốc trừ sâu vi sinh 6 II. Tình hình nghiên cứu thuốc trừ sâu có nguồn gốc từ vi nấm 7 2.1. Một số loại vi nấm được sử dụng phổ biến để làm thuốc trừ sâu. 8 2.1.1 Nấm bạch cương (Beauveria basiana) 8 2.1.2 Nấm lục cương (Metarrhizium anisopliae) 10 2.2. Quy trình sản xuất thuốc trừ sâu vi nấm 11 2.2.1 Chọn chủng nấm giống để sản xuất 11 2.2.2. Chọn môi trường 11 2.2.3. Quy trình sản xuất 12 III. Giới thiệu một số chế phẩm thuốc trừ sâu vi nấm 16 3.1. Chế phẩm thuốc trừ sâu xanh Ometar 16 3.2. Thuốc trừ sâu Muskardin 16 3.3. Thuốc trừ sâu sinh học AT vi sinh 16 3.4. Một số chế phẩm từ nấm lục cương 17 KẾT LUẬN 18 DANH MỤC HÌNH ẢNH 19 TÀI LIỆU THAM KHẢO 20   MỞ ĐẦU Việt Nam nằm trong vùng khí hậu nhiệt đới gió mùanóng ẩm, mưa nhiều tạo điều kiện thuận lợi cho nhiều loài cây nông nghiệp phát triển nhưng đồng thời đây cũng là môi trường thuận lợi cho các loại côn trùng gây hại cây trồng phát triển. Trong những năm gần đây, côn trùng gây hại phát sinh mạnh mẽ cả về số lượng và chủng loại đang đe dọa nghiêm trọng đến năng suất và chất lượng nông sản ở nước ta. Để có thể diệt trừ được sâu bệnh hại, nhiều biện pháp khác nhau đã được đưa ra. Việc sử dụng rộng rãi các hóa chất đã được tổng hợp có tác dụng đáng kể trong ngăn ngừa sâu hại, tuy nhiên việc sử dụng thuốc trừ sâu hóa học đã gây ra ô nhiễm môi trường, ảnh hưởng đến sức khỏe con người, đồng thời còn tạo ra tính kháng thuốc cho các thế hệ sâu hại sau này làm chúng phát triển ngày càng mạnh, thuốc hóa học còn tiêu diệt cả những loài thiên địch có ích cho cây trồng, gây mất cân bằng sinh thái đồng ruộng. Để khắc phục các nhược điểm đó, các biện pháp sinh học, đặc biệt là sử sụng các chế phẩm thuốc trừ sâu vi sinh được xem là cách giải quyết hiệu quả. Trong các thuốc trừ sâu vi sinh, thuốc trừ sâu vi nấm đang có những triển vọng đạt hiệu quả cao trong phòng trừ sâu bệnh hại. Để nghiên cứu và tìm hiểu về những vấn đề cơ bản liên quan đến thuốc trừ sâu từ vi nấm em đã thực hiện bài tiểu luận “Thuốc trừ sâu có nguồn gốc từ vi nấm”. Trong quá trình thực hiện bài tiểu luận không thể tránh khỏi những sai sót, em rất mong sẽ nhận được sự đóng góp ý kiến của cô để bài tiểu luận của em được hoàn thiện. Em xin chân thành cảm ơn. Học viên thực hiện Nguyễn Thị Thùy Linh   I. Khái quát về vi nấm và thuốc trừ sâu vi sinh 1. Khái quát về vi nấm 1.1. Khái niệm về vi nấm

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN

TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC

-

 -BÀI TIỂU LUẬN

THUỐC TRỪ SÂU CÓ NGUỒN GỐC TỪ

VI NẤM

THÁI NGUYÊN – 10/2014

MỤC LỤC

MỞ ĐẦU

Việt Nam nằm trong vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa-nóng ẩm, mưa nhiều tạo điều kiện thuận lợi cho nhiều loài cây nông nghiệp phát triển nhưng đồng thời đây cũng là môi trường thuận lợi cho các loại côn trùng gây hại cây trồng phát triển Trong những năm gần đây, côn trùng gây hại phát sinh mạnh mẽ cả về số lượng và chủng loại đang đe dọa nghiêm trọng đến năng suất và chất lượng nông sản ở nước

ta Để có thể diệt trừ được sâu bệnh hại, nhiều biện pháp khác nhau đã được đưa

ra Việc sử dụng rộng rãi các hóa chất đã được tổng hợp có tác dụng đáng kể trong ngăn ngừa sâu hại, tuy nhiên việc sử dụng thuốc trừ sâu hóa học đã gây ra ô nhiễm môi trường, ảnh hưởng đến sức khỏe con người, đồng thời còn tạo ra tính kháng thuốc cho các thế hệ sâu hại sau này làm chúng phát triển ngày càng mạnh, thuốc hóa học còn tiêu diệt cả những loài thiên địch có ích cho cây trồng, gây mất cân bằng sinh thái đồng ruộng Để khắc phục các nhược điểm đó, các biện pháp sinh học, đặc biệt là sử sụng các chế phẩm thuốc trừ sâu vi sinh được xem là cách giải quyết hiệu quả Trong các thuốc trừ sâu vi sinh, thuốc trừ sâu vi nấm đang có những triển vọng đạt hiệu quả cao trong phòng trừ sâu bệnh hại Để nghiên cứu và tìm hiểu về những vấn đề cơ bản liên quan đến thuốc trừ sâu từ vi nấm em đã thực hiện bài tiểu luận “Thuốc trừ sâu có nguồn gốc từ vi nấm” Trong quá trình thực hiện bài tiểu luận không thể tránh khỏi những sai sót, em rất mong sẽ nhận được sự đóng góp ý kiến của cô để bài tiểu luận của em được hoàn thiện

Em xin chân thành cảm ơn!

Học viên thực hiện Nguyễn Thị Thùy Linh

I Khái quát về vi nấm và thuốc trừ sâu vi sinh

1 Khái quát về vi nấm

1.1 Khái niệm về vi nấm

Vi nấm (Microfungi) là tất cả các nấm không có mũ nấm (thể quả, fruit-body)

có thể thấy rõ bằng mắt thường Những nấm có mũ nấm là các nấm bậc cao Tuy nhiên khi nuôi cấy sợi nấm của các nấm bậc cao để nghiên cứu hoặc để sản xuất sinh khối thì chúng cũng được coi Để nghiên cứu vi nấm bắt buộc phải quan sát dưới kính hiển vi và phải nuôi cấy trong các điều kiện vô khuẩn như đối với vi khuẩn

1.2 Phân loại vi nấm

Căn cứ vào hình thái người ta chia vi nấm thành hai nhóm khác nhau: nhóm nấm men (Yeast) và nhóm nấm sợi (Filamentous fungi-nấm mốc) Chúng chỉ khác

nhau về hình thái chứ không phải là những taxon phân loại riêng biệt Nhiều nấm

men cũng có dạng sợi và rất khó phân biệt với nấm sợi

1.2.1 Nấm men

Thuật ngữ Nấm men (yeast, levure) chỉ là tên chung để chỉ nhóm vi nấm thường có cấu tạo đơn bào và thường sinh sôi nảy nở bằng phương pháp nẩy chồi (budding) Nấm men không thuộc về một taxon phân loại nào nhất định, chúng có

thể thuộc ngành Nấm túi (Ascomycota) hoặc ngành Nấm đảm (Basidiomycota)

Nảy chồi là cách sinh sản vô tính điển hình của nấm men Khi đó thành tế bào

mở ra để tạo ra một chồi (bud) Chồi phát triển thành tế bào con và có thể tách khỏi tế bào mẹ ngay từ khi còn nhỏ hoặc cũng có thể vẫn không tách ra ngay cả khi lớn bằng tế bào mẹ Nhiều khi nhiều thế hệ vẫn dính vào một tế bào đầu tiên nẩy chồi và tạo thành một cành nhiều nhánh tế bào trong giống như cây xương rồng Chồi có thể mọc ra theo bất kỳ hướng nào (nẩy chồi đa cực- multilateral budding) hoặc chỉ nẩy chồi ở hai cực (nẩy chồi theo hai cực- Bipolar budding) hoặc chỉ nảy chồi ở một cực nhất định (nẩy chồi theo một cực – monopolar budding)

Dạng sinh sản hữu tính ở nấm men là dạng các bào tử túi (ascospore) được sinh ra từ các túi (asci) Có thể xảy ra sự tiếp hợp (conjugation) giữa hai tế bào nấm men tách rời hoặc giữa tế bào mẹ và chồi Còn có cả sự biến nạp trực tiếp trong 1 tế bào sinh dưỡng (vegetative cell), tế bào này biến thành túi không qua

tiếp hợp (unconjugated ascus) Thường trong mỗi túi có 4 hay đôi khi có 8 bào tử túi Trong một số trường hợp lại chỉ có 1-2 bào tử túi Bào tử túi ở chi

Saccharomyces có dạng hình cầu, hình bầu dục; ở chi Hanseniaspora và loài Hansenula anomala có dạng hình mũ ; ở loài Hansenula saturnus bào tử túi có

dạng quả xoài giữa có vành đai như dạng Sao Thổ Một số bào tử túi có dạng kéo dài hay hình xoắn…Bề mặt bào tử túi có thể nhẵn nhụi, có thể xù xì hoặc có gai… Bào tử màng dày (hay bào tử áo- chlamydospore) là dạng bào tử giúp nấm men vượt qua được điều kiện khó khăn của ngoại cảnh, chứ không phải là hình thức sinh sản Một số nấm men còn có thể sinh vỏ nhày

Để phân loại nấm men, người ta có thể dựa trên các chỉ tiêu về đặc điểm hình thái hay đặc điểm sinh lý, sinh hóa, còn để phân loại các chi nấm men thì dựa vào các chỉ tiêu chủ yếu là đặc điểm tế bào dinh dưỡng, đặc điểm sinh sản hữu tính và đặc điểm sinh lý, nuôi cấy

Bên cạnh rất nhiều nấm men có ích như là các loại nấm men dùng để sản xuất rượu trắng, rượu vang, bia, làm nở bột mỳ, tạo sinh khối giàu protein và vitamin, sản xuất enzym, sản xuất acid citric từ khí thiên nhiên, sản xuất riboflavin (vitamin B2)… còn có những loại nấm men có thể gây bệnh [2]

Hình1.1 Một số loại nấm men gây bệnh ở người

1.2.2 Nấm sợi (nấm mốc)

Nấm mốc cũng thuộc nhóm vi nấm, có kích thước hiển vi Khác với nấm men, chúng không phải là những tế bào riêng biệt mà là một hệ sợi phức tạp, đa bào có màu sắc phong phú

Nấm mốc có cấu tạo hình sợi phân nhánh, tạo thành một hệ sợi chằng chịt phát triển rất nhanh gọi là khuẩn ti thể hay hệ sợi nấm Chiều ngang của khuẩn ti thay đổi từ 3-10 mm Nấm mốc có hai loại khuẩn ti: khuẩn ti khí sinh mọc trên bề mặt môi trường, từ đây sinh ra những cơ quan sinh sản và khuẩn ti cơ chất mọc sâu vào môi trường

Đa số nấm mốc có cấu tạo đa bào, tạo thành những tổ chức khác nhau như sợi khí sinh, sợi cơ chất Sợi cơ chất của nấm mốc không đơn giản như ở xạ khuẩn mà phức tạp hơn Ở một số nấm mốc, các sợi nấm nối với nhau thông qua các cầu nối, các cầu nối hình thành giữa các sợi nằm gần nhau gọi là sự hợp nối do có hiện tượng 2 khối nguyên sinh chất trộn lẫn với nhau Đó có thể là một hình thức lai dinh dưỡng Thể đệm của nấm mốc được cấu tạo bởi nhiều khuẩn ti liên kết lại với nhau, từ đó sinh ra các cơ quan sinh sản của nấm mốc Hạch nấm mốc là một tổ chức giúp cho nấm sống qua những điều kiện ngoại cảnh bất lợi, chúng thường có hình tròn hoặc bầu dục không đều, kích thước tùy theo loài, từ dưới 1 mm đến vài

cm Sợi nấm trong hạch không phát triển, khi gặp điều kiện thuận lợi hạch sẽ nảy mầm và phát triển bình thường [7]

2 Khái quát thuốc trừ sâu vi sinh

Thuốc trừ sâu vi sinh là những chế phẩm sinh học được sản xuất ra từ các chủng vi sinh vật được nuôi cấy trên môi trường dinh dưỡng khác nhau theo phương pháp thủ công, bán thủ công hoặc phương pháp lên men công nghiệp để tạo ra những chế phẩm có chất lượng cao có khả năng phòng trừ được các loại sâu hại cây trồng nông, lâm nghiệp [8]

Sử dụng thuốc trừ sâu vi sinh mang lại nhiều lợi ích như sau:

+ Không độc hại cho người và gia súc, không nhiễm bẩn môi trường sống, không ô nhiễm môi trường

+ Chưa tạo nên tính kháng thuốc của sâu hại

+ Không ảnh hưởng đến chất lượng, phẩm chất nông sản, không ảnh hưởng đến đất trồng, không khí trong môi trường (do không để lại dư lượng)

+ Không làm mất đi những nguồn tài nguyên sinh vật có ích như các loại ký sinh thiên dịch và những vi sinh vật có lợi với con người

+ Nếu sử dụng hợp lý, đúng phương pháp, đúng kỹ thuật trong điều kiện nhiệt độ thích hợp sẽ mang lại hiệu quả kinh tế cao

+ Hiệu quả thuốc vi sinh thường kéo dài vì chúng không chỉ tiêu diệt trực tiếp lứa sâu đang phá hoại mà chúng còn có thể lan truyền cho thế hệ tiếp theo

Tuy nhiên, sử dụng thuốc trừ sâu vi sinh cũng có những nhược điểm nhất định như: tác động của thuốc trừ sâu chậm, hiệu quả thuốc ban đầu không cao, phổ tác dụng của thuốc hẹp,…

Trong công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh, dựa vào đối tượng vi sinh vật được sử dụng để tạo thuốc trừ sâu mà người ta chia ra làm 3 công nghệ sản xuất sau:

• Công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu từ vi khuẩn: Sử dụng các vi khuẩn que bào mầm

(Bacillaceae), nấm que ruột, vi tảo đơn bào giả Trong các loài đó có loài chuyên

kí sinh, có loài kiêm kí sinh

• Công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu từ virus, sử dụng các virus ký sinh trên côn trùng

(Baculovirus) như: virus đa diện nhân (NPV), virus hạt (GV), virus đa diện tế bào

chất (CPV)

• Công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu từ vi nấm: Vi nấm có phạm vi ký sinh rất rộng, chỉ riêng thống kê phạm vi của bạch cương là 700 loại thuộc 149 họ 15 bộ côn trùng, hơn 10 loài nhện, vv…Hiện nay, công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu từ vi nấm

ký sinh trên côn trùng đang được quan tâm nghiên cứu

II Tình hình nghiên cứu thuốc trừ sâu có nguồn gốc từ vi nấm

Nhiều loài nấm sợi có khả năng năng gây bệnh cho sâu hại cây trồng Tuy vậy cho đến nay mới chỉ có các loài sau đây được sử dụng để sản xuất các loại chế phẩm nấm diệt sâu hại:

− Ascheroria spp.

− Beauveria basiana (nấm bạch cương)

− Conidiobolus obscurus

− Culicinomyces clavosporus

− Metarrhizium anisopliae (nấm lục cương)

− Hirsutella thompsonu

− Zoophthora radicans

Có hai loại vi nấm được sử dụng phổ biến hơn và đạt hiệu quả cao trong việc phòng trừ sâu hại cây trồng và cây rừng đó là nấm bạch cương và nấm lục cương

II.1 Một số loại vi nấm được sử dụng phổ biến để làm thuốc trừ sâu

Trong các loại vi nấm được sử dụng làm thuốc trừ sâu có hai loại vi nấm được sử dụng phổ biến hơn và đạt hiệu quả cao trong việc phòng trừ sâu hại cây trồng và cây rừng đó là nấm bạch cương và nấm lục cương

2.1.1 Nấm bạch cương (Beauveria basiana)

Nấm bạch cương còn gọi là nấm cứng trắng, nấm tằm vôi Chúng là loại thường gặp trên nhiều loại sâu hại Người ta phát hiện được nấm bạch cương trong trường hợp nấm này gây bệnh làm chết hàng loạt tằm của nghề nuôi tằm Sau đó người ta tìm cách phân lập và nuôi cấy chúng trên môi trường nhân tạo Các nấm bạch cương có thể sợi nấm màu trắng, dạng lông, sợi nấm mảnh có đường kính 1,5-2 µm, cuống bào tử mọc đơn hoặc phân nhánh Tế bào sinh bào tử hình bình, hình ống hoặc hình cầu, thẳng hoặc hơi uốn cong Trục sợi uốn hình chữ “Z”, bào tử mọc trên đầu góc chữ Z cùng với cuống rất nhỏ Trên cơ thể côn trùng, khi khô sợi nấm chuyển từ màu trắng sang màu crem hay đôi khi có pha thêm một ít màu đỏ

Hình 2.1 Bào tử trần và cuống nấm bạch cương

Nấm bạch cương thể hiện tính độc với côn trùng nhờ độc tố beauvericin (C45H57O9N3), đây là một loại depsipeptit vòng, có điểm sôi khoảng 93-94oC Cơ chế tác động của nấm bạch cương lên côn trùng được diễn ra như sau: Khi phun chế phẩm nấm, những bào tử của nấm sẽ phát tán trong không khí hay bám trên thân, lá cây Khi gặp cơ thể sâu, bào tử sẽ nảy mầm mọc thành sợi nấm đâm xuyên qua lớp vỏ kitin của sâu và phát triển trong cơ thể của chúng Sợi nấm mọc rất nhanh trên cơ thể côn trùng, khi đó cơ thể côn trùng huy động các tế bào bạch

huyết (lymphocyte) đến để chiến đấu chống lại độc tố beauvericin của nấm Nhưng độc tính của độc tố quá mạnh nên khi nấm tiêu diệt được hầu hết các tế bào bạch huyết cũng là lúc côn trùng phải chết

Hình2.2.Sợi nấm bạch cương mọc trên cơ thể côn trùng

Các nấm bạch cương xuất hiện trên 120 loài thuộc 45 họ và 7 bộ côn trùng rừng Nếu kể cả sâu hại nông nghiệp thì chúng có thể ký sinh trên gần 200 loài Một số loại nấm bạch cương tiêu biểu có thể kể đến bao gồm:

+ Aporia crataegi

+ Aradua cinnamomeus

+ Bembidion sp

+ Cacoecia crataegana

+ Chrysopa vulgaris

+ Cionus sp

+ Rhizotrogus sp

+ Scolytus scolytus

2.1.2 Nấm lục cương (Metarrhizium anisopliae)

Năm 1878 khi nghiên cứu về các loại sâu Anisoplia austriaca, nhà khoa học

người Nga I.I Metchnikov đã phát hiện thấy một loài nấm có bào tử màu lục có thể gây chết hàng loạt côn trùng Lúc đó ông đặt tên cho hai loại nấm này là

Entomophthora anisopliae Về sau này kiểm tra lại, người ta xếp chúng vào giống Metarrhyzium.

Các nấm lục cương có dạng sợi phân nhánh, có vách ngăn ngang, có đường kính từ 3-4 µm Sợi có màu từ trắng tới hồng Bào tử của nấm là bào tử trần, dạng hình que, kích thước 3,5µm x 7,2µm, có màu xám đến oliu-lục Bào tử xếp thành

chuỗi khá chặt chẽ và nhìn bằng mắt thường, thấy bào tử tạo ra trên bề mặt côn trùng một lớp phấn khá rõ

Hình2.3 Nấm lục cương

Nấm lục cương có thể phát triển trong giới hạn pH=6,9-7,4 Nhiệt độ thích hợp cho sự phát triển của nấm lục cương là 24oC-25oC Nếu nhiệt độ môi trường lớn hơn 28oC sợi nấm sẽ không sản sinh ra bào tử trần Ngoài ra, muốn nấm có bào tử cần phải có độ ẩm của không khí khá cao

Nấm lục cương có chứa nhiều loại độc tố có tên là deutrucin A, B, C, D Trong đó, deutrucin A (C29H47O7N5) và B (C30H51O7N5) là những depsipeptit vòng

có thể tách từ dịch nuôi cấy nấm lục cương

Cơ chế tác động của nấm lên côn trùng được diễn ra như sau: Bào tử nấm lục cương khi rơi trên bề mặt côn trùng trong khoảng 24 giờ sẽ nảy mầm tạo thành ống mầm chui xuyên qua vỏ của côn trùng, sau đó tiếp tục phân nhánh tạo thành một mạng sợi nấm chằng chịt trên khắp bề mặt của cơ thể côn trùng Lúc này ngoại độc tố được tiết ra sẽ tác động lên côn trùng, khiến cho côn trùng bị chết

Hình 2.4 Côn trùng chết do nhiễm nấm lục cương

Cho đến nay người ta đã biết được trên 70 loài côn trùng bị nấm lục cương tiêu diệt, trong số đó có tới 34 loài côn trùng cánh cứng và chỉ có 5 loài côn trùng cánh vảy Một số côn trùng mẫn cảm với nấm này bao gồm:

− Melolotha melolotha

− Melolotha hippocastanei

− Anisoplia autriaca

− Otiorrhymchus ligustici

− Plusia gamma

II.2 Quy trình sản xuất thuốc trừ sâu vi nấm

2.2.1 Chọn chủng nấm giống để sản xuất

Tùy từng loại nấm ký sinh trên côn trùng hại mà người ta nghiên cứu để sản xuất ra các loại chế phẩm khác nhau Có thể sử dụng nấm bạch cương phân lập

trên sâu róm thông để sản xuất chế phẩm Bb phòng trừ sâu róm thông Có thể sử

dụng nấm lục cương phân lập trên bọ xít, rày nâu, bọ cánh cứng hại dừa để sản

xuất ra chế phẩm nấm Ma phòng trừ các đối tượng sâu hại dừa.

2.2.2 Chọn môi trường

• Môi trường nhân giống cấp 1 (trên ống thạch) được sử dụng phổ biến trong sản xuất vi nấm bao gồm các môi trường sau:

− Môi trường Crapek Dox: Agar (20g), Sacharoza (30g), NaNO3 (3g), KH2PO4

(1g), MgSO4.7H20 (0.1g), KCl (0.5g), FeSO4 (0.01g), H2O (1000ml), pH=5.5

− Môi trường Sabouraud: Agar (20g), Glucoza (40g), Pepton (10g), H2O (1000ml), pH=6

− Môi trường Sabouroud khoáng chất (PT.Thùy 1992): Agar (20g), Pepton (10g), Glucoza (40g), MgSO4.7H2O (0.5g), KH2PO4 (1g), H2O (1000ml), pH=6

• Môi trường nhân giống cấp 2

Theo phương pháp lên men chìm có thể sử dụng hai môi trường điển hình sau:

Pepton (15g), KH2PO4 (1g), MgSO4.7H2O (1g), Agar (20g), H2O (1000 ml), pH=6

(10g), Pepton (15g), Sacharoza (10g), Agar (20g), H2O (1000ml), pH=6.5

Theo phương pháp lên men xốp, môi trường nhân giống cấp 2 bao gồm các thành phần sau: Bột cám gạo (50%), Bột ngô (30%), Bột đậu tương hoặc đậu xanh (10%), Trấu hoặc bã mía, vỏ lạc (10%)

Năm 2003-2004, Phạm Thị Thùy và cộng sự đã nghiên cứu môi trường sản xuất nấm lục cương có thành phần 50% cám gạo, 20% bột ngô, 20% bột đậu, 10% trấu với tỷ lệ nước/môi trường sản xuất là 50%, cấy chủng nấm lục cương được phân lập trên bò sữa Phú Quốc, chất lượng chế phẩm nấm đạt cao 3 x 1010

BT/g Đây là kết quả rất tốt có triển vọng rút ngắn số lượng chế phẩm nấm để phòng trừ sâu hại trên 1 ha cây trồng, nhằm giảm giá thành cho nhà nông [1], [3], [4], [5]

2.2.3 Quy trình sản xuất

a) Sản xuất theo phương pháp nuôi cấy chìm

Chuẩn bị giống: Giống vi nấm sẽ được nuôi cấy trên môi trường mạc nha – men bia Sau 3 – 4 ngày lấy ra, làm khô lạnh để sử dụng dần

Nhân giống: Cấy giống chuẩn bị vào bình nón, nuôi lắc 25-28 giờ ở 25-28oC Lên men: Thành phần môi trường lên men gồm: 2% nấm men chăn nuôi, 1% tinh bột, 0.2% NaCl, 0.01% MnCl2, 0.05% KCl Cấy 2-10% giống vào nồi men,

pH khoảng 5-5.6, nuôi ở 25-28oC trong 3-4 ngày, lượng khí thổi là 2-2.5 lít không khí/1 lít môi trường/1 phút

Tách, ly tâm, thu sinh khối: Cho dịch nuôi qua máy ly tâm để tách nước, thu bào tử dạng sệt có độ ẩm 70-80% và lượng bào tử 6-8 x 109/g, sau đó đưa đi phun sấy để làm dạng khô

b) Sản xuất theo phương pháp nuôi cấy trên môi trường lỏng không khử trùng, không khuấy trộn và thổi khí

Đun sôi môi trường tự chế từ các nguyên liệu tự nhiên như cháo hạt ngũ cốc, nước chiết khoai tây, cà rốt, giá đỗ,…Để nguội xuống 35-40oC thì cấy bào tử nấm Đậy nilon để tránh bụi và tránh nhiễm

Nuôi ở nhiệt độ 25-28oC Sau 7-10 ngày, từ màng nấm xuất hiện bào tử Đến ngày 18-25 thì vớt nấm đặt lên miếng kính, dựng nghiêng cho róc nước

Làm khô bào tử ở nhiệt độ thấp (30-32oC), nghiền, trộn với bột than bùn

c) Sản xuất theo phương pháp có khử trùng